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发生在成视网膜细胞瘤蛋白大袋立体结构外的错义突变 被引量：1
1
作者 申煌煊 张清炯 +3 位作者 肖学珊 黎仕强 郭向明 吴中耀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期314-316,共3页
目的 :了解成视网膜细胞瘤 (RB)患者RB1基因突变至RB发生中RB蛋白 (pRB)的变化。方法 :提取RB患者的基因组DNA ,PCR扩增后 ,SSCP/异源双链筛查RB1基因的启动子和全部 2 7个外显子 ,克隆测序鉴定突变 ,并分析突变产物对pRB的影响。结果 ... 目的 :了解成视网膜细胞瘤 (RB)患者RB1基因突变至RB发生中RB蛋白 (pRB)的变化。方法 :提取RB患者的基因组DNA ,PCR扩增后 ,SSCP/异源双链筛查RB1基因的启动子和全部 2 7个外显子 ,克隆测序鉴定突变 ,并分析突变产物对pRB的影响。结果 :RB患者RB1基因的外显子 4存在着错义突变 ,该突变发生在pRB的大袋立体结构外。RB患者RB1基因存在着不影响pRB大袋的生殖细胞性突变 ,这是迄今为止第 4例报道。结论 展开更多
关键词 成视网膜细胞瘤 成视网膜细胞瘤蛋白 基因突变 RB
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circROBO1上调KLF5促进视网膜细胞瘤侵袭的机制研究
2
作者 刘越峰 张志伟 +1 位作者 李欣 罗卫民 《海南医学院学报》 2023年第17期1302-1308,共7页
目的:探索circROBO1通过上调KLF5促进视网膜Y79细胞侵袭的作用及其可能的调控机制。方法:RNase R酶消化及qRT-PCR实验检测环状RNA circROBO1在视网膜Y79细胞中的结构稳定性;分别提取视网膜Y79细胞的胞质及胞核RNA,进行circROBO1的亚细... 目的:探索circROBO1通过上调KLF5促进视网膜Y79细胞侵袭的作用及其可能的调控机制。方法:RNase R酶消化及qRT-PCR实验检测环状RNA circROBO1在视网膜Y79细胞中的结构稳定性;分别提取视网膜Y79细胞的胞质及胞核RNA,进行circROBO1的亚细胞定位分析;采用siRNA沉默视网膜Y79细胞中circROBO1的表达,划痕实验、Transwell细胞侵袭与迁移实验检测circROBO1对Y79细胞迁移与侵袭能力的影响;通过CircInteractome及TargetScan在线软件分别预测circROBO1与下游miRNA及miRNA与下游靶基因KLF5的靶向结合位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证两者之间的靶向调控关系。蛋白免疫印迹实验检测siRNA沉默Y79细胞中circROBO1的表达后对KLF5表达的影响。结果:与未经RNase R酶处理的对照组相比,circROBO1的相对表达量在RNase R酶处理后并无显著变化;而线性ROBO1的相对表达量在经RNase R酶处理后,则显著降低(t=16.18,P<0.05);circROBO1在细胞质中的含量显著高于细胞核(t=13.04, P<0.05);与转染si-control的对照组相比,si-circROBO1组视网膜Y79细胞的迁移率、Transwell细胞侵袭与迁移能力均显著降低(t=22.54,P<0.05);circROBO1可靶向吸附miR-885-5p、miR-885-5p与KLF5之间存在靶向结合位点(t=11.39,P<0.05);与si-control组相比,si-circROBO1组的KLF5蛋白表达显著降低(t=17.26,P<0.05)。结论:circROBO1通过上调KLF5促进视网膜Y79细胞瘤侵袭。 展开更多
关键词 视网膜Y79细胞 circROBO1 miR-885-5p KLF5 侵袭
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实验性视网膜脱离复位后的视网膜细胞超微结构观察 被引量：12
3
作者 孙晓东 张皙 +2 位作者 俞彰 杨桦 黄璐璐 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2001年第4期326-329,共4页
