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辣根过氧化物酶在体外条件下对青蒿素生物合成的影响(英文) 被引量:4
1
作者 章焰生 叶和春 李国凤 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2003年第6期616-618,共3页
通过细胞提取液 ,在体外条件下研究了辣根过氧化物酶对青蒿素生物合成的影响 .细胞提取液以磷酸与Tris两种缓冲液制备 .结果表明 ,辣根过氧化物酶在以磷酸缓冲液制备的细胞提取液中 ,很大地促进了青蒿素的生物合成 ,青蒿素的含量提高约 ... 通过细胞提取液 ,在体外条件下研究了辣根过氧化物酶对青蒿素生物合成的影响 .细胞提取液以磷酸与Tris两种缓冲液制备 .结果表明 ,辣根过氧化物酶在以磷酸缓冲液制备的细胞提取液中 ,很大地促进了青蒿素的生物合成 ,青蒿素的含量提高约 1倍左右 ,而外加青蒿酸对青蒿素的生物合成并无显著的影响 .以Tris缓冲液制备细胞提取液 ,外加过氧化物酶并不能促进青蒿素的生物合成 .图 4参 展开更多
关键词 青蒿酸 青蒿 辣根过氧化物 生物转化
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中枢神经系内辣根过氧化物酶的顺、逆行运送速度及其在标记部位的存留时间 被引量:5
2
作者 鞠躬 舒斯云 +2 位作者 李文明 郭峰 杜永樑 《解剖学报》 CAS 1983年第1期37-46,116-117,共12页
用2~2.2公斤的白兔22只,在脊髓腰。段一侧注射一定量的HRP,存活12小时至7日,在脊髓脑干长距离顺、逆运送的基础上研究了顺、逆行运送的速度及HRP在标记部位存留的时间。脑干中主要观察的顺行标记部位为背侧副橄榄核,逆行标记部位为红核... 用2~2.2公斤的白兔22只,在脊髓腰。段一侧注射一定量的HRP,存活12小时至7日,在脊髓脑干长距离顺、逆运送的基础上研究了顺、逆行运送的速度及HRP在标记部位存留的时间。脑干中主要观察的顺行标记部位为背侧副橄榄核,逆行标记部位为红核及苍白中缝核。各核中顺行或逆行标记的出现及其消长过程相同,存活18小时后首先出现,2日后达高峰,7日后消褪殆尽。本研究得到以下的结论:1.HRP被顺、逆行运送的速度相等,每日至少350毫米,属快速运送。2.标记的净积累时间约为1日,故最佳存活期大致相当按纤维长度计所需的运输时间加1日。3.HRP在顺、逆行标记部位最多可存留~6日。4.HRP在不同纤维系的运速及存留时间相同。 展开更多
关键词 标记 红核 中脑盖 HRP 顺行 中缝核 逆行标记 大鼠 纤维性能 纤维长度 存留时间 标记细胞 二氨基联苯胺 胞体 视神经轴浆流 轴浆运输 存活期 脑干 辣根过氧化物
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以OT为底物固体电极伏安法测定辣根过氧化物酶及其标记物的研究 被引量:1
3
作者 王海玉 焦奎 +1 位作者 孙伟 王光杰 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期42-45,共4页
以玻碳电极为工作电极研究了邻联甲苯胺(OT)为底物微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶(HRP)及其标记物的方法。HRP能够催化H2O2氧化OT,其反应产物在玻碳电极上-0.58V(vs.Ag/AgCl)左右被还原产生一个灵敏的还原峰,还原峰电流随着酶浓度的... 以玻碳电极为工作电极研究了邻联甲苯胺(OT)为底物微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶(HRP)及其标记物的方法。HRP能够催化H2O2氧化OT,其反应产物在玻碳电极上-0.58V(vs.Ag/AgCl)左右被还原产生一个灵敏的还原峰,还原峰电流随着酶浓度的增大而增大,借助此还原电流可以测定HRP,并进而可用于以HRP为标记物的酶免疫分析。对酶催化反应条件和酶催化反应产物的测定条件进行了详细的研究,在最佳实验条件下测定游离HRP的线性范围是2.0×10-9~4.0×10-8g/mL,检出限为1.6×10-9g/mL;测定游离的酶标记物(IgG HRP),稀释范围为1∶2000~1∶400000,最大稀释比为1∶400000。 展开更多
关键词 固体电极伏安法 辣根过氧化物 标记 邻联甲苯胺 玻碳电极 微分脉冲伏安法 电化学免疫分析法
