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羟基磷灰石-聚乙烯醇/胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶修复兔骨软骨缺损 被引量：1
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作者 王武 樊晓磊 +2 位作者 谢杰 胡懿郃 曾敏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第5期682-689,共8页
背景:关节骨软骨缺损是目前骨科医生面临的难题,传统修复方法难以取得满意疗效,以羟基磷灰石-聚乙烯醇为基础的复合水凝胶材料是目前研究的一个方向。目的:制备羟基磷灰石-聚乙烯醇/胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶,表征其物理学特征,验证... 背景:关节骨软骨缺损是目前骨科医生面临的难题,传统修复方法难以取得满意疗效,以羟基磷灰石-聚乙烯醇为基础的复合水凝胶材料是目前研究的一个方向。目的:制备羟基磷灰石-聚乙烯醇/胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶,表征其物理学特征,验证其植入体内后的组织相容性及细胞黏附增殖能力,探讨其对兔骨软骨缺损的修复效果。方法:利用3D打印技术制备圆柱状多孔聚乳酸支架(孔径分别为1.2,1.4,1.6,1.8 mm),再将聚乙烯醇及羟基磷灰石混合乳液灌入聚乳酸支架中,经过冻融及二氯甲烷溶解后制成羟基磷灰石-聚乙烯醇水凝胶。然后将胶原-壳聚糖-明胶混合液灌入羟基磷灰石-聚乙烯醇水凝胶中,利用京尼平进行交联,最后经乙醇清洗及冷冻干燥制成羟基磷灰石-聚乙烯醇/胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶,表征4组水凝胶的物理学特征,筛选性能最优的水凝胶进行后续实验。将羟基磷灰石-聚乙烯醇水凝胶、胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶分别植入SD大鼠皮下,苏木精-伊红与Masson染色观察材料表面的细胞黏附生长状况。在15只兔双侧膝关节股骨滑车制作骨软骨缺损(直径5 mm、深6 mm)模型,左侧植入复合水凝胶(实验组),右侧未植入任何材料(对照组),Micro-CT及组织学检测来评估其对骨软骨缺损的修复效果。结果与结论:①综合孔隙率、含水率、力学测试及扫描电镜结果,得出孔径1.2 mm的羟基磷灰石-聚乙烯醇/胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶更符合天然软骨的一般特性,用于后续实验;②苏木精-伊红与Masson三色染色显示,随着材料植入大鼠皮下时间的延长,两种材料周边黏附的细胞均明显增多,其中胶原-壳聚糖-明胶植入后的细胞增殖状况更好,可见大量细胞长入其形成的网状结构,且网状结构也逐渐降解;③在兔骨软骨缺损实验中,至术后8周时,Micro-CT检查显示实验组植入的材料和周围骨-软骨整合良好,其表面及内部均有部分骨长入,对照组软骨及软骨下层仍然存在明显的缺损,未形成有效修复;苏木精-伊红与甲苯胺蓝染色显示,实验组植入复合水凝胶4-8周后即与周围骨软骨发生整合,随着时间的延长材料表面逐渐有新生软骨形成,至12周时缺损处大部分被新生软骨覆盖,软骨下层也出现良好的骨长入;对照组至术后12周虽然深层骨缺损大部分修复、浅层的软骨及软骨下骨缺损也有一定程度修复,但主要被纤维组织及部分纤维软骨替代;④结果表明,羟基磷灰石-聚乙烯醇/胶原-壳聚糖-明胶复合水凝胶材料可仿生天然软骨的结构和功能,在动物实验中能有效修复骨软骨缺损。 展开更多
关键词 羟基磷灰石 聚乙烯醇 胶原 壳聚糖 水凝胶 骨软骨缺损
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PRP联合ADSCs负载藻酸钙凝胶修复软骨缺损的效果研究
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作者 刘大诚 李艺楠 《局解手术学杂志》 2024年第5期393-398,共6页
目的探讨富血小板血浆(PRP)联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)负载藻酸钙凝胶修复软骨缺损的效果。方法取新西兰大白兔皮下脂肪分离培养ADSCs,制造兔关节软骨缺损模型,然后将ADSCs种植到负载PRP的藻酸钙凝胶上,构建组织工程软骨并移植到缺损... 目的探讨富血小板血浆(PRP)联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)负载藻酸钙凝胶修复软骨缺损的效果。方法取新西兰大白兔皮下脂肪分离培养ADSCs,制造兔关节软骨缺损模型,然后将ADSCs种植到负载PRP的藻酸钙凝胶上,构建组织工程软骨并移植到缺损处。实验分为3组:对照组、PRP组和PRP-ADSCs-藻酸钙凝胶组,每组10只。术后观察细胞形态和生长情况,甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色等方法检测成软骨特性,CCK-8法检测ADSCs增殖活性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA和蛋白多糖mRNA表达。结果在倒置相差显微镜下,ADSCs呈现典型的间充质干细胞形态,即梭形或椭圆形,细胞质丰富,核形规则。随着培养时间的延长,ADSCs逐渐呈现出良好的生长状态,细胞数量增多,细胞间连接紧密,形态规则。对照组软骨缺损区未见明显修复,染色呈浅蓝,ADSCs数量多;PRP组软骨缺损区部分修复,染色呈蓝色,ADSCs数量较对照组多;PRP-ADSCs-藻酸钙凝胶组软骨缺损区修复效果最好,染色呈深蓝色,ADSCs数量较PRP组多。诱导14 d后,ADSCs甲苯胺蓝异染阳性,胞浆及细胞周围出现紫红色异染。Ⅱ型胶原免疫组化染色显示,PRP-ADSCs-藻酸钙凝胶组ADSCs平均灰度值明显高于其他组(P<0.05);阳性细胞胞浆内可见棕黄色颗粒,细胞周围黄染。CCK-8检测显示,PRP-ADSCs-藻酸钙凝胶组ADSCs第2天进入指数生长,对照组第3天才开始进入指数生长状态。在观察期间内,PRP-ADSCs-藻酸钙凝胶组软骨诱导后ADSCs OD值显著高于其他组(P<0.05)。PRP-ADSCs-藻酸钙凝胶组Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于其他组(P<0.05)。3组ADSCs的蛋白多糖mRNA表达随时间增加而递增,第14、21天PRPADSCs-藻酸钙凝胶组ADSCs的蛋白多糖mRNA表达明显高于其他组(P<0.05)。结论利用PRP、ADSCs、藻酸钙凝胶形成的复合体初步构建组织工程软骨对缺损关节软骨进行修复,可提高ADSCs增殖活性及Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达水平,使缺损的关节软骨得到明显修复。 展开更多
