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硫酸软骨素酶高产菌株的筛选、鉴定和发酵培养条件的研究 被引量：6
1
作者 刘万顺 付静芸 +2 位作者 常菁 杨艳 韩宝芹 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期35-39,53,共6页
通过透明圈法从土样中初筛到2株产硫酸软骨素酶能力较高的菌株,经复筛,28号菌株产酶能力更强,对该菌株的形态特征和生理生化特性考察,初步鉴定为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。该菌株的发酵产酶条件研究表明,其产酶最... 通过透明圈法从土样中初筛到2株产硫酸软骨素酶能力较高的菌株,经复筛,28号菌株产酶能力更强,对该菌株的形态特征和生理生化特性考察,初步鉴定为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。该菌株的发酵产酶条件研究表明,其产酶最适培养基组分为(%,w/v):酵母粉1.0,硫酸软骨素0.5,NaCl 0.5,KH2PO40.03,MgSO4.7H2O0.5,起始pH=8.5,其余为水。其最适产酶条件为:250mL三角瓶装液量40mL,1%(v/v)接种量,25℃,100r/min培养36h。在最适产酶培养条件下,菌株发酵液中硫酸软骨素酶的活力可达1.2U/mL。本研究筛选出产硫酸软骨素酶高的菌株,并为发酵法制备硫酸软骨素酶提供一定的实验依据。 展开更多
关键词 硫酸软骨素酶 菌株鉴定 少动鞘氨醇单胞菌 筛选 发酵条件
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软骨素酶ABC酶解高效液相色谱法测定鱼翅中的透明质酸 被引量：5
2
作者 鲍伦军 杨建成 +2 位作者 何振华 杨晓云 梁伟大 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期557-559,共3页
建立了一种测定鲨鱼翅中透明质酸的酶解 高效液相色谱方法。在37℃,0 2mol/LTris HCl缓冲溶液中,鱼翅中的透明质酸被硫酸软骨素酶ABC酶解成透明质酸二糖。色谱条件为:ZORBAX糖分析柱(4 6mmi d ×250mm,5μm)色谱柱;紫外检测波长226... 建立了一种测定鲨鱼翅中透明质酸的酶解 高效液相色谱方法。在37℃,0 2mol/LTris HCl缓冲溶液中,鱼翅中的透明质酸被硫酸软骨素酶ABC酶解成透明质酸二糖。色谱条件为:ZORBAX糖分析柱(4 6mmi d ×250mm,5μm)色谱柱;紫外检测波长226nm;流动相为乙腈 0 5%磷酸(体积比为2∶98),流速1mL/min;进样量10μL。透明质酸二糖的线性范围为25g/L～600g/L。将此法应用到鱼翅的实际样品检测中,取得了良好的结果,透明质酸在鱼翅样品中的质量分数为0 86%～1 96%。 展开更多
关键词 测定 高效液相色谱法 软骨素酶 酶解 透明质酸 鱼翅 高分子多糖
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硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球的制备及其体外性质 被引量：7
3
作者 张德盛 钟德君 +1 位作者 宋跃明 吴江 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第32期6247-6250,共4页
背景:硫酸软骨素酶ABC能够分解脊髓损伤局部持续产生的硫酸软骨素蛋白多糖,从而促进轴突的生长,但该酶性质不稳定,需要多次局部用药。目的:制备硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球,观察其体外释药特性。设计、时间及地点:... 背景:硫酸软骨素酶ABC能够分解脊髓损伤局部持续产生的硫酸软骨素蛋白多糖,从而促进轴突的生长,但该酶性质不稳定,需要多次局部用药。目的:制备硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球,观察其体外释药特性。设计、时间及地点:重复测量设计,于2006-03/2007-01在中国科学院成都有机所和四川大学华西医学中心药理实验室完成。材料:聚乳酸-聚乙醇酸共聚物、硫酸软骨素酶ABC、CH2Cl2、硫酸软骨素B。方法:复乳法制备硫酸软骨素酶ABC缓释微球,并以生理盐水为体外释药介质。主要观察指标:扫描电镜下观察硫酸软骨素酶ABC缓释微球的形态。应用Malvern激光粒度分布测试仪测定其粒径分布并自动计算微球的平均粒径和径距。采用酶解分光光度测定硫酸软骨素酶ABC含量,并计算载药量与包封率。于0.5,1,1.5,2,3,4,6,8,10,12,14,16,18,21d取样,绘制体外释药曲线。结果:硫酸软骨素酶ABC缓释微球形态均匀,其平均粒径5.538μm,径距1.479,呈正态分布。平均载药量(15.55±0.90)×10-3%,平均包封率(53.88±1.45)%,硫酸软骨素酶ABC微球在3周内的体外累积释药分数为0.8514,释药平稳,其最佳体外释药拟合方程为Weibull方程:lnln(1/1-Y)=0.7396lnX-1.617,R2=0.9933。结论:所制备的硫酸软骨素酶ABC微球形态均匀,粒径分布窄,再分散性好,3周内能维持有效的药物浓度。 展开更多