目的　　研究视网膜脱离复位后视网膜超微结构改变，以探讨视功能恢复障碍的机制。方法　　１２只灰兔通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立视网膜脱离模型。用透射电镜观察术后 １，２，３，４周的视网膜。结果　视网膜复位早期光... 目的　　研究视网膜脱离复位后视网膜超微结构改变，以探讨视功能恢复障碍的机制。方法　　１２只灰兔通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立视网膜脱离模型。用透射电镜观察术后 １，２，３，４周的视网膜。结果　视网膜复位早期光感受器外节段缺失、断裂。内节、视细胞核、双极细胞、神经节细胞均可见胞浆水肿，线粒体肿胀和嵴断裂。复位３周后，视网膜细胞结构基本正常，但仍有部分外节变短，神经纤维空洞存在。结论　　视网膜复位后不仅光感受器，而且视网膜其他细胞和神经纤维均有不可逆的改变，这些改变导致祝功能恢复不良。 展开更多
关键词 视网膜脱离 超微结构 视功能 动物实验 视网膜细胞
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决明子多糖对大鼠青光眼视网膜细胞的保护作用及机制 被引量：16
4
作者 张新 赵燕 魏玲 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第15期3739-3742,共4页
目的探讨决明子多糖对大鼠青光眼视网膜细胞的保护作用及其机制。方法体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组,脂多糖(1 mg/L,LPS)组,决明子多糖低、中和高剂量组(15,30和60 mg/L)。决明子多糖组分别给予相应浓度的决明子多糖孵育12 h,对照... 目的探讨决明子多糖对大鼠青光眼视网膜细胞的保护作用及其机制。方法体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组,脂多糖(1 mg/L,LPS)组,决明子多糖低、中和高剂量组(15,30和60 mg/L)。决明子多糖组分别给予相应浓度的决明子多糖孵育12 h,对照组给予等量无菌生理盐水。孵育完成后,除对照组外,其余各组给予LPS刺激12 h。显微镜观察细胞阿米巴样变化,Q-PCR法检测细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-1β基因表达变化。60只SD雄性大鼠,随机分为对照组,模型组,决明子多糖低、中和高剂量组(500,1 000和2 000 mg/kg),每组12只。除对照组外,其余各组烙断巩膜上静脉造大鼠青光眼模型。手术结束3 d后记录大鼠眼内压,同时决明子多糖组分别灌胃相应剂量的决明子多糖,对照组和模型组给予等量蒸馏水。3 w后,测定大鼠眼内压,同时取大鼠眼球TUNEL法检测原位细胞凋亡,HE染色观察大鼠视网膜变化。结果与LPS组相比,决明子多糖低、中和高剂量组BV2小胶质细胞的阿米巴样变化明显减少(P<0.05或P<0.01);决明子多糖低、中和高剂量组的TNF-α表达量明显降低(P<0.05或P<0.01),决明子多糖高剂量组的IL-1β表达量明显降低(P<0.05)。与对照组相比,手术3 d后造模大鼠的眼内压明显升高(P<0.01);给药3 w后,与模型组相比,决明子多糖低、中和高剂量组的视网膜凋亡细胞明显减少(P<0.05),但眼内压差异无统计学意义(P>0.05);HE染色结果,对照组大鼠视网膜排列整齐,模型组大鼠视网膜明显萎缩,神经节细胞减少。决明子多糖低、中和高剂量组视网膜结构均有恢复,且中和高剂量组神经节细胞层未见明显损伤。结论决明子多糖具有保护青光眼所致视网膜细胞损伤的作用,其作用机制与抑制小胶质细胞的炎性病变有关。 展开更多
关键词 决明子多糖 小胶质细胞 炎性反应 青光眼 视网膜细胞
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视黄酸联合视网膜细胞共培养对胚胎干细胞体外分化的诱导作用 被引量：9
5
作者 张良 唐仕波 +3 位作者 张淳 黄冰 罗燕 陈系古 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第6期565-568,共4页
