稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2基因的MDCK细胞系的建立 被引量：2

1

作者 吕让 王丹 +2 位作者 宋彩玲 齐宾宾 刘明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期704-707,共4页

为建立稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因的MDCK细胞系,本研究采用RT-PCR扩增TMPRSS2基因,克隆于逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-TMPRSS2。采用脂质体转染的方式将重组质粒pLXSN-TMPRSS2、pGP和pE-ampho共转染293T细胞... 为建立稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因的MDCK细胞系,本研究采用RT-PCR扩增TMPRSS2基因,克隆于逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-TMPRSS2。采用脂质体转染的方式将重组质粒pLXSN-TMPRSS2、pGP和pE-ampho共转染293T细胞,获得逆转录病毒样颗粒。将逆转录病毒样颗粒感染MDCK细胞,经G418加压筛选和有限稀释法克隆及RT-PCR和间接免疫荧光(IFA)等试验的鉴定,建立了稳定表达TMPRSS2基因的MDCK细胞系。此外,红细胞凝集试验和IFA结果还显示,流感病毒可以在无外源胰酶存在的条件下在该细胞系中增殖,从而为流感细胞培养型病毒株的大规模生产奠定了基础。 展开更多

关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶2 逆转录病毒 MDCK细胞系 tmprss2

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跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2的纯化及类胰蛋白酶活性研究

2

作者 陈航 陈晓乐 《海峡药学》 2022年第4期118-120,共3页

目的纯化LNCaP细胞中TMRPSS2蛋白,测定其酶促反应米氏常数Km值。方法应用Protein A亲和层析柱纯化TMPRSS2,免疫蛋白印记法鉴定分子量,Graf it@软件计算酶促反应米氏常数Km。结果TMPRSS分子量为70 kD。米氏常数Km为686.65μM。结论Protei... 目的纯化LNCaP细胞中TMRPSS2蛋白,测定其酶促反应米氏常数Km值。方法应用Protein A亲和层析柱纯化TMPRSS2,免疫蛋白印记法鉴定分子量,Graf it@软件计算酶促反应米氏常数Km。结果TMPRSS分子量为70 kD。米氏常数Km为686.65μM。结论Protein A亲和柱可用于纯化LNCaP细胞中TMPRSS2。TMPRSS2具有类蛋白酶活性。 展开更多

关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶 tmprss2 类胰蛋白酶活性

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跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS3与遗传性耳聋 被引量：2

3

作者 葛圣雷 易彦 谢鼎华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期859-866,共8页

跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS3(transmembrane protease,serine3)属于TTSPs(typeⅡtransmembrane serine proteases)家族成员,在分子结构上,TMPRSS3具有典型的TTSPs结构域,如丝氨酸蛋白酶、LDLRA、SRCR等.TMPRSS3有不同的蛋白异构体,其中异构... 跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS3(transmembrane protease,serine3)属于TTSPs(typeⅡtransmembrane serine proteases)家族成员,在分子结构上,TMPRSS3具有典型的TTSPs结构域,如丝氨酸蛋白酶、LDLRA、SRCR等.TMPRSS3有不同的蛋白异构体,其中异构体A是体内最主要的存在形式,主要在内耳表达,亚细胞水平定位于内质网膜上,TMPRSS3基因缺陷是遗传性耳聋DFNB8/10的遗传基础,因此目前对TMPRSS3的功能研究主要集中在听觉系统方面,此外蛋白异构体D还可能是卵巢癌的生物学标志物.TMPRSS3是迄今为止发现的第一个基因突变能引起耳聋的蛋白酶,表明听觉通路上的某些关键调控因子可能作为它的生理学底物被水解激活,从而介导相应的信号转导途径,但它激活了哪些信号通道,目前尚不清楚.借鉴mCAP(mouse channel activating protease)的功能预测ENaC(epithelial sodium channel)可能是TMPRSS3的作用底物,推测TMPRSS3参与内耳Na+平衡调控,但仍有待于体内实验证实.当前酶学领域研究技术的革新发展,尤其酶降解组学的应用,为认识蛋白酶TMPRSS3的功能及其复杂的分子调控机制提供了新的捷径. 展开更多

关键词 tmprss3 Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶 内耳 底物 信号转导途径

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跨膜丝氨酸蛋白酶2与肺腺癌和肺鳞癌预后的关系 被引量：1