关键词 硫酸软骨素酶ABC 聚乳酸-聚乙醇酸共聚物 缓释 微球 生物材料
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硫酸软骨素酶产生菌的筛选及酶的分离纯化 被引量：9
4
作者 阎浩林 何汉洲 +1 位作者 蔡苏兰 王琦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期79-82,共4页
利用平板快速筛选法 ,从鱼腹中筛选到一株产生硫酸软骨素酶的细菌YH31 1 ,通过生物特性和生化反应试验考察 ,初步鉴定为温和气单胞菌 (Aeromonassobria)。培养至 36h时 ,该菌株产酶达到高峰期 ,培养液的酶活力达0 9U mL。利用超声波破... 利用平板快速筛选法 ,从鱼腹中筛选到一株产生硫酸软骨素酶的细菌YH31 1 ,通过生物特性和生化反应试验考察 ,初步鉴定为温和气单胞菌 (Aeromonassobria)。培养至 36h时 ,该菌株产酶达到高峰期 ,培养液的酶活力达0 9U mL。利用超声波破碎菌体细胞 ,分别测定培养液和菌体细胞的酶活力 ,发现培养液的酶活力要远远大于菌体细胞的酶活力 ,显示该酶为分泌型表达 ,属于胞外酶。发酵液经离心后 ,上清液用硫酸铵分级沉淀 ,再分别经过CM Cellulose、QAE sephadexA5 0和SephadexG 1 5 0层析柱进行逐级分纯 ,并跟踪酶活 ,最后获得硫酸软骨素酶。SDS PAGE检测为单一条带 ,其分子量约为 80kD。 展开更多
关键词 硫酸软骨素 硫酸软骨素酶 温和气单胞菌 胞外酶
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肝素黄杆菌硫酸软骨素酶AC的高效重组表达体系构建及其酶学性质研究 被引量：4
5
作者 吴敬君 李晔 +2 位作者 张翀 李梅 邢新会 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期127-134,共8页
为实现硫酸软骨素酶AC(chondroitinase AC,ChonAC)在大肠杆菌中高效表达,通过PCR方法从肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)中扩增得到ChonAC基因cslA,采用融合蛋白技术构建麦芽糖结合蛋白(maltose-bindingprotein,MBP)与ChonAC的融合表... 为实现硫酸软骨素酶AC(chondroitinase AC,ChonAC)在大肠杆菌中高效表达,通过PCR方法从肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)中扩增得到ChonAC基因cslA,采用融合蛋白技术构建麦芽糖结合蛋白(maltose-bindingprotein,MBP)与ChonAC的融合表达载体(MBP-ChonAC),并在低温(15℃)条件下实现MBP-ChonAC的可溶活性表达,通过MBPTrap HP可实现一步纯化,使纯度可达95%以上,酶比活力可达94.1IU/mg融合蛋白(即相当于143.8IU/mgChonAC蛋白当量)。对MBP-ChonAC的酶学研究发现,其最佳催化pH值为7.5～8.0,最佳Ca2+浓度为20mmol/L,最适NaCl浓度为50mmol/L,最佳作用温度为20～35℃。MBP-ChonAC具有较好的热稳定性,在30℃时其半衰期可达8.3h。同时对其以硫酸软骨素A为底物的动力学常数测定发现,MBP-ChonAC相比ChonAC其Km稍有增大而催化常数kcat稍有降低,但是差别不大,表明MBP的融合没有对ChonAC的催化能力造成影响。通过宿主优化、诱导浓度优化及培养基优化进一步提高了MBP-ChonAC的表达量,其摇瓶培养酶活力就可达10800.5IU/L。 展开更多
关键词 亲和纯化 硫酸软骨素酶AC 酶学性质 表达量优化 麦芽糖结合蛋白 重组表达
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硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖与胶质纤维酸性蛋白表达的影响 被引量：6
6
作者 谢群 林扬元 陈建明 《新乡医学院学报》 CAS 2010年第5期436-440,共5页
