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tRF-013354介导阿霉素诱导的足细胞损伤的机制研究
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作者 王晓红 黄婵 +3 位作者 季嘉玲 张琳琳 张爱青 甘卫华 《皖南医学院学报》 CAS 2024年第1期14-18,共5页
目的:探究tRNA衍生片段013354(tRF-013354)在阿霉素(ADR)诱导的足细胞损伤中的作用及相关机制。方法:用ADR诱导足细胞损伤模型,tRF-013354 mimic和tRF-013354 NC-mimic分别转染足细胞,Real-time PCR(RT-PCR)验证转染效率,CCK-8检测足细... 目的:探究tRNA衍生片段013354(tRF-013354)在阿霉素(ADR)诱导的足细胞损伤中的作用及相关机制。方法:用ADR诱导足细胞损伤模型,tRF-013354 mimic和tRF-013354 NC-mimic分别转染足细胞,Real-time PCR(RT-PCR)验证转染效率,CCK-8检测足细胞存活率,免疫荧光检测足细胞损伤标志物Nephrin、Podocin的定位和表达水平,Western blot检测Nephrin、Podocin和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白非磷酸化β-catenin、Wnt1的蛋白表达水平,RT-PCR检测tRF-013354的表达;用Wnt信号拮抗剂Dickkopf-1(DKK1)阻断Wnt/β-catenin信号通路,Western blot检测非磷酸化β-catenin和Nephrin、Podocin的蛋白表达水平,RT-PCR检测tRF-013354的表达。结果:1μg/mL ADR干预足细胞24 h,可成功构建ADR诱导足细胞损伤模型,Wnt/β-catenin信号通路被激活,tRF-013354下调(P<0.05);足细胞过表达tRF-013354可减轻足细胞损伤;DDK1阻断Wnt/β-catenin信号通路,与ADR组比较,ADR+DKK1组足细胞损伤减轻,tRF-013354表达上调(P<0.05)。结论:tRF-013354可能作为Wnt/β-catenin信号通路的下游效应分子减轻ADR诱导的足细胞损伤。 展开更多
关键词 tRNA衍生片段 阿霉素 足细胞损伤 WNT/Β-CATENIN信号通路
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mitoTEMPO通过调控线粒体自噬对慢性肾脏病模型大鼠足细胞损伤的保护作用研究
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作者 王若霜 冷彦飞 袁飞远 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第5期22-29,共8页
目的 探讨线粒体靶向的2, 2, 6, 6-四甲基哌啶-1-氧基-4-氨基-2-氧基乙基(mitochondria-targeted 2, 2, 6, 6-tetramethylpiperidin-1-oxyl-4-amino-2-oxyethl,mitoTEMPO)对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)模型大鼠足细胞损伤... 目的 探讨线粒体靶向的2, 2, 6, 6-四甲基哌啶-1-氧基-4-氨基-2-氧基乙基(mitochondria-targeted 2, 2, 6, 6-tetramethylpiperidin-1-oxyl-4-amino-2-oxyethl,mitoTEMPO)对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)模型大鼠足细胞损伤的影响及其相关分子机制。方法 18只健康SD大鼠随机分为对照(Control)组、模型组(CKD组)和mitoTEMPO组,每组6只。采用全自动生化分析仪测定肾功能;苏木素-伊红染色检测肾病理结构;免疫组织化学法检测肾脏肌间质蛋白(desmin)和足突蛋白(podocin)表达;透射电镜检测足细胞超微结构;免疫荧光共染检测足细胞线粒体自噬;实时荧光定量PCR检测肾脏炎性因子表达;蛋白免疫印迹法检测Nod样受体家族成员蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体,自噬和帕金蛋白(Parkin)/PTEN诱导假定激酶1(PTEN induced putative kinase1,PINK1)通路相关蛋白表达。结果 与Control组比较,CKD组大鼠24h尿蛋白(84.89±8.98 mg/24h vs 5.79±1.39mg/24h),血清肌酐(serum creatinine,Scr)(75.10±10.46μmol/L vs 38.57±4.89μmol/L),尿素氮(urea nitrogen,BUN)(8.96±1.07 mmol/L vs 2.73±0.43mmol/L)水平升高,差异具有统计学意义(t=21.322,7.749,13.233,均P<0.001);肾小球体积增大、系膜增生、大量炎性细胞浸润;足细胞足突融合,基底膜增厚,线粒体嵴断裂和空泡化;desmin阳性区增多,podocin阳性区减少,差异具有统计学意义(t=9.903,7.651,均P<0.001);p62和desmin可见共定位;LC3 II/I,PINK1和Parkin蛋白表达降低(t=16.984,15.105,11.390),IL-1β,TNF-α,NLRP3,cleaved caspase-1和p62蛋白表达升高(t=5.700~21.571),差异具有统计学意义(均P<0.001)。与CKD组比较,mitoTEMPO组24h尿蛋白、Scr和BUN水平降低,差异具有统计学意义(t=12.508,4.712,7.338,均P<0.001);肾脏病理损伤和足细胞情况显著改善;desmin阳性区减少,podocin阳性区增多(t=6.649,7.686,均P<0.001);LC3和COX IV可见共定位;LC3 II/I,PINK1和Parkin蛋白表达升高(t=15.481,20.469,5.801),IL-1β,TNF-α,NLRP3,cleaved caspase-1和p62蛋白表达降低(t=3.477~9.681),差异具有统计学意义(均P<0.001)。结论mitoTEMPO对CKD足细胞损伤可产生保护作用,其机制可能与激活PINK1/parkin通路介导的线粒体自噬来抑制NLRP3炎症小体有关。 展开更多