4

作者 邓剑雄 钟方炎 +1 位作者 顾伟国 邱峰 《南昌大学学报（医学版）》 2021年第4期35-39,共5页

目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系。方法使用Oncomine、GEPIA和UALCAN数据库分析TMPRSS2在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达水平和启动子的甲基化水平,并使用Kaplan-Meier plotter数据... 目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系。方法使用Oncomine、GEPIA和UALCAN数据库分析TMPRSS2在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达水平和启动子的甲基化水平,并使用Kaplan-Meier plotter数据库分析TMPRSS2表达水平对该类患者预后的影响。基于TIMER数据库分析TMPRSS2表达与免疫细胞浸润的关系及免疫浸润对预后的影响。结果在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中,相比正常肺组织TMPRSS2的表达量均显著降低(P<0.05),其启动子甲基化水平均出现显著增高(P<0.05)。肺腺癌中TMPRSS2的高表达有较好的预后(HR=0.49,95%CI 0.39~0.63;P=3.9×10-9),而在肺鳞状细胞癌中无相关性(HR=1.15,95%CI 0.89~1.48;P=0.28)。肺腺癌和肺鳞状细胞癌中TMPRSS2表达与多种免疫细胞浸润有关(P<0.05),B细胞和CD4+T细胞浸润水平与肺腺癌患者的预后相关(P<0.05)。结论TMPRSS2在肺腺癌和肺鳞状细胞癌组织中表达均显著下降,TMPRSS2的表达水平可能通过免疫细胞浸润影响肺腺癌患者的预后。 展开更多

关键词 肺腺癌 肺鳞状细胞癌 跨膜丝氨酸蛋白酶2 生物信息学 预后 免疫细胞浸润

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跨膜丝氨酸蛋白酶2-成红细胞特异性转化基因相关基因、成红细胞特异性转化基因变异体1及成红细胞特异性转化基因变异体4在前列腺癌中的表达及临床意义

5

作者 陈俊泳 韩耕宇 +2 位作者 褚靖 邓健 谢群 《实用医院临床杂志》 2022年第4期82-85,共4页

目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-成红细胞特异性转化基因相关基因(ERG)、TMPRSS2-成红细胞特异性转化基因变异体1(ETV1)、TMPRSS2-成红细胞特异性转化基因变异体4(ETV4)在前列腺癌中的表达及临床意义。方法2018年4月至2020年9月我... 目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-成红细胞特异性转化基因相关基因(ERG)、TMPRSS2-成红细胞特异性转化基因变异体1(ETV1)、TMPRSS2-成红细胞特异性转化基因变异体4(ETV4)在前列腺癌中的表达及临床意义。方法2018年4月至2020年9月我院收治的82例前列腺癌患者,采用免疫组化法检测癌组织及癌旁正常组织中TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4表达。分析上述因子表达与前列腺癌临床病理特征的关系及诊断前列腺癌的价值。结果前列腺癌组织中TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4阳性表达率均高于癌旁正常组织(P<0.05)。临床分期C+D、Gleason评分≥5分者TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4阳性表达率高于临床分期A+B、Gleason评分<5分(P<0.05)。RTMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4联合检测曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度分别为0.814、0.925、0.865,均高于各项指标单独检测(P<0.05)。结论TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4在前列腺癌患者中呈过度表达,通过联合检测上述因子对前列腺癌的诊断与鉴别诊断有良好的应用价值。 展开更多

关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶2 前列腺癌 成红细胞特异性转化基因相关基因 成红细胞特异性转化基因变异体1 成红细胞特异性转化基因变异体4

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Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4与肿瘤 被引量：2

6

作者 史忠诚 李钰 张贵寅 《国外医学（遗传学分册）》 CAS 2005年第3期152-155,共4页

Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)为Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶中的新成员,经蛋白结构分析及实验研究推测其与肿瘤及肿瘤转移关系密切,本文就TMPRSS4的结构与功能做一综述。

关键词 Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶 tmprss4 肿瘤 丝氨酸蛋白酶 肿瘤转移 跨膜 Ⅱ型 结构分析 实验研

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雄激素受体通过let-7c-5p/跨膜丝氨酸蛋白酶2通路促进非小细胞肺癌侵袭的机制

