兔视网膜色素上皮细胞移植术后急性排斥反应的病理学研究 被引量：1

1

作者 刘哲丽 张劲松 吴景天 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期18-19,共2页

目的：研究视网膜色素上皮细胞移植后排斥反应的发生及其控制过程。方法：以经巩膜外路移植方法行家兔同种异体视网膜色素上皮细胞移植，应用光镜及电镜观察移植后１４ｄ受体视网膜及移植细胞的病理学改变和免疫抑制剂对其影响。结果：... 目的：研究视网膜色素上皮细胞移植后排斥反应的发生及其控制过程。方法：以经巩膜外路移植方法行家兔同种异体视网膜色素上皮细胞移植，应用光镜及电镜观察移植后１４ｄ受体视网膜及移植细胞的病理学改变和免疫抑制剂对其影响。结果：单纯移植组移植排斥反应变化明显；免疫抑制剂组无排斥反应的变化。结论：家兔同种异体间视网膜色素上皮细胞移植有急性排斥反应的发生，但在控制排斥反应的情况下。 展开更多

关键词 排斥反应 细胞移植 视网膜色素上皮 病理学

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Long Evans和Wistar大鼠视网膜神经节细胞电生理学及形态学特性比较研究 被引量：3

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作者 陈中山 阴正勤 +1 位作者 王仕军 曾玉晓 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第20期1815-1818,共4页

目的　比较LongEvans大鼠和Wistar大鼠睁眼前后视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells ,RGCs)电生理学特性及形态学特征上的差异。方法　取出生后 0～ 3 1dLongEvans和Wistar大鼠 ,各按睁眼时间分为两组 ,制备视网膜片 ,行膜片钳全细... 目的　比较LongEvans大鼠和Wistar大鼠睁眼前后视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells ,RGCs)电生理学特性及形态学特征上的差异。方法　取出生后 0～ 3 1dLongEvans和Wistar大鼠 ,各按睁眼时间分为两组 ,制备视网膜片 ,行膜片钳全细胞记录 ,同时行组织切片和细胞内染色 ,观察形态特征。结果　比较 2 2只LongEvans大鼠和 2 4只Wistar大鼠被动膜学特性和动作电位 (actionpotential,AP)幅度及阈值无显著差异 ,形态学上除两者视网膜色素上皮细胞 (retinalpig mentepithelium ,RPE)含或不含色素颗粒外未见明显区别。结论　LongEvans大鼠因其RPE含色素颗粒 ,以及在视觉和神经系统等方面的优点 ,可取代Wistar等白化鼠而作为一种良好的视觉和神经科学研究的实验动物模型。 展开更多

关键词 大鼠 视网膜色素 色素上皮细胞 电生理学 形态学

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视网膜色素上皮细胞的生理功能及其参与的病变 被引量：7

3

作者 马洪梅 孙凤海 贾健 《国际眼科杂志》 CAS 2015年第7期1184-1186,共3页

视网膜色素上皮细胞能够维持光感受器的更新、再生,对维持视网膜外层的内环境稳定有重要意义,而且还是增生性玻璃体视网膜病变中最重要的细胞成分。视网膜色素上皮细胞参与了糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性等疾... 视网膜色素上皮细胞能够维持光感受器的更新、再生,对维持视网膜外层的内环境稳定有重要意义,而且还是增生性玻璃体视网膜病变中最重要的细胞成分。视网膜色素上皮细胞参与了糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性等疾病的发生发展,是视网膜中被研究最多的细胞,虽来源于神经外胚叶,但其在特定的条件下能够分化和分裂的特性,让研究者看到了利用RPE来治疗相应的视网膜变性类疾病、遗传性疾病的希望。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮细胞 病理学 功能

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视网膜色素上皮腺瘤的病理形态学观察

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作者 张平 冯官光 +3 位作者 吴金浪 林健贤 易玉珍 庞友监 《解剖学研究》 CAS 2002年第1期30-32,共3页