目的探讨硫酸软骨素酶ABC对严重脊髓损伤(SCI)大鼠硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法制作大鼠脊髓横断伤模型,60只大鼠随机分为对照组10只、损伤组25只和治疗组25只。治疗组给予硫酸软骨素酶ABC髓鞘... 目的探讨硫酸软骨素酶ABC对严重脊髓损伤(SCI)大鼠硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法制作大鼠脊髓横断伤模型,60只大鼠随机分为对照组10只、损伤组25只和治疗组25只。治疗组给予硫酸软骨素酶ABC髓鞘浸润治疗。用免疫荧光组织化学观察脊髓CSPGs的表达;用免疫荧光组织化学及Western-blot方法观察脊髓GFAP的表达。结果 SCI后星形胶质细胞明显活化增殖,CSPGs和GFAP的表达明显增加(P<0.05);治疗组脊髓CSPGs和GFAP的表达均较损伤组减少,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs,改善SCI区的微环境,改善GFAP蛋白的表达,是修复SCI,促进神经再生的机制之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 硫酸软骨素酶ABC 硫酸软骨素蛋白多糖 胶质纤维酸性蛋白
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硫酸软骨素酶缓解视网膜变性大鼠光感受器细胞凋亡 被引量：3
7
作者 黄玉苗 高朋芬 +1 位作者 胥亚男 杨丽霞 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期19-23,共5页
为建立RP动物模型,经玻璃体腔注射ChABC酶,免疫荧光法观察CSPGs的表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测多功能蛋白聚糖(Versican)mRNA的表达,检测光感受器凋亡情况,以探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对碘酸钠诱导的视网膜变性大鼠光感受... 为建立RP动物模型,经玻璃体腔注射ChABC酶,免疫荧光法观察CSPGs的表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测多功能蛋白聚糖(Versican)mRNA的表达,检测光感受器凋亡情况,以探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对碘酸钠诱导的视网膜变性大鼠光感受器细胞凋亡的影响。结果表明:正常组CSPGs于脉络膜、内核层、节细胞层弱阳性表达,造模4周后CSPGs扩增到外核、外丛状层,各层荧光明显增强,而同期ChABC酶治疗组CSPGs在各层表达明显减弱;Versican mRNA表达与此一致,正常对照组、变性对照组、PBS组、治疗组Versican mRNA灰度比分别为0.18±0.02、0.92±0.03、0.98±0.06和0.30±0.01,治疗组明显低于变性组,差异极显著(P<0.01);各组光感受器凋亡率分别为(7.33±1.03)%、(40.0±2.37)%、(41.83±2.32)%、(35.2+1.94)%,治疗组显著低于变性组,差异极显著(P<0.01)。证明ChABC酶能通过降解变性大鼠视网膜异常沉积的CSPGs,抑制光感受器细胞的凋亡,从而促进损伤网膜的修复。 展开更多
关键词 硫酸软骨素酶ABC 硫酸软骨素蛋白多糖 视网膜变性 大鼠
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硫酸软骨素酶ABC对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝和胶质纤维酸性蛋白的影响 被引量：3
8
作者 陈德纯 任先军 +1 位作者 唐勇 蒋涛 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2007年第5期380-383,I0004,共5页
目的:探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝200(NF200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响。方法:SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)和ChABC治疗组(C组),每组24只。A组仅打开椎板及置管,不... 目的:探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝200(NF200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响。方法:SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)和ChABC治疗组(C组),每组24只。A组仅打开椎板及置管,不损伤脊髓,不给药;C组和B组均采用Allen′s法制作大鼠T10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天1次连续1周蛛网膜下腔注射ChABC(6μl/次)和等量生理盐水。术后1d、1周、2周和4周每组各处死6只大鼠,B组和C组以损伤区为中心、A组在相应部位切取1cm长的脊髓组织,以HE染色观察脊髓组织形态变化,应用免疫组化方法检测脊髓组织中NF200和GFAP的变化。结果:HE染色示A组脊髓无胶质细胞增生和胶质瘢痕形成;B、C组脊髓损伤区有胶质细胞增生和胶质瘢痕,C组明显少于B组。A组术后1d、1周、2周和4周时NF200阳性细胞数及灰度值和GFAP染色阳性面积无差异,1、2、4周时B、C组脊髓损伤区NF200染色阳性细胞数及灰度值和GFAP染色阳性面积均较A组显著增加(P<0.05或P<0.01),1d和1周时C组NF200染色阳性细胞数及灰度值与B组比较无显著性差异,2周和4周时C组明显高于B组(P<0.05);1d、1周和4周时C组GFAP染色阳性面积与B组无显著性差异,2周时C组显著小于B组(P<0.05)。结论:ChABC能提高大鼠急性脊髓损伤后神经细胞内NF200的表达并抑制GFAP的表达,进而促进神经细胞的修复,抑制胶质细胞的增生和胶质瘢痕的形成,对脊髓损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 硫酸软骨素酶ABC 胶质纤维酸性蛋白 神经中丝 大鼠