7

作者 杨艳 黄毅 余维巍 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第4期755-759,共5页

目的探讨雄激素受体(AR)在非小细胞肺癌(NSCLC)中促进肺癌细胞A549及H1533细胞侵袭的具体机制。方法通过在A549及H1533细胞中过表达或敲低AR,采用Transwell方法观察AR对A549及H1533细胞侵袭的影响;筛查NSCLC中与侵袭密切相关的基因,寻... 目的探讨雄激素受体(AR)在非小细胞肺癌(NSCLC)中促进肺癌细胞A549及H1533细胞侵袭的具体机制。方法通过在A549及H1533细胞中过表达或敲低AR,采用Transwell方法观察AR对A549及H1533细胞侵袭的影响;筛查NSCLC中与侵袭密切相关的基因,寻找可以被AR调控的下游基因,采用定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)来验证该靶基因与AR的调控关系,采用Transwell方法来验证其对细胞侵袭的影响;通过生信分析寻找靶基因跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的调控微小RNA(miRNA),采用qPCR和Western blot方法来验证该miRNA与TMPRSS2的调控关系,采用Transwell方法来验证其对细胞侵袭的影响;最后通过裸鼠在体成瘤实验观察上述基因对肿瘤细胞侵袭的影响,并采用t检验比较各组间差异。结果过表达AR增加了肺癌细胞(H1355-oeAR和A549-oeAR)的侵袭(0.75±0.08比1.84±0.25、0.54±0.04比1.39±0.30,t=36.360、5.362,P<0.05),敲低AR降低了肺癌细胞的侵袭(A549-shAR)(0.83±0.08比0.22±0.03、0.61±0.07比1.90±0.29,t=45.178,P<0.01)。采用生信分析预测及qPCR验证发现TMPRSS2表达受AR调控(0.55±0.04比1.67±0.37、0.46±0.04比1.67±0.29,t=23.152、43.228,P<0.01)。H1355-oeAR和A549-oeAR组TMPRSS2的表达(0.29±0.04比1.28±0.18、0.32±0.03比1.16±0.15,t=7.152、4.298,P<0.05)显著高于对照组。敲低TMPRSS2部分降低H1355-oeAR和A549-oeAR组细胞侵袭(0.78±0.05比0.25±0.01、0.82±0.06比0.36±0.01,t=6.358、14.298,P<0.05),敲低TMPRSS2还可部分降低H1355-oeAR和A549-oeAR中AR水平(2.25±0.44比1.10±0.14、2.32±0.53比1.15±0.23,t=8.258、12.538,P<0.05);通过生信分析及验证实验发现let-7c-5p可以抑制TMPRSS2表达(1.27±0.11比0.48±0.08、1.35±0.33比0.56±0.08,t=47.110,P<0.01),过表达let-7c-5p可以部分逆转过表达AR所致的H1355和A549细胞的侵袭(1.77±0.34比0.94±0.10、2.35±0.33比1.10±0.11,t=33.116、21.108,P<0.01)。也可以降低过表达AR所致的TMPRSS2蛋白表达(1.09±0.13比0.55±0.08、1.36±0.21比0.76±0.10,t=3.760、10.105,P<0.05);ChIP结果表明,let-7c-5p可以与H1355和A549细胞中TMPRSS23’启动子区域的AREs结合(0.23±0.02比1.32±0.20、0.34±0.03比1.10±0.10,t=7.110、5.175,P<0.05),双荧光素酶检测结果显示,let-7c-5p可以抑制野生型TMPRSS23’端非编码区(3’UTR)结构的荧光素酶表达,而不能抑制突变型TMPRSS23’UTR结构的荧光素酶表达(1.25±0.14比0.44±0.03、0.58±0.03比0.66±0.08,t=12.510,P<0.05;t=1.175,P>0.05);通过IVIS对裸鼠肿瘤进行评估,发现oeAR+luc组比Ctrl+luc组发生更多的肿瘤细胞侵袭(0.33±0.04比0.78±0.08,t=7.566,P<0.05),而oeAR+shTMPRSS2+luc组较oeAR+luc组侵袭降低(0.19±0.04比0.78±0.18,t=8.56,P<0.05)。结论AR可以通过改变let-7c-5p/TMPRSS2信号通路来促进肺癌细胞A549及H1533侵袭。 展开更多