目的　探讨视网膜色素上皮腺瘤临床及形态学特征 ,为其诊断及鉴别提供依据。方法　常规石蜡切片HE染色、组织化学PAS和VG染色、透射电镜及用SP法做免疫组化S 10 0、Cytokeratin和Vimentin检测。结果　该瘤细胞呈椭圆形、立方形 ,部分瘤... 目的　探讨视网膜色素上皮腺瘤临床及形态学特征 ,为其诊断及鉴别提供依据。方法　常规石蜡切片HE染色、组织化学PAS和VG染色、透射电镜及用SP法做免疫组化S 10 0、Cytokeratin和Vimentin检测。结果　该瘤细胞呈椭圆形、立方形 ,部分瘤细胞排列成腺管状 ,瘤细胞团周围见均匀红染的条状物质 ;上述条状物质PAS染色阳性 ,VG染色大部分呈黄色 ,少量呈红色 ;透射电镜显示细胞的紧密连接 ;免疫组化S 10 0和Cytokeratin阳性、vimentin阴性。结论　视网膜色素上皮腺瘤的超微结构及免疫组化特征均同视网膜色素上皮相似 ,可通过形态学检查确诊。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮腺瘤 病理 超微结构 免疫组化

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中药单体干预增生性玻璃体视网膜病变的研究进展 被引量：1

5

作者 赵敏瑶 虞玥 宋正宇 《中国中医眼科杂志》 2024年第1期71-74,共4页

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致孔源性视网膜脱离手术失败和复发的主要原因。目前临床治疗PVR多以手术为主,但存在一定不足,因此,需要寻找新的药物疗法。中药单体兼有中药与化学药的双重优势,我国传统中药与中药单体在PVR治疗尤其... 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致孔源性视网膜脱离手术失败和复发的主要原因。目前临床治疗PVR多以手术为主,但存在一定不足,因此,需要寻找新的药物疗法。中药单体兼有中药与化学药的双重优势,我国传统中药与中药单体在PVR治疗尤其是视网膜保护方面具有独特优势,逐渐成为了研究热点。本文对近年来中药单体治疗PVR的文献进行综述,发现姜黄素、藏红花素、槲皮素等中药单体可通过降低血小板源性生长因子、转化生长因子、表皮生长因子等因子的表达,抑制上皮细胞—间充质转化的生物学过程,防止PVR的发生。这些中药单体的发现对后续新药的研发可提供新的选择,为PVR的治疗提供更多元化的方法。 展开更多

关键词 增生性玻璃体视网膜病变 中药单体 视网膜色素上皮细胞 病理机制

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人脂肪间充质干细胞向视网膜色素上皮样细胞的诱导分化及其在体应用研究 被引量：6

6

作者 郭凯 罗燕 +4 位作者 李涛 田景毅 孙伟 林少芬 唐仕波 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期794-797,共4页

背景 目前,干细胞疗法治疗视网膜变性疾病是眼科研究的热点之一.研究已证实骨髓间充质干细胞（MSCs）可以体外诱导分化为视网膜色素上皮（RPE）样细胞,但由于取材困难,临床应用受到了一定的限制.人脂肪间充质干细胞（ADSCs）与MSCs有类... 背景 目前,干细胞疗法治疗视网膜变性疾病是眼科研究的热点之一.研究已证实骨髓间充质干细胞（MSCs）可以体外诱导分化为视网膜色素上皮（RPE）样细胞,但由于取材困难,临床应用受到了一定的限制.人脂肪间充质干细胞（ADSCs）与MSCs有类似的特性且容易获取,但人ADSCs能够诱导分化为RPE细胞的研究尚不多见. 目的 评估人ADSCs向RPE样细胞诱导分化的可行性及其在体应用的安全性.方法 将体外培养的第3代人ADSCs接种于6孔板进行培养,12h后于实验组培养液中加入100 ng/ml表皮生长因子（EGF）、50 μmol/L牛磺酸和5×10-7 mol/L视黄酸进行诱导,常规培养的细胞作为对照组.采用RPE细胞标志物Pan细胞角蛋白（Pan-CK）单克隆抗体进行免疫荧光检测,对诱导的细胞进行鉴定,采用细胞膜示踪剂PKH26标记法示踪诱导细胞,将诱导后的RPE样细胞悬液lμl注入6只BALB/c裸鼠的右眼玻璃体腔,另6只裸鼠玻璃体内注射等容量PBS.于注射后1个月摘取实验动物右眼眼球,各组中3只眼球用于组织病理学检查,在光学显微镜下观察玻璃体视网膜的形态学改变,另3只眼球在透射电子显微镜下观察玻璃体视网膜超微结构的改变,评估诱导细胞在体应用的安全性. 结果 体外培养的第3代人ADSCs呈细长多角形,生长良好.对照组细胞Pan-CK表达缺失,而诱导细胞的细胞膜Pan-CK表达阳性,呈红色荧光.诱导的细胞经PKH26标记后细胞膜呈红色荧光.诱导的细胞悬液于裸鼠玻璃体内注射后1个月,光学显微镜下可见诱导细胞位于视网膜表面,视网膜各层组织结构排列清晰;透射电子显微镜下可见视网膜神经节细胞（RGCs）细胞膜完整,线粒体结构正常,染色质均匀. 结论 人ADSCs体外诱导后可分化为RPE样细胞,PKH26可对诱导后细胞进行细胞示踪,分化的细胞玻璃体腔注射后短期内未发现视网膜的不良反应。 展开更多