关键词 富血小板血浆 脂肪间充质干细胞 负载 藻酸钙凝胶 修复 软骨缺损
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缓释万古霉素三维支架修复兔感染性骨软骨缺损
3
作者 李兴屿 周杰 +5 位作者 李沙沙 张天喜 郭国宁 喻安永 邓江 叶鹏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第22期3509-3516,共8页
背景:大量研究证实组织工程支架几乎可完全修复骨软骨缺损,但当骨软骨缺损合并感染时,即使前期经过彻底的清创,单纯骨软骨组织工程支架的修复效果往往不理想。目的:制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,观察其... 背景:大量研究证实组织工程支架几乎可完全修复骨软骨缺损,但当骨软骨缺损合并感染时,即使前期经过彻底的清创,单纯骨软骨组织工程支架的修复效果往往不理想。目的:制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,观察其对兔股骨远端感染性骨软骨缺损的修复效果。方法:①采用乳化溶剂挥发法制备盐酸万古霉素缓释微球;将不同质量(7.5,10,12.5 mg)的缓释微球分别与丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石溶液混合,利用化学交联法制备盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架,表征支架的孔隙率、吸水膨胀率、热水溶失率及体外药物缓释等。②将45只新西兰大白兔随机分为空白组、对照组、实验组,每组15只,均建立右后肢股骨远端骨软骨缺损并感染模型,空白组不作任何处理,对照组缺损处植入丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石支架,实验组缺损处植入盐酸万古霉素缓释微球(10 mg)丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架。术后1周,检测血液样本C-反应蛋白、白细胞水平;术后4,8,12周取术区组织,分别进行大体观察与病理学观察。结果与结论:①随着缓释微球含量的增加,支架的孔隙率降低,组间比较差异有显著性意义(P<0.05);3组支架的孔径大小、吸水膨胀率、热水溶失率比较差异均无显著性意义(P>0.05);3组支架体外均可持续释放盐酸万古霉素达30 d以上。②实验组兔血液样本C-反应蛋白、白细胞水平均低于空白组、对照组(P<0.05);实验组兔术后各时间点的大体软骨修复情况明显好于空白组、对照组;苏木精-伊红、Masson、阿利新蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色显示,实验组兔术后各时间点的骨软骨修复效果明显优于空白组、对照组。③结果表明,盐酸万古霉素缓释微球丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架能有效促进开放性骨软骨缺损的修复。 展开更多
关键词 载药微球 万古霉素 骨软骨缺损 组织工程 丝素蛋白 壳聚糖 纳米羟基磷灰石 支架
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关节腔内注射制剂增强微骨折治疗软骨缺损研究进展
4
作者 陈志安 段培押 +3 位作者 周田华 王江南 谭洪波 施荣茂 《武警医学》 CAS 2024年第1期84-88,共5页
关节软骨损伤是一种常见的临床骨科疾病,微骨折(MF)已被认为是修复软骨损伤的一线技术,辅助注射药物可以促进透明软骨再生增强临床效果。本文对常用关节腔内注射制剂进行总结,为临床提供指导。
关键词 微骨折 关节腔注射制剂 软骨缺损
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富血小板血浆对兔膝关节软骨缺损模型软骨修复重塑的效果及其机制初步研究
5
作者 林星镇 朱满华 +2 位作者 万青 彭天忠 侯新聚 《中国民间疗法》 2024年第4期82-85,129,共5页
目的:评价富血小板血浆(PRP)对兔膝关节软骨缺损模型软骨的修复重塑作用及机制探讨。方法:选取18只成年新西兰大白兔,建立兔膝关节软骨缺损模型,随机分为实验组和对照组,每组9只。实验组对兔膝关节软骨缺损模型进行PRP关节腔注射0.4 mL(... 目的:评价富血小板血浆(PRP)对兔膝关节软骨缺损模型软骨的修复重塑作用及机制探讨。方法:选取18只成年新西兰大白兔,建立兔膝关节软骨缺损模型,随机分为实验组和对照组,每组9只。实验组对兔膝关节软骨缺损模型进行PRP关节腔注射0.4 mL(每4周1次),对照组仅进行兔膝关节软骨缺损模型造模,不给予任何干预措施。实验组注射后行组织学检测,采用苏木精-伊红染色(HE染色)、番红-固绿染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP染色)及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测软骨中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,观察两组关节软骨修复及血管化情况。结果:(1)对兔膝关节软骨缺损模型进行HE染色,结果显示软骨表面粗糙,完整性破坏,表层软骨出现纤维化变性及软骨严重缺损,造模成功。(2)与对照组比较,实验组HE染色显示软骨表面无裂隙,软骨细胞数量增多,排列紊乱程度减轻,潮线相对完整。通过番红-固绿染色发现,实验组潮线相对完整,软骨组织与骨组织分界线相对明显,软骨中间层细胞呈圆形,着色较淡,排列规律,软骨基质呈均匀浅红色。(3)通过免疫染色TRAP发现,实验组炎症程度相对较低,破骨细胞数量大幅度降低,骨丢失情况较对照相对降低。(4)通过实时荧光定量PCR检测软骨中VEGF mRNA发现,4周后实验组VEGF mRNA表达高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PRP可以加速兔膝关节软骨缺损模型软骨的修复,并与VEGF促进损伤组织的血管化作用密切相关。 展开更多