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骨髓间充质干细胞与硫酸软骨素酶ABC联合移植对大鼠脊髓损伤的修复作用及其机制 被引量：2
9
作者 文远超 余云湖 +4 位作者 王波 冉启山 朱涛 付晓红 杨开华 《山东医药》 CAS 2018年第11期13-17,共5页
目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)与硫酸软骨素酶ABC(ChABC)联合移植对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制。方法 80只脊髓亚急性损伤大鼠随机分为4组各20只。损伤后第6天,A组先后移植2.0×10~6/μL的原代BMSCs细胞悬液、1 U/mL的... 目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)与硫酸软骨素酶ABC(ChABC)联合移植对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制。方法 80只脊髓亚急性损伤大鼠随机分为4组各20只。损伤后第6天,A组先后移植2.0×10~6/μL的原代BMSCs细胞悬液、1 U/mL的ChABC各20μL,B组予等量BMSCs,C组予等量ChABC,D组予等量PBS。比较各组运动功能评分(BBB评分)、脊髓损伤区面积及后肢体感诱发电位(SEP)、经颅磁刺激运动诱发电位(MEP)潜伏期和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、生长相关蛋白-43(GAP-43)、脑源性神经生长因子(BDNF)阳性细胞百分比。结果与D组比较,其余3组制模后第1天BBB评分降低,第14、28天BBB评分升高;与A组比较,B、C组BBB评分降低(P均<0.05)。与同组移植前比较,其余3组SEP、MEP潜伏期短;与A组比较,B组SEP潜伏期长,C、D组SEP潜伏期短;与A组比较,其余3组MEPP潜伏期短;P均<0.05。与其余3组比较,A组损伤区面积小(P均<0.05)。与D组比较,其余3组GFAP阳性细胞百分比低,GAP-43、BDNF阳性细胞百分比高;与A组比较,GFAP阳性细胞百分比高,GAP-43、BDNF阳性细胞百分比低;P均<0.05。结论 BMSCs与ChABC联合移植对大鼠脊髓损伤有修复作用,机制可能与其降低GFAP、GAP-43表达及升高BDNF表达有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 硫酸软骨素酶ABC 脊髓损伤 胶质纤维酸性蛋白 生长相关蛋白-43 脑源性神经生长因子
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硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后神经元修复的影响 被引量：2
10
作者 陈德纯 任先军 +1 位作者 唐勇 蒋涛 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第9期843-845,共3页
目的探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对脊髓损伤后神经元修复的影响。方法SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、生理盐水对照组和ChABC治疗组,采用Allen法打击大鼠胸10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天1次连续1周蛛网膜下注射生理... 目的探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对脊髓损伤后神经元修复的影响。方法SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、生理盐水对照组和ChABC治疗组,采用Allen法打击大鼠胸10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天1次连续1周蛛网膜下注射生理盐水和ChABC。在伤后第1天,第1、2、4周应用免疫组化检测各组组织切片中NF200的变化,尼氏染色观测各组脊髓切片中尼氏体和神经元的改变,BBB评分检测损伤的后肢运动恢复情况。结果大鼠脊髓损伤后1d和1周给药组NF200着色面积、Nissl染色阳性细胞和BBB评分与生理盐水组比较差异无统计学意义。在2、4周,治疗组要显著优于生理盐水组(P<0.05)。结论ChABC能促进大鼠脊髓损伤后神经元的修复,提高后肢运动功能的恢复。 展开更多