关键词 细胞分化 脂肪间充质干细胞 眼色素上皮/细胞学 干细胞移植 视网膜/病理 超微结构 BALB/C小鼠

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视网膜色素上皮—脉络膜在近视发病中的作用 被引量：49

7

作者 胡诞宁 StevenA.McCormick 《眼视光学杂志》 2000年第4期197-200,共4页

目的 :探讨人眼视网膜色素上皮细胞 (RPE)、黑素细胞、成纤维细胞与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、β转化生长因子 (TGF β)和肝细胞生长因子 (HGF)的关系。 方法 :①用不含血清的培养液培养三种细胞 48h ,收集培养液 ,用酶标免疫吸附... 目的 :探讨人眼视网膜色素上皮细胞 (RPE)、黑素细胞、成纤维细胞与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、β转化生长因子 (TGF β)和肝细胞生长因子 (HGF)的关系。 方法 :①用不含血清的培养液培养三种细胞 48h ,收集培养液 ,用酶标免疫吸附法测量生长因子含量 ;②将各种生长因子加入含有三种不同细胞的培养液中 ,五天后行细胞计数。结果 :在RPE和成纤维细胞培养液中能测出HGF、bFGF和TGF ,而在黑素细胞培养液中则不能测出。bFGF能刺激上述三种细胞的生长 ,HGF能刺激RPE与黑素细胞的生长 ,而TGF β能抑制三种细胞的生长。结论 :RPE、成纤维细胞和黑素细胞具有上述生长因子受体 ,其中RPE和成纤维细胞还能产生上述生长因子。视网膜产生的各种与近视有关的信使不能透过RPE—脉络膜 ,所以不能直接作用于巩膜。RPE、成纤维细胞和黑素细胞通过产生、抑制和应答各种生长因子、神经递质及激素 。 展开更多

关键词 近视 病理生理学 视网膜色素上皮细胞 脉络脉

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兔视网膜色素上皮细胞培养和鉴定 被引量：5

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作者 胡健艳 陈雪 +1 位作者 陈辉 于靖 《南通大学学报（医学版）》 2005年第3期171-173,共3页

目的:进行兔视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞的体外培养,探讨RPE培养与鉴定方法,为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法:用改良的眼杯固定法,将其固定在眼球托上,用胰酶直接消化视网膜色素上皮面,收取RPE细胞。作细胞形... 目的:进行兔视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞的体外培养,探讨RPE培养与鉴定方法,为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法:用改良的眼杯固定法,将其固定在眼球托上,用胰酶直接消化视网膜色素上皮面,收取RPE细胞。作细胞形态学、免疫组织化学、免疫荧光鉴定。结果:RPE细胞培养早期生长活跃、胞核透明、胞浆含丰富黑色素颗粒,多巴氧化酶呈阳性反应.免疫组织化学染色和免疫荧光染色提示角蛋白表达强阳性。结论:培养的大量细胞可用于RPE的体外实验研究,多巴染色是鉴定RPE细胞一种较好的方法。 展开更多

关键词 兔视网膜色素上皮细胞 免疫组织化学染色 RPE细胞 养和 免疫荧光染色 体外实验研究 细胞形态学 黑色素颗粒 多巴氧化酶 体外培养 鉴定方法 生理功能 细胞模型 病理过程 生化特征 细胞培养 蛋白表达 阳性反应 多巴染色 固定法

