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氨磷汀通过上调PKM2表达增强肾近端小管上皮细胞抵抗顺铂毒性
1
作者 薛嵘 马金刚 +5 位作者 李莹屏 张健 高佩娟 黄文辉 杨晓军 李小丽 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期433-440,共8页
目的探究氨磷汀缓解顺铂肾毒性的分子机制。方法在肾近端小管上皮细胞系HK-2及原代细胞中,采用CCK-8细胞活性实验检测氨磷汀对顺铂细胞毒性的抑制作用。通过在线数据库tabula-muris分析肾脏组织各细胞亚群PKM2的表达。通过流式细胞术检... 目的探究氨磷汀缓解顺铂肾毒性的分子机制。方法在肾近端小管上皮细胞系HK-2及原代细胞中,采用CCK-8细胞活性实验检测氨磷汀对顺铂细胞毒性的抑制作用。通过在线数据库tabula-muris分析肾脏组织各细胞亚群PKM2的表达。通过流式细胞术检测细胞凋亡比例。通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测细胞中PKM2基因表达。通过小RNA干扰技术敲低细胞中PKM2基因表达。结果氨磷汀显著增强HK-2细胞和原代肾近端小管上皮细胞抵抗顺铂的毒性。在顺铂处理的细胞中,随着氨磷汀浓度的增加,细胞的活力从0.37增加到0.45至0.77(P<0.001)。另外,随着氨磷汀浓度的增加,HK-2细胞中PKM2基因表达依次增加,在1μmol/L浓度时增加到8.76倍(P<0.001)。在HK-2细胞中干扰PKM2基因表达,氨磷汀对顺铂的细胞毒性的保护作用显著受到抑制。顺铂诱导的细胞凋亡比例、标志蛋白Cleaved-PARP和Cleaved-caspase3的表达被氨磷汀显著抑制。单细胞数据分析的结果表明,相对于肾脏组织其他细胞亚群,PKM2在肾近端小管上皮细胞中表达最低。结论氨磷汀通过上调肾近端小管上皮细胞PKM2的表达抑制顺铂诱导的细胞凋亡,从而缓解顺铂的细胞毒性。 展开更多
关键词 氨磷汀 近端小管上皮细胞 PKM2 顺铂 毒性
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慢性染镉小鼠肾近端小管上皮细胞的形态学观察 被引量:4
2
作者 苏敏 许庭良 姜俸蓉 《四川解剖学杂志》 2001年第1期46-47,共2页
关键词 小鼠 小家鼠 近端小管上皮细胞 近端小管细胞 凋亡细胞
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近端小管RAS功能轴在早期糖尿病小鼠肾脏中的变化
3
作者 虎璇 杨一菲 +2 位作者 韦忠平 John S.D.CHAN 苏可 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1373-1382,共10页
目的:观察自发性糖尿病小鼠模型中,糖尿病肾病早期近端小管肾素-血管紧张素系统(RAS)两条轴[血管紧张素转换酶(ACE)-血管紧张素II(Ang II)-血管紧张素II 1型受体(AT1)经典轴和ACE2-Ang(1-7)-Mas受体(MasR)新轴]的变化特征及对肾脏结构... 目的:观察自发性糖尿病小鼠模型中,糖尿病肾病早期近端小管肾素-血管紧张素系统(RAS)两条轴[血管紧张素转换酶(ACE)-血管紧张素II(Ang II)-血管紧张素II 1型受体(AT1)经典轴和ACE2-Ang(1-7)-Mas受体(MasR)新轴]的变化特征及对肾脏结构和功能的影响。方法:应用雄性自发性1型糖尿病Akita小鼠(以C57BL/6背景的雄性非糖尿病小鼠为正常对照)和自发性2型糖尿病db/db小鼠(以C57BLKS/J背景的雄性db/m非糖尿病小鼠为正常对照),饲养至16周龄时处死小鼠,测定相应生理指标。收集尿液,检测尿液中Ang II和Ang(1-7)的含量;收取肾脏组织行病理切片染色观察肾脏结构变化;免疫组化法观察肾脏组织血管紧张素原(Agt)、ACE、ACE2和MasR的表达部位及变化;Western blot和RT-qPCR测定近端肾小管的上述蛋白及mRNA的变化。结果:两种糖尿病小鼠16周龄时,肾小球滤过率和尿白蛋白/肌酐比值显著增加(P<0.05),PAS染色可见近端肾小管细胞体积增加,管腔扩张,肾小管肥大,肾小管损伤分数显著增加(P<0.01)。RAS成分检测结果显示,与对照组相比,糖尿病小鼠近端小管Agt和ACE2的蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01),尿Ang II排泄显著增加(P<0.01),而ACE和MasR的蛋白和mRNA表达水平显著下调(P<0.01),尿Ang(1-7)含量显著减少(P<0.01)。结论:在自发性糖尿病小鼠中,近端小管RAS在糖尿病肾病早期被激活,激活的RAS可能参与糖尿病肾病早期肾小球高滤过、肾小球和肾小管肥大及近端小管损伤。 展开更多