关键词 硫酸软骨素酶ABC 脊髓损伤 BBB评分 神经丝蛋白200
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硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤修复的影响 被引量：2
11
作者 林扬元 谢群 +1 位作者 陈建明 王玮 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期288-292,共5页
为了探讨硫酸软骨素酶ABC对脊髓损伤后损伤局部瘢痕形成和脊髓传导功能修复的影响,本研究首先制作大鼠脊髓全横断损伤动物模型,并将其分为脊髓损伤组(A组)和脊髓损伤治疗组(B组)。在观察期内对动物的行为学表现进行BBB评分;用免疫荧光... 为了探讨硫酸软骨素酶ABC对脊髓损伤后损伤局部瘢痕形成和脊髓传导功能修复的影响,本研究首先制作大鼠脊髓全横断损伤动物模型,并将其分为脊髓损伤组(A组)和脊髓损伤治疗组(B组)。在观察期内对动物的行为学表现进行BBB评分;用免疫荧光组织化学方法观察损伤4周后硫酸软骨素酶ABC对损伤局部的硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs)的裂解作用;用辣根过氧化物酶(HRP)示踪法观察损伤8周后神经纤维的再生情况。结果显示:A组与B组之间动物的行为学评分B组优于A组,有显著性差异(P<0.01);B组动物脊髓内硫酸软骨素蛋白聚糖阳性物质的表达明显低于A组,具有显著性差异(P<0.05),而硫酸软骨素核心蛋白的表达无显著性差异(P>0.05);HRP示踪法显示B组脊髓损伤头端可见少量HRP标记的神经元胞体和纤维。本研究结果提示硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs中的葡胺聚糖链,减少瘢痕,促进损伤的神经纤维再生。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经再生 硫酸软骨素酶ABC 硫酸软骨素蛋白聚糖 硫酸软骨素核心蛋白
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硫酸软骨素酶ABC-PLGA缓释微球处理去细胞同种异体神经移植修复大鼠坐骨神经 被引量：3
12
作者 于光明 王伟 +1 位作者 张力 张德龙 《解放军医学院学报》 CAS 2014年第8期858-862,共5页
目的探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球处理改良化学法去细胞同种异体神经移植修复大鼠坐骨神经的可行性。方法用复乳法制备硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球。取成年雄性SD... 目的探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球处理改良化学法去细胞同种异体神经移植修复大鼠坐骨神经的可行性。方法用复乳法制备硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球。取成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组(n=10):硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球处理改良化学法去细胞同种异体神经移植组(A组)、自体神经移植组(B组)、改良化学法去细胞同种异体神经浸泡ChABC神经移植对照组(C组)、改良化学法去细胞同种异体神经移植09%氯化钠注射液对照组(D组)。取A、C、D 3组动物人工切取右侧坐骨神经10 mm,用改良化学法制备移植神经段:A、C两组浸泡在PBS液中,D组浸泡在含2 U/ml ChABC的PBS液(pH7.4)中。A组动物取C组制备神经行同种异体神经移植,外膜无张力缝合,并在移植神经段距近心端缝合处2 mm、4 mm、6 mm、8 mm处分别注入0.2μl制备好的硫酸软骨素酶ABC-PLGA缓释微球。B组在右侧离断10 mm坐骨神经倒置后行外膜缝合。C组取D组制备神经行神经移植。D组取A组制备神经行神经移植后,按照A组的位置注入等量等渗0.9%氯化钠注射液。术后4、8、12周进行大体标本观察,术后12周行电生理检测、HE染色、镀银染色及电镜组织学检测、图像分析对比。结果制备所得硫酸软骨素酶ABC微球表面光滑,球体大小各异且均匀,无粘连及成簇等现象,Weibull方程曲线显示硫酸软骨素酶ABC微球体外释药稳定。采用硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球处理改良化学法去细胞同种异体神经移植能够促进大鼠神经缺损处的轴突再生,提高神经修复的速度和质量,再生神经直径较粗,粘连较轻,电生理检测和组织学观察显示各项指标均优于两对照组,且较两对照组修复效果更接近于自体神经移植。结论硫酸软骨素酶ABC-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物缓释微球处理改良化学法去细胞同种异体神经移植可以修复大鼠神经损伤。 展开更多