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亚低温对大鼠视网膜色素上皮缺血再灌注损伤保护作用的电镜观察

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作者 郑玉涛 陈海英 《泰山医学院学报》 CAS 2005年第4期326-328,共3页

目的观察亚低温对缺血再灌注大鼠视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)超微结构的影响,探讨亚低温对大鼠RPE缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法24只SD大鼠随机分正常组、缺血1h再灌注1h组和亚低温缺血再灌注组,每组8只... 目的观察亚低温对缺血再灌注大鼠视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)超微结构的影响,探讨亚低温对大鼠RPE缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法24只SD大鼠随机分正常组、缺血1h再灌注1h组和亚低温缺血再灌注组,每组8只。采用提高眼压所造成视网膜缺血后,恢复眼压形成血流再灌注。用透射电镜观察各组视网膜色素上皮细胞的超微结构。结果缺血再灌注大鼠RPE微绒毛和质膜内褶逐渐稀疏、低平,甚至脱落;细胞器损害主要表现为线粒体的脱嵴、水肿和内质网的扩张;亚低温缺血再灌注组大鼠RPE超微结构明显改善。结论亚低温可以减轻缺血再灌注大鼠RPE病变程度,对大鼠RPE缺血再灌注损伤有保护作用。 展开更多

关键词 视网膜/病理学 色素上皮细胞 低温 再灌注损伤

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恢复视力的修复和置换来自光感受器／视网膜色素上皮研究组的报告

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作者 王琳 李子良 《美国医学会眼科杂志（中文版）》 1994年第1期39-39,共1页

视网膜研究的一个主要目的是发展对造成光感受器功能降低或丧失的疾病的新的治疗方法．以防止失明。这些疾病影响光感受器和视网膜色素上皮区(从脉络膜毛细血管到外丛状层)，并最终损害和破坏锥体和杆本，其病理生理机制可能是直接攻击... 视网膜研究的一个主要目的是发展对造成光感受器功能降低或丧失的疾病的新的治疗方法．以防止失明。这些疾病影响光感受器和视网膜色素上皮区(从脉络膜毛细血管到外丛状层)，并最终损害和破坏锥体和杆本，其病理生理机制可能是直接攻击光感受器或累及支持光感受器括性的细胞和细胞外环境。最近在基础科学和临床医学方面的进展，使得设计能够预防光感受器细胞损伤或者修复已损伤的细胞，甚至置换损伤或死亡的细胞，如视网膜色素上皮细胞或光感受器的新疗法成为可能。 展开更多

关键词 光感受器 视网膜色素上皮 复视 视力 修复 疾病 损伤 病理生理机制 细胞外 新疗法

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一种新的研究视网膜色素上皮移植的兔模型

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作者 盛丽娜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第3期207-207,共1页

关键词 视网膜色素上皮移植 兔模型 细胞角蛋白 视网膜下间隙 移植模型 蛋白-1 电生理学 标记蛋白

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577nm阈下微脉冲激光与577nm激光光凝对兔视网膜组织影响的比较 被引量：11

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作者 李慧丽 王春燕 +2 位作者 李小丹 余海 傅燕 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期824-828,共5页