目的 探讨胚胎干细胞(ESC)在视黄酸联合视网膜细胞共培养诱导条件下的分化特征。 方法 将ESC自液氮中复苏、培养,传1代后进行拟胚体培养。将部分3.5 d拟胚体离心重悬后加入含有视黄酸的24孔板中进行诱导,另一部分加入已经培养有视网膜... 目的 探讨胚胎干细胞(ESC)在视黄酸联合视网膜细胞共培养诱导条件下的分化特征。 方法 将ESC自液氮中复苏、培养,传1代后进行拟胚体培养。将部分3.5 d拟胚体离心重悬后加入含有视黄酸的24孔板中进行诱导,另一部分加入已经培养有视网膜混合细胞的培养瓶中,培养液中同时也加入视黄酸。视网膜混合细胞中仅加入视黄酸未加拟胚体作为对照。倒置相差显微镜下观察细胞在整个诱导过程中形态学的改变并使用免疫细胞化学检测诱导细胞中巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、广谱细胞角蛋白、微管相关蛋白-2、视紫质蛋白表达情况。结果 (1)形态学改变仅由视黄酸诱导,诱导细胞呈多种形态;在共培养条件下,绝大多数拟胚体分化出来的细胞形态非常单一,呈透明圆形。部分原贴壁的视网膜细胞出现了明显的网状结构。(2)免疫细胞化学显示两种诱导条件均可见大部分诱导细胞MAP-2阳性,并可见Nestin阳性细胞。共培养诱导尚可见GFAP阳性、Cytokeratin阳性和Rhodopsin阳性的细胞。 结论 视黄酸可以诱导大部分细胞成为神经细胞,在视黄酸和与视网膜细胞共培养诱导条件下,可以获得更为纯化的形态一致的神经样细胞,部分诱导细胞表达视网膜细胞的特性。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 视网膜细胞 共培养 视黄酸 分化
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新型自由基清除剂对鼠视神经挫伤后视网膜细胞的保护作用 被引量：5
6
作者 周海燕 高晨 +4 位作者 张景科 周丽雅 王小梅 田蔓男 魏志诚 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期40-44,共5页
目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen speciesin,ROS)的含量和依达拉奉(edaravone,MCI-186)对视网膜细胞的保护作用。方法 SD大鼠192只,雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各4... 目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen speciesin,ROS)的含量和依达拉奉(edaravone,MCI-186)对视网膜细胞的保护作用。方法 SD大鼠192只,雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各48只。对照组、治疗组用视神经钳夹法制作大鼠视神经夹挫伤模型;治疗组造模后腹腔注射依达拉奉30mg/kg,用生理盐水稀释后每隔12h腹腔注射给药。给药时间为30min,共14d。于实验的3、6、10、14d处死大鼠。2′,7′-二氯双氢荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)为标记探针,通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞内2′,7′-二氯双氢荧光素(DCF)的荧光强度;以AnnexinV/PI双染色法通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡的形态特征;透射电镜观察各组鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的超微结构改变。结果造模后3～14d,视网膜细胞中活性氧的表达量和细胞总凋亡率在3、6、10、14d时每个时间点对照组较治疗组和正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),假手术与正常组间相比均无显著性差异。透射电镜检查显示:治疗组大鼠RGCs细胞核、染色质、细胞器损伤较对照组有明显减轻。结论依达拉奉通过清除ROS,阻止了RGCs凋亡,具有一定的视网膜细胞保护作用。 展开更多
关键词 自由基清除剂 视神经钳夹伤 视网膜细胞 活性氧 凋亡 超微结构 依达拉奉
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自适应系统对活体人眼视网膜细胞的初步观察 被引量：6
7
作者 姜春晖 王文吉 +4 位作者 徐格致 凌宁 张雨东 饶学军 李新阳 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期503-505,共3页
