乳酸菌表层蛋白功能研究进展 被引量：2

1

作者 王晓萌 韩张鹏 +3 位作者 李佳乐 付梦琪 桑亚新 高洁 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第6期411-419,共9页

乳酸菌作为益生菌的主要类群,不仅常用于食品发酵,还具有维持肠道稳态、调节宿主免疫、疾病的预防和治疗等功能。乳酸菌对肠道的黏附能力是其发挥功能的重要前提,也是其在肠道中定植的必要条件。表层蛋白(SLP)是乳酸菌表面主要的黏附因... 乳酸菌作为益生菌的主要类群,不仅常用于食品发酵,还具有维持肠道稳态、调节宿主免疫、疾病的预防和治疗等功能。乳酸菌对肠道的黏附能力是其发挥功能的重要前提,也是其在肠道中定植的必要条件。表层蛋白(SLP)是乳酸菌表面主要的黏附因子,在菌相之间、菌相与环境之间的相互关系中发挥重要作用。本文概述乳酸菌SLP的结构特征及功能,重点论述SLP对菌体的支撑保护作用,在菌相识别中的黏附作用,抑制病原菌入侵作用,免疫调节方面的作用等,并阐述SLP在生物技术、纳米技术、疫苗研发中的应用,以期为乳酸菌SLP的进一步研究与开发利用提供参考。 展开更多

关键词 乳酸菌 表层蛋白 识别和黏附 疫苗研发

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嗜酸乳杆菌NCFM表层蛋白的提取及其与菌体酸和胆盐耐受及粘附性能的关系 被引量：8

2

作者 胡斌 田丰伟 +4 位作者 赵建新 张秋香 王刚 张灏 陈卫 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期118-121,共4页

对嗜酸乳杆菌NCFM表层蛋白(SLP)的氯化锂(LiCl)提取方法进行了优化,通过SDS-PAGE验证,确定了效率最高的提取条件,即用5mol/L LiCl在35℃处理菌体20min,且提取SLP后,菌体不会失活,8h后重新生成的SLP达到峰值。利用SLP能够再生的性质,分析... 对嗜酸乳杆菌NCFM表层蛋白(SLP)的氯化锂(LiCl)提取方法进行了优化,通过SDS-PAGE验证,确定了效率最高的提取条件,即用5mol/L LiCl在35℃处理菌体20min,且提取SLP后,菌体不会失活,8h后重新生成的SLP达到峰值。利用SLP能够再生的性质,分析了SLP与菌体耐酸耐胆盐性能,以及菌体对肠上皮细胞HT-29粘附能力的关系。实验结果显示:随着SLP的再生,去除SLP的菌体酸存活率由0h的52.5%上升到8h后的85.9%,胆盐存活率由0h的43.4%上升到8h后的81.8%,菌体对HT-29细胞的粘附指数从0h的0.33上升到8h后的18.54。SLP再生过程中菌体对酸和胆盐的耐受力和对HT-29细胞的粘附力均有恢复,因此说明SLP的完整对嗜酸乳杆菌NCFM在消化中存活力有重要影响。 展开更多

关键词 表层蛋白 嗜酸乳杆菌NCFM 氯化锂 酸和胆盐耐受 粘附能力

原文传递

乳酸杆菌表层蛋白基因结构及功能研究进展 被引量：5

3

作者 关晓燕 罗卫东 +2 位作者 李丽丽 董颖 顾英 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期679-684,共6页

乳酸杆菌对宿主的黏附性是其发挥益生作用的基础,而其黏附性与自身的表层蛋白密切相关。乳酸杆菌表层蛋白具有相对分子质量低、高等电点、结构和基因的多样性等特点。国内外学者对于乳酸杆菌的表层蛋白进行了深入的研究。作者从乳酸杆... 乳酸杆菌对宿主的黏附性是其发挥益生作用的基础,而其黏附性与自身的表层蛋白密切相关。乳酸杆菌表层蛋白具有相对分子质量低、高等电点、结构和基因的多样性等特点。国内外学者对于乳酸杆菌的表层蛋白进行了深入的研究。作者从乳酸杆菌表层蛋白的基因结构和特性、和生物学功能几个方面对乳酸杆菌表层蛋白进行了综述。 展开更多