背景近年来研究表明，577nm阈下微脉冲激光治疗视网膜疾病可达到传统577nm激光光凝的治疗作用且对视网膜组织损伤小，但其具体作用机制和敏感的靶细胞尚未完全阐明。目的探讨和比较577nm阈下微脉冲激光与577nm激光光凝视网膜后成年中华... 背景近年来研究表明，577nm阈下微脉冲激光治疗视网膜疾病可达到传统577nm激光光凝的治疗作用且对视网膜组织损伤小，但其具体作用机制和敏感的靶细胞尚未完全阐明。目的探讨和比较577nm阈下微脉冲激光与577nm激光光凝视网膜后成年中华黑兔视网膜组织形态学变化，为577nm阈下微脉冲激光光凝在临床上的应用提供依据。方法采用抽签法按照视网膜光凝条件不同将26只中华黑兔分为正常对照组（2只）、577nm激光组（6只）和阈下微脉冲激光组（18只），其中阈下微脉冲激光组按照激光工作负载率的不同亚分为9％、12％和15％阂下微脉冲激光组，每组各6只，正常对照组不做任何处理。光凝后行彩色眼底照相及OCT检查，摘取兔眼球壁行苏木精-伊红染色，光学显微镜下观察兔脉络膜和视网膜组织结构的变化。结果彩色眼底照相和OCT显示正常对照组兔眼视网膜组织结构清晰。9％阈下微脉冲激光组OCT扫描可见视网膜神经上皮层稍模糊；12％阈下微脉冲激光组光凝斑处视网膜神经上皮层轻度水肿，视网膜色素上皮（RPE）层稍模糊；15％阈下微脉冲激光组可见光凝斑处视网膜神经上皮层明显水肿，RPE层局限性隆起；各阈下微脉冲激光组彩色眼底照相均未见光凝斑。577nm激光组兔眼彩色眼底照相可见灰白色光凝斑，OCT扫描层面可见视网膜呈多灶性隆起，视网膜各层组织结构模糊，伴浆液性神经上皮层脱离。视网膜组织病理学检查可见，与正常对照组兔眼相比，9％和12％阈下微脉冲激光组兔眼脉络膜血管变形或出血，但视细胞形态结构、双极细胞层和视网膜神经节细胞（RGC）层未见明显改变；15％阈下微脉冲激光组视细胞扁平状膜盘肿胀，双极细胞层和RGC层未见明显改变；577nm激光组兔眼视细胞层、双极细胞层和RGC层结构紊乱，RPE层变薄。结论577nm阈下微脉冲激光对脉络膜层和RPE层具有高度选择性，视网膜光凝后对视网膜神经上皮层的损伤程度轻微，既可发挥治疗作用，又不损伤视网膜神经上皮；577nm激光视网膜光凝可对视网膜全层造成损伤。 展开更多

关键词 激光光凝 眼色素上皮/手术 视网膜/病理 阈下微脉冲激光 兔

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肾上腺素致兔浆液性脉络膜视网膜病变的实验研究 被引量：4

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作者 张鹏 惠延年 +4 位作者 王雨生 白建伟 王海燕 胡丹 马吉献 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第2期239-242,共4页

目的:通过对兔脉络膜上腔注射肾上腺素诱发浆液性视网膜脱离,探讨交感-肾上腺髓质系统在中心性浆液性脉络膜视网膜病变(centralserouschori-oretinopathy,CSC)发病中的作用。方法:将肾上腺素溶液从有色兔1眼的脉络膜上腔注入,于注射后1h... 目的:通过对兔脉络膜上腔注射肾上腺素诱发浆液性视网膜脱离,探讨交感-肾上腺髓质系统在中心性浆液性脉络膜视网膜病变(centralserouschori-oretinopathy,CSC)发病中的作用。方法:将肾上腺素溶液从有色兔1眼的脉络膜上腔注入,于注射后1h及1,2,3,6,10d对其双眼行眼底彩色照相、荧光素眼底血管造影(fundusfluoresceinangiography,FFA)、吲哚青绿血管造影(indocyaninegreenangiography,ICGA)及组织病理学检查。结果:注射后1h,ICGA见区域性脉络膜缺血及其周围扩张的脉络膜血管,FFA可见视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)剧烈荧光渗漏。光学显微镜镜下可见神经感觉层与RPE间有浆液积聚,光感受器外节排列紊乱。注射后2～10d,神经感觉层下积液逐渐减少至消失,RPE渗漏减少,脉络膜缺血区域减小至消失,RPE脱色素,光感受器外节仍然轻度紊乱。结论:肾上腺素可导致脉络膜静脉及毛细血管淤血并继发视网膜神经感觉层浆液性脱离,说明因应激所致的交感-肾上腺髓质系统活动增加可能是CSC发生的根本原因。 展开更多

关键词 中心性浆液性脉络膜视网膜病变 交感-肾上腺髓质系统 实验研究 荧光素眼底血管造影 浆液性视网膜脱离 吲哚青绿血管造影 组织病理学检查 视网膜色素上皮 脉络膜上腔 兔 注射肾上腺素 光感受器 脉络膜血管 脉络膜缺血 光学显微镜

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分析器官生理学(感官生理学)

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《国外科技资料目录（医药卫生）》 1999年第11期12-12,共1页

9939399 虹膜颜色对瞳孔光反应的影响/Bergamin O∥Graefe’s Arch Clin Exp Ophthalmol.-1998,236(8).-567～570 同医图 9939400