关键词 雄激素受体 跨膜丝氨酸蛋白酶2 非小细胞肺癌

原文传递

Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4表达水平与肿瘤患者预后关系的Meta分析

8

作者 王艺辉 陈少兴 +1 位作者 林联拯 马贺 《中国医学装备》 2020年第11期34-38,共5页

目的:探讨Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)和肿瘤患者预后的关系。方法:采用计算机检索的方法,检索考克兰图书馆(TheCochraneLibrary)、荷兰医学数据库(EMBASE)、美国国家医学图书网(PubMed)、中国知网及万方等数据库从建库到2019年10... 目的:探讨Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)和肿瘤患者预后的关系。方法:采用计算机检索的方法,检索考克兰图书馆(TheCochraneLibrary)、荷兰医学数据库(EMBASE)、美国国家医学图书网(PubMed)、中国知网及万方等数据库从建库到2019年10月含有关于TMPRSS4表达水平与肿瘤预后相关文献,由两位研究员进行文献筛选及阅读并收集相关资料。采用StataSE12.0软件对数据进行Meta分析。结果:共计纳入13篇文献,涉及1990例患者。Meta分析中TMPRSS4高表达可使肿瘤患者总生存时间缩短(HR=2.09,95%CI:1.56~2.81;P<0.001);亚组分析中TMPRSS4高表达可使非消化道肿瘤的总生存时间缩短,对消化道肿瘤的总生存时间无影响,非消化道肿瘤(HR=2.31,95%CI:1.71~3.10;P<0.001),消化道肿瘤(HR=1.59,95%CI:0.73~3.48;P>0.05)。TMPRSS4高表达可使女性肿瘤和非女性肿瘤的总生存时间均缩短,女性肿瘤(HR=2.41,95%CI:1.29~4.52;P<0.05),非女性肿瘤(HR=2.00,95%CI:1.38~2.91;P<0.001)。TMPRSS4高表达可使肿瘤患者的无病生存时间缩短(HR=2.52,95%CI:1.48~4.26;P<0.001),TMPRSS4高表达会缩短肿瘤患者的无复发生存时间(HR=2.00,95%CI:1.52~2.64;P<0.001)。结论:TMPRSS4高表达可能是影响肿瘤预后的一个不利因素。 展开更多

关键词 Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(tmprss4) 肿瘤 预后 META分析

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TMPRSS2-ERG融合基因在前列腺癌中的研究进展

9

作者 钟远峰 王兴枝子 黄敏玉 《中国现代医生》 2024年第9期110-113,共4页

在前列腺癌中,跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)-E26转化特异性相关基因[E26 transformation-specific(ETS)-related gene,ERG]融合基因由雄激素调控基因TMPRSS2(染色体21q22.2)与ERG(染色体21q22.3)融合形... 在前列腺癌中,跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)-E26转化特异性相关基因[E26 transformation-specific(ETS)-related gene,ERG]融合基因由雄激素调控基因TMPRSS2(染色体21q22.2)与ERG(染色体21q22.3)融合形成。TMPRSS2-ERG可导致ERG过表达,过表达的ERG在多种因素协同作用下可引起相关靶基因表达并激活下游信号通路,从而参与前列腺癌的发生、发展过程。TMPRSS2-ERG有望成为前列腺癌的有效治疗靶点。本文对TMPRSS2-ERG在前列腺癌中的作用机制及其在前列腺癌诊疗中的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 前列腺癌 跨膜丝氨酸蛋白酶2 E26转化特异性相关基因 融合基因 作用机制 临床治疗

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新型冠状病毒感染相关蛋白ACE2和TMPRSS2在人结膜组织中的表达及意义

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作者 刘辉 李元朋 +6 位作者 杨菁茹 任雨洁 王伟伟 蔡凤梅 夏益敏 王佳 王卉芳 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期753-757,共5页

目的探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病毒感染相关蛋白血管紧张素转换酶2(ACE2)和跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在人眼部结膜组织中的表达及其临床意义。方法收集2019年6月至2020年6月于西安市人民医院眼科手术切除的人体结膜组织标本50例... 目的探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病毒感染相关蛋白血管紧张素转换酶2(ACE2)和跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在人眼部结膜组织中的表达及其临床意义。方法收集2019年6月至2020年6月于西安市人民医院眼科手术切除的人体结膜组织标本50例,包括正常结膜组织10例、结膜乳头状瘤组织15例、结膜色素痣组织15例和结膜囊肿10例,并收集10例因外伤摘除眼球的角膜组织作为对照。采用免疫组织化学法对不同眼表组织标本中ACE2和TMPRSS2阳性表达进行定位,并对其表达强度进行比较。结果ACE2和TMPRSS2均表达于正常结膜上皮细胞、结膜乳头状瘤上皮细胞、结膜色素痣上皮细胞和结膜囊肿囊壁细胞中,ACE2主要表达于结膜上皮的表层细胞和中间层细胞,在基底层细胞和杯状细胞不表达,TMPRSS2表达于全层细胞,二者在结膜组织中的阳性表达率均为100%;ACE2和TMPRSS2在正常结膜组织、结膜乳头状瘤、结膜色素痣和结膜囊肿中的表达强度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);ACE2和TMPRSS2在角膜组织中均为弱阳性表达,二者在不同结膜组织中中度阳性和强阳性表达例数增多。ACE2和TMPRSS2在正常结膜组织、结膜乳头状瘤、结膜色素痣和结膜囊肿中不同强度等级表达例数与角膜组织比较,差异均有统计学意义(ACE2:Z=-3.473、-4.183、-3.970、-3.873,均P<0.01;TMPRSS2:Z=-4.119、-4.472、-4.443、-4.147,均P<0.001)。结论COVID-19病毒感染相关受体蛋白ACE2和TMPRSS2表达于眼表结膜组织中,为COVID-19经眼表的感染途径提供了组织学证据。 展开更多