关键词 乳酸杆菌 表层蛋白 结构域 基因

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乳酸杆菌表层蛋白及应用研究 被引量：6

4

作者 刘元元 杨秀华 +1 位作者 王远亮 李宗军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期279-283,共5页

在一些古细菌和真细菌中,表层蛋白是细胞膜最外层的结构。尽管所有表层蛋白具有相同的氨基酸成分,但是与其他细菌表层蛋白相比,乳酸杆菌表层蛋白具有其独有的特性:小分子量,高等电点,为碱性蛋白。一些乳酸杆菌具有多个表层蛋白基因。国... 在一些古细菌和真细菌中,表层蛋白是细胞膜最外层的结构。尽管所有表层蛋白具有相同的氨基酸成分,但是与其他细菌表层蛋白相比,乳酸杆菌表层蛋白具有其独有的特性:小分子量,高等电点,为碱性蛋白。一些乳酸杆菌具有多个表层蛋白基因。国外学者对表层蛋白作为功能分子共价吸附固定的基质、表面展示载体和分子筛等方面的应用进行了深入研究,展示了巨大的发展前景。 展开更多

关键词 表层蛋白 乳酸杆菌 黏附 生物分析 表面展示

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乳酸菌表层蛋白的分离及其结构和性质 被引量：6

5

作者 朱晓 胡斌 +2 位作者 李景艳 刘慧博 卢蓉蓉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期19-24,共6页

对自主拥有的多株乳酸菌进行了表层蛋白的分离和鉴定,并对其结构和性质进行了研究。采用LiCl溶液进行提取,经SDS-PAGE检测,确定嗜酸乳杆菌fb116、嗜酸乳杆菌fb115和瑞士乳杆菌fb213携带表层蛋白。采用差示扫描量热仪(DSC)测定,其变性温... 对自主拥有的多株乳酸菌进行了表层蛋白的分离和鉴定,并对其结构和性质进行了研究。采用LiCl溶液进行提取,经SDS-PAGE检测,确定嗜酸乳杆菌fb116、嗜酸乳杆菌fb115和瑞士乳杆菌fb213携带表层蛋白。采用差示扫描量热仪(DSC)测定,其变性温度分别为63.67℃,61.98℃和59.78℃。它们的氨基酸组成大致相同,疏水氨基酸含量高达45%,酸性氨基酸含量在21%左右,远高于碱性氨基酸。圆二色谱法(CD)分析显示,其二级结构相似,α-螺旋和β-折叠约占34%和12%。去除表层蛋白之后,3株菌株的自动聚集能力和表面疏水性出现下降,这提示表层蛋白的存在有助于乳酸菌黏附性能的发挥。 展开更多

关键词 乳酸菌 表层蛋白 二级结构 表面性质 氨基酸组成

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嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表层蛋白对菌株黏附特性的影响 被引量：3

6

作者 占萌 李慧臻 +2 位作者 王娜娜 焦雯姝 霍贵成 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第5期144-150,共7页

采用体外实验探究了嗜酸乳杆菌KLDS1.0901的浓度、生长阶段、表层蛋白对其黏附Caco-2细胞能力的影响。将未处理、去除表层蛋白和热致死的KLDS1.0901采用荧光标记灌胃给小鼠,取不同部位的肠黏膜,进行流式细胞检测。通过透射电镜和SDS-PAG... 采用体外实验探究了嗜酸乳杆菌KLDS1.0901的浓度、生长阶段、表层蛋白对其黏附Caco-2细胞能力的影响。将未处理、去除表层蛋白和热致死的KLDS1.0901采用荧光标记灌胃给小鼠,取不同部位的肠黏膜,进行流式细胞检测。通过透射电镜和SDS-PAGE对表层蛋白粗品进行分析鉴定。结果表明,随着菌体浓度的增加,KLDS1.0901黏附率增大直至浓度为10~8CFU/mL黏附率达到饱和。菌体处于对数生长末期时,黏附特性更优。Caco-2单细胞层与KLDS1.0901表层蛋白共同孵育1 h黏附量显著下降(p <0.05),且加入的表层蛋白浓度越高,对其黏附抑制作用越强。未处理的KLDS1.0901细胞壁外围包裹着表层结构,但除去表层蛋白后表层结构即消失。表层蛋白粗品中表层蛋白含量约为15.6%,分子量在43 kDa左右。综上,嗜酸乳杆菌KLDS1.0901含有丰富的表层蛋白,且能较好的黏附于小鼠肠道,具有益生菌的潜力。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌 表层蛋白 黏附 荧光标记