关键词 细胞内钙离子 视网膜水平细胞 钙离子交换 器官生理学 光反应 颜色对 虹膜色素上皮细胞 瞳孔 贮存 功能

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RCS大鼠视网膜色素上皮超微结构及病理特征 被引量：1

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作者 李红艳 刘世全 陈新春 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期52-52,共1页

ＲＣＳ大鼠视网膜色素上皮超微结构及病理特征李红艳刘世全陈新春视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）具有许多生理功能，包括吞噬视锥、视杆外节的脱落部分以及实现光感受器和脉络膜毛细血管... ＲＣＳ大鼠视网膜色素上皮超微结构及病理特征李红艳刘世全陈新春视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）具有许多生理功能，包括吞噬视锥、视杆外节的脱落部分以及实现光感受器和脉络膜毛细血管之间的物质交换等［１］。ＲＣＳ大鼠... 展开更多

关键词 视网膜 色素上皮 超微结构 病理 RCS大鼠

原文传递

蓝光诱导人视网膜色素上皮细胞分泌外泌体与核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白炎性体的相关性研究 被引量：1

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作者 马映雪 陈松 +4 位作者 何广辉 杨婧 陈莉 姜鉴洪 宋建 《中华眼底病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期498-502,共5页

目的观察蓝光诱导人视网膜色素上皮（RPE）细胞外泌体对核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白（NLRP3）炎性体相关因子表达的影响。方法人RPE细胞株贴壁细胞分为实验组和对照组。实验组细胞以蓝光照射6h建立光损伤模型；对照组细胞常规培养... 目的观察蓝光诱导人视网膜色素上皮（RPE）细胞外泌体对核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白（NLRP3）炎性体相关因子表达的影响。方法人RPE细胞株贴壁细胞分为实验组和对照组。实验组细胞以蓝光照射6h建立光损伤模型；对照组细胞常规培养。分级低温超速离心法获得两组细胞外泌体，透射电子显微镜观察其形态；蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测两组细胞外泌体表面CD63及白细胞介素（IL）-113、IL-18、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-1）蛋白相对表达水平。将两组细胞外泌体作用于正常RPE细胞，据此分为蓝光诱导细胞外泌体＋实验组、正常细胞外泌体＋对照组。培养24h后，Westernblot检测两组细胞外泌体中IL-113、IL．18、caspase．1蛋白表达；荧光实时定量聚合酶链反应检测两组细胞中NLRP3mRNA表达。结果实验组细胞发生损伤失去原有形态；外泌体均呈双凹托盘状，直径50~200nm；实验组细胞外泌体中IL-113（t=18．04）、IL-18（t=-12．55）、caspase-1（t=14．70）蛋白表达量明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）。蓝光诱导细胞外泌体＋实验组细胞外泌体中IL．1B（t=-i8．59）、IL．18（t=23．95）、caspase．1（t-=35．27）蛋白表达量明显高于正常细胞外泌体＋对照组，差异均有统计学意义（P〈0．001）；蓝光诱导细胞外泌体＋实验组、正常细胞外泌体＋对照组细胞内NLRP3mRNA相对表达量分别为1．000±0．069、0．200±0．010，两者比较，差异有统计学意义（t=-12．20，P〈0．001）。结论蓝光诱导RPE细胞外泌体可使RPE细胞内NLRP3炎性体相关细胞因子IL．1B、IL．18、caspase-1蛋白和NLRP3mRNA表达上调。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮/病理生理学 外泌体 炎性体 光刺激届0作用

原文传递

小干扰RNA介导丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮细胞的影响 被引量：1

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作者 余天 邢怡桥 陈长征 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期413-417,共5页