关键词 线粒体靶向的2 2 6 6-四甲基哌啶-1-氧基-4-氨基-2-氧基乙基 慢性肾脏病 足细胞损伤 PINK1/Parkin信号通路 Nod样受体家族成员蛋白3炎症小体
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miR-155靶向SMAD2在小鼠狼疮肾炎足细胞损伤和炎性反应中的影响
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作者 张洁 徐璐瑶 +6 位作者 吴昱升 王蓉 杨岚茵 蓝梦麟 林雨倩 黄艳琴 林栩 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第5期321-328,共8页
目的:探讨miR-155调控SMAD2表达对小鼠狼疮性肾炎足细胞损伤以及炎性反应中的影响。方法:实验小鼠随机分为空白组、模型组、 AAV9-miR-155组、AAV9-miR-NC组、AAV9-miR-anti组和AAV9-miR-anti-NC组,每组8只,其中空白组为C57BL/6小鼠,其... 目的:探讨miR-155调控SMAD2表达对小鼠狼疮性肾炎足细胞损伤以及炎性反应中的影响。方法:实验小鼠随机分为空白组、模型组、 AAV9-miR-155组、AAV9-miR-NC组、AAV9-miR-anti组和AAV9-miR-anti-NC组,每组8只,其中空白组为C57BL/6小鼠,其余组均为MRL/lpr小鼠,并在此基础上对各组进行相应处理和取样。通过在线靶基因预测网站Target genes对miR-155与SMAD2是否存在结合位点进行预测。双荧光素酶报告基因分析系统预测验证miR-155与SMAD2的靶向关系。考马斯亮蓝法检测各组小鼠24 h尿蛋白含量。苏木精-伊红染色法染色观察小鼠肾脏组织。qRT-PCR检测各组肾组织中miR-155水平上的表达。Western blot检测肾组织中nephrin、P-cadherin和SMAD2蛋白表达。免疫荧光实验检测小鼠炎性因子(IL-6、TNF-α)的荧光强度。结果:与空白组相比,模型组小鼠尿蛋白升高,肾脏病理损伤严重,肾组织的miR-155上调,并且nephrin、P-cadherin和SMAD2蛋白表达水平下降(P<0.05),而IL-6、TNF-α荧光强度增强。与模型组、AAV9-miR-NC组相比,AAV9-miR-155组小鼠模型组小鼠尿蛋白升高,肾脏病理损伤明显,肾组织miR-155升高明显,nephrin、P-cadherin和SMAD2表达水平下降(P<0.05),而IL-6、TNF-α荧光强度增强明显;与模型组、AAV9-miR-anti-NC组相比,AAV9-miR-anti组与模型组相比小鼠尿蛋白下降,肾脏病理损伤改善,miR-155表达降低,nephrin、P-cadherin和SMAD2表达水平升高(P<0.05),而IL-6、TNF-α荧光强度下降;模型组、AAV9-miR-NC组、 AAV9-miR-anti-NC组小鼠则上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-155可抑制野生型SMAD2细胞的荧光活性,靶向调控SMAD2的表达。结论:高表达miR-155可通过调控SMAD2加重小鼠足细胞损伤和狼疮肾炎的炎性反应,而抑制miR-155表达可减轻小鼠足细胞损伤和炎性反应。 展开更多
关键词 MIR-155 SMAD2 足细胞损伤 狼疮性肾炎
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尿沉渣中钙信号相关mRNA作为IgA肾病足细胞损伤无创性指标的研究
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作者 刘翔 汤绚丽 余瑾 《浙江中西医结合杂志》 2024年第1期34-37,46,共5页
IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是目前最常见的原发性慢性肾小球疾病,5%~25%的IgAN患者10年内进展为终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD),需行肾脏替代治疗^([1])。近年来,足细胞在IgAN中,致病作用受到更多关注,足细胞损伤与蛋... IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是目前最常见的原发性慢性肾小球疾病,5%~25%的IgAN患者10年内进展为终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD),需行肾脏替代治疗^([1])。近年来,足细胞在IgAN中,致病作用受到更多关注,足细胞损伤与蛋白尿及IgAN病情进展正相关^([2])。 展开更多
关键词 IGA肾病 足细胞损伤 TRPC6 mRNA Calpain mRNA 无创性指标
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miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制研究
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作者 徐璐瑶 张洁 林栩 《中国临床新医学》 2024年第8期852-859,共8页