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乳杆菌表层蛋白对菌株表面特性和益生特性的影响 被引量：2

7

作者 李佳珣 张秋香 +1 位作者 王瑞 赵建新 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2021年第11期43-49,33,共8页

为评估乳杆菌表层蛋白对菌株特性的影响,该研究通过序列比对筛选出含slp基因的乳杆菌,之后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其中部分菌的slp基因表达情况进行鉴定,并测定了表层蛋白去除前后菌体生长的吸光度值、自聚集... 为评估乳杆菌表层蛋白对菌株特性的影响,该研究通过序列比对筛选出含slp基因的乳杆菌,之后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其中部分菌的slp基因表达情况进行鉴定,并测定了表层蛋白去除前后菌体生长的吸光度值、自聚集率、自成膜量、与致病菌共聚集率等特性。结果表明,4株嗜酸乳杆菌、30株卷曲乳杆菌、3株瑞士乳杆菌、30株鼠李糖乳杆菌都含有slp基因,经过SDS-PAGE鉴定了四种菌的部分菌株均表达表层蛋白,且其表层蛋白与菌株的特性密切相关。比如,在生长方面,瑞士乳杆菌去除表层蛋白前后生长能力差异很大,但氯化锂溶液和蛋白酶K两种溶液处理的吸光度值差距较小,差值仅在0.2以内;在与致病菌共聚集方面,大部分菌株在不同处理过程中没有较大差异,有趣的是,本身自聚能力弱的鼠李糖乳杆菌3-1表现出来的与致病菌极强的共聚能力,这株菌的在口腔方面的防龋潜力值得进一步探究。该研究丰富了人们对乳杆菌表层蛋白的了解,为深入探究表层蛋白的功能和应用奠定理论基础。 展开更多

关键词 乳杆菌 表层蛋白 表面特性 序列比对 slp基因

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乳杆菌表层蛋白理化性质与生物功能的研究进展 被引量：3

8

作者 孟珺 王艳阳 +1 位作者 康媛媛 章绍兵 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第4期129-138,共10页

许多乳杆菌外表面都包裹着一层蛋白质,即为表层蛋白,氯化锂、盐酸胍和尿素等高浓度的解离剂可从菌体表面剥离表层蛋白。乳杆菌表层蛋白等电点偏碱性,分子质量25~71 kDa,来源不同的蛋白结构组成差异较大。乳杆菌表层蛋白对其菌体的表面... 许多乳杆菌外表面都包裹着一层蛋白质,即为表层蛋白,氯化锂、盐酸胍和尿素等高浓度的解离剂可从菌体表面剥离表层蛋白。乳杆菌表层蛋白等电点偏碱性,分子质量25~71 kDa,来源不同的蛋白结构组成差异较大。乳杆菌表层蛋白对其菌体的表面性质、胃肠道耐受性、黏附与定植都有积极的影响,还可协助乳杆菌抑制致病菌的感染,减少病原菌感染引起的细胞凋亡。乳杆菌表层蛋白独特的理化特性和良好的益生功能使其在食品和医药领域有着较为广泛的应用。着重综述了乳杆菌表层蛋白结构性质、制备方法、生物学功能、应用等方面的研究进展,为乳杆菌表层蛋白进一步的研究提供有价值的信息。 展开更多

关键词 表层蛋白 益生特性 黏附 抑菌

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表层蛋白对嗜酸乳杆菌NCFM生长代谢的影响

9

作者 李佳珣 张秋香 +1 位作者 王瑞 赵建新 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期40-44,共5页