关键词 周围神经损伤 硫酸软骨素酶ABC 化学去细胞异体神经 大鼠
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沙雷氏菌产硫酸软骨素酶菌种的CO_2激光辐照选育 被引量：2
13
作者 喻东 陶科 国锦琳 《激光技术》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期41-43,共3页
为了选育高产硫酸软骨素酶菌株,从土壤中首次筛选到一株产硫酸软骨素酶的粘质沙雷氏菌,经过CO2激光辐射诱变(激光功率10W,扩束光斑直径0.5 cm,照射距离23 cm,照射时间30 s),选育出高产硫酸软骨素酶的菌株GT596。经传代培养,发现具有稳... 为了选育高产硫酸软骨素酶菌株,从土壤中首次筛选到一株产硫酸软骨素酶的粘质沙雷氏菌,经过CO2激光辐射诱变(激光功率10W,扩束光斑直径0.5 cm,照射距离23 cm,照射时间30 s),选育出高产硫酸软骨素酶的菌株GT596。经传代培养,发现具有稳定的高产硫酸软骨素酶活性。 展开更多
关键词 激光技术 硫酸软骨素酶 CO2激光辐射 粘质沙雷氏菌
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注射硫酸软骨素酶对大鼠脊髓损伤后腓肠肌乙酰胆碱酯酶的变化及运动功能的影响 被引量：1
14
作者 李洪鹏 白旭东 +2 位作者 高杰 巴方 刘宁 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2012年第3期219-221,共3页
目的探讨注射硫酸软骨素酶ABC对成年大鼠脊髓损伤后不同时期后肢运动功能的恢复及腓肠肌运动终板内乙酰胆碱酯酶的影响。方法 10周龄Wistar雄性大鼠40只,采用脊髓半横断法制作模型,健侧作为对照组（A组）,患侧随机分为单纯脊髓损伤组（... 目的探讨注射硫酸软骨素酶ABC对成年大鼠脊髓损伤后不同时期后肢运动功能的恢复及腓肠肌运动终板内乙酰胆碱酯酶的影响。方法 10周龄Wistar雄性大鼠40只,采用脊髓半横断法制作模型,健侧作为对照组（A组）,患侧随机分为单纯脊髓损伤组（B组）及术后注射硫酸软骨素酶ABC组（C组）。术后采用BBB评分法进行行为学观察,分别于损伤后3 d、7 d、14 d和28d各选取5只大鼠,酶化学染色法检测腓肠肌中乙酰胆碱酯酶（AChE）的表达。结果 C组在术后14~28 d BBB评分高于B组（P〈0.05）;B组和C组与A组相比,腓肠肌AChE活性均降低,但C组于术后14~28 d AchE活性高于B组（P〈0.05）。结论大鼠脊髓损伤后注射硫酸软骨素酶可以提高AChE的活性,并可提高大鼠患肢的运动功能。 展开更多
关键词 脊髓损伤 硫酸软骨素酶 BBB评分 乙酰胆碱酯酶 大鼠
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软骨素酶对兔眼玻璃体及玻璃体视网膜界面的影响 被引量：3
15
作者 孟自军 曾水清 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期271-274,共4页
目的　探讨玻璃体腔内注射软骨素酶 (CA)诱导产生玻璃体液化的能力及其对玻璃体视网膜界面黏附作用的影响。方法　 3 6只新西兰白兔随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,右眼为实验眼 ,各 12眼 ,分别注射CA 0 1、0 2、1U/ 0 1mL ;左眼为对照眼 ,... 目的　探讨玻璃体腔内注射软骨素酶 (CA)诱导产生玻璃体液化的能力及其对玻璃体视网膜界面黏附作用的影响。方法　 3 6只新西兰白兔随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 ,右眼为实验眼 ,各 12眼 ,分别注射CA 0 1、0 2、1U/ 0 1mL ;左眼为对照眼 ,注射等量的平衡盐溶液 (BSS)。于注射后不同时间行临床观察、电生理及组织病理学检查。结果　注射后 1周 ,实验组兔眼即可观察到玻璃体液化 ,但未见玻璃体后脱离 (PVD)。注射后 5周 ,实验组全部兔眼玻璃体液化 ,部分兔眼发现临床可见的PVD并经组织学检查证实。对照组未见玻璃体液化及PVD。结论　CA能在较短的时间内诱导产生玻璃体液化并对玻璃体视网膜间粘连有一定的破坏作用。 展开更多
关键词 软骨素酶 玻璃体液化 玻璃体后脱离 组织病理学
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软骨素酶ABC去除化学去细胞神经中硫酸软骨素蛋白多糖 被引量：2
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作者 于海龙 彭江 +5 位作者 卢世璧 项良碧 张莉 赵斌 眭翔 许文静 《神经损伤与功能重建》 2012年第1期19-23,共5页