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RmIL-18多克隆抗体的制备及辣根过氧化物酶的标记 被引量:1
4
作者 谭友文 吴建成 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第5期831-833,共3页
目的用纯品rmIL-18免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,并予辣根过氧化物酶标记。方法使用免疫佐剂包被rmIL-18分次免疫新西兰兔,得到兔血清,再采用硫酸铵沉淀粗提法和QAE-Sephadex A-50离子交换层析法提纯IL-18抗体,最后用HRP简易过碘酸钠法... 目的用纯品rmIL-18免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,并予辣根过氧化物酶标记。方法使用免疫佐剂包被rmIL-18分次免疫新西兰兔,得到兔血清,再采用硫酸铵沉淀粗提法和QAE-Sephadex A-50离子交换层析法提纯IL-18抗体,最后用HRP简易过碘酸钠法标记IL-18抗体。结果用以上方法标记的IL-18抗体酶标记率为40.29%,酶标抗体的效价为1∶3200,最佳工作浓度为l∶1600。结论成功制备出标记HRP的IL-18多克隆抗体,建立了IL-18抗原的酶联免疫检测,以进一步用于实验研究。 展开更多
关键词 IL-18 辣根过氧化物 免疫标记
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辣根过氧化物酶标记法研究鸡直肠传入神经元的分布 被引量:1
5
作者 何玉琴 刘英 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第10期798-800,共3页
采用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法研究了鸡直肠感觉传入神经元的分布,证明鸡直肠脊神经感觉传入神经元集中分布于双侧T5~LS3和LS7~LS12脊神经节,峰值位于T7和LS10脊神经节;LS7~LS12区段脊神经节内标记细胞明显多于T5~LS3区段脊神... 采用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法研究了鸡直肠感觉传入神经元的分布,证明鸡直肠脊神经感觉传入神经元集中分布于双侧T5~LS3和LS7~LS12脊神经节,峰值位于T7和LS10脊神经节;LS7~LS12区段脊神经节内标记细胞明显多于T5~LS3区段脊神经节内的标记细胞;标记细胞为椭圆形和圆形. 展开更多
关键词 直肠 传入神经元 辣根过氧化物逆行标记
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大鼠中枢神经内细胞色素氧化酶与逆行辣根过氧化物酶联合反应
6
作者 刘忠浩 楚亚平 +1 位作者 刘求理 周国志 《神经解剖学杂志》 CAS 1988年第2期252-254,283,共4页
向大鼠单侧尾壳核注射HRP后,用氯化钴—细胞色素氧化酶组织化学反应方法,证明脑干内红核、三叉神经中脑核及耳蜗神经核等显高CO活性神经元;丘脑板内核、黑质、中缝背核及中脑被盖核等神经元呈现HRP标记;蓝斑核内可同时观察到高CO活性和... 向大鼠单侧尾壳核注射HRP后,用氯化钴—细胞色素氧化酶组织化学反应方法,证明脑干内红核、三叉神经中脑核及耳蜗神经核等显高CO活性神经元;丘脑板内核、黑质、中缝背核及中脑被盖核等神经元呈现HRP标记;蓝斑核内可同时观察到高CO活性和HRP标记两种神经元。实验结果说明此法有可能直接用于研究脑内高CO活性神经元与其它神经元之间的联系。 展开更多
关键词 细胞鱼氧化 辣根过氧化物 尾壳核 大鼠
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十七种哺乳动物二级抗体的制备和辣根过氧化物酶标记
7
作者 林树柱 刘先菊 +1 位作者 杨帆 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第7期1-5,共5页