为评估表层蛋白对嗜酸乳杆菌自聚集、生长及代谢的影响,通过测定菌体自聚集率、菌体生长、GC-MS分析表层蛋白去除前后嗜酸乳杆菌胞内小分子代谢物的变化。结果表明,表层蛋白去除前后,嗜酸乳杆菌的胞内氨基酸类如组氨酸、酪氨酸、鸟氨酸... 为评估表层蛋白对嗜酸乳杆菌自聚集、生长及代谢的影响,通过测定菌体自聚集率、菌体生长、GC-MS分析表层蛋白去除前后嗜酸乳杆菌胞内小分子代谢物的变化。结果表明,表层蛋白去除前后,嗜酸乳杆菌的胞内氨基酸类如组氨酸、酪氨酸、鸟氨酸,有机酸类如乳酸、苹果酸等代谢物具有显著差异,这些代谢物直接影响了表层蛋白相关的主要生化反应和关键代谢通路。经过代谢通路富集分析,主要影响了精氨酸和脯氨酸代谢、赖氨酸生物合成、精氨酸生物合成、氨基糖和核苷酸糖代谢、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢这5条代谢通路。总之,表层蛋白的剥离影响了氨基酸合成的代谢通路,氨基酸合成会竞争生长所需的能量,进而影响嗜酸乳杆菌的生长,该研究为进一步认识表层蛋白对嗜酸乳杆菌胞内小分子化合物代谢的影响提供了依据。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌 表层蛋白 代谢组学 自聚集 氨基酸合成

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嗜酸乳杆菌表层蛋白结构与生物学特性研究 被引量：1

10

作者 王婷 周慧敏 +1 位作者 于小番 许慧卿 《现代食品》 2019年第5期137-142,共6页

目的:阐明嗜酸乳杆菌表层蛋白的一级结构、高级结构,探讨嗜酸乳杆菌表层蛋白的高级结构对嗜酸乳杆菌生物学特性的影响。方法:通过耐盐和耐胆盐实验测定嗜酸乳杆菌的耐盐性和耐胆盐性,MAT法测定嗜酸乳杆菌的表面疏水率,自凝聚试验测定嗜... 目的:阐明嗜酸乳杆菌表层蛋白的一级结构、高级结构,探讨嗜酸乳杆菌表层蛋白的高级结构对嗜酸乳杆菌生物学特性的影响。方法:通过耐盐和耐胆盐实验测定嗜酸乳杆菌的耐盐性和耐胆盐性,MAT法测定嗜酸乳杆菌的表面疏水率,自凝聚试验测定嗜酸乳杆菌的自凝聚率,共凝聚试验测定嗜酸乳杆菌的共凝聚率。结果:嗜酸乳杆菌亲本株的耐受性、表面疏水率、自凝聚力与共凝聚力均高于去表层蛋白的嗜酸乳杆菌菌株。结论:嗜酸乳杆菌表层蛋白对提高嗜酸乳杆菌耐受性、疏水率、凝聚力有显著影响。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌 表层蛋白 耐受性 疏水性 凝聚性

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嗜酸乳杆菌表层蛋白提取方法的对比

11

作者 王艳阳 边明明 +2 位作者 康媛媛 章绍兵 孟珺 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第17期107-112,共6页

本文通过电泳比较了5 mol/L LiCl法、4 mol/L盐酸胍法、8 mol/L尿素法和5 mol/L LiCl结合1 mol/L LiCl法提取嗜酸乳杆菌JCM 1132表层粗蛋白方法,并进一步研究了不同提取方法对乳杆菌表面特性的影响。结果表明:两种不同浓度的LiCl法是提... 本文通过电泳比较了5 mol/L LiCl法、4 mol/L盐酸胍法、8 mol/L尿素法和5 mol/L LiCl结合1 mol/L LiCl法提取嗜酸乳杆菌JCM 1132表层粗蛋白方法,并进一步研究了不同提取方法对乳杆菌表面特性的影响。结果表明:两种不同浓度的LiCl法是提取表层蛋白的最适方法,该方法提取可得到纯度较高的表层蛋白。且用该方法剥离表层蛋白后,菌体的存活率最高,约为99.27%。不同方法去除表层蛋白后,菌体的表面电荷、表面疏水性、自聚集能力以及与沙门氏菌的共聚集能力均有所降低。表明表层蛋白对嗜酸乳杆菌表面性质起关键性作用,对乳杆菌益生功能的积极影响。 展开更多

关键词 乳杆菌 表层蛋白 提取方法 益生特性

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乳酸菌表层蛋白对其耐消化应激及肠道黏附能力的影响 被引量：1

12

作者 陈大卫 程月 +8 位作者 范佳明 申菲菲 任晨瑜 陈春萌 张瑞 张臣臣 关成冉 郑英明 顾瑞霞 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2022年第5期4-9,共6页