目的探讨miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制。方法选择巨噬细胞RAW264.7和肾小球足细胞MPC5进行实验。将miR-155mimics、miR-155mimicsNC、miR-155inhibitor和miR-155inhibitorNC慢病毒转染至RAW264.7细胞,构... 目的探讨miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制。方法选择巨噬细胞RAW264.7和肾小球足细胞MPC5进行实验。将miR-155mimics、miR-155mimicsNC、miR-155inhibitor和miR-155inhibitorNC慢病毒转染至RAW264.7细胞,构建miR-155过表达/低表达巨噬细胞系及其对照,分离巨噬细胞外泌体。采用流式细胞术检测各组巨噬细胞M1/M2表型比值。采用Transwell法将RAW264.7细胞与MPC5细胞进行共培养,分别于共培养12h、24h后采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测巨噬细胞miR-155表达水平;采用Westernblot法检测巨噬细胞IL-6、IL-10表达水平,以及肾小球足细胞synaptoporin和nephrin表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肾小球足细胞IL-1β、IL-10表达水平;采用TUNEL染色法检测肾小球足细胞凋亡情况。结果成功构建miR-155过表达/低表达巨噬细胞系并分离其外泌体。miR-155过表达可诱导巨噬细胞极化为M1型,抑制miR-155可诱导巨噬细胞极化为M2型。在miR-155mimics慢病毒转染至巨噬细胞24h后,其miR-155表达水平显著增加(P<0.05),并上调IL-6的表达水平(P<0.05),抑制IL-10的表达水平(P<0.05),经Transwell共培养使足细胞synaptoporin、nephrin表达水平下降(P<0.05),IL-1β表达水平升高(P<0.05),并促进足细胞发生凋亡。而转染miR-155inhibitor慢病毒至巨噬细胞后所得结果趋势与miR-155mimics相反。RT-qPCR检测结果显示,miR-155mimics组巨噬细胞外泌体中miR-155水平显著升高(P<0.05),miR-155inhibitor组巨噬细胞外泌体中miR-155水平显著降低(P<0.05)。结论miR-155过表达可诱导巨噬细胞极化为M1型,并通过外泌体介导引发足细胞损伤,而下调miR-155表达则逆转这一作用。 展开更多
关键词 MIR-155 巨噬细胞 外泌体 足细胞损伤 凋亡 炎症因子
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糖尿病肾病足细胞损伤机制及中医药干预研究进展
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作者 林阳榕 陈勇 《云南中医中药杂志》 2024年第9期79-84,共6页
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见、最严重的并发症之一,也是终末期肾病和慢性肾脏性疾病的首要病因,然而关于DN发病病因及分子机制,目前尚不明确。大量研究表明,足细胞损伤在DN发展过程中起到了关键性作用,其机制涉... 糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见、最严重的并发症之一,也是终末期肾病和慢性肾脏性疾病的首要病因,然而关于DN发病病因及分子机制,目前尚不明确。大量研究表明,足细胞损伤在DN发展过程中起到了关键性作用,其机制涉及到氧化应激、炎症、纤维化、代谢等因素。通过探讨DN中足细胞损伤的机制,总结中医药干预DN的研究进展,为中医药防治DN提供研究思路。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞损伤 中医药干预
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中医治疗足细胞损伤的研究进展
7
作者 郭陈成 张君 《中国民间疗法》 2024年第3期109-112,共4页
足细胞损伤是导致蛋白尿的关键因素,其损伤可影响多种肾脏疾病的发生发展和预后。目前对足细胞损伤尚无有效及特异性的治疗方法。该文从中药单体、中药复方、中成药、针灸等方面,分析总结近年来中医治疗足细胞损伤的相关文献,发现中医... 足细胞损伤是导致蛋白尿的关键因素,其损伤可影响多种肾脏疾病的发生发展和预后。目前对足细胞损伤尚无有效及特异性的治疗方法。该文从中药单体、中药复方、中成药、针灸等方面,分析总结近年来中医治疗足细胞损伤的相关文献,发现中医治疗足细胞损伤具有多靶点、多途径、低毒性等优势,以期为中医防治足细胞损伤提供借鉴。 展开更多
关键词 足细胞损伤 中药单体 中药复方 中成药 针灸 大黄素 黄连素 黄芪甲苷 雷公藤甲素 三七总皂苷
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异三聚体G蛋白与足细胞损伤
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作者 刘灿 戴恩来 +2 位作者 丁照然 段淑文 王晓辉 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期177-187,共11页