目的 观察丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮（RPE）细胞的影响。方法 体外培养人RPE细胞，取第8～12代生长良好的传代细胞用于实验。将细胞分为正常对照组、光损伤模型组。采用波长400 nm的蓝色节能灯以（2000±500）... 目的 观察丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮（RPE）细胞的影响。方法 体外培养人RPE细胞，取第8～12代生长良好的传代细胞用于实验。将细胞分为正常对照组、光损伤模型组。采用波长400 nm的蓝色节能灯以（2000±500） Lux持续光照RPE细胞6 h建立光损伤模型。建模后光损伤模型组再分为针对HtrA1的小干扰RNA（HtrA1 siRNA）组、阴性对照组、空白对照组。应用脂质体RNAimax将HtrA1 siRNA转染至HtrA1 siRNA组细胞；阴性对照组细胞转染非特异的阴性siRNA；空白对照组为单纯光损伤细胞。采用细胞计数试剂盒、transwell小室法及流式细胞仪检测各组细胞增生、迁徙、凋亡以及细胞周期情况；实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测细胞中HtrA1和血管内皮生长因子A（VEGF-A）mRNA、蛋白质表达。结果 光损伤模型组细胞中HtrA1 mRNA、蛋白表达均较正常对照组细胞明显升高，差异有统计学意义（t=17.62、15.09，P＜0.05）。与阴性对照组、空白对照组比较，HtrA1 siRNA组细胞增生（t=6.37、4.52）、迁徙能力（t=9.56、12.13）、凋亡率（t=23.37、29.08）明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；细胞停留在G0/G1期数目增多（t=6.24、4.93），差异有统计学意义（P＜0.05）；HtrA1、VEGF-A mRNA（t=17.36、11.32、7.29、4.05）和蛋白（t=12.02、15.28、4.98、6.24）表达均明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 特异性沉默HtrA1基因表达可降低蓝光对人RPE细胞增生、迁徙能力的损伤和细胞凋亡率；下调VEGF-A的表达。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮/病理生理学 血管内皮生长因子A RNA干扰 丝氨酸蛋白酶类 光刺激/副作用 动物实验

原文传递

视网膜下液对培养的人视网膜色素上皮细胞、神经胶质细胞及成纤维细胞生长的刺激作用 被引量：7

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作者 罗贤民 姜德咏 +3 位作者 聂爱光 黄溥倪 唐罗生 朱晓华 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 1996年第4期233-235,共3页

目的：研究视网膜下液（ｓｕｂｒｅｔｉｎａｌｆｌｕｉｄ，ＳＲＦ）对增殖性玻璃体视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＰＶＲ）的多种细胞增殖的影响。方法：采用直接细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ... 目的：研究视网膜下液（ｓｕｂｒｅｔｉｎａｌｆｌｕｉｄ，ＳＲＦ）对增殖性玻璃体视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＰＶＲ）的多种细胞增殖的影响。方法：采用直接细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入率测定ＤＮＡ合成两种方法观察２８例孔源性视网膜脱离患者ＳＲＦ对培养的人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇ－ｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞、视网膜神经胶质（ｒｅｔｉｎａｌｇｌｉａ，ＲＧ）细胞及成纤维细胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＦＢ）生长刺激作用。结果：所有标本均具有刺激ＲＰＥ细胞、ＲＧ细胞及ＦＢ增殖和ＤＮＡ合成能力，增殖率范围分别在基线上５２．５％～２３３．３％、３６．４％～１７７．８％、５５．４％～２７７．８％之间。ＳＲＦ促细胞增殖率在三种细胞间比较无显著差异。结论：ＳＲＦ具有促多种细胞增殖的能力，推测ＳＲＦ中含有促细胞增殖的活性物质。 展开更多

关键词 视网膜 色素上皮细胞 视网膜疾病 病理生理学

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蓝光照射对人视网膜色素上皮细胞L-型钙通道mRNA表达的影响 被引量：2

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作者 宫鑫 蔡善君 +4 位作者 李海辉 吕建平 伍志鹏 宿罡 谢兵 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期411-415,共5页

