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融合标签谷胱甘肽S-转硫酶高亲和配体的设计与筛选
被引量:
3
1
作者
杨宪峰
张灵
+3 位作者
杨晓兰
龙高波
张奕
廖飞
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期791-795,共5页
目的:设计与筛选融合标签血吸虫谷胱甘肽S-转硫酶(Glutathione S-transferase,GST)的高亲和配体。方法:将原核融合表达载体pGST-MOLUC转入大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷低温诱导GST标签表达,用Glutathione Sepharose 4B亲和纯化此...
目的:设计与筛选融合标签血吸虫谷胱甘肽S-转硫酶(Glutathione S-transferase,GST)的高亲和配体。方法:将原核融合表达载体pGST-MOLUC转入大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷低温诱导GST标签表达,用Glutathione Sepharose 4B亲和纯化此标签GST。初速度法测定GST对底物1-氯-2,4-二硝基苯(1-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)和还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的Km;测定GST产物S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)、3,5-二甲基苯甲酸、对丁基苯甲酸、依他尼酸及3者对应的对称双酰丁二胺对标签GST的抑制作用。结果:纯化标签GST对GSH和CDNB顺序结合且Km都高于0.10mmol/L;GS-DNB相对CDNB的竞争性抑制常数约5μmol/L,相对GSH的非竞争性抑制常数约33μmol/L。3,5-二甲基苯甲酸、对丁基苯甲酸、依他尼酸对此GST抑制常数都大于0.20 mmol/L;N,N’-双依他尼酰-1,4-丁二胺和N,N’-双对丁基苯甲酰-1,4-丁二胺都为GST相对GSH的强竞争性抑制,抑制常数分别为31 nmol/L和(0.61±0.43)μmol/L(n=3)。结论:将标签GST低亲和力芳香羧酸用柔性短链连成对称结构,可获得结合于单个活性中心的高亲和力标签GST抑制剂。
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关键词
谷胱甘肽s-转硫酶
亲和力
抑制剂
配体
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职称材料
双依他尼酸乙醇胺对谷胱甘肽S-转硫酶mu的选择性抑制作用
被引量:
1
2
作者
同婷婷
段昌园
+2 位作者
李欣蓬
廖飞
杨晓兰
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期406-413,共8页
谷胱甘肽S-转移酶(GST)的同工酶mu (GSTM)高表达与卵巢癌顺铂耐药有关。以GST非选择性抑制剂依他尼酸设计二价潜抑制剂双依他尼酸乙醇胺(aminoethanol di-ethacrynic acid, ADEA),测定ADEA及其与还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)加合物...
谷胱甘肽S-转移酶(GST)的同工酶mu (GSTM)高表达与卵巢癌顺铂耐药有关。以GST非选择性抑制剂依他尼酸设计二价潜抑制剂双依他尼酸乙醇胺(aminoethanol di-ethacrynic acid, ADEA),测定ADEA及其与还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)加合物对GST同工酶亚型A1、P1、M2的半抑制浓度(IC50)、抑制类型、结合比和结合动力学。ADEA本身对GSTM2的IC50比GSTA1低300倍,比GSTP1低3 000倍;ADEA与GSH在酶催化下反应10 min所得产物,对上述3种同工酶的IC50分别降低5、57、200倍。ADEA本身和产物对GSTM2相对于底物CDNB是反竞争性抑制剂,ADEA本身对GSTM2相对于底物GSH是混合性抑制剂,ADEA与GSH产物对GSTM2相对于底物GSH是反竞争性抑制剂。分析ADEA对GSTM2荧光静态淬灭表明ADEA及其产物是二价结合;分析荧光和酶活性随时间变化表明酶与ADEA本身结合速度比其产物CDNB慢10倍。ADEA是有效的GSTM2选择性二价潜抑制剂。
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关键词
双依他尼酸乙醇胺
谷
胱
甘
肽
转
s-
转
硫
酶
mu
二价潜抑制剂
依他尼酸
原文传递
细胞代谢解毒酶CYP1A1、GSTM1基因多态性与吸烟对男性肺鳞癌发病的影响
被引量:
2
3
作者
宋宝
刘杰
+4 位作者
黄海燕
王兴武
郑燕
韩金祥
王哲海
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2010年第11期1193-1196,共4页
目的探讨细胞代谢解毒酶细胞色素P450酶1A1(CYP1A1)、谷胱甘肽S-转硫酶M1(GSTM1)基因多态性和吸烟因素对男性肺鳞癌发病的影响。方法采用基因芯片技术对125例男性肺鳞癌患者和125例男性健康对照者CYP1A1、GSTM1基因多态性进行检测。结果...