G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCRs)是人体内最大的膜蛋白受体超家族,共有超过800种亚型,目前约有35%经食品药品监督管理局批准上市的药物靶向GPCRs治疗多种疾病,如心力衰竭(β肾上腺素受体)、消化性溃疡(组胺受体)、前... G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCRs)是人体内最大的膜蛋白受体超家族,共有超过800种亚型,目前约有35%经食品药品监督管理局批准上市的药物靶向GPCRs治疗多种疾病,如心力衰竭(β肾上腺素受体)、消化性溃疡(组胺受体)、前列腺癌(促性腺激素受体)、高血压(肾上腺素能和血管紧张素受体)、疼痛(阿片受体)和支气管哮喘(β2肾上腺素受体)等。虽然GPCRs数量巨大,但其下游的信号蛋白却是有限的,异三聚体G蛋白(heterotrimeric G proteins,GPs)是传导GPCRs信号的关键蛋白,通过与GPCRs偶联将细胞外刺激转化为细胞内反应并通过下游级联启动多种信号转导事件。足细胞是肾小球滤过屏障的重要组成部分,其损伤是蛋白尿形成和肾小球进行性硬化的核心事件。本文就GPs的调控、信号转导及其在足细胞损伤中的作用等方面作一综述,以期为科研和临床研治该病提供理论依据。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 异三聚体G蛋白 足细胞损伤
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二十碳五烯酸对糖尿病肾足细胞损伤保护机制研究
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作者 张磊 于芳 +4 位作者 曹瑞 王晓慧 徐孝娜 王枫 刘寒强 《空军军医大学学报》 CAS 2024年第8期913-919,共7页
目的探究二十碳五烯酸(EPA)在模拟高糖诱导肾足细胞损伤中的作用及其潜在机制。方法体外培养小鼠MPC5肾足细胞,高糖诱导足细胞出现损伤,用不同浓度的EPA干预处理。采用CCK-8法评估MPC5细胞的活力,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blott... 目的探究二十碳五烯酸(EPA)在模拟高糖诱导肾足细胞损伤中的作用及其潜在机制。方法体外培养小鼠MPC5肾足细胞,高糖诱导足细胞出现损伤,用不同浓度的EPA干预处理。采用CCK-8法评估MPC5细胞的活力,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blotting检测凋亡蛋白及足细胞标志蛋白表达,活性氧(ROS)荧光探针检测法分析高糖刺激后ROS的生成,ELISA进一步检测炎性因子分泌情况。结果CCK-8细胞活力显示,EPA能维持高糖诱导的细胞活力,EPA干预后足细胞标志蛋白podocin和synaptopodin的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);流式细胞术分析显示EPA干预后高糖刺激的足细胞凋亡率明显下降(P<0.01),促凋亡蛋白Bax和cleaved Caspase-3表达降低(P<0.05,P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增加(P<0.01);相较于高糖组,EPA干预后ROS生成明显降低(P<0.01),ELISA结果显示EPA干预降低高糖诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6炎性因子分泌(P<0.01);EPA干预后炎性信号通路蛋白TLR4和MYD88蛋白降低(P<0.05,P<0.01),EPA干预后脂质代谢蛋白SREBP1的表达下降(P<0.05,P<0.01);过表达SREBP1后,EPA对高糖诱导MPC5细胞上述检测结果被逆转。结论EPA可以抑制高糖刺激后足细胞内ROS的产生及减少足细胞凋亡,同时EPA可能通过调节SREBP1来抑制炎症通路激活,从而对糖尿病肾足细胞起到保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 二十碳五烯酸 足细胞损伤 SREBP1
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核糖核酸的m6A甲基化水平及主要甲基化调控酶在糖尿病肾病足细胞损伤中的表达和作用
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作者 黄秋人 常凯利 +2 位作者 鲁智慧 丁小强 戴艳 《上海医学》 CAS 2024年第6期364-371,共8页
目的明确糖尿病肾病(DN)足细胞损伤中RNA m6A甲基化修饰的改变,探索可能起主要调控作用的甲基化修饰酶。方法2型DN db/db小鼠(DN组)和非DN db/m小鼠(对照组),每组各6只饲养至32周后提取肾小球。采用比色法检测各组小鼠肾小球RNA m6A甲... 目的明确糖尿病肾病(DN)足细胞损伤中RNA m6A甲基化修饰的改变,探索可能起主要调控作用的甲基化修饰酶。方法2型DN db/db小鼠(DN组)和非DN db/m小鼠(对照组),每组各6只饲养至32周后提取肾小球。采用比色法检测各组小鼠肾小球RNA m6A甲基化水平,RT-PCR检测小鼠肾小球中主要甲基化调控酶(METTL3、METTL14、WTAP、FTO和ALKBH5)的表达,采用免疫组织化学(简称免疫组化)法观察甲基转移酶METTL14在各组小鼠肾组织的表达。选取微小病变(MCD)和DN患者肾穿刺和肾癌患者癌旁健康肾组织标本,采用免疫组化法检测METTL14和WT1在各组组织中的表达。采用免疫印迹RT-PCR和免疫印迹检测体外梯度浓度高糖(25、35 mmol/L)或AGE(25、50、100μmol/L)刺激的人足细胞内METTL14的mRNA和蛋白质相对表达量。采用免疫荧光明确METTL14在50μmol/L的AGE处理下的人足细胞中的表达和定位。体外应用METTL14小干扰RNA处理人足细胞并予AGE刺激24 h。采用免疫印迹检测法检测各组足细胞内METTL14和凋亡蛋白表达,RT-PCR检测各组足细胞趋化因子和炎症因子的mRNA水平。结果与对照组比较,DN组小鼠肾小球中RNA的m6A甲基化水平显著增加;DN组小鼠肾小球中甲基转移酶METTL3、METTL14及去甲基化酶FTO的mRNA和蛋白质相对表达量升高,其中METTL14增高最为显著(P值均<0.05)。与健康对照者比较,DN患者肾穿刺样本中足细胞标志物WT1显著减少,METTL14的阳性数目显著增多并定位于细胞核(P值均<0.001)。体外35 mmol/L高糖和50μmol/L AGE刺激显著促进人足细胞内METTL14 mRNA和蛋白质相对表达量(P值均<0.01)。体外转染METTL14小干扰RNA显著抑制了AGE刺激后的人足细胞内METTL14蛋白表达的上调和足细胞凋亡,减轻AGE诱导的人足细胞内趋化因子MCP-1、炎症因子IL-6、TNF-αmRNA水平的增加。结论METTL14可能是介导DN肾小球中RNA的m6A甲基化修饰的关键调控酶。敲除足细胞METTL14可通过减轻足细胞的凋亡和炎症发挥对DN损伤足细胞的保护作用。 展开更多