目的　探讨应用自适应光学技术获得高分辨率视觉细胞图像的可能性及其意义。方法　 2 0 0 1年3～ 11月 ,我院采用活体人眼视网膜高分辨力成像自适应光学系统 ,观察 2 5名年龄为 18～ 4 8岁的健康成年人的眼底细胞 ,主要是黄斑部视细胞... 目的　探讨应用自适应光学技术获得高分辨率视觉细胞图像的可能性及其意义。方法　 2 0 0 1年3～ 11月 ,我院采用活体人眼视网膜高分辨力成像自适应光学系统 ,观察 2 5名年龄为 18～ 4 8岁的健康成年人的眼底细胞 ,主要是黄斑部视细胞。试验者的裸眼视力为 0 .9～ 1.0 ,眼底检查均正常。结果　清晰地观察到视网膜细胞 ,主要是双极细胞及视细胞的图像。计数视细胞 :中心凹旁 1.5°处视细胞为 4～ 5万 /mm2 ,3°处少于 3万 /mm2 。结论　活体人眼视网膜高分辨力成像自适应光学系统可获得清晰的视网膜细胞图像 。 展开更多
关键词 自适应系统 活体人眼视网膜细胞 高分辨率 视觉细胞图像 自适应光学系统 视网膜疾病
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乳鼠视网膜细胞诱导骨髓间充质干细胞分化为视网膜神经节样细胞 被引量：8
8
作者 徐春玲 苏冠方 牟大鹏 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期174-178,共5页
目的探讨乳鼠视网膜细胞对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的诱导分化作用。方法从出生8d的大鼠骨髓中分离培养BMSCs,同时培养乳鼠视网膜神经细胞。在Transwell双层培养体系下,利用乳鼠视网膜细胞诱导BMSCs,诱导后细胞经RT-PCR及免疫荧光... 目的探讨乳鼠视网膜细胞对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的诱导分化作用。方法从出生8d的大鼠骨髓中分离培养BMSCs,同时培养乳鼠视网膜神经细胞。在Transwell双层培养体系下,利用乳鼠视网膜细胞诱导BMSCs,诱导后细胞经RT-PCR及免疫荧光鉴定。结果加入乳鼠视网膜细胞共培养第7d有神经元样细胞形成,经nestin、NF、β-IIITubulin、Thy1.1行免疫组织化学、RT-PCR、免疫荧光鉴定,细胞呈阳性反应。结论BMSCs在体外培养条件下,经过新生乳鼠视网膜细胞诱导,可以分化为视网膜神经节样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 诱导分化 视网膜神经节样细胞 视网膜细胞
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石斛散对体外培养人视网膜细胞的作用 被引量：4
9
作者 杨永升 庄曾渊 +1 位作者 王津津 徐艳玲 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第6期405-408,共4页
目的观察中药方剂石斛散及单味药对人视网膜细胞的增生以及谷氨酸损伤的保护作用,探讨其在视网膜细胞损伤或变性类疾病方面的作用及机理,为临床治疗同类疾病提供依据。方法体外培养人视网膜细胞,通过四甲基偶氮唑盐实验观察石斛散复方... 目的观察中药方剂石斛散及单味药对人视网膜细胞的增生以及谷氨酸损伤的保护作用,探讨其在视网膜细胞损伤或变性类疾病方面的作用及机理,为临床治疗同类疾病提供依据。方法体外培养人视网膜细胞,通过四甲基偶氮唑盐实验观察石斛散复方以及各单味药对视网膜细胞增生的影响。另用Rhodamine123标记培养的视网膜细胞,通过激光共聚焦扫描显微镜动态观察和记录不同药物作用下细胞的线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化。结果体外培养人视网膜细胞贴壁、伸展以及生长良好。四甲基偶氮唑盐实验:石斛散组1.58g·L-1和0.50g·L-1以及石斛组5.00g·L-1对人视网膜细胞活性分别增加21.8%、14.2%和13.4%。MMP实验:石斛散轻度升高MMP,增加约13.5%,同时它可以抵抗谷氨酸损伤细胞后引起的MMP下降,由降低46.4%减少为16.2%。结论石斛散能够影响人视网膜细胞线粒体功能、促进细胞活性、抵抗谷氨酸对人视网膜细胞损伤作用。可作为临床治疗视网膜变性类疾病的一种选择。 展开更多
关键词 视网膜细胞 石斛散 线粒体膜电位 四甲基偶氮唑盐
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家兔视网膜脱离状态下玻璃体NGF水平及视网膜细胞动态观察 被引量：3
10
作者 孙声桃 郭希让 +2 位作者 吴景兰 鲍玉洲 王永淑 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第5期570-574,共5页