首先研究了乳酸菌的耐消化应激能力,然后研究了表层蛋白对菌株耐消化应激、黏附Caco-2细胞和抑制大肠杆菌黏附Caco-2细胞的影响。结果表明,依次经过唾液-胃液-肠液消化应激后,植物乳杆菌S7、W198和副干酪乳杆菌m111的存活率均大于3.53%... 首先研究了乳酸菌的耐消化应激能力,然后研究了表层蛋白对菌株耐消化应激、黏附Caco-2细胞和抑制大肠杆菌黏附Caco-2细胞的影响。结果表明,依次经过唾液-胃液-肠液消化应激后,植物乳杆菌S7、W198和副干酪乳杆菌m111的存活率均大于3.53%,显著高于其他菌株(p<0.05),且菌株细胞均携带表层蛋白;去除表层蛋白后,菌株S7、W198和m111的耐消化应激能力显著下降(p<0.05),存活率较未去除的分别下降了12.08%、38.32%和2.35%;对Caco-2细胞的黏附率分别显著下降了6.64%、5.10%和14.43%(p<0.05)。菌株S7通过排斥、竞争和替代的方式来抑制大肠杆菌的黏附能力分别显著下降了4.22%、18.70%和12.06%(p<0.05);菌株W198通过排斥和替代的方式来抑制大肠杆菌黏附的能力显著下降了41.56%和22.20%(p<0.05);菌株m111通过排斥和取代的方式来抑制大肠杆菌黏附的能力分别显著下降了21.25%和30.40%(p<0.05)。植物乳杆菌S7、W198和副干酪乳杆菌m111具有较强的耐消化应激能力,表层蛋白能增强其耐消化应激及黏附肠道的能力。 展开更多

关键词 乳酸菌 消化应激 表层蛋白 肠道黏附

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乳酸菌表层蛋白功能研究进展

13

作者 孟子恒 黄现青 +4 位作者 胡慧 乔明武 宋莲军 刘宇飞 海丹 《食品科技》 CAS 北大核心 2024年第7期49-58,共10页

乳酸菌表层蛋白(Surface layer proteins, SLP)是微生物表面的主要蛋白,具有多样功能。文章综述了SLP在菌体细胞保护、菌间互作、免疫调节和纳米技术中的作用,对SLP在支撑菌体、调控免疫反应,以及作为纳米载体和标记物的应用进行了深入... 乳酸菌表层蛋白(Surface layer proteins, SLP)是微生物表面的主要蛋白,具有多样功能。文章综述了SLP在菌体细胞保护、菌间互作、免疫调节和纳米技术中的作用,对SLP在支撑菌体、调控免疫反应,以及作为纳米载体和标记物的应用进行了深入探讨。该综述旨在为SLP在微生物学、免疫学和纳米技术中的未来研究提供新的视角。 展开更多

关键词 乳酸菌 表层蛋白 免疫调节

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基于生物信息学的植物乳酸杆菌表层黏附蛋白的筛选及鉴定 被引量：4

14

作者 沈通一 张明 +4 位作者 周玉坤 陈红旗 张鹏 杭晓敏 秦环龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第16期1626-1631,共6页

目的:筛选、鉴定及验证植物乳酸杆菌CGMCC No.1258表层黏附蛋白.方法:用盐酸胍结合超速离心法提取表层膜蛋白,通过HRP标记的黏蛋白作抗体Western blot找到含有黏附蛋白的条带进行质谱分析,生物信息学的TPP软件分析获得可能的蛋白,进行... 目的:筛选、鉴定及验证植物乳酸杆菌CGMCC No.1258表层黏附蛋白.方法:用盐酸胍结合超速离心法提取表层膜蛋白,通过HRP标记的黏蛋白作抗体Western blot找到含有黏附蛋白的条带进行质谱分析,生物信息学的TPP软件分析获得可能的蛋白,进行蛋白的分段表达克隆,并对纯化的蛋白用Western blot进行再次鉴定找到靶蛋白.同时将黏蛋白连接的sepharose 4B柱提取菌体黏附蛋白,通过制备的靶蛋白多克隆抗体对菌体黏附蛋白作Western blot进一步验证.结果:表层蛋白提取后,电泳及Western blot结果显示30-33 kDa处可及HRP标记的黏蛋白结合的阳性条带,随后进行质谱及TPP分析获得的蛋白为:(1)A型GTP连接蛋白;(2)丙酮酸氧化酶;(3)细胞分裂激活蛋白;(4)整合膜蛋白;(5)后期能力蛋白.并进行克隆表达及分段表达,并在此后的Western blot鉴定中呈强阳性条带显示靶蛋白是整合膜蛋白的第2段.在应用该靶蛋白制备的多克隆抗体进一步Western blot验证试验中发现同菌体黏附蛋白相作用的强阳性条带.结论:植物乳酸杆菌表层黏附蛋白为整合膜蛋白,并且该蛋白的黏附区域位于其第2段氨基酸序列中. 展开更多