关键词 新型冠状病毒肺炎 结膜 血管紧张素转换酶2 跨膜丝氨酸蛋白酶2

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以跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)为受体挖掘治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)潜在单体化合物 被引量：3

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作者 徐昕怡 曹学帅 +3 位作者 龙茜 刘乐平 唐吉伟 顾晖 《药物评价研究》 CAS 2020年第5期813-821,共9页

目的探讨以跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)为受体的单体化合物治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法借助BindingDB数据库检索作用于TMPRSS2受体的单体化合物。通过UniProt、GeneCards等数据库查询单体化合物作用靶点对应的基因... 目的探讨以跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)为受体的单体化合物治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法借助BindingDB数据库检索作用于TMPRSS2受体的单体化合物。通过UniProt、GeneCards等数据库查询单体化合物作用靶点对应的基因名,进而运用Cytoscape 3.2.1构建化合物-靶点(基因)网络,通过WebGestalt数据库进行GO功能注释和Pathway通路分析,预测其作用机制。运用SWISS-MODEL进行TMPRSS2蛋白质三级结构预测,利用Auto Dock软件进行化合物与TMPRSS2受体的分子对接。结果通过BindingDB数据库发现3个作用于TMPRSS2的单体化合物:(2S)-1-[((2R)-2-(苄基磺酰基氨基)-5-(二氨基亚甲基氨基)戊酰基]-N-[(4-氨基甲酰基苯基)甲基]吡咯烷-2-羧酰胺(CID-46899577,分子式C26H36N8O4S)、4-[[[((5R)-5-(苄磺酰基氨基)-8-(二氨基甲基亚氨基)氨基-4-氧代辛烷-3-基]氨基]甲基]苯羧酰亚胺(CID-56677007,分子式C24H35N7O3S)、4-[[[((4S,6R)-6-(苄基磺酰基氨基)-9-(二氨基亚甲基氨基)-5-氧肟酮-4-基]氨基]甲基]苯羧酰亚胺(CID-56663319,分子式C25H37N7O3S);单体化合物-靶点网络中靶点58个,GO功能富集分析得到GO条目380个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目310个,细胞组成(CC)条目14个,分子功能(MF)条目56个。KEGG通路富集筛选得到26条信号通路,涉及干扰素-γ信号传导途径、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、白介素信号通路等。分子对接结果显示,TMPRSS2与C26H36N8O4S、C24H35N7O3S及甲磺酸卡莫司他都能自发结合,且2种化合物与甲磺酸卡莫司他结合能相近。结论单体化合物C26H36N8O4S、C24H35N7O3S与TMPRSS2能自发结合,作用于F2、PLG、PLAU、PLAT、HSP90AA1、XIAP、AKT1、AKT2、AKT3等靶点调节多条信号通路,有可能对COVID-19有治疗作用。 展开更多

关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶2 新型冠状病毒肺炎 丝氨酸蛋白酶抑制剂 网络药理学 分子对接 C26H36N8O4S C24H35N7O3S 甲磺酸卡莫司他

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新型冠状病毒相关TMPRSS2蛋白结构特征和抗原表位分析 被引量：5

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作者 戴姿薇 唐标 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2021年第1期58-68,共11页