目的 :研究视网膜脱离状态下玻璃体内源性神经生长因子 (NGF)水平及视网膜细胞的动态变化 ,为视网膜脱离的治疗提供实验依据。方法 :健康青紫兰家兔制备视网膜脱离模型 ,模型制备后 8h ,1d ,4d ,7d ,14d以夹心酶免疫反应方法检测玻璃体... 目的 :研究视网膜脱离状态下玻璃体内源性神经生长因子 (NGF)水平及视网膜细胞的动态变化 ,为视网膜脱离的治疗提供实验依据。方法 :健康青紫兰家兔制备视网膜脱离模型 ,模型制备后 8h ,1d ,4d ,7d ,14d以夹心酶免疫反应方法检测玻璃体NGF的水平 ,同时制备视网膜光镜、电镜标本 ,观察视网膜细胞的动态变化。统计学方法采用方差分析、秩和检验和直线相关分析。结果 :①家兔正常玻璃体NGF的水平为 (16 48± 2 5 2 )ng/L。视网膜脱离后 8h玻璃体NGF水平已增加 ,1d后达正常水平的 12 6倍 ;脱离后第 4d为正常水平的 4倍 ;第 14d降至正常水平。②视网膜脱离后第 4～ 7d变性及凋亡视细胞数增加 ,与玻璃体NGF水平显著负相关。③视网膜脱离 7d后神经节细胞层的厚度与玻璃体NGF水平显著正相关。结论 :NGF对视网膜细胞可能具有保护作用 。 展开更多
关键词 视网膜脱离 神经生长因子 视网膜细胞 兔 玻璃体NGF
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胚胎干细胞诱导分化视网膜细胞的方法新进展 被引量：2
11
作者 赵永吉 庞丽 游志鹏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期851-854,共4页
视网膜变性疾病是引起视力丧失的重要原因，由于这类眼病的病因不明确、发病机制复杂，目前尚无有效的治疗方法。近年来，干细胞研究领域取得了突破性进展，干细胞具有分化为机体所有细胞的潜能，可以利用胚胎干细胞（ESCs）分化出各种... 视网膜变性疾病是引起视力丧失的重要原因，由于这类眼病的病因不明确、发病机制复杂，目前尚无有效的治疗方法。近年来，干细胞研究领域取得了突破性进展，干细胞具有分化为机体所有细胞的潜能，可以利用胚胎干细胞（ESCs）分化出各种视网膜细胞，这为视网膜变性疾病的治疗带来了新的曙光。ESCs治疗视网膜变性疾病至关重要的一步是将ESCs分化为视网膜光感受器细胞和视网膜色素上皮（RPE）样细胞。本文对自发诱导培养法、共培养法、细胞因子诱导法、单层贴壁诱导培养法和3D诱导培养法等ESCs分化为视网膜光感受器细胞和RPE细胞方法的最新进展进行综述。 展开更多
关键词 视网膜变性疾病 胚胎干细胞 分化 视网膜细胞
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视网膜细胞瘤的研究进展 被引量：3
12
作者 谢满云（综述） 李永平（审校） 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期660-664,共5页
视网膜细胞瘤是发生于视网膜组织的一种良性肿瘤。该病自1982年由Gallie等首次描述，迄今人们对其认识日渐加深。越来越多的临床和组织病理学研究提示，视网膜细胞瘤可能是视网膜母细胞瘤（RB）的早期转化阶段或是RB的一种类型，且由于... 视网膜细胞瘤是发生于视网膜组织的一种良性肿瘤。该病自1982年由Gallie等首次描述，迄今人们对其认识日渐加深。越来越多的临床和组织病理学研究提示，视网膜细胞瘤可能是视网膜母细胞瘤（RB）的早期转化阶段或是RB的一种类型，且由于该病早期无明显的临床症状，因而难以发现。因此认为通过对RB患者的亲属进行随访和筛查，以便早期发现、早期诊断和早期干预视网膜细胞瘤对于防止和阻断其向恶性肿瘤的转化进程具有重要的临床意义。收集国内外关于视网膜细胞瘤的研究和报道，对视网膜细胞瘤的命名变迁、临床表现、病理特征、分子机制研究及遗传学特点等方面进行综述。 展开更多
关键词 视网膜细胞瘤 视网膜母细胞瘤 分子生物学 遗传学 临床表现
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脑苷肌肽对rd小鼠视网膜细胞保护作用的研究 被引量：5
13
作者 杨永升 王津津 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第12期1131-1133,共3页
