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大鼠脑缺血再灌注后诱导型环氧合酶和丙二醛的表达及川芎嗪的干预作用 被引量:5
1
作者 杨迎春 任占川 梁勇刚 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期886-890,共5页
目的探讨脑缺血再灌注损伤后诱导型环氧合酶(COX-2)和丙二醛(MDA)的表达及其意义,为治疗缺血性脑病提供实验依据。方法以线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫印迹法和硫代巴比妥酸法以及与神经行为相结合的... 目的探讨脑缺血再灌注损伤后诱导型环氧合酶(COX-2)和丙二醛(MDA)的表达及其意义,为治疗缺血性脑病提供实验依据。方法以线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫印迹法和硫代巴比妥酸法以及与神经行为相结合的方法,观测缺血再灌注侧大脑皮质内COX-2和MDA的表达和神经功能的变化,2,3,5-氯化二苯四氮唑(TTC)染色观测脑梗死体积的变化。结果MDA与COX-2的表达呈正相关(r=0.910,P<0.01)。COX-2和MDA在假手术组含量均较低,I2h/R6h两者均有明显升高,并随再灌注时间延长逐渐升高,在I2h/R24h达高峰,I2h/R48h略有下降,但仍维持在较高水平;与I2h/R24h模型组比较,川芎嗪治疗组的脑梗死体积明显减小(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01)。结论脑缺血再灌注后,COX-2和MDA的表达较正常组明显增多,是导致脑缺血再灌注损伤的因素之一。川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 诱导型环氧合酶 丙二醛 川芎嗪 免疫印迹法 硫代巴比妥酸法 大鼠
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CD40配体通过诱导型环氧合酶途径诱导单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶 被引量:3
2
作者 樊民 李岚 +3 位作者 吴宗贵 黄佐 任雨笙 潘晓明 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期845-847,共3页
目的:观察重组人CD40配体(rhCD40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4μg/ml)的rhCD40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U... 目的:观察重组人CD40配体(rhCD40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4μg/ml)的rhCD40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U937细胞24 h后收集上清液;在加入终浓度为0.4μg/ml rhCD40L的基础上,分别加入终浓度为10-4mol/L的阿司匹林(COX-1抑制剂)或NS-398,共同刺激U937细胞24 h后收集上清液。酶谱法测定上述U937细胞培养上清中MMPs活性。结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9活性增加(P<0.01),且随浓度的增加而逐渐增强,0.4μg/mlrhCD40L作用最强;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P<0.05)。NS-398、阿司匹林均可抑制rhCD40L诱导U937细胞分泌MMP-2和MMP-9(P<0.01),NS-398的抑制作用强于阿司匹林(P<0.05)。结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导单核巨噬细胞分泌MMPs,这种诱导作用可能与诱导型环氧合酶(COX)有关,而且与COX-2的相关性可能较COX-1更密切。 展开更多
关键词 CD40配体 诱导型环氧合酶 基质金属蛋白 巨噬细胞
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CD40L刺激诱导型环氧合酶表达及普伐他汀的作用 被引量:1
3
作者 樊民 吴宗贵 +3 位作者 李岚 李洪涛 王磊 潘晓明 《心脏杂志》 CAS 2006年第3期245-248,共4页
目的探讨重组人CD40配体(rhCD40L)对培养的人单核细胞(U937)表达诱导型环氧合酶(COX-2)的作用和普伐他汀对其影响。方法体外培养U937细胞,以0.05、0.1、0.2μg/m l的rhCD40L分别刺激24 h;0.4μg/m l的rhCD40L分别刺激3、6、12、24 h;终... 目的探讨重组人CD40配体(rhCD40L)对培养的人单核细胞(U937)表达诱导型环氧合酶(COX-2)的作用和普伐他汀对其影响。方法体外培养U937细胞,以0.05、0.1、0.2μg/m l的rhCD40L分别刺激24 h;0.4μg/m l的rhCD40L分别刺激3、6、12、24 h;终浓度10、1、0.1 mmol/L的普伐他汀与0.4μg/m l的rhCD40L共同刺激U937细胞24 h。RT-PCR检测COX-2 mRNA表达,W estern-b lot检测COX-2蛋白表达,ELISA法检测前列腺素E2(PGE2)的浓度反映COX-2酶活性。结果0.4μg/m l的rhCD40L刺激后3 h可诱导COX-2 mRNA和蛋白表达,随着rh-CD40L浓度和作用时间增加,COX-2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.01),且呈时效和量效关系;同样,rhCD40L以时间和剂量依赖的方式增加U937细胞中PGE2的合成。0.4μg/m l的rhCD40L与普伐他汀共同刺激24 h后,COX-2的表达显著被抑制。结论rhCD40L以时间和浓度依赖的方式诱导COX-2的表达,普伐他汀可以抑制此作用。 展开更多
关键词 CD40L配体 诱导型环氧合酶 普伐他汀 单核细胞
