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血红素加氧酶1基因在小鼠肾足细胞中的表达及抗炎作用
1
作者 唐明秋 宋熠 +1 位作者 倪萍 赵宝清 《湖北科技学院学报（医学版）》 2023年第2期110-113,119,共5页
目的构建血红素加氧酶1基因(HO-1)真核双表达载体pCDNA3.1-ho-1:t2a:egfp,并在小鼠肾足细胞MPC5中过表达,研究HO-1在脂代谢紊乱模型下的抗炎作用。方法取生长良好的人胚胎肾细胞HEK293t,提取总RNA反转录得到cDNA文库,扩增得到HO-1基因... 目的构建血红素加氧酶1基因(HO-1)真核双表达载体pCDNA3.1-ho-1:t2a:egfp,并在小鼠肾足细胞MPC5中过表达,研究HO-1在脂代谢紊乱模型下的抗炎作用。方法取生长良好的人胚胎肾细胞HEK293t,提取总RNA反转录得到cDNA文库,扩增得到HO-1基因目的片段。将目的片段和载体进行双酶切,超滤管回收后T4-ligase连接,得到真核表达质粒命名为pCDNA3.1-ho-1:t2a:egfp。将载体进行菌液PCR、双酶切和测序鉴定后,转染小鼠肾足细胞MPC5,通过荧光显微镜和Western blot检测HO-1以及炎性因子表达情况。结果以HEK293t为来源扩增得到的目的片段凝胶电泳位置正确;筛选得到的载体菌液PCR、双酶切凝胶电泳以及测序结果正确;转染细胞后,荧光显微镜和Western blot结果显示质粒转染成功,并且减少了炎性因子IL-18、IL-1β表达。结论成功构建pCDNA3.1-ho-1:t2a:egfp双表达质粒,为糖尿病脂代谢紊乱细胞模型后续相关实验奠定基础。 展开更多
关键词 血红素加氧酶1基因 载体构建 真核表达 抗炎作用
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血红素加氧酶1基因启动子微卫星多态性与疾病易感性研究进展 被引量：1
2
作者 路永坤 唐芸 王洪琦 《医学综述》 2009年第20期3068-3071,共4页
血红素加氧酶1(HO-1)基因启动子微卫星多态性调节HO-1的表达,影响机体对多种疾病的易感性。长GT重复序列是心血管疾病、脑血管疾病、外周血管疾病、肺部疾病的易感基因,短GT重复序列预防这些疾病。短GT等位基因的类风湿性关节炎患者的... 血红素加氧酶1(HO-1)基因启动子微卫星多态性调节HO-1的表达,影响机体对多种疾病的易感性。长GT重复序列是心血管疾病、脑血管疾病、外周血管疾病、肺部疾病的易感基因,短GT重复序列预防这些疾病。短GT等位基因的类风湿性关节炎患者的预后更好。GT重复序列对肿瘤的影响因肿瘤的类型、遗传背景不同而不同。 展开更多
关键词 血红素加氧酶1基因 微卫星多态性 易感性
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日本血吸虫成虫HO-1编码基因片段的扩增及序列分析
3
作者 刘文琪 李雍龙 龙小纯 《热带医学杂志》 CAS 2004年第2期133-135,160,共4页
目的研究日本血吸虫成虫血红素加氧酶-1(HO-1)基因的表达并对部分编码区序列进行测序分析。方法收集日本血吸虫成虫,提取总RNA;以成虫总RNA为模板,利用HO-1特异性引物一步法RT-PCR进行体外扩增,检测血吸虫成虫是否有HO-1基因的转录表达... 目的研究日本血吸虫成虫血红素加氧酶-1(HO-1)基因的表达并对部分编码区序列进行测序分析。方法收集日本血吸虫成虫,提取总RNA;以成虫总RNA为模板,利用HO-1特异性引物一步法RT-PCR进行体外扩增,检测血吸虫成虫是否有HO-1基因的转录表达;纯化PCR扩增产物,DNA测序后进行序列分析。结果提取较高纯度的血吸虫成虫总RNA后,RT-PCR扩增得到一特异性条带,测序结果显示该特异性片段长度为506bp。结论本研究用RT-PCR的方法证实了HO-1基因在血吸虫体内的转录表达,为进一步研究血吸虫HO-1基因的全长和基因调控奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 血红素加氧酶-1基因 表达 测序
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血红素加氧酶-1基因启动子微卫星多态与广东汉族湿热证易感性的相关性研究
4
作者 王洪琦 路永坤 《新中医》 CAS 北大核心 2010年第9期72-74,共3页
目的:研究血红素加氧酶-1(HO-1)基因启动子微卫星多态与广东汉族湿热证易感性、氧化应激之间的关系。方法:采用PCR扩增技术和琼脂糖电泳方法分析40例湿热证者和30例对照者HO-l基因启动子区GT双核苷酸重复序列,同时测定血清总抗氧化能力(... 目的:研究血红素加氧酶-1(HO-1)基因启动子微卫星多态与广东汉族湿热证易感性、氧化应激之间的关系。方法:采用PCR扩增技术和琼脂糖电泳方法分析40例湿热证者和30例对照者HO-l基因启动子区GT双核苷酸重复序列,同时测定血清总抗氧化能力(TAOC)和丙二醛(MDA)含量。结果:湿热组HO-1基因启动子长重复序列出现频率高于对照组(P<0.01),短重复序列出现频率低于对照组(P<0.01),提示HO-1基因启动子长重复序列与湿热证易感性相关。湿热组TAOC低于对照组(P<0.01),MDA含量高于对照组(P<0.01),提示湿热组抗氧化能力降低,过氧化反应剧烈。长重复序列携带者TAOC低于短重复序列携带者(P<0.01),MDA含量高于短重复序列携带者(P<0.01),提示HO-1基因启动子重复序列的长度影响机体的氧化应激。结论:HO-l基因启动子微卫星多态影响湿热证的易感性,该作用与长重复序列携带者抗氧化能力降低有关。 展开更多
关键词 湿热证 中医疗法 血红素加氧酶-1基因 启动子微卫星多态 易感性
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