目的观察脑苷肌肽(cattle encephalon glycoside and ignotin,CEGI)对体外分离的rd小鼠视网膜细胞的保护作用,旨在探求CEGI对视网膜以及视神经损伤相关疾病的治疗效果,为临床用药提供客观依据和指导。方法采用体外分离rd小鼠视网膜细胞... 目的观察脑苷肌肽(cattle encephalon glycoside and ignotin,CEGI)对体外分离的rd小鼠视网膜细胞的保护作用,旨在探求CEGI对视网膜以及视神经损伤相关疾病的治疗效果,为临床用药提供客观依据和指导。方法采用体外分离rd小鼠视网膜细胞悬液,用MTT和台盼蓝染料排斥法观察CEGI和神经生长因子(NGF)对细胞活性的影响。结果 MTT实验示CEGI8.00mg·L-1、0.04g·L-1、0.20g·L-1和NGF0.04mg·L-1、0.20mg·L-1对视网膜细胞活性有促进作用,尤其以CEGI0.04g·L-1和NGF0.20mg·L-1最为明显,细胞增殖率分别为130.0%±21.8%和124.0%±13.3%。若将二者组合使用,可使细胞增长率达到132.0%±9.1%,与药物空白对照组100.0%±10.1%相比差异均有统计学意义。台盼蓝染料排斥试验结果显示0.04g·L-1CEGI组活细胞比例在除5min外的各时间点,都明显高于对照组,而0.20mg·L-1NGF组也可保护视网膜细胞,主要以短时间点为主(5min～1d),与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 CEGI有促进视网膜细胞生长发育作用,对rd小鼠视网膜细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 视网膜细胞 脑苷肌肽 RD小鼠 台盼蓝染料排斥法
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丙泊酚对体外培养小鼠视网膜细胞抗氧化应激的作用 被引量：4
14
作者 杨明 朱彧 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1222-1225,共4页
目的探讨丙泊酚对体外培养视网膜细胞氧化应激的影响。方法原代培养小鼠视网膜细胞,经5μg/ml和50μg/ml丙泊酚处理后,予以200μmol/L H2O2处理诱导氧化应激。处理细胞分为四组:视网膜细胞未处理组(对照组),视网膜细胞H2O2处理组(0μg/m... 目的探讨丙泊酚对体外培养视网膜细胞氧化应激的影响。方法原代培养小鼠视网膜细胞,经5μg/ml和50μg/ml丙泊酚处理后,予以200μmol/L H2O2处理诱导氧化应激。处理细胞分为四组:视网膜细胞未处理组(对照组),视网膜细胞H2O2处理组(0μg/ml组),视网膜细胞H2O2+低剂量丙泊酚处理组(5μg/ml组)和视网膜细胞H2O2+高剂量丙泊酚处理组(50μg/ml组)。MTS法检测细胞活力。流式细胞术检测活性氧簇(ROS)。生化法检测细胞培养上清及细胞裂解物中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽S转移酶(GST)、髓过氧化物酶(MPO)含量。蛋白印迹检测NF-κB。ELISA检测IL-6、IL-1β。结果加入终浓度0、5、50μg/ml的丙泊酚,细胞生存率分别为33.5%,65.2%和85.5%(P<0.05);0、5和50μg/ml组的ROS产生分别为对照组的1007.8%、398.9%和256.2%;MDA表达分别为对照组的301.5%、221.4%和172.4%(P<0.05);SOD水平分别为对照组的28.5%、44.2%和71.3%(P<0.05);GST水平分别为对照组的32.6%、52.1%和66.8%(P<0.05);GSH-Px水平分别为对照组的25.8%、65.2%和76.5%(P<0.05);MPO水平分别为对照组的285.2%、236.6%和166.3%(P<0.05);NF-κB表达分别为对照组的933.3%、576.9%和472.2%(P<0.05);IL-1β水平分别为对照组的346.4%、292.6%和180.0%(P<0.05);IL-6水平分别为对照组的224.6%、187.9%和148.0%(P<0.05)。结论丙泊酚可以减轻H2O2诱导的氧化应激对原代视网膜细胞的损伤,其作用机制可能是丙泊酚可以增加SOD等抗氧化酶产生,抑制NF-κB激活和炎症因子产生,从而减轻氧化应激对细胞的损伤。 展开更多
关键词 丙泊酚 视网膜细胞 氧化应激
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视黄酸联合视网膜细胞培养上清液对胚胎干细胞体外分化的诱导作用 被引量：2
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作者 张良 唐仕波 +3 位作者 罗燕 黄冰 张淳 陈系古 《眼科学报》 2003年第2期122-125,共4页