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诱导型环氧合酶-2在CD40配体诱导基质金属蛋白酶表达中的作用 被引量:1
4
作者 李岚 樊民 +1 位作者 杨靖 汪沁沁 《心脏杂志》 CAS 2011年第1期56-58,64,共4页
目的:探讨重组人CD40配体(rhCD40L)诱导U937细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)表达的作用及其与诱导型环氧合酶-2(COX-2)途径的关系。方法:体外培养U937细胞,以不同浓度(0.1、0.2、0.4 mg/L)的rhCD40L和不同浓度(10-5 mol/L、10-4 mol/L、10-3... 目的:探讨重组人CD40配体(rhCD40L)诱导U937细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)表达的作用及其与诱导型环氧合酶-2(COX-2)途径的关系。方法:体外培养U937细胞,以不同浓度(0.1、0.2、0.4 mg/L)的rhCD40L和不同浓度(10-5 mol/L、10-4 mol/L、10-3 mol/L)的COX-2特异性抑制剂(NS-398)分别刺激24 h。在加入终浓度为0.4 mg/L rhCD40L的基础上,加入终浓度为10-4 mol/L的NS-398,共同刺激U937细胞24 h后,收集培养上清液,用酶谱法测定MMPs的活性。结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9的活性明显增加(P<0.01),且呈剂量依赖性;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P<0.05)。结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导MMPs表达,rhCD40L对MMPs的诱导作用可能与COX-2途径有关。 展开更多
关键词 CD40配体 诱导型环氧合酶-2 基质金属蛋白 单核细胞系U937
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诱导型环氧合酶抑制剂对重组人CD40配体抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的影响
5
作者 樊民 李岚 +4 位作者 王皓 高春芳 李洪涛 任雨笙 吴宗贵 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期914-916,共3页
目的:观察诱导型环氧合酶(COX-2)抑制剂NS-398对重组人CD40配体(rhCD40L)抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的影响,探讨NS-398治疗AS的可能机制。方法:体外培养人血管平滑肌细胞(VSMCs),人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链基因启动子重组质粒pCOLH_2... 目的:观察诱导型环氧合酶(COX-2)抑制剂NS-398对重组人CD40配体(rhCD40L)抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的影响,探讨NS-398治疗AS的可能机制。方法:体外培养人血管平滑肌细胞(VSMCs),人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链基因启动子重组质粒pCOLH_22.4和pCOLH_21.6扩增和酶切鉴定后转染VSMCs,用不同浓度rhCD40L(0.1、0.2、0.4μg/ml)、100μmol/L NS-398以及rhCD40L(0.4μg/ml)+NS-398(100μmol/L)作用于转染后细胞,ELISA检测各组细胞CAT目的基因的表达,以未加任何细胞因子或药物处理的成功转染后细胞为对照组。结果:与对照组相比,NS-398增加pCOLH_2 2.4、pCOLH_21.6 CAT基因的表达(P<0.05);rhCD40L抑制Ⅰ型胶原基因启动子活性,且呈剂量依赖性,0.4μg/ml的rhCD40L对启动子活性抑制作用最强(P<0.05);而NS-398可以逆转0.4μg/ml rhCD40L的抑制作用(P<0.05)。结论:NS-398增加Ⅰ型胶原基因启动子活性,在转录水平上促进Ⅰ型胶原的表达;rhCD40L抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性可能与COX-2通路有关。 展开更多
关键词 CD40配体 诱导型环氧合酶 胶原 转录启动子
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诱导型环氧合酶高表达增加兔主动脉粥样硬化斑块易损性
6
作者 李岚 樊民 +3 位作者 倪灿荣 梁春 任雨笙 吴宗贵 《心脏杂志》 CAS 2011年第6期715-718,共4页
目的:探讨诱导型环氧合酶(COX-2)在兔主动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)组织中的表达及其与斑块易损性之间的关系。方法:以高脂饲料喂养建立兔主AS模型,并与正常饲料组对照。喂养12周后,取兔主动脉标本,行HE及免疫组化染色,观察COX-2... 目的:探讨诱导型环氧合酶(COX-2)在兔主动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)组织中的表达及其与斑块易损性之间的关系。方法:以高脂饲料喂养建立兔主AS模型,并与正常饲料组对照。喂养12周后,取兔主动脉标本,行HE及免疫组化染色,观察COX-2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原在AS斑块组织中的表达。结果:COX-2仅见于AS斑块,正常动脉壁无表达。AS组COX-2免疫组化染色强度均显著高于正常对照组(P<0.05)。AS组Ⅰ、Ⅲ型胶原和MMP-2免疫组化染色强度均显著高于正常对照组(P<0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原的比例增加。结论:COX-2在兔主动脉AS斑块中的高表达可能增加斑块的易损性。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 诱导型环氧合酶 斑块 易损性