关键词 富血小板血浆 膝骨关节炎 兔膝关节软骨缺损模型 软骨修复 机制研究
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牛津膝关节单髁置换术治疗部分软骨缺损的疗效
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作者 李紫宇 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2024年第2期0038-0042,共5页
探讨牛津单髁膝关节置换术(UKA)治疗部分软骨缺损的疗效。方法 回顾性分析2019年1月至2022年1月期间因AMOA而接受UKA的患者,按入选排除标准确定60例患者纳入研究。将患者分成40例PTCL(和20例FTCL。并根据膝关节X线K-L分级将患者分成三组... 探讨牛津单髁膝关节置换术(UKA)治疗部分软骨缺损的疗效。方法 回顾性分析2019年1月至2022年1月期间因AMOA而接受UKA的患者,按入选排除标准确定60例患者纳入研究。将患者分成40例PTCL(和20例FTCL。并根据膝关节X线K-L分级将患者分成三组:20例FTCL(K-L3/4级)、16例PTCL(K-L2级)和24例PTCL(K-L3级)。结果 所有患者均进行了至少1年的随访。仅胫骨PTCL和仅股骨PTCL患者在术后OKS、FJS-12及KOOS评分结果较FTCL组低,但无明显统计学差异。PTCL(K-L3级)与FTCL(K-L3/4级)患者在术后OKS、FJS-12及KOOS评分结果相当,比较无明显统计学差异。而PTCL(K-L2级)患者术后的OKS、FJS-12及KOOS评分分数均明显低于FTCL(K-L3/4级)与PTCL(K-L3级)患者,但结果无显著统计学差异。结论 牛津单髁置换术治疗部分软骨缺损的前内侧膝关节骨性关节炎可取得相对满意的临床疗效,但对于仅累及胫骨或K-L2级的部分软骨缺损患者,应谨慎选择牛津单髁置换术治疗。 展开更多
关键词 牛津单髁置换术 前内侧膝骨关节炎 部分软骨缺损
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双相PLGA支架结合BMSCs修复兔膝关节骨软骨缺损的实验研究
7
作者 余敏 丑克 李雨佳 《中国现代手术学杂志》 2023年第1期1-7,共7页
目的研究双相聚乳酸聚乙醇酸共聚物(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)支架结合骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)修复兔膝关节骨软骨缺损的效果。方法对20只健康新西兰大白兔的40个膝关节股骨滑车部位戳孔,造成直径... 目的研究双相聚乳酸聚乙醇酸共聚物(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)支架结合骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)修复兔膝关节骨软骨缺损的效果。方法对20只健康新西兰大白兔的40个膝关节股骨滑车部位戳孔,造成直径5 mm深4~5 mm的骨软骨缺损,并随机分为实验组和空白组,每组各20个膝关节。实验组植入PLGA支架与BMSCs的复合物;空白组采取自发修复,不植入任何材料。术后6周、12周分批处死,比较两组改良Cook评分和国际软骨修复协会软骨修复组织(International Cartilage Repair Society,ICRS)评分;比较实验组修复12周后的膝关节标本和正常关节标本的生物力学参数。结果术后6周,实验组和空白组的改良Cook评分为8.1±0.4 vs.4.3±0.9,ICRS评分为12.4±0.9 vs.0.8±0.2;术后12周,实验组和空白组的改良Cook评分为9.2±0.3 vs.5.2±1.2,ICRS评分为17.2±0.3 vs.3.7±0.5。两组比较均有统计学差异(P=0.000)。实验组修复12周后的膝关节标本和正常关节标本的生物力学比较,蠕变时间为(2314±592)s vs.(2763±649)s,应力松弛时间为(1936±334)s vs.(2142±402)s,杨氏模量为(0.32±0.13)MPa vs.(0.36±0.22)MPa,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论双相PLGA支架结合BMSCs修复兔膝关节软骨及软骨下骨缺损效果理想,修复后各项生物学特性接近正常关节组织。 展开更多
关键词 聚乳酸聚乙醇酸共聚物 双相支架 骨软骨缺损
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补肾活血方联合人脐带血间充质干细胞修复小鼠膝关节软骨缺损的实验研究 被引量：1
8
作者 岑芊瑶 刘江源 +6 位作者 曾庆贺 温经渊 吴丛姿 王旭 吴震 金红婷 陈佳丽 《中医正骨》 2023年第12期5-13,24,共10页