目的:探讨经过初步诱导的拟胚体在视黄酸和视网膜细胞培养上清液作用下的分化特征。方法:将胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)自液氮中复苏、培养,传1代后进行拟胚体(embry-onic bodies,EB)培养。3天半的 EB离心重悬后不作消化,使... 目的:探讨经过初步诱导的拟胚体在视黄酸和视网膜细胞培养上清液作用下的分化特征。方法:将胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)自液氮中复苏、培养,传1代后进行拟胚体(embry-onic bodies,EB)培养。3天半的 EB离心重悬后不作消化,使用视黄酸、视黄酸加鼠视网膜胶质细胞和神经细胞培养上清液、视黄酸加人视网膜色素上皮培养上清液、视黄酸加人胎儿视网膜胶质细胞培养上清液(分别记为A、B、C、D组)等进行诱导。观察诱导过程中形态学改变,培养3周时使用免疫细胞化学检测Nestin、GFAP、cytokeratin、MAP-2、rhodopsin等在诱导后细胞中的表达情况。结果:(1)形态学改变:4种条件下的早期改变基本相同,均可见多种形态的细胞;3周后:拟胚体结构基本已散开,A组:见多种形态的细胞,细胞边界欠清,饱满度下降;B组:细胞以透明度较高的圆形细胞为主;C组:拟胚体及拟胚体周围的细胞中出现了含有明显色素的细胞;D组诱导:细胞胞体较大,形态结构较为单一;(2)免疫细胞化学:4种条件下均表现为大部分细胞MAP-2阳性,未见Nestin阳性细胞;此外,A组中,未见 GFAP、Cytokeratin、Rhodopsin阳性细胞 ;B组中,可见 GFAP、Cytokeratin、Rhodopsin阳性细胞;C组仅见Cytokeratin阳性细胞;D组仅见GFAP阳性细胞。结论:在ESC的次级诱导中。 展开更多
关键词 视黄酸 视网膜细胞 上清液 胚胎干细胞 细胞分化 实验
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镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠视网膜细胞保护作用机制的研究 被引量：4
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作者 温鑫洋 颜春鲁 +2 位作者 金华 刘志军 曹强 《中医临床研究》 2016年第5期1-3,共3页
目的:探索镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠视网膜细胞的保护作用机制。方法:将48只SHR随机分为4组:模型组(B)、贝那普利对照组(C)、镇肝熄风汤低剂量观察组(D)、镇肝熄风汤高剂量观察组(E);每组各12只。正常空白组WKY(A)12只。镇肝熄风汤... 目的:探索镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠视网膜细胞的保护作用机制。方法:将48只SHR随机分为4组:模型组(B)、贝那普利对照组(C)、镇肝熄风汤低剂量观察组(D)、镇肝熄风汤高剂量观察组(E);每组各12只。正常空白组WKY(A)12只。镇肝熄风汤低剂量组灌服镇肝熄风汤15g·kg^(-1)·d^(-1)(药物浓度1.5g/m L);镇肝熄风汤高剂量组灌服镇肝熄风汤30g·kg^(-1)·d^(-1)(药物浓度3.0g/m L);贝那普利组灌服贝那普利0.90mg·kg^(-1)·d^(-1)。模型组(B)及WKY组每日灌服同体积的蒸馏水。共8周。检测干预前后大鼠血压,免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax的表达。结果:干预前与空白组(WKY大鼠)比较,其他各组(SHR大鼠)收缩压、舒张压和平均血压明显高于同周龄的WKY大鼠(P<0.05);各组大鼠干预8周后再次进行血压测定,与模型组比较,各治疗组收缩压、舒张压和平均血压显著降低(P<0.05);镇肝熄风汤减轻了SHR的Bax表达(P<0.01),增加了Bcl-2的表达,其中中药高剂量组达到WKY水平(P>0.05)。结论:镇肝熄风汤不仅有明显的降压作用,而且在高血压病程中可抑制视网膜毛细血管的细胞凋亡。 展开更多
关键词 镇肝熄风汤 视网膜细胞 血压 B-淋巴细胞瘤 白血病-2基因
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视网膜细胞诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞 被引量：3
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作者 徐春玲 苏冠方 牟大鹏 《中国实验诊断学》 2007年第1期7-9,共3页