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刘寄奴抗炎组分筛选及其机制研究 被引量:26
7
作者 章丹丹 潘一峰 +2 位作者 唐宁 华晓东 卞卡 《上海中医药杂志》 2009年第7期67-71,共5页
目的考察刘寄奴活性组分及其对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导RAW264.7细胞的抗炎机制。方法应用溶剂萃取和D101大孔树脂分别制备刘寄奴各提取物和总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Gre... 目的考察刘寄奴活性组分及其对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导RAW264.7细胞的抗炎机制。方法应用溶剂萃取和D101大孔树脂分别制备刘寄奴各提取物和总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Greissreaction法测定各提取物及总黄酮对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;RT-PCR法考察总黄酮对细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、诱导型环氧合酶(COX-2)mRNA的影响;Westernblot法考察总黄酮对细胞iNOS、COX-2、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达的影响。结果刘寄奴乙酸乙酯部位与其他提取物相比,在相同剂量时对亚硝酸盐含量的抑制率最高,由此富集获得的总黄酮含量达53%。刘寄奴总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量,并对刺激后的细胞活力有保护作用;刘寄奴总黄酮呈抑制iNOS、COX-2mRNA表达,抑制iNOS、COX-2、p-ERK的蛋白表达。结论活性导向的分离提示乙酸乙酯部位是刘寄奴抗炎活性组分之一,由此富集的总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制iNOS和COX-2基因和蛋白的表达而达到抗炎效果。 展开更多
关键词 刘寄奴总黄酮 炎症反应 化氮 诱导型化氮 诱导型环氧合酶
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大鼠脑出血灶周HIF-1α和COX-2的动态变化 被引量:2
8
作者 李婷婷 牛小媛 《医学研究杂志》 2012年第9期108-111,共4页
目的观察大鼠脑出血后血肿灶周脑组织中HIF-1α、COX-2蛋白的动态表达,探讨二者与脑水肿的关系,以及HIF-1α和COX-2蛋白的表达在血肿灶周脑组织损伤中的作用机制。方法 SD大鼠35只,随机分为假手术组、脑出血6h、1、3、7、14、21天组,每... 目的观察大鼠脑出血后血肿灶周脑组织中HIF-1α、COX-2蛋白的动态表达,探讨二者与脑水肿的关系,以及HIF-1α和COX-2蛋白的表达在血肿灶周脑组织损伤中的作用机制。方法 SD大鼠35只,随机分为假手术组、脑出血6h、1、3、7、14、21天组,每组5只。采用自体血体内注射法建立脑出血动物模型,用免疫组化法检测脑出血后血肿灶周脑组织中HIF-1α和COX-2蛋白的动态表达,并用干/湿比重法测定脑含水量。结果脑出血后6h HIF-1α、COX-2蛋白的表达和脑水含量明显升高,3~7天达到高峰,第14天明显降低,COX-2及脑水含量在21天基本降至正常。HIF-1α在21天仍有较高水平的表达。造模后6h,脑出血组与假手术组相比,HIF-1α及COX-2蛋白的表达和脑水含量明显增高,其差异有统计学意义(P<0.05)。脑出血组的各时间点间比较,其差异均有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α蛋白的表达与脑水含量呈正相关(r=0.636,P<0.01);COX-2蛋白的表达与脑水含量呈正相关(r=0.927,P<0.01)。结论大鼠脑出血后血肿灶周HIF-1α、COX-2蛋白的表达呈一定的变化规律。随着脑出血时间的延长HIF-1α蛋白、COX-2蛋白的表达程度和脑组织水肿程度呈正相关。 展开更多
关键词 脑出血 诱导因子-1Α 诱导型环氧合酶-2 脑水肿
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Correlation between circulating myeloid-derived suppressor cells and Th17 cells in esophageal cancer 被引量:8
9
作者 Zhi-Jun Jiao Jing-Jing Gao +5 位作者 Sheng-Hao Hua De-Yu Chen Wen-Hong Wang Hui Wang Xu-Hui Wang Hua-Xi Xu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第38期5454-5461,共8页
AIM: To perform a comprehensive investigation into the potential correlation between circulating myeloidderived suppressor cells (MDSCs) and Th17 cells in esophageal cancer (ECA). METHODS: A total of 31 patients newly... AIM: To perform a comprehensive investigation into the potential correlation between circulating myeloidderived suppressor cells (MDSCs) and Th17 cells in esophageal cancer (ECA). METHODS: A total of 31 patients