采用生物信息学方法分析预测新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)跨膜蛋白酶丝氨酸2(transmembrane protease serine 2,TMPRSS2)的理化特性、结构特征和抗原表位,为抗SARS-CoV-2药物研发提供参... 采用生物信息学方法分析预测新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)跨膜蛋白酶丝氨酸2(transmembrane protease serine 2,TMPRSS2)的理化特性、结构特征和抗原表位,为抗SARS-CoV-2药物研发提供参考。利用ProtParam、ProtScale分析预测TMPRSS2蛋白酶的理化特性;利用COILS Server、SignalP、TMPred、TargetP Server、NetPhos Server、NetNGlyc Server服务器对TMPRSS2蛋白酶结构进行功能结构的分析预测;利用SOPMA、Pfam、SWISS MODEL分析预测TMPRSS2蛋白酶高级结构;利用IEBD分析预测TMPRSS2蛋白酶B细胞、T细胞表位。TMPRSS2蛋白酶氨基酸组成数为492个,其中丝氨酸占比最高;亲水性较高,含10个跨膜螺旋区;具有4个磷酸化位点,3个糖基化修饰点;二级结构中无规则卷曲占据主导地位,三级结构能与已知的5ce.1.1.A(SMTL ID)模型同源建模;存在13个潜在的B细胞表位,12个得分较高的T细胞表位。 展开更多

关键词 新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 SARS-CoV-2) 跨膜蛋白酶丝氨酸2(transmembrane protease serine 2 tmprss2) 生物信息学 序列分析 抗原表位筛选

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慢病毒介导跨膜丝氨酸蛋白酶2∶ERG融合基因短发卡RNA靶向抑制前列腺癌细胞生长 被引量：4

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作者 梁辉 张圣平 +3 位作者 张建文 王宏亮 孙睿 植凡 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1300-1302,共3页

目的 观察靶向抑制跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）：ERG融合基因后对前列腺癌细胞生长的影响.方法 设计特异性作用于TMPRSS2∶ ERG融合基因的短发卡RNA （shRNA）,并进行慢病毒包装后感染前列腺癌细胞,进一步通过噻唑蓝（MTT）实验,以及... 目的 观察靶向抑制跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）：ERG融合基因后对前列腺癌细胞生长的影响.方法 设计特异性作用于TMPRSS2∶ ERG融合基因的短发卡RNA （shRNA）,并进行慢病毒包装后感染前列腺癌细胞,进一步通过噻唑蓝（MTT）实验,以及流式细胞术研究ERG基因沉默后前列腺癌细胞增殖的变化.结果 成功构建并筛选到高效特异性的shRNA1序列,在mRNA水平的靶向抑制效率为79％,蛋白水平的靶向抑制率为93％;靶向抑制TMPRSS2∶ ERG融合基因表达96 h后,前列腺细胞生长速度降低了33.34％;细胞周期分析发现ERG基因沉默后的VCaP细胞S期和G2/M期细胞比例分别由10.0％降至6.6％,29.1％下降到17.25％,而G0/G1期细胞比例由51.7％升高到71.2％.结论 靶向抑制TMPRSS2∶ ERG融合基因的表达可以显著抑制前列腺癌细胞的生长. 展开更多

关键词 前列腺癌 跨膜丝氨酸蛋白酶2∶ERG融合基因 RNA干扰 慢病毒

原文传递

前列腺癌中跨膜丝氨酸蛋白酶2-E26转录因子融合基因和相关蛋白的表达及其意义 被引量：3

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作者 赵海宝 吴红霞 《肿瘤研究与临床》 CAS 2019年第7期479-483,共5页

目的研究前列腺癌组织中跨膜丝氨酸蛋白酶2-E26转录因子(TMPRSS2-ETS)融合基因及ETS相关基因(ERG)、ETS变异体1(ETV1)、同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)、雄激素受体(AR)蛋白表达情况。方法收集大同市第三人民医院2016年12月至2017... 目的研究前列腺癌组织中跨膜丝氨酸蛋白酶2-E26转录因子(TMPRSS2-ETS)融合基因及ETS相关基因(ERG)、ETS变异体1(ETV1)、同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)、雄激素受体(AR)蛋白表达情况。方法收集大同市第三人民医院2016年12月至2017年10月前列腺癌患者石蜡标本50例,以同期前列腺增生患者标本30例作为对照。采用荧光原位杂交检测TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1以及TMPRSS2-ETV4基因融合状况;免疫组织化学法检测ERG、ETV1、PTEN、AR蛋白的表达。结果前列腺癌组织中TMPRSS2-ETS融合基因阳性率为70%(35/50),前列腺增生组织中未检测到TMPRSS2-ETS融合基因。TMPRSS2-ETS融合基因的表达在不同年龄、血清前列腺特异性抗原(PSA)值及是否远处转移前列腺癌患者组间的差异均无统计学意义(均P>0.05),而Gleason评分>7分的前列腺癌患者TMPRSS2-ETS融合基因的表达高于≤7分的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ERG及ETV1在前列腺癌组织中的表达高于前列腺增生组织,差异均有统计学意义(均P<0.05);PTEN在前列腺癌组织中的表达低于前列腺增生组织,差异有统计学意义(P<0.05);AR在前列腺癌组织及前列腺增生组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。TMPRSS2-ETS融合基因与ERG在前列腺癌中的表达呈正相关(r=0.302,P<0.05);TMPRSS2-ETS融合基因与ETV1、PTEN、AR在前列腺癌中的表达均无相关性(均P>0.05)。结论TMPRSS2-ETS融合基因和ERG、ETV1蛋白在前列腺癌中表达上调,可能参与了肿瘤的发生、发展,检测TMPRSS2-ETS融合基因和ERG蛋白有助于前列腺癌的诊断。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 跨膜丝氨酸蛋白酶2 E26转录因子 基因融合 荧光原位杂交