目的观察蓝光照射对人视网膜色素上皮（RPE）细胞L-型钙通道mRNA表达的影响。方法体外培养的第4代人RPE细胞按随机数字表法分为无光照组、光照组、光照＋硝苯地平组和光照＋（-）BayK8644组。（2000±500）LUX蓝光照射6h，终止细胞... 目的观察蓝光照射对人视网膜色素上皮（RPE）细胞L-型钙通道mRNA表达的影响。方法体外培养的第4代人RPE细胞按随机数字表法分为无光照组、光照组、光照＋硝苯地平组和光照＋（-）BayK8644组。（2000±500）LUX蓝光照射6h，终止细胞培养24h。光照前加入硝苯地平和（-）BayK8644，浓度均为1×10^-5mmol／L。荧光定量聚合酶链（PCR）技术检测各组人RPE细胞L-型钙通道α1c亚型、α1D亚型和α1F亚型mRNA的表达。结果荧光定量PCR产物α1C、α1D、α1F和内参8-肌动蛋白的cDNA逆转录PCR扩增产物长度分别为68、157、125、186碱基对，产物的凝胶电泳结果显示扩增条带位置与以上片段相吻合。荧光定量PCR检测结果显示，光照组、光照＋硝苯地平组、光照＋（-）BayK8644组α1CtuRNA的表达均高于无光照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；光照＋硝苯地平组、光照＋（-）BayK8644组α1CmRNA的表达均高于光照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；光照＋（-）BayK8644组α1CmRNA的表达高于光照＋硝苯地平组，差异有统计学意义（P〈0．05）。光照组、光照＋硝苯地平组、光照＋（-）BayK8644组d1DmRNA的表达均高于无光照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；光照＋（-）BayK8644组α1DmRNA的表达与光照组和光照＋硝苯地平组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；光照＋硝苯地平组与光照组α1DmRNA的表达比较。差异无统计学意义（P〉0．05）。光照组、光照＋硝苯地平组、光照＋（-）BayK8644组α1FmRNA的表达均高于无光照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；光照＋硝苯地平组、光照＋（-）BayK8644组α1FmRNA的表达均高于光照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论蓝光照射可引起人RPE细胞L-型钙通道中α1C、α1D及α1F亚型mRNA表达不同程度的增高；1×10^-5mmol／L硝苯地平不能对抗蓝光对RPE细胞I，型钙通道作用，而1×10^-5mmol／L（-）BayK8644可以增加以上3个亚基的表达。 展开更多

关键词 光刺激 视网膜色素上皮 病理生理学 钙通道 L型

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光照对人视网膜色素上皮细胞趋化因子受体3配体的影响 被引量：2

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作者 李璐 陈长征 +2 位作者 易佐慧子 翁铭 邢怡桥 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期416-420,共5页

目的观察光照后人视网膜色素上皮（RPE）细胞趋化因子受体3（CCR3）配体嗜酸性粒细胞趋化因子（eotaxin）-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表达。方法体外培养人RPE细胞，取第5～10代生长状态良好的传代细胞用于实验。将同代细胞随机分为光... 目的观察光照后人视网膜色素上皮（RPE）细胞趋化因子受体3（CCR3）配体嗜酸性粒细胞趋化因子（eotaxin）-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表达。方法体外培养人RPE细胞，取第5～10代生长状态良好的传代细胞用于实验。将同代细胞随机分为光照干预组与正常对照组。采用15w蓝色荧光灯自制光照器，以（600±100）Lux的强度对光照干预组细胞持续光照12h，对照组细胞采用双层高压消毒锡纸包裹。随后两组细胞均置于恒温培养箱内继续培养，并于光照结束后0、3、6、12、24h终止细胞培养。采用实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法分别检测eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白的表达。结果光照干预组细胞eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势，其中eotaxin-3mRNA和蛋白表达增加最为明显。光照干预组与正常对照组比较，光照结束后0（t。=6．05，t。-12．561）、3（t1—2．95，t2—3．67）h时eotaxin-1、eotaxin-2mRNA表达间差异均有统计学意义（P〈0．05），eotaxin-3mRNA表达间差异无统计学意义（t3=1．57、1．OO，P〉0．05）；光照结束后6（t1=4．73，t2=18．64，t3：28．48）、12（t1=3．11，t2=20．62，t3=18．50）、24（t1=8．25，t2=38．27，t3=18．60）h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA表达间差异均有统计学意义（P〈0．05）。光照干预组与正常对照组比较，除光照结束后3h时eotaxin-3蛋白表达间差异无统计学意义外（t3=1．28，P〉0．05）；光照结束后0（t1=4．85，t2=5．45，t3=6．21）、3h（tl-5．64，t2=4．55）、6（t1=31．60，t2=6．63，t3=7．15）、12（t1=14．09，t2=18．22，t3=15．76）、24（t1=6．96，t2=10．47，t3=12．85）h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3蛋白表达间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论光照后人RPE细胞CCR3配体eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势，以eotaxin-3表达增加最为突出。 展开更多

关键词 光刺激 视网膜色素上皮 病理生理学 受体 CCR3 趋化因子CCL11

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