关键词 肾素-血管紧张素系统 肾小管 糖尿病肾病 自发性糖尿病小鼠
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灯盏花素对高糖环境近端小管上皮细胞钠钾ATP酶活性的影响 被引量:5
4
作者 杜飞 高原 +1 位作者 姚君 王兴红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期2242-2243,共2页
目的观察灯盏花素(breviscapine,Bre)对高糖环境原代培养的近端小管上皮细胞(proximal tubule epithelial cells,PTEC)钠钾ATP酶(Na+,K+-ATPase)活性的影响。方法手工微分离法原代培养PTEC,MTT法检测不同浓度的灯盏花素作用72h对PTEC增... 目的观察灯盏花素(breviscapine,Bre)对高糖环境原代培养的近端小管上皮细胞(proximal tubule epithelial cells,PTEC)钠钾ATP酶(Na+,K+-ATPase)活性的影响。方法手工微分离法原代培养PTEC,MTT法检测不同浓度的灯盏花素作用72h对PTEC增殖的影响,以确定合适的灯盏花素实验浓度。将细胞分为5组:正常对照组(NC组)、高糖组(HG组)、小剂量灯盏花素组、中剂量灯盏花素组、大剂量灯盏花素组,每组设6个复孔,作用72h。液闪法测定PTEC钠钾ATP酶活性。结果HG组PTEC钠钾ATP酶活性显著高于NC组(P<0.01),小剂量组与HG组比较无统计学意义,中剂量组与HG组比较明显降低(P<0.05),大剂量组显著降低(P<0.01)。结论高糖环境下PTEC的钠钾ATP酶活性明显升高;灯盏花素对高糖环境原代PTEC钠钾ATP酶活性的升高有明显的抑制作用;其对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的防治作用可能部分通过抑制PTEC钠钾ATP酶活性实现。 展开更多
关键词 灯盏花素 糖尿病肾病 近端小管上皮细胞 钠钾ATP酶
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缬沙坦对人肾近端小管上皮细胞TGF-β/Smad信号途径的影响 被引量:4
5
作者 任韫卓 王晨 +1 位作者 史永红 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期960-964,共5页
目的观察缬沙坦对TGF-β刺激人肾近端小管上皮细胞表达Smad的影响。方法以人肾小管上皮细胞(HKC)为对象,分为正常对照组;TGF-β1刺激组;缬沙坦组。Western blot检测p-Smad2/3、smad2/3、Smad7以及细胞上清ColⅠ蛋白含量;RT-PCR检测Smad2... 目的观察缬沙坦对TGF-β刺激人肾近端小管上皮细胞表达Smad的影响。方法以人肾小管上皮细胞(HKC)为对象,分为正常对照组;TGF-β1刺激组;缬沙坦组。Western blot检测p-Smad2/3、smad2/3、Smad7以及细胞上清ColⅠ蛋白含量;RT-PCR检测Smad2 mRNA和Smad7 mRNA水平。MTT法检测刺激组及缬沙坦组在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响。结果①Western blot显示,与TGF-β1刺激组相比,缬沙坦使Smad2/3、p-Smad2/3蛋白的表达下降,ColⅠ分泌显示相同趋势,而Smad7蛋白的表达没有变化。②半定量RT-PCR显示,与TGF-β1刺激组相比,缬沙坦组Smad2 mRNA降低,Smad7 mRNA无变化。③MTT法检测显示不同浓度缬沙坦对TGF-β1刺激所引起的细胞增殖受抑制现象均有改善,并且随药物浓度的增加该作用增强。结论提示缬沙坦的肾脏保护作用可能部分是通过抑制TGF-β/Smads信号途径实现的。 展开更多
关键词 人肾近端小管上皮细胞 SMADS蛋白 Ⅰ型胶原 缬沙坦
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梗阻性黄疸大鼠肾近端小管细胞凋亡的超微结构观察 被引量:3
6
作者 刘冬娟 徐彦平 +1 位作者 郭玉坤 石玉秀 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期483-484,共2页
关键词 梗阻性黄疸 大鼠 近端小管 细胞凋亡 超微结构 透射电镜 上皮细胞