目的:探讨补肾活血方联合人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)修复小鼠膝关节软骨缺损的效果及作用机制。方法:将24只10周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、hUCB-MSC... 目的:探讨补肾活血方联合人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)修复小鼠膝关节软骨缺损的效果及作用机制。方法:将24只10周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、hUCB-MSCs组和补肾活血方联合hUCB-MSCs组,每组6只。除对照组外,其余3组均用针头在小鼠股骨髁滑车关节面上造一个直径0.45 mm、深1 mm的圆柱形缺损。分别于造模后第1周、第2周、第3周,向hUCB-MSCs组、补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠膝关节腔内注射10μL的hUCB-MSCs悬液(200个细胞·μL^(-1)),向对照组和模型组小鼠膝关节腔内注射10μL的生理盐水;各组小鼠均每周注射1次。造模后第2天,补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠给予补肾活血方浓缩液(20μL·g-1)灌胃,对照组、模型组和hUCB-MSCs组小鼠每天给予等量生理盐水灌胃;各组小鼠均每天灌胃1次,共4周。灌胃结束后第2天,脱颈处死各组小鼠,切取小鼠右侧膝关节,以Micro-CT观察小鼠膝关节软骨缺损区骨微结构;以阿尔新蓝-苏木素染色观察膝关节软骨缺损区软骨退变情况,并采用国际骨关节炎研究学会(Osteoarthritis Research Society International,OARSI)评分对关节软骨退变情况进行评估;采用免疫组织化学染色测定小鼠膝关节软骨缺损区软骨中Ⅱ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅡalpha 1 chain,Col2a1)和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP13)的表达量。结果:①小鼠膝关节软骨缺损区骨微结构观察结果。对照组、hUCB-MSCs组和补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠膝关节软骨缺损区骨松质的骨密度均高于模型组(LSD-t=18.425,P=0.000;LSD-t=-10.186,P=0.000;LSD-t=-7.487,P=0.000),骨体积分数均高于模型组(LSD-t=7.242,P=0.002;LSD-t=-5.243,P=0.006;LSD-t=-5.441,P=0.006),骨小梁厚度均大于模型组(LSD-t=7.575,P=0.002;LSD-t=-10.005,P=0.002;LSD-t=-5.409,P=0.006),骨小梁数量均多于模型组(LSD-t=9.166,P=0.000;LSD-t=-10.014,P=0.000;LSD-t=-9.147,P=0.000),骨小梁分离度均小于模型组(LSD-t=-9.120,P=0.000;LSD-t=10.375,P=0.000;LSD-t=7.650,P=0.002);hUCB-MSCs组骨松质骨小梁数量少于对照组(LSD-t=3.027,P=0.039);其余各组之间两两比较,差异均无统计学意义。②小鼠膝关节软骨缺损区软骨退变情况观察结果。与对照组相比,模型组小鼠关节软骨退变明显;与模型组相比,hUCB-MSCs组和补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠关节软骨退变较轻。对照组、hUCB-MSCs组和补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠OARSI评分均低于模型组(LSD-t=-11.762,P=0.000;LSD-t=10.947,P=0.000;LSD-t=14.779,P=0.000),补肾活血方联合hUCB-MSCs组和对照组小鼠OARSI评分均低于hUCB-MSCs组(LSD-t=-5.635,P=0.005;LSD-t=-3.443,P=0.026),对照组小鼠OARSI评分低于补肾活血方联合hUCB-MSCs组(LSD-t=-5.914,P=0.004)。③小鼠膝关节软骨缺损区软骨Col2a1和MMP13表达量测定结果。对照组、hUCB-MSCs组和补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠膝关节软骨缺损区软骨Col2a1阳性表达面积均大于模型组(LSD-t=9.863,P=0.000;LSD-t=45.990,P=0.000;LSD-t=-17.406,P=0.000),补肾活血方联合hUCB-MSCs组小鼠膝关节软骨缺损区软骨Col2a1阳性表达面积大于hUCB-MSCs组(LSD-t=3.623,P=0.022),补肾活血方联合hUCB-MSCs组和hUCB-MSCs组小鼠膝关节软骨缺损区软骨Col2a1阳性表达面积与对照组的差异均无统计学意义(LSD-t=-1.643,P=0.176;LSD-t=0.533,P=0.623)。对照组、hUCB-MSCs组和补肾活血方联合hUCB-MSCs组MMP13阳性细胞数占比均低于模型组(LSD-t=-14.299,P=0.001;LSD-t=9.688,P=0.001;LSD-t=15.638,P=0.000),补肾活血方联合hUCB-MSCs组MMP13阳性细胞数占比低于hUCB-MSCs组和对照组(LSD-t=-11.488,P=0.007;LSD-t=3.578,P=0.023),hUCB-MSCs组MMP13阳性细胞数占比高于对照组(LSD-t=-9.425,P=0.000)。结论:补肾活血方联合hUCB-MSCs能明显改善小鼠膝关节软骨缺损区骨微结构,修复软骨缺损,其作用机制可能与上调Col2a1的表达和抑制MMP13的表达有关。 展开更多
关键词 膝关节 软骨 关节 小鼠 软骨缺损 间质干细胞 脐带血 补肾活血方 骨微结构 动物实验
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干细胞再生工程技术与关节软骨缺损修复
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作者 吕子豪 周明旺 +2 位作者 王晓萍 吉星 李盛华 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2023年第4期424-430,共7页