目的制备兔抗17种哺乳动物的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为哺乳血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化哺乳动物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清... 目的制备兔抗17种哺乳动物的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为哺乳血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化哺乳动物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗哺乳动物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗哺乳动物的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blot方法考察标记抗体的特异性。结果纯化了恒河猴、东北虎、布氏田鼠、黑线姬鼠、斑羚、原驼、果子狸、食蟹猴、梅花鹿、长爪沙鼠、马鹿、骆驼、大仓鼠、豚鹿、熊猴、大耳羊和雪貂等17种哺乳动物的血清IgG,分别免疫大耳白兔制备了这17种哺乳动物的兔抗血清,免疫双扩散法测定兔抗这17种哺乳动物的抗血清效价均达到1∶32,并对纯化的兔抗恒河猴IgG、兔抗东北虎IgG、兔抗布氏田鼠IgG、兔抗黑线姬鼠IgG、兔抗斑羚IgG、兔抗原驼IgG、兔抗果子狸IgG、兔抗食蟹猴IgG、兔抗梅花鹿IgG、兔抗长爪沙鼠IgG、兔抗马鹿IgG、兔抗骆驼IgG、兔抗大仓鼠IgG、兔抗豚鹿IgG、兔抗熊猴IgG、兔抗大耳羊IgG和兔抗雪貂IgG等17种哺乳动物的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1∶(2000~60000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性。结论成功制备了HRP标记的兔抗17种哺乳动物的二级抗体,为哺乳动物血清学检测体系的建立提供了工具。 展开更多
关键词 哺乳动物 二级抗体 辣根过氧化物 标记
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狗坐骨神经荧光素及辣根过氧化物酶逆行追踪实验研究
8
作者 曹涌 成红兵 +1 位作者 张沛云 王晓冬 《南通医学院学报》 2000年第4期326-327,330,共3页
目的 :确定狗周围神经逆行示踪试验的最佳示踪剂及示踪时间。方法 :用快蓝 (FB)、碘化丙啶 (PI)及辣根过氧化物酶 (HRP)注射于正常狗坐骨神经 ,选择不同时间观察脊髓及相应脊神经背根神经节的神经元。结果 :14天时神经元胞体开始出现 FB... 目的 :确定狗周围神经逆行示踪试验的最佳示踪剂及示踪时间。方法 :用快蓝 (FB)、碘化丙啶 (PI)及辣根过氧化物酶 (HRP)注射于正常狗坐骨神经 ,选择不同时间观察脊髓及相应脊神经背根神经节的神经元。结果 :14天时神经元胞体开始出现 FB,随后荧光逐渐加强和阳性标记细胞逐渐增多 ;而 PI及HRP追踪组 ,仅少量胞体中出现很细的 HRP未能观察到 PI。结论 :狗的周围神经逆行示踪试验最好选择易溶解、激发波长较短的荧光素 ,并在体内存留的时间要长 ,以 FB较为合适。 展开更多
关键词 坐骨神经 辣根过氧化物 逆行追踪试验 荧光
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双水相萃取结合硼酸亲和吸附分离纯化辣根过氧化物酶 被引量:1
9
作者 吴雅娇 邢又元 +3 位作者 韩娟 吴嘉聪 李媛媛 王赟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第2期55-61,共7页
开发一种结合两步双水相萃取和亲和吸附分离的新型集成化方法,用于从辣根中分离和纯化辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)。首先,将两步双水相萃取工艺用于糖和色素的分离,然后将"多价"苯硼酸亲和磁性石墨烯复合材料... 开发一种结合两步双水相萃取和亲和吸附分离的新型集成化方法,用于从辣根中分离和纯化辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)。首先,将两步双水相萃取工艺用于糖和色素的分离,然后将"多价"苯硼酸亲和磁性石墨烯复合材料(d-PBA-GO@Fe_(3)O_(4)@PEI)用作进一步吸附分离,实现从杂质蛋白中选择性分离HRP。通过研究温敏聚合物17R4-盐双水相体系的液液相平衡行为,以及9种模型化合物在双水相体系中的分配行为,最终确定8%17R4-13.2%(NH_(4))_(2)SO_(4)双水相体系作为初步纯化的工艺体系。通过构建的集成化方法,成功地从辣根中分离出HRP,而对HRP的结构没有影响,HRP的比活力和纯化因子分别达到28.93 U/mg和1.92。该方法具有优异的分离纯化性能,对植物糖蛋白的工业化生产具有良好的前景。 展开更多