目的探讨细胞代谢解毒酶细胞色素P450酶1A1(CYP1A1)、谷胱甘肽S-转硫酶M1(GSTM1)基因多态性和吸烟因素对男性肺鳞癌发病的影响。方法采用基因芯片技术对125例男性肺鳞癌患者和125例男性健康对照者CYP1A1、GSTM1基因多态性进行检测。结果 CYP1A1m2位点GG基因型和GSTM1缺失基因型在肺鳞癌组与健康对照者间存在显著性差异(P<0.05)。吸烟者携带CYP1A1m2位点至少一个变异G等位基因或携带GSTM1缺失型者患肺鳞癌的危险性进一步显著增加,OR值分别为4.50和3.81(P<0.01)。结论吸烟与CYP1A1、GSTM1基因多态性与男性肺鳞癌的发生有关。
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关键词
细胞色素P450
酶
1A1
谷胱甘肽s-转硫酶
M1
基因多态性
肺鳞癌
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职称材料
GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的相关性Meta分析
被引量:
1
4
作者
杨天宁
赵达
+1 位作者
马守成
关泉林
《国际肿瘤学杂志》
CAS
2015年第10期743-746,共4页
目的探讨GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的关系。方法计算机检索PubMed、EMBase、CochraneLibrary、中国生物医学文献数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国期刊全文数据库和万方医药期刊全文数据库,全面检索GSTT1基因与中国...
目的探讨GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的关系。方法计算机检索PubMed、EMBase、CochraneLibrary、中国生物医学文献数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国期刊全文数据库和万方医药期刊全文数据库,全面检索GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的临床对照研究。按纳入与排除标准筛选文献,对符合条件的研究由两位研究者独立进行资料提取和质量评价,采用RevMan5.1软件进行Meta分析。结果共检索出326篇文献,最终纳入10篇病例对照研究,其中结直肠癌患者2983例,对照组共纳入健康人4386例。Meta分析结果显示GSTT1基因是否缺失与结直肠癌易感性相关(RR=1.11,95%C,为1.06-1.17,Z=4.26,P〈0.0001)。结论在中国人群中GSTT1基因缺失增加了结直肠癌的患病风险。
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关键词
结直肠肿瘤
META分析
谷胱甘肽s-转硫酶
T1
原文传递
题名
融合标签谷胱甘肽S-转硫酶高亲和配体的设计与筛选
被引量:
3
1
作者
杨宪峰
张灵
杨晓兰
龙高波
张奕
廖飞
机构
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期791-795,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30472139
81071427)
重庆市教委科技资助项目(编号:KJ100313)
文摘
目的:设计与筛选融合标签血吸虫谷胱甘肽S-转硫酶(Glutathione S-transferase,GST)的高亲和配体。方法:将原核融合表达载体pGST-MOLUC转入大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷低温诱导GST标签表达,用Glutathione Sepharose 4B亲和纯化此标签GST。初速度法测定GST对底物1-氯-2,4-二硝基苯(1-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)和还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的Km;测定GST产物S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)、3,5-二甲基苯甲酸、对丁基苯甲酸、依他尼酸及3者对应的对称双酰丁二胺对标签GST的抑制作用。结果:纯化标签GST对GSH和CDNB顺序结合且Km都高于0.10mmol/L;GS-DNB相对CDNB的竞争性抑制常数约5μmol/L,相对GSH的非竞争性抑制常数约33μmol/L。3,5-二甲基苯甲酸、对丁基苯甲酸、依他尼酸对此GST抑制常数都大于0.20 mmol/L;N,N’-双依他尼酰-1,4-丁二胺和N,N’-双对丁基苯甲酰-1,4-丁二胺都为GST相对GSH的强竞争性抑制,抑制常数分别为31 nmol/L和(0.61±0.43)μmol/L(n=3)。结论:将标签GST低亲和力芳香羧酸用柔性短链连成对称结构,可获得结合于单个活性中心的高亲和力标签GST抑制剂。
关键词
谷胱甘肽s-转硫酶
亲和力
抑制剂
配体
Keywords
glntathione
s-
transferase
affinity
inhibitors
ligand
分类号
Q555.8 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
双依他尼酸乙醇胺对谷胱甘肽S-转硫酶mu的选择性抑制作用
被引量:
1
2
作者
同婷婷
段昌园
李欣蓬
廖飞
杨晓兰
机构
重庆医科大学检验医学院
重庆理工大学药学与生物工程学院
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期406-413,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31570862,81773625)资助。
文摘