关节软骨因结构特殊导致损伤后自身修复较为困难。干细胞易于分离、增殖,且免疫原性低,在再生医学领域尤其在软骨缺损的修复中逐步得到应用。间充质干细胞、胚胎干细胞及诱导多能干细胞等通过干细胞植入与组织工程支架等技术相结合,能... 关节软骨因结构特殊导致损伤后自身修复较为困难。干细胞易于分离、增殖,且免疫原性低,在再生医学领域尤其在软骨缺损的修复中逐步得到应用。间充质干细胞、胚胎干细胞及诱导多能干细胞等通过干细胞植入与组织工程支架等技术相结合,能够促进骨与软骨的修复,在软骨重建中发挥重要作用。本文从干细胞对软骨修复作用角度,分析了不同种类干细胞在关节软骨修复中的优势、问题以及局限性,以期对干细胞再生技术修复软骨起到理论指导作用。 展开更多
关键词 干细胞 软骨缺损 软骨修复 组织工程
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hUC-MSCs对大鼠膝骨软骨缺损的修复作用
10
作者 程刚 张峰 +5 位作者 吴玉娇 袁晓阳 徐靓 王康 魏伟 严尚学 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第8期1267-1273,共7页
目的研究关节腔注射人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)对大鼠膝关节软骨缺损的修复作用及部分机制。方法舒泰50麻醉大鼠后,在大鼠股骨滑车沟采用电钻造成2 mm×2 mm的骨软骨缺损。术后一周将动物分为模型组和hUC-MSCs移植组,另设假... 目的研究关节腔注射人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)对大鼠膝关节软骨缺损的修复作用及部分机制。方法舒泰50麻醉大鼠后,在大鼠股骨滑车沟采用电钻造成2 mm×2 mm的骨软骨缺损。术后一周将动物分为模型组和hUC-MSCs移植组,另设假手术组作为对照。hUC-MSCs移植组关节腔注射hUC-MSCs(2×10^(6)个细胞,50μl),假手术组和模型组关节腔注射等量生理盐水作为对照。大鼠在细胞移植后第10周麻醉处死。通过体视显微镜、组织病理学和免疫荧光分析评估hUC-MSCs对受损软骨的修复作用。体外培养大鼠原代软骨细胞,Transwell法检测hUC-MSCs对软骨细胞的增殖与迁移作用。结果关节腔注射hUC-MSCs可提高ICRS评分,缺损部位修复相对完整,有大量软骨细胞和基质填充,具有明显的修复作用。HE、番红固绿及Masson染色结果显示,hUC-MSCs组损伤部位与周围正常关节软骨组织差异无显著性。与模型组相比,hUC-MSCs组Ⅰ型胶原(ColⅠ)水平下降,Ⅱ型胶原(ColⅡ)水平上升,增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数增加,性别决定区域Y相关的高迁移率族框9(SOX9)表达水平及入核增加。体外共培养结果显示,hUC-MSCs可促进软骨细胞增殖和迁移。结论关节腔移植hUC-MSCs可促进关节软骨缺损修复,其机制可能与保护软骨基质和促进软骨细胞增殖迁移有关。 展开更多
关键词 软骨修复 hUC-MSCs 骨软骨缺损 软骨细胞
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骨软骨缺损修复中骨形态发生蛋白2的作用与应用 被引量：3
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作者 王布雨 张勇 +3 位作者 李飞非 董晓宇 邓江 阮世强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第20期3259-3265,共7页
背景:骨软骨的缺损修复是目前骨科医生面对的一大挑战,当前的治疗手段达不到令人满意的效果,组织工程的发展为骨软骨缺损修复带来了新的希望。骨形态发生蛋白2是参与骨骼生长发育和修复的重要因子,具有良好的骨诱导作用,近些年研究发现... 背景:骨软骨的缺损修复是目前骨科医生面对的一大挑战,当前的治疗手段达不到令人满意的效果,组织工程的发展为骨软骨缺损修复带来了新的希望。骨形态发生蛋白2是参与骨骼生长发育和修复的重要因子,具有良好的骨诱导作用,近些年研究发现骨形态发生蛋白2对软骨发育也有影响。目的:从骨形态发生蛋白2对骨和软骨2个方面的影响,探讨近年来骨形态发生蛋白2在骨软骨缺损修复中的研究进展。并通过总结骨形态发生蛋白2在各类骨缺损修复中的应用情况,为治疗骨软骨的缺损提供新的思路和策略。方法:在万方数据库和中国知网以“骨形态发生蛋白2,软骨细胞,软骨缺损,骨缺损,间充质干细胞,信号通路”为检索词;在PubMed数据库以“Bone morphogenetic protein 2,Chondrocytes,Cartilage injury,Bone injury,MSC,Signaling pathways”为检索词,检索2012-01-01/2022-07-01收录的有关骨软骨缺损修复中骨形态发生蛋白2的作用机制及在骨软骨组织工程中的应用研究。结果与结论:(1)骨形态发生蛋白2促进间充质干细胞软骨分化,并且能够维持软骨细胞表型来维持软骨的特性。(2)骨形态发生蛋白2通过调节软骨细胞的糖代谢来控制软骨发育。(3)骨形态发生蛋白2通过经典Smad 1/5/8信号通路对成骨起作用,但成软骨的机制尚不清楚。(4)骨形态发生蛋白2目前在组织工程中的研究和应用主要集中在骨缺损修复领域,关于软骨的缺损修复研究较少,如何阻止骨形态发生蛋白2促使软骨细胞向肥大软骨细胞的转化会是未来研究的重点。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白2 信号通路 骨缺损 软骨缺损 缓释系统 骨髓间充质干细胞:软骨细胞 组织工程
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载神经生长因子软骨及软骨下骨双层仿生支架修复兔软骨缺损
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作者 周杰 叶鹏 +4 位作者 张天喜 李兴屿 李沙沙 喻安永 邓江 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第34期5421-5429,共9页