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跨膜丝氨酸蛋白酶2在病毒感染中的作用及其抑制剂的研究进展 被引量：2

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作者 张黎(综述) 王佑春 黄维金(审校) 《微生物学免疫学进展》 2020年第3期66-72,共7页

跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine proteinase 2,TMPRSS2)是细胞膜表面丝氨酸蛋白酶家族的一员,它具有介导冠状病毒棘突蛋白水解的作用,为冠状病毒感染宿主必需的宿主蛋白。现就近年来TMPRSS2在分子生物学功能方面的研究;TMPRSS... 跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine proteinase 2,TMPRSS2)是细胞膜表面丝氨酸蛋白酶家族的一员,它具有介导冠状病毒棘突蛋白水解的作用,为冠状病毒感染宿主必需的宿主蛋白。现就近年来TMPRSS2在分子生物学功能方面的研究;TMPRSS2在呼吸系统病毒感染,尤其是在冠状病毒感染中的作用,以及以TMPRSS2为靶点的药物研究进展作一概述,旨在对冠状病毒特别是新冠病毒的预防和治疗,提供新的靶点和方向。 展开更多

关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶2 流感病毒 冠状病毒 抑制剂

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甲状腺结节性病变中组织因子途径抑制剂-2、跨膜丝氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶-1蛋白的表达及意义

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作者 原志庆 李娜 +3 位作者 贺国洋 王霞 杨慧林 郑丽丽 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期515-516,共2页

组织因子途径抑制剂-2（tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2）可与基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）及MMPs前体结合,抑制MMPs及跨膜丝氨酸蛋白酶（transmembrane protease serine 4,TMPRSS4）等对细胞外基质的... 组织因子途径抑制剂-2（tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2）可与基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）及MMPs前体结合,抑制MMPs及跨膜丝氨酸蛋白酶（transmembrane protease serine 4,TMPRSS4）等对细胞外基质的破坏作用[1-2].本研究采用免疫组化（IHC）方法检测结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡状腺瘤和甲状腺乳头状癌中TFPI-2、TMPRSS4和MMP-1的表达及意义. 展开更多

关键词 组织因子途径抑制剂-2 基质金属蛋白酶-1 丝氨酸蛋白酶 甲状腺结节性病变 跨膜 PROTEASE 甲状腺滤泡状腺瘤 结节性甲状腺肿

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TMPRSS2重组蛋白阻断SARS-CoV-2假病毒的感染

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作者 潘婷 彭倩文 +1 位作者 杜艳芸 王晨辉 《生命科学研究》 CAS CSCD 2022年第4期283-290,共8页

为了探究Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(type Ⅱ transmembrane serine protease,TMPRSS2)重组蛋白阻断严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)侵染宿主的能力,在体外构建假病毒感染细胞的体... 为了探究Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(type Ⅱ transmembrane serine protease,TMPRSS2)重组蛋白阻断严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)侵染宿主的能力,在体外构建假病毒感染细胞的体系,使用SARS-CoV-2 S(spike glycoprotein)蛋白携带水疱性口炎病毒(ΔG-VSV/荧光素酶)感染细胞,利用293F细胞体外纯化酶活及自身剪切位点突变的TMPRSS2重组蛋白,发现纯化的剪切位点R255Q和酶活位点S441A双突变的TMPRSS2重组蛋白,能够有效降低S蛋白与宿主细胞表面TMPRSS2的结合,进而阻断SARS-CoV-2假病毒对Calu3肺癌细胞系的感染。实验结果表明,使用突变的TMPRSS2重组蛋白竞争性结合病毒的刺突蛋白S,同抑制TMPRSS2蛋白酶的活性一样,都能阻断S蛋白的切割活化,抑制病毒与宿主细胞的膜融合,最终达到阻止病毒入侵的目的,这为阻断SARS-CoV-2感染提供了新的潜在靶点和思路。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(tmprss2) 假病毒感染 重组蛋白