谷胱甘肽S-转移酶(GST)的同工酶mu (GSTM)高表达与卵巢癌顺铂耐药有关。以GST非选择性抑制剂依他尼酸设计二价潜抑制剂双依他尼酸乙醇胺(aminoethanol di-ethacrynic acid, ADEA),测定ADEA及其与还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)加合物对GST同工酶亚型A1、P1、M2的半抑制浓度(IC50)、抑制类型、结合比和结合动力学。ADEA本身对GSTM2的IC50比GSTA1低300倍,比GSTP1低3 000倍;ADEA与GSH在酶催化下反应10 min所得产物,对上述3种同工酶的IC50分别降低5、57、200倍。ADEA本身和产物对GSTM2相对于底物CDNB是反竞争性抑制剂,ADEA本身对GSTM2相对于底物GSH是混合性抑制剂,ADEA与GSH产物对GSTM2相对于底物GSH是反竞争性抑制剂。分析ADEA对GSTM2荧光静态淬灭表明ADEA及其产物是二价结合;分析荧光和酶活性随时间变化表明酶与ADEA本身结合速度比其产物CDNB慢10倍。ADEA是有效的GSTM2选择性二价潜抑制剂。
关键词
双依他尼酸乙醇胺
谷
胱
甘
肽
转
s-
转
硫
酶
mu
二价潜抑制剂
依他尼酸
Keywords
Aminoethanoldi-ethacrynic acid
Glutathione
s-
transferase mu
Divalent inhibitor
Ethacrynic acid
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
原文传递
题名
细胞代谢解毒酶CYP1A1、GSTM1基因多态性与吸烟对男性肺鳞癌发病的影响
被引量:
2
3
作者
宋宝
刘杰
黄海燕
王兴武
郑燕
韩金祥
王哲海
机构
山东省肿瘤医院基础研究中心
山东省肿瘤医院内三科
山东省医学科学院医药生物技术研究中心
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2010年第11期1193-1196,共4页
基金
山东省卫生厅项目(2007HW135)
山东省自然科学基金(Q2007C11)
文摘
目的探讨细胞代谢解毒酶细胞色素P450酶1A1(CYP1A1)、谷胱甘肽S-转硫酶M1(GSTM1)基因多态性和吸烟因素对男性肺鳞癌发病的影响。方法采用基因芯片技术对125例男性肺鳞癌患者和125例男性健康对照者CYP1A1、GSTM1基因多态性进行检测。结果 CYP1A1m2位点GG基因型和GSTM1缺失基因型在肺鳞癌组与健康对照者间存在显著性差异(P<0.05)。吸烟者携带CYP1A1m2位点至少一个变异G等位基因或携带GSTM1缺失型者患肺鳞癌的危险性进一步显著增加,OR值分别为4.50和3.81(P<0.01)。结论吸烟与CYP1A1、GSTM1基因多态性与男性肺鳞癌的发生有关。
关键词
细胞色素P450
酶
1A1
谷胱甘肽s-转硫酶
M1
基因多态性
肺鳞癌
Keywords
cytochrome P450 enzyme 1A1
glutathione-
s-
transferase M1
gene polymorphisms
lung squamous carcinoma
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的相关性Meta分析
被引量:
1
4
作者
杨天宁
赵达
马守成
关泉林
机构
兰州大学第一临床医学院肿瘤内科
兰州大学第一医院肿瘤内科
兰州大学第一医院肿瘤外科
出处
《国际肿瘤学杂志》
CAS
2015年第10期743-746,共4页
文摘
目的探讨GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的关系。方法计算机检索PubMed、EMBase、CochraneLibrary、中国生物医学文献数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国期刊全文数据库和万方医药期刊全文数据库,全面检索GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的临床对照研究。按纳入与排除标准筛选文献,对符合条件的研究由两位研究者独立进行资料提取和质量评价,采用RevMan5.1软件进行Meta分析。结果共检索出326篇文献,最终纳入10篇病例对照研究,其中结直肠癌患者2983例,对照组共纳入健康人4386例。Meta分析结果显示GSTT1基因是否缺失与结直肠癌易感性相关(RR=1.11,95%C,为1.06-1.17,Z=4.26,P〈0.0001)。结论在中国人群中GSTT1基因缺失增加了结直肠癌的患病风险。
关键词
结直肠肿瘤
META分析
谷胱甘肽s-转硫酶
T1
Keywords
Colonic neoplasms
Meta-analysis
Glutathione
s-
transferases T1
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
融合标签谷胱甘肽S-转硫酶高亲和配体的设计与筛选
杨宪峰
张灵
杨晓兰
龙高波
张奕
廖飞
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
下载PDF
职称材料
2
双依他尼酸乙醇胺对谷胱甘肽S-转硫酶mu的选择性抑制作用
同婷婷
段昌园
李欣蓬
廖飞
杨晓兰
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
原文传递
3
细胞代谢解毒酶CYP1A1、GSTM1基因多态性与吸烟对男性肺鳞癌发病的影响
宋宝
刘杰
黄海燕
王兴武
郑燕
韩金祥
王哲海
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2010
2
下载PDF
职称材料
4
GSTT1基因与中国人群结直肠癌易感性的相关性Meta分析
杨天宁
赵达
马守成
关泉林
《国际肿瘤学杂志》
CAS
2015
1
原文传递
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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