目的采用高内涵技术筛选补骨脂潜在肝毒性成分及其可能的作用机制。方法采用CCK-8法测定补骨脂中异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、补骨脂素、异补骨脂素、...目的采用高内涵技术筛选补骨脂潜在肝毒性成分及其可能的作用机制。方法采用CCK-8法测定补骨脂中异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂酚10种成分的IC_(50)值。在相同浓度药物处理HepG 2细胞24 h后,进行高内涵检测,通过阳性细胞的平均荧光强度评价各组细胞活性氧、还原型谷胱甘肽、线粒体膜电位及线粒体超氧化物水平4个指标的变化情况,初步筛选补骨脂中主要肝毒性成分。结果CCK-8细胞活力实验结果显示,异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂酚对Hep G 2细胞的IC_(50)值分别为52.69、42.72、83.63、42.29、57.43、110.80、1420.00、23.58和25.34μmol·L^(-1)。高内涵结果显示,在20μmol·L^(-1)浓度下,补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、补骨脂定和补骨脂酚可显著提高细胞内活性氧水平;异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、异补骨脂素、补骨脂定和补骨脂酚均可导致细胞中还原型谷胱甘肽水平保护性升高;异补骨脂查尔酮、补骨脂定和补骨脂酚均显著降低线粒体膜电位,造成线粒体超氧化物累积。结论异补骨脂查尔酮、补骨脂定和补骨脂酚是补骨脂中造成线粒体功能损伤的主要成分,具有潜在的肝脏毒性,其具体作用机制有待进一步研究。展开更多
目的探讨补骨脂提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢指标的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、补骨脂提取物组和西药组,每组15只。除对照组外,各组通过切除大鼠两侧卵巢组织进行造模,对照组大鼠仅暴露卵巢而不行切除术...目的探讨补骨脂提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢指标的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、补骨脂提取物组和西药组,每组15只。除对照组外,各组通过切除大鼠两侧卵巢组织进行造模,对照组大鼠仅暴露卵巢而不行切除术。造模成功后,补骨脂提取物组给予补骨脂素(88 mg/kg)灌胃,西药组给予阿仑膦酸钠(7 mg/kg)灌胃,对照组和模型组则灌胃等体积生理盐水;连续12周。采用酶联免疫吸附实验检测各组大鼠血清骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨特异性碱性磷酸酶(bone-specific alkaline phosphatase,BAP)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,CTX)水平;采用RT-PCR法检测大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a和β-catenin的mRNA表达;采用双能X线骨密度仪检测大鼠腰椎和股骨的骨密度(bone mineral density,BMD)。结果与对照组比较,模型组大鼠血清CTX水平显著升高(P<0.05),OCN、BAP含量明显降低(P均<0.05);与模型组比较,各用药组大鼠血清CTX水平显著降低(P均<0.05),OCN、BAP含量明显升高(P均<0.05),但各用药组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a、β-catenin的mRNA表达明显降低(P均<0.05),第4腰椎及左、右股骨BMD明显降低(P均<0.05);与模型组比较,各用药组大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a、β-catenin的mRNA表达水平,第4腰椎及左、右股骨BMD均升高(P均<0.05),但各用药组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论补骨脂提取物能提高去卵巢骨质疏松大鼠骨密度,改善骨代谢指标,其作用可能与活化Wnt/β-catenin有关。展开更多
文摘目的采用高内涵技术筛选补骨脂潜在肝毒性成分及其可能的作用机制。方法采用CCK-8法测定补骨脂中异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂酚10种成分的IC_(50)值。在相同浓度药物处理HepG 2细胞24 h后,进行高内涵检测,通过阳性细胞的平均荧光强度评价各组细胞活性氧、还原型谷胱甘肽、线粒体膜电位及线粒体超氧化物水平4个指标的变化情况,初步筛选补骨脂中主要肝毒性成分。结果CCK-8细胞活力实验结果显示,异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂酚对Hep G 2细胞的IC_(50)值分别为52.69、42.72、83.63、42.29、57.43、110.80、1420.00、23.58和25.34μmol·L^(-1)。高内涵结果显示,在20μmol·L^(-1)浓度下,补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查尔酮、补骨脂定和补骨脂酚可显著提高细胞内活性氧水平;异补骨脂查尔酮、4’-O-甲基补骨脂查尔酮、补骨脂宁、异补骨脂素、补骨脂定和补骨脂酚均可导致细胞中还原型谷胱甘肽水平保护性升高;异补骨脂查尔酮、补骨脂定和补骨脂酚均显著降低线粒体膜电位,造成线粒体超氧化物累积。结论异补骨脂查尔酮、补骨脂定和补骨脂酚是补骨脂中造成线粒体功能损伤的主要成分,具有潜在的肝脏毒性,其具体作用机制有待进一步研究。
文摘目的探讨补骨脂提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢指标的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、补骨脂提取物组和西药组,每组15只。除对照组外,各组通过切除大鼠两侧卵巢组织进行造模,对照组大鼠仅暴露卵巢而不行切除术。造模成功后,补骨脂提取物组给予补骨脂素(88 mg/kg)灌胃,西药组给予阿仑膦酸钠(7 mg/kg)灌胃,对照组和模型组则灌胃等体积生理盐水;连续12周。采用酶联免疫吸附实验检测各组大鼠血清骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨特异性碱性磷酸酶(bone-specific alkaline phosphatase,BAP)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,CTX)水平;采用RT-PCR法检测大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a和β-catenin的mRNA表达;采用双能X线骨密度仪检测大鼠腰椎和股骨的骨密度(bone mineral density,BMD)。结果与对照组比较,模型组大鼠血清CTX水平显著升高(P<0.05),OCN、BAP含量明显降低(P均<0.05);与模型组比较,各用药组大鼠血清CTX水平显著降低(P均<0.05),OCN、BAP含量明显升高(P均<0.05),但各用药组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a、β-catenin的mRNA表达明显降低(P均<0.05),第4腰椎及左、右股骨BMD明显降低(P均<0.05);与模型组比较,各用药组大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a、β-catenin的mRNA表达水平,第4腰椎及左、右股骨BMD均升高(P均<0.05),但各用药组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论补骨脂提取物能提高去卵巢骨质疏松大鼠骨密度,改善骨代谢指标,其作用可能与活化Wnt/β-catenin有关。