目的探索乳鼠视网膜细胞体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法以大鼠BMSCs为研究对象,利用分层共培养的乳鼠视网膜细胞作诱导剂,进行增殖培养、分化诱导;免疫组化法进行细胞性质鉴定。结果加入乳鼠视网膜细胞共培... 目的探索乳鼠视网膜细胞体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法以大鼠BMSCs为研究对象,利用分层共培养的乳鼠视网膜细胞作诱导剂,进行增殖培养、分化诱导;免疫组化法进行细胞性质鉴定。结果加入乳鼠视网膜细胞共培养第7天有神经元样细胞形成,经nestin、NF鉴定为神经元样细胞。结论BMSCs在体外培养条件下,经过新生乳鼠视网膜细胞诱导,可以分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分化 神经元 视网膜细胞
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P75神经营养受体与视网膜细胞凋亡 被引量：2
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作者 贡亦清 陈逖 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第4期742-744,共3页
P75神经营养受体是最早发现的神经营养因子受体,既往认为其主要作为高亲和力受体的辅助受体间接发挥作用。近年来研究表明,P75神经营养受体在神经系统的发育中有诱导细胞凋亡作用。现阐述其在视网膜神经细胞生长,分化以及逆向运输神经... P75神经营养受体是最早发现的神经营养因子受体,既往认为其主要作为高亲和力受体的辅助受体间接发挥作用。近年来研究表明,P75神经营养受体在神经系统的发育中有诱导细胞凋亡作用。现阐述其在视网膜神经细胞生长,分化以及逆向运输神经营养因子等方面的作用。 展开更多
关键词 P75神经营养受体 视网膜细胞 细胞凋亡 神经营养因子 信号传递
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坏死性凋亡与视网膜细胞死亡相关性的研究进展 被引量：2
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作者 陆冰 孙晓东 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期85-88,共4页
视网膜色素上皮细胞、神经节细胞、光感受器细胞等视网膜细胞在维持视网膜和脉络膜功能上发挥了重要作用。视网膜细胞的死亡是多种眼病引起视功能损害的主要原因。坏死性凋亡是一种新的重要的细胞死亡途径。本文就坏死性凋亡的发现及其... 视网膜色素上皮细胞、神经节细胞、光感受器细胞等视网膜细胞在维持视网膜和脉络膜功能上发挥了重要作用。视网膜细胞的死亡是多种眼病引起视功能损害的主要原因。坏死性凋亡是一种新的重要的细胞死亡途径。本文就坏死性凋亡的发现及其分子机制及坏死性凋亡在年龄相关性黄斑变性、视网膜脱离等多种视网膜疾病中的研究现状进行综述，为视网膜疾病的防治提供新的思路。 展开更多
关键词 视网膜细胞 坏死性凋亡 视网膜疾病
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视网膜细胞显微镜的照明系统 被引量：1
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作者 张运海 沈建新 +1 位作者 李邦明 梁迪 《光学仪器》 2009年第6期58-62,共5页
为满足视网膜细胞成像照明光束的高亮度、窄谱宽要求,提出了一种用于视网膜细胞成像的照明系统,将半导体激光器发出的632.8nm激光耦合到芯径为105μm的多模光纤中,用聚光镜将多模光纤的出光端汇聚到一个旋转毛玻璃上,再用一个投射物镜... 为满足视网膜细胞成像照明光束的高亮度、窄谱宽要求,提出了一种用于视网膜细胞成像的照明系统,将半导体激光器发出的632.8nm激光耦合到芯径为105μm的多模光纤中,用聚光镜将多模光纤的出光端汇聚到一个旋转毛玻璃上,再用一个投射物镜将毛玻璃上的光源像投射到眼睛里照亮视网膜。试验发现该照明方法很好地消除了激光散斑,满足视网膜显微成像对高亮度光源的要求,光源有较窄的谱宽,成像系统色差很小,成像质量优于采用传统氙灯做照明光源的图像。该照明系统能较好地满足视网膜显微成像。 展开更多
关键词 自适应光学 视网膜细胞 照明系统
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