背景:大面积骨软骨缺损修复效果差,双层或多层支架由于更加符合软骨解剖、更具仿生性,成为一种新的治疗策略。目的:探讨神经生长因子/Ⅱ型胶原蛋白-丝素蛋白-壳聚糖/Ⅰ型胶原蛋白-丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石软骨及软骨下骨双层仿... 背景:大面积骨软骨缺损修复效果差,双层或多层支架由于更加符合软骨解剖、更具仿生性,成为一种新的治疗策略。目的:探讨神经生长因子/Ⅱ型胶原蛋白-丝素蛋白-壳聚糖/Ⅰ型胶原蛋白-丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石软骨及软骨下骨双层仿生支架修复软骨缺损的效果。方法:采用冷冻干燥、乳化-溶剂挥发法制备不同比例的Ⅱ型胶原蛋白-丝素蛋白-壳聚糖/Ⅰ型胶原蛋白-丝素蛋白-壳聚糖-纳米羟基磷灰石双层支架,检测支架的理化性能,筛选较适宜的各成分比例支架用于动物实验。将双层支架浸泡于神经生长因子缓释微球溶液中,制备载神经生长因子的双层支架。取30只新西兰大白兔,按照随机数字表法分为3组,每组10只,均建立骨软骨缺损模型,空白对照组不进行任何治疗,对照组植入未载神经生长因子的双层支架,实验组植入载神经生长因子的双层支架,术后4,8,12周,分别进行软骨修复大体观察、软骨组织形态观察。结果与结论:(1)通过孔隙率、吸水膨胀率、热水溶失率等指标的相关结果,得出:上层支架中Ⅱ型胶原蛋白:丝素蛋白:壳聚糖的质量比为1:1:1、下层支架中Ⅰ型胶原蛋白:丝素蛋白:壳聚糖:纳米羟基磷灰石质量比为1:1:1:1时,双层支架具有良好的理化性能,适宜用于动物实验。(2)神经生长因子缓释微球的平均粒径为(25.87±6.54)μm,载药量为0.516μg/mg,包封率为40.5%。(3)动物实验中,大体观察结果显示,实验组软骨修复快于对照组、空白对照组,且修复效果最好。苏木精-伊红染色与阿利新蓝染色显示,至术后12周时,空白对照组缺损区可见纤维组织及少量软骨陷窝结构,对照组缺损区修复组织大部分为纤维软骨,软骨下骨未完全重建,骨软骨层分界不清晰,实验组软骨层与软骨下骨层修复比较完整、分界明显,可见潮线。免疫组化染色显示,至术后12周时,实验组修复软骨中的Ⅱ型胶原多于对照组、空白对照组。(4)实验成功制备出具有良好理化性质的软骨及软骨下骨双层仿生支架,该支架负载神经生长因子后能更好地促进兔软骨缺损修复。 展开更多
关键词 双层支架 神经生长因子 缓释微球 软骨缺损 组织工程学 胶原蛋白:生物相容性
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功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶修复软骨缺损的实验研究
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作者 于鹏 贾丙申 +1 位作者 段炼 付昆 《局解手术学杂志》 2023年第10期854-859,共6页
目的探讨功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损的修复作用。方法培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为BMSCs-KLD-12组(BMSCs与KLD-12凝胶共培养)和BMSCs-KLPP组(BMSCs与KLPP凝胶共培养),分别行软骨诱导分化培养,MTT法检测... 目的探讨功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损的修复作用。方法培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为BMSCs-KLD-12组(BMSCs与KLD-12凝胶共培养)和BMSCs-KLPP组(BMSCs与KLPP凝胶共培养),分别行软骨诱导分化培养,MTT法检测细胞的增殖活性。将人软骨组织分为软骨-KLPP组(制作软骨缺损区并填充KLPP凝胶进行培养)、软骨-KLD-12组(制作软骨缺损区并填充KLD-12凝胶进行培养)、软骨组(仅制作软骨缺损区)。Calcein-AM/PI双染法检测BMSCsKLD-12组及BMSCs-KLPP组的细胞毒性。培养49 d后,收集软骨组、软骨-KLD-12组、软骨-KLPP组的软骨组织进行切片,并行阿尔新蓝染色。Western blot法检测各组中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、Ⅹ型胶原(Col-Ⅹ)的表达。结果与BMSCs-KLD-12组比较,BMSCs-KLPP组培养1 d、3 d、7 d的细胞增殖率均明显增加(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ的相对表达水平明显增加(P<0.05)。Calcein-AM/PI双染色检测表明BMSCs-KLPP组和BMSCs-KLD-12组细胞活性基本一致,KLPP凝胶无细胞毒性。与软骨-KLD-12组比较,软骨-KLPP组软骨修复作用更明显(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ的相对表达水平更高(P<0.05)。结论功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损具有良好的修复作用。 展开更多
关键词 功能性纳米自组装多肽凝胶 软骨细胞 软骨组织缺损 修复
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Ⅱ型胶原海绵修复兔膝关节软骨缺损的组织学观察 被引量：7
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作者 杨小红 李斯明 +2 位作者 叶惠贞 苏江 冼其 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第3期236-239,共4页
目的:观察Ⅱ型胶原海绵修复兔膝关节软骨缺损的组织学变化。方法:将28只成年雄性新西兰兔制作膝关节缺损模型并随机分成2组,A组在缺损局部植入Ⅱ型胶原海绵,B组不植入以作对照。手术后2、4、6、8、10、12周分别作HE、Safranin O染色及S-... 目的:观察Ⅱ型胶原海绵修复兔膝关节软骨缺损的组织学变化。方法:将28只成年雄性新西兰兔制作膝关节缺损模型并随机分成2组,A组在缺损局部植入Ⅱ型胶原海绵,B组不植入以作对照。手术后2、4、6、8、10、12周分别作HE、Safranin O染色及S-100蛋白检测。结果:(1)HE染色显示A组2周后即出现新生软骨细胞,12周后新生软骨组织完全填满缺损区并与周围组织整合,而B组直至术后第12周仍由纤维组织所填充;(2)S-100蛋白免疫组化检测结果显示A组新生软骨细胞具有正常兔软骨细胞的表型;(3)Safranin O染色结果显示A组新生软骨细胞具有分泌软骨基质的功能。结论:Ⅱ型胶原具有较强的诱导软骨细胞生长的能力,其诱导生长的新生软骨具有正常透明软骨的表型和功能。 展开更多