关键词 植物乳酸杆菌 表层黏附蛋白 蛋白表达 生物信息学

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MALDI-TOF质谱技术研究铁蛋白蛋白壳表层的电荷分布 被引量：11

15

作者 黄河清 孔波 +2 位作者 林庆梅 陈晋安 曹廷明 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期99-103,共5页

采用SephacrylS -300排阻层析和DEAE -纤维素层析技术分离纯化鱼工鱼肝铁蛋白 (LiverferritinofDasyatisAkajei,DALF)。纯化后的DALF经梯度聚丙烯酰胺凝胶再次分离后 ,显示出两条凝胶带 ,即单分子DALF和双聚态DALF。选用基质辅助激光解... 采用SephacrylS -300排阻层析和DEAE -纤维素层析技术分离纯化鱼工鱼肝铁蛋白 (LiverferritinofDasyatisAkajei,DALF)。纯化后的DALF经梯度聚丙烯酰胺凝胶再次分离后 ,显示出两条凝胶带 ,即单分子DALF和双聚态DALF。选用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱技术 (MALDI -TOFMS)研究DALF的电荷分布时 ,发现DALF蛋白壳表层上显示出三种不同质荷比的分子离子峰 ,其质荷比为10369.41m/z、20710.33m/z和41809.43m/z。当DALF亚基被解离后 ,这三个分子离子峰随之消失 ,因而推测DALF蛋白壳表层存在着高密度正电荷区域 ,并与该蛋白形成非电惰性有着密切联系。通过拟出DALF蛋白壳表面电荷分布模型 。 展开更多

关键词 MALDI-TOF质谱 蛋白壳表层 Hong鱼肝 铁蛋白 质谱 电泳 电荷分布 电子传递

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致病钩体表层膜蛋白新基因(Lslp)的克隆表达及免疫原性研究

16

作者 胡昌华 鲍朗 +1 位作者 谢建平 张会东 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期500-503,共4页

克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性。根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp(GenBankAF32 5 80 7)的序列设计引物 ,在 6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序。以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1 λT ,构建重组质粒... 克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性。根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp(GenBankAF32 5 80 7)的序列设计引物 ,在 6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序。以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1 λT ,构建重组质粒并用酶切和PCR鉴定 ,进一步在大肠杆菌中诱导表达 ,并进行免疫印迹分析 ;纯化表达产物免疫家兔 ,ELISA检测血清抗体滴度。结果显示Lslp在 6株致病钩体中均能扩增出相应片段 ,且序列同源性达到99 6 % ;构建高效原核表达重组质粒pGST LslP ,经IPTG诱导在大肠杆菌中可表达出 6 6kDGST融合蛋白 ,并能与全钩抗血清发生免疫印迹反应 ;将上述融合蛋白免疫新西兰大白兔产生 1 :5 1 2 0高滴度的IgG抗体。研究结果提示致病钩体膜蛋白新基因Lslp可在大肠杆菌进行高效表达 ,表达产物能被全钩抗血清识别 。 展开更多

关键词 克隆 表达 钩端螺旋体 表层膜蛋白 基因 免疫原性

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嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌粘附鸡肠纹状缘膜的影响 被引量：4

17

作者 粟硕 王艳菁 +4 位作者 齐海涛 王利 黄震 陈济铛 张桂红 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期283-288,共6页