关键词 m6A甲基化 METTL14 糖尿病肾病 足细胞损伤
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雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效及对氧化应激和足细胞损伤指标的影响
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作者 何慧 王丽芳 《中国中西医结合肾病杂志》 2024年第1期37-39,共3页
目的:探讨雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效及对氧化应激和足细胞损伤指标的影响。方法:收集92例脾肾气虚型糖尿病肾病患者分为对照组(n=46)和观察组(n=46)。对照组予西药治疗,观察组在对照组基础上联合雪莲益肾方治疗... 目的:探讨雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效及对氧化应激和足细胞损伤指标的影响。方法:收集92例脾肾气虚型糖尿病肾病患者分为对照组(n=46)和观察组(n=46)。对照组予西药治疗,观察组在对照组基础上联合雪莲益肾方治疗。比较疗效、24 h尿蛋白、24 h尿微量白蛋白、中医证候积分、氧化应激指标、足细胞损伤指标和不良反应。结果:观察组治疗总有效率高于对照组(93.5%vs 78.3%,P<0.05)。治疗后,观察组24 h尿蛋白、24 h尿微量白蛋白水平和中医证候积分低于对照组,氧化应激指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平高于对照组,丙二醛(MDA)水平低于对照组,足细胞损伤指标尿Nephrin和Podocin蛋白水平低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:雪莲益肾方联合西药治疗脾肾气虚型糖尿病肾病疗效确切,其机制可能与减轻氧化应激和足细胞损伤有关。 展开更多
关键词 雪莲益肾方 糖尿病肾病 氧化应激 足细胞损伤
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水蛭对局灶节段性肾小球硬化大鼠足细胞损伤的影响
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作者 卢文雅 王旸 +6 位作者 王立范 杨馨 闫晓琳 李喆 郑楠 杨心雨 刘娜 《中国中医药科技》 CAS 2024年第3期404-408,共5页
目的:观察水蛭对局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)模型大鼠足细胞损伤的影响。方法:44只大鼠随机分为正常组、模型组、水蛭组3组,采用单侧肾切除术后尾静脉注射阿霉素法建立大鼠FSGS模型,水蛭组给予水蛭... 目的:观察水蛭对局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)模型大鼠足细胞损伤的影响。方法:44只大鼠随机分为正常组、模型组、水蛭组3组,采用单侧肾切除术后尾静脉注射阿霉素法建立大鼠FSGS模型,水蛭组给予水蛭悬浊液0.9 g/(kg·d)灌胃,正常组、模型组予等量生理盐水灌胃,共8周。分别于给药后4周、8周末测定大鼠血清三酰甘油(TG),免疫荧光法、Western Blot法检测肾组织线粒体融合蛋白2(Mfn2)蛋白表达,PCR法检测Mfn2 mRNA表达。结果:水蛭组大鼠血TG水平较模型组降低(P<0.05);肾组织Mfn2蛋白和Mfn2 mRNA表达较模型组大鼠增多(P<0.05)。结论:水蛭可以降低FSGS大鼠TG水平,提高Mfn2蛋白及mRNA表达水平,减少足细胞损伤。 展开更多
关键词 局灶节段性肾小球硬化 水蛭 足细胞损伤 三酰甘油 MFN2 大鼠
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中医药治疗膜性肾病足细胞损伤的研究进展
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作者 黎梅 陈双琴 《中国民族民间医药》 2024年第2期76-80,共5页
文章分析了膜性肾病与足细胞的关系,简述了单味中药及提取物、中药复方制剂、中西医结合治疗膜性肾病足细胞损伤作用机制及优势,分析表明中西医结合治疗比单纯的中医药治疗有更多的多途径、多靶点及疗效快、副用少等优点,为临床运用中... 文章分析了膜性肾病与足细胞的关系,简述了单味中药及提取物、中药复方制剂、中西医结合治疗膜性肾病足细胞损伤作用机制及优势,分析表明中西医结合治疗比单纯的中医药治疗有更多的多途径、多靶点及疗效快、副用少等优点,为临床运用中药减少西药副反应或者减少西药的用量和基础实验提供理论依据。 展开更多
关键词 膜性肾病 足细胞损伤 单味中药及提取物 中药复方制剂 中西医结合治疗
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基于PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用及机制 被引量:1
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作者 吕娟 张云霞 +2 位作者 白俊嫄 蒲晓薇 戴恩来 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期739-746,共8页