关键词 辣根过氧化物 纯化 双水相体系 亲和吸附 苯硼酸
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运用辣根过氧化物酶和乙酰胆碱酯酶双标记法对家兔腰、骶、尾髓脊髓小脑束乙酰胆碱酯酶阳性神经元的研究
10
作者 张进路 徐群渊 +2 位作者 王元身 王卫 王海燕 《神经解剖学杂志》 CAS 1986年第1期19-26,163,共9页
本研究采用10只家兔进行腰、骶、尾髓的脊髓小脑束乙酰胆碱酯酶阳性神经元定位研究。其中8只在小脑内注射HRP后,按Mesulam组化法追踪腰、骶、尾髓各节段的HRP-AChE双标及HRP单标神经元;作为对照,2只家兔同样节段的脊髓切片则单纯显示神... 本研究采用10只家兔进行腰、骶、尾髓的脊髓小脑束乙酰胆碱酯酶阳性神经元定位研究。其中8只在小脑内注射HRP后,按Mesulam组化法追踪腰、骶、尾髓各节段的HRP-AChE双标及HRP单标神经元;作为对照,2只家兔同样节段的脊髓切片则单纯显示神经元的AChE活性。实验结果表明,家兔腰、骶、尾髓的各群脊髓小脑束神经元中,大多数细胞均为乙酰胆碱酯酶阳性神经元,但它们所含AChE的量可能有所不同。各群细胞中乙酰胆碱酯酶阳性神经元所占数量的多少可能与脊髓小脑束神经元的不同功能有关。 展开更多
关键词 胆碱酯 脊髓小脑束 家兔 辣根过氧化物 乙酰胆碱酯标记
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辣根过氧化物酶(HRP)3种方法标记兔抗牛IgG效果的比较 被引量:4
11
作者 高琳 彭吉生 裘大堂 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1999年第11期23-24,共2页
关键词 兔抗牛IgG 疾病 免疫诊断 辣根过氧化物 标记
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辣根过氧化物酶酶标抗原催化α-萘酚微量热 被引量:3
12
作者 陈佳 李红梅 +2 位作者 徐斐 李琳 戈铭芝 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第17期204-207,共4页
采用戊二醛法将盐酸克伦特罗(CL)和辣根过氧化物酶(HRP)偶联制备不同偶联率的酶标抗原,利用MicroDSCⅢ微量热仪测定不同偶联率的酶标抗原催化α-萘酚放热量。结果表明:采用戊二醛法进行偶联HRP的酶活损失微弱,且在相同CL浓度下偶联率低... 采用戊二醛法将盐酸克伦特罗(CL)和辣根过氧化物酶(HRP)偶联制备不同偶联率的酶标抗原,利用MicroDSCⅢ微量热仪测定不同偶联率的酶标抗原催化α-萘酚放热量。结果表明:采用戊二醛法进行偶联HRP的酶活损失微弱,且在相同CL浓度下偶联率低的酶标抗原放热量较大。在同等条件下,0.15mol/LNaCl反应体系中酶促反应的放热量优于0.1mol/LPBS反应体系,在0.15mol/LNaCl缓冲体系下,酶活力为2U时催化放热的最佳底物浓度为20mmol/L。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 辣根过氧化物标记 微量热
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辣根过氧化物酶在石墨电极上的固定化及其对H_2O_2的响应
13
作者 冯春梁 赵新 +2 位作者 王汉 李言 韩玉花 《辽宁师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第4期486-489,共4页