关键词 修复 膝关节软骨缺损 治疗 组织学 软骨缺损 Ⅱ型胶原
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移植基质诱导的自体软骨细胞修复关节软骨缺损临床研究 被引量：6
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作者 杨造成 张仲文 +5 位作者 侯世科 谢鹏 李禾 李端明 庞晓东 杨轶 《武警医学》 CAS 2007年第4期249-253,共5页
目的 探讨基质诱导的自体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的方法与疗效.方法 2004年11月～2006年11月,对7例膝关节软骨炎患者行关节镜取软骨、基质诱导自体软骨细胞移植（Matrix-induced Autologous chondrocyte implantation,MACI）膜植... 目的 探讨基质诱导的自体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的方法与疗效.方法 2004年11月～2006年11月,对7例膝关节软骨炎患者行关节镜取软骨、基质诱导自体软骨细胞移植（Matrix-induced Autologous chondrocyte implantation,MACI）膜植入术.对患者行MRI检查确定损伤位置,并进行IKDC2000评分.术后按照特定的康复计划进行循序渐进的功能锻炼.结果 随访时间6个月到24个月.术后半年多数患者各项症状逐渐消失,IKDC2000评分大部分增高.复查MRI和关节镜,显示原来缺损的关节软骨已基本修复,并伴有软骨下骨的修复.结论 与传统自体软骨细胞移植（Autologous chondrocyte implantation,ACI）技术相比,利用MACI技术修复软骨缺损具有术后恢复时间短、操作简便、创伤小、生成更多透明软骨等优点,具有良好的应用前景. 展开更多
关键词 关节软骨缺损 软骨缺损修复 基质诱导自体软骨细胞移植
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同种异体软骨修复甲状软骨缺损的实验研究 被引量：3
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作者 赵大庆 陈文弦 +2 位作者 李贵泽 孙永柱 孙安 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期112-114,共3页
目的　观察用不同类型的同种异体软骨修复喉软骨缺损的效果。方法　取新西兰白兔16只 ,平均分成两组。在每只兔的双侧甲状软骨切除 6mm× 3mm× 1mm全层软骨。一组动物将RPMI 16 4 0液和甲醛保存 30d的同种异体甲状软骨 (大小为... 目的　观察用不同类型的同种异体软骨修复喉软骨缺损的效果。方法　取新西兰白兔16只 ,平均分成两组。在每只兔的双侧甲状软骨切除 6mm× 3mm× 1mm全层软骨。一组动物将RPMI 16 4 0液和甲醛保存 30d的同种异体甲状软骨 (大小为 5mm× 2mm× 1mm)分别植入甲状软骨两侧缺损处 ,另一组动物于甲状软骨两侧缺损处分别植入新鲜的自体和异体软骨。分别于术后 7、30、180及 36 0d时处死取材 ,用大体观察、HE染色及免疫组织化学方法观察移植修复效果。结果经连续 1年观察 ,RPMI 16 4 0液保存的及新鲜的同种异体软骨与自体软骨移植排斥反应轻 ,均能较好修复甲状软骨缺损 ,而甲醛保存软骨早期有明显炎性细胞浸润 ,移植 180d至 36 0d时软骨基质明显吸收 ,软骨细胞退变 ,甲状软骨缺损区为纤维结缔组织修复。结论　RPMI 16 4 0液保存的及新鲜的同种异体软骨都具有活性 ,和自体软骨一样是软骨缺损修复的良好材料 。 展开更多
关键词 软骨 组织培养 同种移植 甲状软骨缺损 喉软骨缺损
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骨形态发生蛋白复合物结合CAD/CAM技术原位修复喉甲状软骨缺损 被引量：1
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作者 刘艺昌 周敬 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第51期8228-8233,共6页
背景:临床修复喉甲状软骨缺损时使用一定的支架材料。骨形态发生蛋白具有成骨诱导活性,与其他形式的载体联合起来进行复合应用可以更好的发挥出其诱导成骨作用。联合使用计算机辅助设计/计算机辅助制造技术能提高修复效果。目的:进一步... 背景:临床修复喉甲状软骨缺损时使用一定的支架材料。骨形态发生蛋白具有成骨诱导活性,与其他形式的载体联合起来进行复合应用可以更好的发挥出其诱导成骨作用。联合使用计算机辅助设计/计算机辅助制造技术能提高修复效果。目的:进一步验证骨形态发生蛋白复合物结合计算机辅助设计/计算机辅助制造技术在原位修复喉甲状软骨缺损中的应用效果。方法:纳入18只新西兰大白兔,对动物喉部进行三维扫描,建立兔甲状软骨三维数字模型。利用泡沫凝胶注模法制备羟基磷灰石支架,再制备骨形态发生蛋白复合物。18只动物随机分为观察组和对照组。两组兔行一侧甲状软骨切除后,观察组植入珊瑚羟基磷灰石支架;对照组填充明胶海绵。处理后4,8,12周,进行大体观察和评分;处理后12周,对动物行喉镜检查,喉组织常规切片后进行苏木精-伊红染色,进行组织学观察。结果与结论:处理后12周,对照组兔的喉腔出现明显的变窄现象,且存在轻微充血;观察组喉腔黏膜光滑,且通畅、宽敞,未出现肉芽生长情况。处理后4,8,12周,两组喉甲状软骨评分均呈现出不断下降的情况,且不同时间点,观察组评分均显著低于对照组(均P<0.05)。处理后12周,对照组未出现成熟骨细胞和软骨细胞的生成;观察组则可见植入材料完全降解,存在大量多核样组织细胞增生和吞噬,手术区域软骨母细胞出现增生现象,并伴有成软骨区域形成情况,另外还以观察到软骨骨质形成以及软骨细胞增生现象。结果表明,利用骨形态发生蛋白复合物结合计算机辅助设计/计算机辅助制造技术进行原位喉甲状软骨缺损修复可以获得良好的效果,实验过程中所使用的复合物具有良好的骨诱导作用以及组织相容性。 展开更多