目的:观察软骨素酶ABC(ChABC)是否能降解化学去细胞神经(CEAN)中的硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)。方法:取SD大鼠的坐骨神经,按化学法制备去细胞神经,ChABC浸泡16h,行HE染色、CSPG及基底膜素层粘连蛋白(LN)免疫组化染色,观察去细胞神经的结... 目的:观察软骨素酶ABC(ChABC)是否能降解化学去细胞神经(CEAN)中的硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)。方法:取SD大鼠的坐骨神经,按化学法制备去细胞神经,ChABC浸泡16h,行HE染色、CSPG及基底膜素层粘连蛋白(LN)免疫组化染色,观察去细胞神经的结构及成分变化。Wistar大鼠15只,切除左坐骨神经5mm,随机分为A、B、C 3组各5只,分别采用自体神经、CEAN、经ChABC处理的CEAN修复缺损,术后15d测量各组神经纤维生长情况。结果:ChABC处理去细胞神经后,CSPG免疫组化染色示CSPG表达显著降低;HE染色显示结构无明显变化;LN免疫组化染色无明显变化。术后2周A组神经再生距离长于B、C组(P<0.05),C组优于B组(P<0.05)。结论:ChABC可降低化学去细胞神经中的CSPG,有利于促进神经再生。 展开更多
关键词 神经再生 去细胞神经 硫酸软骨素蛋白聚糖 软骨素酶ABC
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软骨素酶ABC诱导大鼠尾椎间盘退变的实验研究 被引量：2
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作者 王炎 王琨 吴小涛 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第1期14-16,20,共4页
目的探讨软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,Ch ABC)诱导SD大鼠椎间盘退变动物模型的稳定性及可行性。方法80只雄性SD大鼠,随机分为7天组和30天组,每组40只,取浓度为0.25 unit/m L Ch ABC 0.1 m L,注入(coccygeal vertebrae,Co7/8)椎间盘... 目的探讨软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,Ch ABC)诱导SD大鼠椎间盘退变动物模型的稳定性及可行性。方法80只雄性SD大鼠,随机分为7天组和30天组,每组40只,取浓度为0.25 unit/m L Ch ABC 0.1 m L,注入(coccygeal vertebrae,Co7/8)椎间盘作为造模组,(coccygeal vertebrae,Co6/7)近端椎间盘不作处理作为对照组。术后第7天、第30天行尾椎7.0T磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI),取标本行HE染色,阿尔新蓝染色,马森三色染色及Ⅱ型胶原和蛋白多糖免疫组织化学,观察椎间盘退变情况。结果 MRI结果显示:术后第7天,第30天,对照组Co6/7椎间盘T2信号强度均未见明显变化,而造模组Co7/8椎间盘T2信号强度均明显降低,Co7/8与Co6/7椎间盘T2信号值差异具有统计学意义(P<0.05),两时间点Co7/8椎间盘T2信号值比较差异无统计学意义;术后第7天和第30天,HE染色,阿尔新蓝染色,马森三色染色提示Co7/8椎间盘均出现明显退变,Co7/8椎间盘Ⅱ型胶原和蛋白多糖免疫组织化学积分光密度值均较Co6/7椎间盘显著降低(P<0.05)。结论软骨酶素ABC诱导构建大鼠尾椎间盘退变模型是一种简单有效、重复性好的建模方法。 展开更多
关键词 椎间盘退变 软骨素酶ABC 动物模型
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硫酸软骨素酶ABC促进大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的实验研究 被引量：2
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作者 陈德纯 任先军 +1 位作者 唐勇 蒋涛 《颈腰痛杂志》 2007年第2期96-100,共5页
目的探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对神经脊髓损伤后运动功能恢复的影响。方法SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、生理盐水对照组和ChABC治疗组,采用Allen法打击大鼠胸10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天一次连续一周蛛网膜下... 目的探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对神经脊髓损伤后运动功能恢复的影响。