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miR-30e*在顺铂诱导的肾近端小管上皮细胞凋亡和线粒体损伤中的作用 被引量:3
7
作者 杨玲云 郭燕 +5 位作者 倪佳佳 王荣 林加娟 丁桂霞 黄松明 张爱华 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1060-1065,共6页
目的:观察顺铂诱导肾近端小管细胞损伤过程中mi R-30e*的表达变化,并探讨其在顺铂诱导的小管细胞凋亡和线粒体损伤中的作用。方法:实时定量PCR(q RT-PCR)检测顺铂处理后的小管细胞mi R-30e*的表达水平;使用重组慢病毒载体感染细胞,稳定... 目的:观察顺铂诱导肾近端小管细胞损伤过程中mi R-30e*的表达变化,并探讨其在顺铂诱导的小管细胞凋亡和线粒体损伤中的作用。方法:实时定量PCR(q RT-PCR)检测顺铂处理后的小管细胞mi R-30e*的表达水平;使用重组慢病毒载体感染细胞,稳定高表达或低表达mi R-30e*;使用流式细胞仪检测细胞凋亡,观察mi R-30e*在顺铂诱导的小管细胞凋亡中的作用;q RT-PCR检测线粒体DNA(mt DNA)拷贝数,JC-1检测线粒体膜电位变化,探究mi R-30e*在顺铂引起的线粒体损伤中的作用。结果:1顺铂处理肾小管上皮细胞后,mi R-30e*的表达呈时间依赖性和剂量依赖性下调;2使用q RT-PCR检测重组慢病毒载体制备的稳定高表达或低表达mi R-30e*的小管细胞株中mi R-30e*的表达,过表达组增高了7倍,敲低表达组降低了近50%;3加入顺铂后,与对照组相比小管细胞凋亡增加,过表达mi R-30e*对凋亡起保护作用,敲低mi R-30e*则加重凋亡;4通过检测mt DNA的拷贝数发现顺铂诱导的线粒体损伤在48 h时有意义,迟于mi R-30e*表达的下调,线粒体膜电位检测JC-1提示过表达mi R-30e*对线粒体有保护作用。结论:顺铂处理小管细胞可降低其mi R-30e*的表达;体外过表达mi R-30e*对顺铂引起的小管细胞的凋亡和线粒体损伤具有保护作用,敲低mi R-30e*会加重顺铂诱导的肾近端小管细胞凋亡和线粒体损伤。 展开更多
关键词 miR-30e* 顺铂 近端小管上皮细胞 线粒体损伤
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庆大霉素致大鼠肾近端小管上皮细胞凋亡的超微结构研究 被引量:7
8
作者 刘冬娟 赖亚新 +1 位作者 徐彦平 李艳杰 《中国药物警戒》 2009年第12期709-712,共4页
目的探讨庆大霉素对实验性大鼠肾近端小管上皮细胞凋亡的影响。方法通过给大鼠腹腔注射庆大霉素100mg/Kg/d,分别在连续用药第5天、8天、10天等不同天数处死大鼠,取肾脏制备超薄切片,在透射电镜下观察肾近端小管上皮细胞凋亡的情况。结... 目的探讨庆大霉素对实验性大鼠肾近端小管上皮细胞凋亡的影响。方法通过给大鼠腹腔注射庆大霉素100mg/Kg/d,分别在连续用药第5天、8天、10天等不同天数处死大鼠,取肾脏制备超薄切片,在透射电镜下观察肾近端小管上皮细胞凋亡的情况。结果大鼠连续注射庆大霉素5天、8天、10天后肾近端小管上皮细胞均有凋亡的发生,注射庆大霉素10天的大鼠肾小管上皮细胞出现较多坏死。结论庆大霉素肾毒性作用部分是通过肾近端小管上皮细胞凋亡而实现的,细胞凋亡的发生与庆大霉素肾毒性作用强弱有关。 展开更多
关键词 大鼠 庆大霉素肾毒性 近端小管上皮细胞 细胞凋亡 超微结构
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灯盏花素抑制高糖诱导大鼠近端小管上皮细胞的氧化应激 被引量:3
9
作者 杜飞 高原 +1 位作者 姚君 王兴红 《中国实验诊断学》 北大核心 2011年第8期1276-1278,共3页
目的探讨灯盏花素对高糖诱导的原代大鼠近端小管上皮细胞(proximal tubule epithelial cells,PTEC)氧化应激的影响。方法原代培养大鼠PTEC并将其分为:正常对照组、高糖组、小剂量组、中剂量组、大剂量组,每组设6个复孔(n=6),作用72 h。... 目的探讨灯盏花素对高糖诱导的原代大鼠近端小管上皮细胞(proximal tubule epithelial cells,PTEC)氧化应激的影响。方法原代培养大鼠PTEC并将其分为:正常对照组、高糖组、小剂量组、中剂量组、大剂量组,每组设6个复孔(n=6),作用72 h。测定PTEC培养液一氧化氮(nitrogen monoxidum,NO)、过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione hormone,GSH)水平。