newly diagnosed with ECA and 26 healthy subjects were included in the current study. The frequencies of MDSCs and Th17 cells in peripheral blood were determined by flow cytometry. The mRNA expression of cytokines, arginase 1 (Arg1) and inducible NO synthase (iNOS) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and plasma Arg1 were assessed by real-time polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. RESULTS: There was an increased prevalence of MDSCs in the peripheral blood from ECA patients (15.21% ± 2.25%) when compared with healthy control (HC) (1.10% ± 0.12%, P < 0.0001). The plasma levels of Arg1 in ECA patients were significantly higher than those in HC (28.28 ± 4.10 ng/mL vs 9.57 ± 1.51 ng/ mL, P=0.0003). iNOS mRNA levels in the peripheral blood of ECA patients also showed a threefold increase compared with HC (P=0.0162). The frequencies of Th17 cells (CD4 + IL-17A + ) were significantly elevated in ECA patients versus HC (3.50% ± 0.33% vs 1.82% ± 0.19%, P=0.0001). Increased mRNA expression of IL-17 and ROR-γt was also observed in ECA patients compared with HC (P=0.0041 and P=0.0004, respectively), while the mRNA expression of IL-6 and tumor necrosis factor-α (TNF-α) showed significant decreases (P=0.0049 and P < 0.0001, respectively). No obvious correlations were found between the frequencies of MDSCs and Th17 cells in the peripheral blood from ECA patients(r=-0.1725, P=0.3534). Arg1 mRNA levels were positively correlated with levels of IL-6 (r=0.6404, P=0.0031) and TNF-α (r=0.7646, P=0.0001). Similarly, iNOS mRNA levels were also positively correlated with levels of IL-6 (r=0.6782, P=0.0007) and TNF-α (r=0.7633, P < 0.0001). CONCLUSION: This study reveals the relationship between circulating MDSCs and Th17 cells, which may lead to new immunotherapy approaches for ECA based on the associated metabolites and cytokines. 展开更多
关键词 Myeloid-derived suppressor cells Th17 cells Esophageal cancer Arginase Peripheral blood mononuclear cells Inducible NO synthase
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大鼠脑挫伤后NTE与COX-2表达随时间的变化 被引量:3
10
作者 刘玉利 田亚汀 +3 位作者 田晓菲 王淑强 史满金 张国徽 《中国法医学杂志》 CSCD 2014年第1期22-24,29,I0002,共5页
目的观察大鼠脑挫伤后脑组织NTE和COX-2的表达变化,并评价其法医学的意义。方法健康SD大鼠48只,随机分成正常对照组、手术对照组、挫伤组(按挫伤后处死时间再分为1h、12h、1d、3d、7d、14d共6个组)每组6只。以自由落体撞击法制作脑挫裂... 目的观察大鼠脑挫伤后脑组织NTE和COX-2的表达变化,并评价其法医学的意义。方法健康SD大鼠48只,随机分成正常对照组、手术对照组、挫伤组(按挫伤后处死时间再分为1h、12h、1d、3d、7d、14d共6个组)每组6只。以自由落体撞击法制作脑挫裂伤模型;应用免疫组化方法检测COX-2和NTE在脑组织中的表达情况;用SPSS 13.0软件分析COX-2和NTE的表达情况与脑挫伤后存活时间的相关性。结果正常对照组和假手术组NTE和COX-2均呈低水平表达,脑挫伤组伤后NTE和COX-2表达逐渐增强,均于1d达到高峰,至14d时COX-2表达降至正常对照组水平,而NTE仍高于正常对照组水平;挫伤各组与正常对照组比较,除1h组灰度值无统计学差异(P>0.05)外,其余各组均有明显差异(P<0.01)。结论脑挫伤后脑组织NTE和COX-2的表达均呈现先增强后下降的趋势,其表达规律有望为脑挫伤诊断及损伤时间推断提供参考。 展开更多
关键词 法医病理学 脑挫伤 免疫组织化学 神经病靶酯 诱导型环氧合酶
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