目的探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用及分子机制。方法体外培养大鼠肾小球足细胞,阿霉素诱导建立足细胞损伤模型,分为:空白组、模型组、淫羊藿苷联合地塞米松组及氯喹组。免疫荧光法测定足细胞特异性骨架蛋白... 目的探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用及分子机制。方法体外培养大鼠肾小球足细胞,阿霉素诱导建立足细胞损伤模型,分为:空白组、模型组、淫羊藿苷联合地塞米松组及氯喹组。免疫荧光法测定足细胞特异性骨架蛋白synaptopodin的表达;转染mRFP-GFP-LC3双荧光自噬指示体系,激光共聚焦显微镜观察足细胞内自噬流的强弱;透射电镜观察足细胞内自噬体、自噬溶酶体的变化;Western Blot法检测足细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62及自噬信号通路蛋白PTEN、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达。结果与模型组比,淫羊藿苷联合地塞米松组的synaptopodin的表达升高(P<0.05);足细胞内自噬流水平、自噬体及自噬溶酶体数量均增加(P<0.01);LC3-Ⅱ、PTEN的表达上调(P<0.01),但p62、pPI3K、p-Akt、p-mTOR的表达下调(P<0.01)。与淫羊藿苷联合地塞米松组比,氯喹组synaptopodin的表达降低(P<0.05);足细胞内自噬流的水平降低;自噬体数量增加(P<0.05),自噬溶酶体的数量减少(P<0.01);且LC3-Ⅱ和p62表达同步升高(P<0.05,P<0.01),但PTEN、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达无明显变化(P>0.05)。结论淫羊藿苷联合地塞米松可能通过激活PTEN,抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,增强足细胞自噬水平,达到保护足细胞的作用。 展开更多
关键词 阿霉素 足细胞损伤 地塞米松 淫羊藿苷 PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路 自噬
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汉防己甲素联合环孢素干预钙依赖的TRPC6/Calpain-1信号网路改善阿霉素肾病大鼠足细胞损伤的研究 被引量:2
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作者 王华 汤绚丽 +1 位作者 俞东容 余瑾 《浙江临床医学》 2023年第6期816-819,共4页
目的通过干预阿霉素肾病模型,探讨汉防己甲素(Tet)是否可以通过干预钙依赖的TRPC6/Calpain-1信号网络起到足细胞保护的作用,与钙调磷酸酶抑制剂环孢素A(CsA)合用是否存在协同效应。方法SD大鼠阿霉素尾静脉注射建立足细胞损伤动物模型,... 目的通过干预阿霉素肾病模型,探讨汉防己甲素(Tet)是否可以通过干预钙依赖的TRPC6/Calpain-1信号网络起到足细胞保护的作用,与钙调磷酸酶抑制剂环孢素A(CsA)合用是否存在协同效应。方法SD大鼠阿霉素尾静脉注射建立足细胞损伤动物模型,分别给予Tet低、中、高剂量,并予CsA作为对照,并设置Tet联合CsA组,监测各组大鼠肾功能、蛋白尿水平、电镜观察病理组织结构、western blot法检测TRPC6/Calpain-1信号环路蛋白的表达,及测定Calpain及CaN活性。结果模型组大鼠蛋白尿明显增多,肾功能下降,病理上可见足细胞广泛融合,肾组织Calpain-1、CaN表达升高,而synaptopodin和Talin-1表达降低,Calpain和CaN活性显著上调。Tet中、高剂量组及CsA组均能减少蛋白尿,降低血肌酐,改善足细胞病变,Tet联合CsA组作用优于单用CsA组。Tet中、高剂量组能抑制表达升高的TRPC6,Calpain-1,提高synatopodin、Talin-1的表达,但均对CaN活性无抑制作用;CsA显著抑制CaN的表达,可抑制Calpain-1的表达、对TRPC6无抑制作用。Tet联合使用CsA,对TRPC6、CaN蛋白及活性,Calpain-1蛋白及Calpain活性均存在抑制作用,有协同效应。结论Tet能改善阿霉素肾病模型的蛋白尿肾功能及足细胞病理损伤,其机理可能是通过抑制TRPC6过表达引起的Calpain-1活化、减少钙离子的内流,稳定足细胞骨架蛋白,联合使用CsA可实现对CaN等钙信号网络的多靶点抑制,提高疗效及改善病理。 展开更多
关键词 汉防己甲素 钙信号 阿霉素肾病 足细胞损伤 联合治疗
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胎球蛋白–A 调控糖尿病肾病足细胞损伤机制研究
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作者 戢晴 陶海英 +1 位作者 吴海燕 丁国明 《中国现代医生》 2022年第30期,9-12,共4页
目的研究胎球蛋白–A(fetoglobulin–a,Fetuin–A)调控糖尿病肾病足细胞的损伤机制。方法选取健康SD成年大鼠5只,获取大鼠肾小球基膜(glomerular basement membrane,GBM)足细胞,分为上调Fetuin–A组、下调Fetuin–A组。采用反转录–聚... 目的研究胎球蛋白–A(fetoglobulin–a,Fetuin–A)调控糖尿病肾病足细胞的损伤机制。方法选取健康SD成年大鼠5只,获取大鼠肾小球基膜(glomerular basement membrane,GBM)足细胞,分为上调Fetuin–A组、下调Fetuin–A组。