基础电极的选择和酶、抗体、DNA等生物活性分子的固定化方法都是影响生物传感器性能的关键因素.以石墨电极(GE)为基础电极,基于辣根过氧化物酶(HRP)对H2O2氧化邻苯二胺(OPD)生成2,3-二氨基吩嗪(DAP)反应体系的高效催化作用,研究了HRP固... 基础电极的选择和酶、抗体、DNA等生物活性分子的固定化方法都是影响生物传感器性能的关键因素.以石墨电极(GE)为基础电极,基于辣根过氧化物酶(HRP)对H2O2氧化邻苯二胺(OPD)生成2,3-二氨基吩嗪(DAP)反应体系的高效催化作用,研究了HRP固定化技术.分别利用再生丝素、聚乙二醇、壳聚糖包埋固定HRP,并以HRP修饰GE为指示电极,通过电位法测定H2O2浓度,对不同的固定化方法进行评价.结果表明,利用再生丝素包埋法制备的HRP/GE电极对H2O2具有更好响应性能,其工作曲线斜率为54.97,检测下限为8.82×10-8 mol.dm-3,线性范围为3.53×10-7~8.82×10-4 mol.dm-3.所提出的HRP/GE具有制备简单、成本低廉、响应快、灵敏度高等优良性能,具有较好的应用前景. 展开更多
关键词 石墨电极 包埋法 再生丝蛋白 辣根过氧化物 氧化
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兔抗大鼠IgG辣根过氧化物酶标记物研制
14
作者 王建飞 肖正国 《实验动物与动物实验》 1994年第2期18-20,共3页
关键词 辣根过氧化物 标记 兔抗大鼠IgG 研制
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在面神经干引入辣根过氧化物酶四种方法的比较
15
作者 张宗铭 许健 徐敢熊 《解剖学杂志》 CAS 1983年第2期148-151,共4页
自Kristensson开创应用辣根过氧化物酶(HRP)于神经系统的研究中并首先应用于周围神经系统以来,HRP在周围神经的应用,大多为将HRP注射于神经元的终末部位。例如Kristensson将HRP注射于舌肌;Brownson注射于交感神经节;李继硕注射于膀胱;... 自Kristensson开创应用辣根过氧化物酶(HRP)于神经系统的研究中并首先应用于周围神经系统以来,HRP在周围神经的应用,大多为将HRP注射于神经元的终末部位。例如Kristensson将HRP注射于舌肌;Brownson注射于交感神经节;李继硕注射于膀胱;山田、陶之理注射于胃等。在周围神经干中直接给以HRP的报告并不多见。 展开更多
关键词 面神经干 后支 视野镜 HRP 标记细胞 辣根过氧化物
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辣根过氧化物酶注入舌下神经干的逆向传递——光镜和电镜观察
16
作者 许鹿希 杨宝林 《解剖学通报》 1982年第1期105-110,共6页
辣根过氧化物酶(HRP)是一种大分子的蛋白质,其分子量约40,000。用它作为示踪物可以研究它从神经元的末梢逆向传递到胞体的途径。已有数种方法将它引入神经:如注射HRP溶液于舌肌或胃、回肠、膀胱壁、心外膜下等处(1)(2)(3)。
关键词 舌下神经核 标记细胞 同侧 舌肌 神经干 HRP 辣根过氧化物 面神经元 电镜观察
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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析
17
作者 张世伟 吴会玲 +6 位作者 周迎春 王炳志 杨星星 杜业刚 汤璐 冯荣虎 郭继平 《食品科学》 EI CAS CSCD 2024年第6期271-276,共6页
建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。 展开更多
关键词 3-氨基-2-恶唑烷酮 夹心联免疫分析 表位间隔距离 辣根过氧化物酶标记亲和素
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抗苗勒氏管激素的生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析方法的建立 被引量:3
18
作者 薛燕平 王坤 +4 位作者 李莉华 任倩 罗衬银 张德力 姚鹏 《临床血液学杂志(输血与检验)》 2019年第1期155-158,共4页