关键词 软骨 甲状软骨 骨形态发生蛋白质类 组织工程 组织构建 软骨组织工程 喉部 软骨缺损 软骨修复 甲状软骨缺损 骨形态发生蛋白 计算机辅助设计/计算机辅助制造技术
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保留软骨的去细胞全喉支架制备方法及在喉软骨缺损中的修复效果
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作者 苏莉莎 彭涛 +5 位作者 冯俊 李红光 李志勇 杜经纬 马鹏 吉爽 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第24期6013-6016,共4页
目的探讨保留软骨的去细胞全喉支架的制备方法及在大鼠喉软骨缺损中的修复效果。方法取6只大鼠用于支架的制备,分离颈总动脉,结扎分支,经颈总动脉灌注去污剂(SDS、Triton X-100、PBS离子型),3只大鼠去除喉黏膜、肌肉、韧带的同时,保留... 目的探讨保留软骨的去细胞全喉支架的制备方法及在大鼠喉软骨缺损中的修复效果。方法取6只大鼠用于支架的制备,分离颈总动脉,结扎分支,经颈总动脉灌注去污剂(SDS、Triton X-100、PBS离子型),3只大鼠去除喉黏膜、肌肉、韧带的同时,保留细胞外基质和软骨细胞制备保留软骨的去细胞全喉支架,其余3只用于制备对照组支架。另取34只大鼠,建立0.5 cm×0.5 cm全层喉软骨缺损模型,根据处理方法不同随机分为对照组(n=17)和保留软骨组(n=17),对照组植入未经处理的异体喉骨支架,保留软骨组植入保留软骨的去细胞全喉支架,比较两组的修复效果。结果 (1)两种支架经过脱细胞灌注处理后,全喉大体结构完整,体积未发生明显的变化;(2)保留软骨的去细胞全喉支架未见表面细胞组织填充,可见胶原、细胞外基质成分组成的腔隙,细胞之间结构紧密,存在于会厌、声带、环状软骨等表面;对照组支架组织中的细胞成分被完全去除,但是依稀可见网状连接,结构之间不紧密;(3)免疫荧光结果显示:保留软骨的去细胞全喉支架除了有肌肉、软骨细胞外,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、MHC-Ⅱ染色均为阴性;对照组支架免疫荧光染色下MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ染色均为阳性;(4)保留软骨组大鼠修复6 w后缺损部位存在少许不成熟的软骨细胞,极少的软骨形成陷窝,表面存在纤维组织及炎症细胞;修复12 w后缺损部位得到修复,形成软骨陷窝,炎症反应减少;对照组修复6 w后缺损部位周围软骨细胞较少,缺损部位与周围组织边界明显,存在大量炎症细胞;修复12 w后存在少量纤维组织,存在炎症因子。结论保留软骨组植入保留软骨的去细胞全喉支架在喉软骨缺损中具有良好的修复效果。 展开更多
关键词 去细胞全喉支架 喉软骨缺损 免疫排斥反应 全层喉软骨缺损模型
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关节软骨缺损治疗进展 被引量：1
19
作者 蒋萍 蔚芃 《中国社区医师（医学专业）》 2012年第16期26-27,共2页
随着科学技术的发展和组织工程学的兴起,对关节软骨缺损的修复取得了一定的进展,就目前关节软骨缺损治疗方法的应用和临床效果做一综述.
关键词 关节软骨缺损 软骨缺损治疗 组织工程学 科学技术 临床效果 治疗方法
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多种特殊状态下关节软骨缺损修复的组织工程技术 被引量：5
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作者 陈劲松 王中汉 +1 位作者 常非 刘贺 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第8期1272-1279,共8页
背景:应用组织工程学技术可获得良好的关节软骨再生,但多为生理状态下小面积缺损的单纯修复。然而临床上的软骨缺损常伴随骨性关节炎、类风湿性关节炎等基础疾病,且缺损的位置、范围、深度均不确定,给软骨组织修复带来了很大挑战。目的... 背景:应用组织工程学技术可获得良好的关节软骨再生,但多为生理状态下小面积缺损的单纯修复。然而临床上的软骨缺损常伴随骨性关节炎、类风湿性关节炎等基础疾病,且缺损的位置、范围、深度均不确定,给软骨组织修复带来了很大挑战。目的:总结不同位置和炎症状态下软骨缺损的修复方式。方法:检索PubMed数据库和CNKI数据库,英文检索词为“cartilage defect regeneration,osteochondral,growth plate,weight-bearing area,inflammatory”,中文检索词为“关节软骨缺损,骨软骨,生长板,负重区,炎症”,检索建库至2019年3月发表的相关文献。共检索到相关文献209篇,按照纳入与排除标准,最终纳入86篇文献进行总结。结果与结论:针对各种特殊状态下的关节软骨缺损,其修复目标和策略是不同的:全层软骨和骨软骨结构缺损多采用具有多层结构的支架,旨在修复软骨特有的分层结构及软骨下骨结构,同时避免新生软骨内异位骨化的问题;生长板缺损的修复关键在于避免长骨成熟后发生畸形,因此在修复支架内应添加胰岛素样生长因子、骨发生形态蛋白7等生长因子,以持续刺激生长板的修复并发挥骨生长的生理功能;负重区软骨修复则需要修复支架具有良好的力学性能,负重时不会发生严重形变及结构破坏,同时新生的软骨组织具有足够的力学强度以支撑持续的纵向压力和磨损;炎症状态下的软骨缺损则要同时治疗炎症与软骨缺损,间充质干细胞的引入可同时发挥免疫调节及组织再生功能,以使疾病达到彻底治疗的目标。 展开更多
关键词 软骨缺损修复 干细胞 支架 全层缺损 骨软骨缺损 生长板 负重区 骨性关节炎 类风湿性关节炎
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