方法SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、生理盐水对照组和ChABC治疗组,采用Allen法打击大鼠胸10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天一次连续一周蛛网膜下注射生理盐水和ChABC。HE染色和尼氏染色观察各时间点脊髓损伤组织形态和尼氏体及神经元的变化,采用BBB功能评分和运动诱发电位(MEP)观察大鼠的运动功能恢复情况。结果大鼠脊髓损伤后1周时BBB评分和对照组无显著差别,在2、4周,治疗组评分结果明显优于对照组(P<0.05;P<0.01);MEP在1、4周的N1波潜伏期与对照组差异显著(P<0.05;P<0.01)。HE和Nissl染色显示治疗组的形态和神经元数量要优于对照组。结论ChABC能促进大鼠脊髓损伤后神经运动功能恢复,并对脊髓组织损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 硫酸软骨素酶ABC 脊髓损伤 运动诱发电位 BBB评分
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硫酸软骨素酶ABC治疗脊髓损伤的研究进展 被引量：2
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作者 柴宏伟 朱涛 《国际神经病学神经外科学杂志》 2008年第5期427-430,共4页
脊髓损伤后在损伤部位周围形成的神经胶质瘢痕是轴突不能有效再生的主要障碍,胶质瘢痕由星形胶质细胞和硫酸软骨素蛋白聚糖组成。硫酸软骨素蛋白聚糖的基本结构是核心蛋白和葡胺聚糖链共价交连,其中抑制轴突生长的作用大部分是通过葡胺... 脊髓损伤后在损伤部位周围形成的神经胶质瘢痕是轴突不能有效再生的主要障碍,胶质瘢痕由星形胶质细胞和硫酸软骨素蛋白聚糖组成。硫酸软骨素蛋白聚糖的基本结构是核心蛋白和葡胺聚糖链共价交连,其中抑制轴突生长的作用大部分是通过葡胺聚糖链介导的。硫酸软骨素酶ABC能特异性破坏硫酸软骨素蛋白聚糖的葡胺聚糖链,将硫酸软骨素蛋白聚糖分解成核心蛋白和碳水化合物短链,从而降低胶质瘢痕的阻碍作用使轴突的再生能力加强,神经功能得到改善。实验研究证明鞘内注射硫酸软骨素酶ABC治疗大鼠脊髓损伤取得良好结果,利用行为学评分评价硫酸软骨素酶ABC的治疗效果也证明它能促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。 展开更多
关键词 硫酸软骨素酶ABC 硫酸软骨素蛋白聚糖 脊髓损伤
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硫酸软骨素酶联合脂肪间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性
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作者 楚妙 巨朝娟 +2 位作者 赵丽娜 崔增敏 宋耕 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1384-1389,共6页
背景:有研究发现硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖能够促使视网膜上Müller细胞的移行,但硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖是否能促进脂肪间充质干细胞在视网膜变性大鼠视网膜的移行尚不明确。目的:探讨硫酸软骨素酶降解硫酸... 背景:有研究发现硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖能够促使视网膜上Müller细胞的移行,但硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖是否能促进脂肪间充质干细胞在视网膜变性大鼠视网膜的移行尚不明确。目的:探讨硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖对脂肪间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性的影响。方法:分离并培养人脂肪间充质干细胞,建立视网膜变性大鼠模型,向视网膜变性大鼠视网膜下腔注射脂肪间充质干细胞+硫酸软骨素酶,观察移植后大鼠脂肪间充质干细胞迁移率和视网膜细胞凋亡情况。结果与结论:人脂肪间充质干细胞能够成功培养,Brd U对人脂肪间充质干细胞的标记率达90.0%以上。建模后7 d,视网膜外核层塌陷,光感受器细胞大量外节迸解,外核层贴附在Bruch’s膜上,视网膜呈拱桥样,中央视网膜和外周视网膜均受到损伤;正常大鼠视网膜各层清晰,光感受器细胞排列规律,视网膜色素上皮层完整。脂肪间充质干细胞+硫酸软骨素酶组脂肪间充质干细胞迁移率高于脂肪间充质干细胞组,且2组视网膜细胞凋亡率比较差异无显著性意义。表明硫酸软骨素酶降解硫酸软骨素蛋白多糖可提高人脂肪间充质干细胞在视网膜上的迁移能力。 展开更多
关键词 视网膜变性 细胞运动 组织工程 干细胞 移植 人脂肪间充质干细胞 细胞移植 硫酸软骨素酶 硫酸软骨素蛋白多糖 迁移 凋亡
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