为研究嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌(E.coli)粘附鸡肠纹状缘膜的影响,本实验以雏鸡小肠纹状缘膜为模型,以嗜酸乳杆菌和鸡致病性E.coli O78为研究对象,提取嗜酸乳杆菌表层蛋白、肽聚糖及E.coli O78菌毛,雏鸡小肠纹状缘膜,采... 为研究嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌(E.coli)粘附鸡肠纹状缘膜的影响,本实验以雏鸡小肠纹状缘膜为模型,以嗜酸乳杆菌和鸡致病性E.coli O78为研究对象,提取嗜酸乳杆菌表层蛋白、肽聚糖及E.coli O78菌毛,雏鸡小肠纹状缘膜,采用固相粘附试验和生物素标记法从分子间相互作用的关系评价了嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对菌毛粘附的抑制作用,结果表明:表层蛋白和肽聚糖对菌毛粘附具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性抑制菌毛与纹状缘膜的结合,具有竞争性拮抗作用,这主要是由空间占位造成的。肽聚糖的抑制作用相对较小。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌 表层蛋白 肽聚糖 菌毛 固相粘附

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乳酸杆菌对肠上皮黏附机制研究进展 被引量：9

18

作者 沈通一 秦环龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第23期2631-2636,共6页

乳酸菌作为胃肠道的优势菌群,对于维护胃肠道微生态环境稳定有重要意义,而与宿主胃肠道上皮表面的黏附和定植是发挥这些作用的前提和基础.本文就乳酸杆菌黏附活性成分及其生物学特性,与肠上皮细胞的黏附机制及其影响因素的研究现状作一... 乳酸菌作为胃肠道的优势菌群,对于维护胃肠道微生态环境稳定有重要意义,而与宿主胃肠道上皮表面的黏附和定植是发挥这些作用的前提和基础.本文就乳酸杆菌黏附活性成分及其生物学特性,与肠上皮细胞的黏附机制及其影响因素的研究现状作一综述. 展开更多

关键词 乳酸杆菌 黏附因子 表层蛋白

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肾移植术后巨细胞病毒感染的诊断与防治进展 被引量：6

19

作者 赵奇 廖贵益 《器官移植》 CAS CSCD 2014年第6期392-395,共4页

自1956年Smith从先天性巨细胞包涵体病患者颌下腺组织中分离获得人巨细胞病毒（CMV）以来,CMV逐步得到认识。CMV属β疱疹病毒亚科,具有种属特异性,是一种表面有脂质包膜的线状双链脱氧核糖核酸（DNA）病毒。CMV DNA长230 kb,病毒直径150... 自1956年Smith从先天性巨细胞包涵体病患者颌下腺组织中分离获得人巨细胞病毒（CMV）以来,CMV逐步得到认识。CMV属β疱疹病毒亚科,具有种属特异性,是一种表面有脂质包膜的线状双链脱氧核糖核酸（DNA）病毒。CMV DNA长230 kb,病毒直径150-200 nm。 感染。 展开更多

关键词 肾移植 巨细胞病毒 低基质磷酸化蛋白 基质表层蛋白

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植物乳酸杆菌CGMCC NO.1258表层黏附蛋白同致病性大肠埃希菌竞争黏附肠上皮细胞的研究 被引量：2

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作者 沈通一 张明 +4 位作者 张鹏 陈红旗 周玉坤 杭晓敏 秦环龙 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期403-406,共4页

目的了解植物乳酸杆菌CGMCC NO.1258表层黏附蛋白(IMP2)在同肠上皮细胞(Caco-2)黏附作用中的机制。方法在制备和鉴定IMP2的多克隆抗体的基础上,同EPEC进行竞争黏附肠上皮细胞中,采用体外抗体阻断的方法检测IMP2对植物乳酸菌CGMCC NO.125... 目的了解植物乳酸杆菌CGMCC NO.1258表层黏附蛋白(IMP2)在同肠上皮细胞(Caco-2)黏附作用中的机制。方法在制备和鉴定IMP2的多克隆抗体的基础上,同EPEC进行竞争黏附肠上皮细胞中,采用体外抗体阻断的方法检测IMP2对植物乳酸菌CGMCC NO.1258黏附作用的影响。结果多克隆抗体能够有效抑制植物乳酸菌CGMCC NO.1258对肠上皮细胞的黏附,并且导致EPEC对Caco-2细胞黏附的增加。结论IMP2在植物乳酸杆菌CGMCC NO.1258同肠上皮细胞黏附中发挥着重要的作用。 展开更多

关键词 植物乳酸菌 表层黏附蛋白 多克隆抗体

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