采用反转录–聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT–PCR)技术检测Fetuin–A、足细胞表达,观察细胞增殖、凋亡,免疫组化法检测肾组织肿瘤坏死因子–α(tumor necrosis factorα,TNF–α)、混合系列蛋白激酶结构域蛋白(mixed–lineage kinase domain–like protein,MLKL)、受体相互作用蛋白激酶1(receptor–interacting protein kinase 1,RIPK1)水平,蛋白质印迹(Western blot,WB)法检测Wilms瘤基因1(wilms,tumor gene 1,WT1)、特异蛋白1(specific protein 1,Sp1)表达水平。结果与对照组比较,下调Fetuin–A组Fetuin–A、TNF–α、MLKL、RIPK1表达水平、细胞吸光度值、细胞凋亡率均较低,WT1、Sp1表达水平较高;上调Fetuin–A组Fetuin–A、TNF–α、MLKL、RIPK1表达水平、细胞吸光密度值、细胞凋亡率均较高,WT1、Sp1表达水平较低(P<0.05);与下调Fetuin–A组比较,上调Fetuin–A组Fetuin–A、TNF–α、MLKL、RIPK1表达水平、细胞吸光度值、细胞凋亡率较高,WT1、Sp1表达水平较低(P<0.05)。结论Fetuin–A靶向作用于Sp1抑制足细胞生长失常。 展开更多
关键词 胎球蛋白–A 糖尿病肾病 足细胞损伤 特异蛋白 1 肿瘤坏死因子–α
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黄芪甲苷改善高糖诱导的足细胞损伤和线粒体功能障碍并抑制Notch通路激活 被引量:8
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作者 缪晓杰 桂定坤 +3 位作者 陈玉强 吕荣 李道鸿 杨绪枫 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期135-141,共7页
目的研究黄芪甲苷对高糖诱导足细胞损伤和线粒体功能障碍的保护作用及其分子机制。方法构建高糖(30 mmol/L葡萄糖)诱导足细胞损伤模型,分别用低、中、高剂量黄芪甲苷与高糖共处理细胞;CCK-8检测细胞活性,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1荧... 目的研究黄芪甲苷对高糖诱导足细胞损伤和线粒体功能障碍的保护作用及其分子机制。方法构建高糖(30 mmol/L葡萄糖)诱导足细胞损伤模型,分别用低、中、高剂量黄芪甲苷与高糖共处理细胞;CCK-8检测细胞活性,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,试剂盒检测ATP含量,Western blotting检测凋亡及足细胞损伤相关蛋白和Notch通路相关蛋白表达水平。结果与control组相比,HG组细胞活性降低、细胞凋亡水平增加(P<0.05),抗凋亡蛋白(Bcl2)表达降低,凋亡蛋白(Bax、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3)表达升高(P均<0.05);和HG组相比,HG+AS-IV组改善高糖诱导的细胞活性和细胞凋亡水平(P<0.05),抗凋亡蛋白(Bcl2)表达升高,凋亡蛋白(Bax、cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3)表达降低(P均<0.05);和control组比较,HG组细胞线粒体发生功能障碍,JC-1单体含量升高,ATP含量降低(P均<0.05);和HG组相比,HG+AS-IV组改善细胞线粒体功能障碍,JC-1聚合物含量升高,ATP含量升高(P<0.05)。此外,和control组相比,HG组细胞Notch通路相关蛋白表达降低(P均<0.05);而和HG组相比,HG+AS-IV组Notch通路相关蛋白表达升高(P均<0.05)。分子对接结果表明AS-IV能够与Notch1结合。结论黄芪甲苷能够改善高糖诱导的足细胞损伤和线粒体功能障碍,其机制可能是抑制Notch通路激活发挥作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 足细胞损伤 线粒体功能障碍 NOTCH通路
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当归补血汤加味联合西医治疗糖尿病肾病的疗效及对足细胞损伤的影响 被引量:3
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作者 王正 刘蕊 王培 《川北医学院学报》 CAS 2023年第5期676-680,共5页
目的:探讨当归补血汤加味联合西医治疗糖尿病肾病(DKD)的疗效及其对足细胞损伤、氧化应激的影响。方法:选取101例DKD患者为研究对象,按照治疗方案的不同分为对照组(n=51)与中药组(n=50)。对照组予以常规西医治疗,中药组予以当归补血汤... 目的:探讨当归补血汤加味联合西医治疗糖尿病肾病(DKD)的疗效及其对足细胞损伤、氧化应激的影响。方法:选取101例DKD患者为研究对象,按照治疗方案的不同分为对照组(n=51)与中药组(n=50)。对照组予以常规西医治疗,中药组予以当归补血汤加味联合西医治疗,两组均连续治疗3个月。比较两组疗效及安全性,于治疗前及治疗3个月,检测并比较肾功能指标[血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、预估肾小球滤过率(eGFR)、24 h尿蛋白定量(24 h UAE)、尿白蛋白/肌酐比值(UACR)]、尿足细胞损伤相关指标[膜蛋白(Podocin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]和血清氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]的水平。结果:中药组总有效率为92.00%,高于对照组的76.47%(P<0.05)。治疗后,中药组Scr、BUN、24 h UAE、UACR水平均低于对照组(P<0.05),eGFR水平高于对照组(P<0.05);尿Podocin、α-SMA水平均低于对照组(P<0.05);血清SOD水平高于对照组(P<0.05),MDA水平低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:当归补血汤加味联合西医治疗DKD疗效较好,能够有效减轻氧化应激,保护足细胞损伤,减少蛋白尿,改善肾功能。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 当归补血汤 足细胞损伤 肾功能 氧化应激