目的:抗苗勒氏管激素(AMH)在评价卵巢储备功能方面具有更高的准确性,将其用于青春期、生育期女性的生育指导时具有很好的临床价值。目前对于AMH的检测,临床上常采用的是酶联免疫分析法,但存在灵敏度低、检测范围窄等缺点,而影响AMH实际... 目的:抗苗勒氏管激素(AMH)在评价卵巢储备功能方面具有更高的准确性,将其用于青春期、生育期女性的生育指导时具有很好的临床价值。目前对于AMH的检测,临床上常采用的是酶联免疫分析法,但存在灵敏度低、检测范围窄等缺点,而影响AMH实际水平的测定,使得对病情的预估不准确对疾病的治疗产生影响。因此,建立一种低成本、高敏感度的检测AMH水平的方法尤为重要。方法:利用生物素-亲和素放大系统,将一组抗AMH的第一抗体包被微孔板,同时用生物素标记第二抗体,与第一抗体-抗原复合物结合之后,再与生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物结合,加入发光底物,建立AMH酶促化学发光免疫分析方法,同时对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行检测,并与常规ELISA法进行相比检测AMH浓度。结果:线性检测范围为(0.42~50.00)U/ml,该体系稳定性好,灵敏度0.42U/ml,批内差异小于10.0%,批间差异小于10.0%,与常规ELISA对比差异有统计学意义。结论:AMH的生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析易于操作、灵敏度高、价格低廉,适用于临床检测。 展开更多
关键词 抗苗勒氏管激 生物 链霉亲和 辣根过氧化物 促化学发光免疫分析方法
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亲和素—生物素—酶复合物(ABC)法在免疫诊断学中的应用
19
作者 王树林 张萌 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1989年第5期29-30,共2页
亲和素—生物素—酶复合物(Avidin—Biotin—Enzyme Complex,ABC)法是Hsu等于1981年在生物素—亲和素架桥法(BRAB)和标记亲和素法(LAB)的基础上进行改良、建立起来的。这种方法是预先按一定比例将生物素化酶和亲和素共温后形成ABC复合物... 亲和素—生物素—酶复合物(Avidin—Biotin—Enzyme Complex,ABC)法是Hsu等于1981年在生物素—亲和素架桥法(BRAB)和标记亲和素法(LAB)的基础上进行改良、建立起来的。这种方法是预先按一定比例将生物素化酶和亲和素共温后形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体反应。该法不仅减少了反应步骤。而且由于ABC的网格可以网罗相当数量的酶分子,从而使生物素—亲和素系统(BAS)的敏感度大为提高。用该法对多肽类激素进行了酶标测定,发现抗体滴度可提高20~40倍。 展开更多
关键词 亲和 ABC 免疫诊断学 复合物 生物 抗体反应 抗体滴度 多肽类激 架桥法 标记抗体
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糖蛋白-凝集素自组装构筑有序膜及在酶电极的应用 被引量:5
20
作者 李扬眉 江秀明 +2 位作者 陈志春 傅水玉 林贤福 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期216-220,共5页
利用糖蛋白-凝集素的识别作用交替沉积伴刀豆球蛋白(ConA)与辣根过氧化物酶(HRP)制备酶自组装多层膜,用原子力显微镜(AFM)观测了自组装膜的表面形貌、表面粗糙度;AFM和椭圆偏振研究测定了自组装膜的厚度.结果表明,ConA和HRP膜厚分别为9.... 利用糖蛋白-凝集素的识别作用交替沉积伴刀豆球蛋白(ConA)与辣根过氧化物酶(HRP)制备酶自组装多层膜,用原子力显微镜(AFM)观测了自组装膜的表面形貌、表面粗糙度;AFM和椭圆偏振研究测定了自组装膜的厚度.结果表明,ConA和HRP膜厚分别为9.0和4.6nm,与两者的晶体衍射结果一致,说明生物识别自组装方法能很好地保持分子的原有形态.以亚甲蓝(MB)溶液为介体,用循环伏安法测定了表面修饰了三层(ConA/HRP)自组装膜的金电极对H2O2的电化学催化还原作用,在H2O2浓度为0.2~1.0mmol·L-1时,响应电流对H2O2浓度变化成线性,酶电极灵敏度为24.0mA·mol-1·L,表观米氏常数为4.2mmol·L-1. 展开更多
关键词 糖蛋白-凝集 自组装多层膜 电极 伴刀豆球蛋白 辣根过氧化物 表面形貌 生物膜 生物传感器 有序膜 电化学特性
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