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跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2在SARS-Cov-2感染人体中的作用

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作者 王志远 肖易倍 陆美玲 《药物生物技术》 CAS 2022年第3期284-290,共7页

跨膜丝氨酸蛋白酶2(Transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)是一种雄激素依赖性表达的丝氨酸蛋白酶,以往报道其在肿瘤转移侵袭和病毒感染中具有重要的病理学功能。严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome co... 跨膜丝氨酸蛋白酶2(Transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)是一种雄激素依赖性表达的丝氨酸蛋白酶,以往报道其在肿瘤转移侵袭和病毒感染中具有重要的病理学功能。严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome corona virus 2,SARS-CoV-2)进入宿主细胞是其传播和致病的前提,TMPRSS2可通过激活冠状病毒刺突糖蛋白从而介导病毒侵入宿主细胞,因此被认为是干预冠状病毒感染的潜在靶点。现有报告的TMPRSS2的有效抑制剂都是针对丝氨酸蛋白酶家族的广谱性药物,因此新型TMPRSS2特异性抑制分子亟需被挖掘和开发。文章综述了TMPRSS2的生物学特性和病理学功能研究概况,重点对TMPRSS2在人致病性冠状病毒感染中的普遍性功能以及TMPRSS2抑制剂的最新研究动态作一概述,以此强调靶向TMPRSS2有希望成为一种预防和限制新型冠状病毒早期感染和传播的新策略。 展开更多

关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶2 冠状病毒SARS-Cov-2 抑制剂

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前列腺癌中TMPRSS2-ETS基因融合及机制研究进展 被引量：3

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作者 郭晓强 桂耀庭 蔡志明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期117-122,共6页

超过50%的前列腺癌中存在跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)和E26(ETS)转录因子间的基因融合,其中TMPRSS2-ERG最为常见。TMPRSS2-ERG基因融合造成的ERG过表达参与了前列腺的癌变。雄激素受体结合和遗传毒性胁迫共同诱导了染色体的靠近和TMPRSS... 超过50%的前列腺癌中存在跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)和E26(ETS)转录因子间的基因融合,其中TMPRSS2-ERG最为常见。TMPRSS2-ERG基因融合造成的ERG过表达参与了前列腺的癌变。雄激素受体结合和遗传毒性胁迫共同诱导了染色体的靠近和TMPRSS2-ETS的基因融合。TMPRSS2-ERG基因融合可作为前列腺癌诊断的一种生物标志物,并可通过病人尿液检测来实现。文章对TMPRSS2-ETS基因融合的特征、融合及致癌及临床应用进行了综述。 展开更多

关键词 前列腺癌 基因融合 跨膜丝氨酸蛋白酶2 E26 融合机制

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TMPRSS2:ERG融合基因与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性研究 被引量：1

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作者 毛易捷 史伟峰 李青 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第1期44-45,48,共3页

目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因和ETS转录因子家族成员相关基因(ERG)融合基因与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性。方法采用荧光原位杂交技术对24例前列腺癌(PCa)患者组织标本进行TMPRSS2:ERG融合基因检测,评价TMPRSS2:ERG与... 目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因和ETS转录因子家族成员相关基因(ERG)融合基因与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性。方法采用荧光原位杂交技术对24例前列腺癌(PCa)患者组织标本进行TMPRSS2:ERG融合基因检测,评价TMPRSS2:ERG与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性。结果 6例PCa原发癌患者中,4例检出TMPRSS2:ERG融合基因;18例转移性PCa患者中,14例检出该融合基因。外周淋巴结组织标本TMPRSS2:ERG融合基因阳性率为100%(8/8)。14例融合基因阳性转移性PCa患者原发病灶和转移病灶具有一致的融合基因情况。结论 TMPRSS2:ERG融合基因具有较高的PCa诊断特异性和敏感性;应对该融合基因阳性患者尽早采取综合、有效的治疗措施,从而延长患者生存期。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 融合基因 原位杂交 荧光 ETS转录因子相关基因 跨膜丝氨酸蛋白酶2

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