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原人参二醇、人参皂苷CK和原人参三醇对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用 被引量:1
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作者 王梦影 宋泽宇 +5 位作者 甘海林 郑美华 刘倩 潘志城 刘珂 范华英 《烟台大学学报(自然科学与工程版)》 CAS 2023年第1期57-65,共9页
为探讨原人参二醇(PPD)、人参皂苷CK和原人参三醇(PPT)对肾病综合征(NS)中足细胞损伤的保护作用,本研究采用阿霉素(ADR)诱导足细胞损伤。通过CCK8及细胞划痕、Transwell实验分析,结果表明三种人参皂苷可以改善ADR损伤后足细胞的增殖活... 为探讨原人参二醇(PPD)、人参皂苷CK和原人参三醇(PPT)对肾病综合征(NS)中足细胞损伤的保护作用,本研究采用阿霉素(ADR)诱导足细胞损伤。通过CCK8及细胞划痕、Transwell实验分析,结果表明三种人参皂苷可以改善ADR损伤后足细胞的增殖活力并抑制其迁移能力。Western blot及细胞免疫荧光实验结果表明PPD、人参皂苷CK和PPT均可以通过降低Desmin、NF-κB P65、p-NF-κB P65、p-IκBα及升高IκBα的表达水平缓解足细胞损伤,并且可以促进GR的表达及其核转位,其中PPD的作用效果较好。计算机分子对接结果显示PPD、人参皂苷CK和PPT与GR均具有一定的结合活性,但PPD与GR的结合活性最优。因此,PPD、人参皂苷CK和PPT均可以在一定程度上改善ADR诱导的足细胞损伤,其中PPD在保护足细胞损伤方面具有一定的优势。 展开更多
关键词 人参皂苷 肾病综合征 足细胞损伤 糖皮质激素受体
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玉蚕颗粒改善足细胞损伤治疗糖尿病肾病的机制研究 被引量:2
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作者 张亚亨 盛广宇 +1 位作者 宋婷 杨雪军 《上海中医药杂志》 CSCD 2023年第11期77-84,共8页
目的观察玉蚕颗粒对糖尿病肾病(DN)小鼠的治疗作用并探讨其作用机制。方法将80只SPF级雄性c57小鼠随机分为正常组和造模组。正常组10只小鼠予普通饲料;造模组70只小鼠采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立DN小鼠... 目的观察玉蚕颗粒对糖尿病肾病(DN)小鼠的治疗作用并探讨其作用机制。方法将80只SPF级雄性c57小鼠随机分为正常组和造模组。正常组10只小鼠予普通饲料;造模组70只小鼠采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立DN小鼠模型。将50只造模成功的小鼠再随机分为模型组、氯沙坦钾组(氯沙坦钾10 mg/kg)及中药低、中、高剂量组(玉蚕颗粒1.5、3、6 g/kg),每组10只。给药组予相应药物灌胃处理,正常组及模型组以质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,每日1次,持续给药4周。(1)观察小鼠的一般状态,并比较给药前后的体质量变化;给药结束后检测血清空腹血糖(FBG);(2)采用苏木精-伊红(HE)染色、丽春红酸性品红-苯胺蓝(Masson)染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色观察肾组织病理变化;(3)采用透射电镜观察肾小球足细胞超微结构变化;(4)采用免疫组织化学法检测足细胞标志蛋白足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、肾母细胞瘤基因1蛋白(WT1)阳性表达情况,并采用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测Nephrin、WT1蛋白表达水平。结果(1)与正常组比较,模型组小鼠的一般状态较差,体质量下降,FBG升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠状态好转、体质量升高、FBG下降,其中中药中、高剂量组FBG差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HE、Masson及PAS染色显示:与正常组比较,模型组小鼠肾小管管壁变薄、管腔扩张、炎症细胞浸润、肾间质纤维组织增生;与模型组比较,中药各剂量组小鼠肾小管管壁变薄、管腔扩张、纤维组织增生有所减轻、炎症细胞浸润减少。(3)透射电镜观察显示:与正常组比较,模型组小鼠肾小球足细胞足突相互融合、部分足突消失;与模型组比较,中药各剂量组足突融合、消失情况明显好转,且中药中、高剂量组对足细胞损伤的改善效果较明显。(4)免疫组织化学染色结果与Western blot结果显示:与正常组比较,模型组肾组织Nephrin、WT1表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,中药各剂量组小鼠肾组织Nephrin、WT1表达显著升高(P<0.05)。结论玉蚕颗粒可通过降低DN小鼠血糖水平、减轻肾脏组织炎症细胞浸润、改善足细胞损伤,从而治疗糖尿病肾病。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 玉蚕颗粒 足细胞损伤 作用机制 小鼠模型 中药研究
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