结果高糖环境时PTEC NO水平明显升高(P<0.05),小剂量组明显降低(P<0.05),中剂量和大剂量组显著性降低(P<0.01),高糖组PTEC H2O2水平显著升高(P<0.01),小剂量明显升高(P<0.05),中剂量组、大剂量组明显降低(P<0.05);高糖组PTEC CAT显著低于NC组(P<0.01),小剂量组仍明显低于高糖组(P<0.05),大剂量组显著性高于高糖组(P<0.01);高糖组PTEC GSH水平明显低于NC组(P<0.05),小剂量组仍明显较NC组低(P<0.05),中剂量组明显升高(P<0.05),大剂量显著性升高(P<0.01);结论灯盏花素对高糖诱导的原代PTEC的氧化应激增强有明显的抑制作用;灯盏花素对DN的防治作用可能部分通过抑制PTEC的氧化应激实现的。 展开更多
关键词 灯盏花素 糖尿病肾病 近端小管上皮细胞 氧化应激
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小鼠肾脏近端小管上皮细胞原代培养条件优化及功能测试 被引量:3
10
作者 臧路平 吴新荣 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第50期9358-9360,共3页
背景:好的肾脏近端小管上皮细胞原代培养方法能够为药物筛选、机制研究等提供模型基础。目的:探索小鼠肾脏近端小管上皮细胞原代培养的最佳处理条件,并对其进行尿酸吸收功能测试。方法:无菌取小鼠肾脏,去除外膜及脂肪组织,切取近端皮质... 背景:好的肾脏近端小管上皮细胞原代培养方法能够为药物筛选、机制研究等提供模型基础。目的:探索小鼠肾脏近端小管上皮细胞原代培养的最佳处理条件,并对其进行尿酸吸收功能测试。方法:无菌取小鼠肾脏,去除外膜及脂肪组织,切取近端皮质部分,机械破碎,Ⅰ型胶原酶消化,依次过50目,100目筛网过滤,Percoll密度梯度离心法分离肾小管节段,接种至一次性细胞培养瓶。制备细胞爬片,SP法染色鉴定细胞。在1500μmol/L尿酸浓度下,以不同浓度梯度的丙磺舒和苯溴马隆作为指示药物,检测细胞尿酸吸收及作为药物作用体外模型功能。结果与结论:经机械破碎的肾脏近端皮质组织在400U胶原酶处理20min时,肾小管节段贴壁率达到最高为54.5%;首次换液最佳时间为72h;细胞在原代培养第5天生长达到对数期,在第10天状态开始有所下降,折光率低,出现部分漂浮死亡细胞。在1500μmol/L尿酸浓度的吸收培养基中,吸收实验进行30min时,其对尿酸吸收速率达到最大。指示药物丙磺舒和苯溴马隆在不同的浓度下,对于尿酸吸收的抑制率不同,其中苯溴马隆的抑制率要高于丙磺舒。提示在上述分离培养条件下能够培养出数量多、活性高的目的细胞,并且具有良好的尿酸吸收功能,在一定的尿酸和药物浓度下,能够作为研究药物作用的体外细胞模型。 展开更多
关键词 小鼠 肾脏 近端小管 上皮细胞 原代培养 尿酸吸收
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肿瘤坏死因子-α对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2表达的调控及机制 被引量:1
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作者 刘珊英 李焱 +5 位作者 常建星 范新兰 黄琼 傅玉如 林燕华 林天歆 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1292-1295,共4页
目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2(tolllike receptor2,TLR2)表达的调控以及核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)在其中的作用。方法体外分离与培养原代大鼠... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2(tolllike receptor2,TLR2)表达的调控以及核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)在其中的作用。方法体外分离与培养原代大鼠肾近端小管上皮细胞,以TNF-α按不同时间给予刺激,Western blot检测TLR2,I-κBα,磷酸化I-κBα(pI-κBα),GAPDH蛋白水平。分别以TNF-α、NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082处理25h、Bay11-7082预处理1h后加入TNF-α刺激24h,检测TLR2表达的变化。结果TNF-α刺激6~24h,TLR2高于基线水平;Bay11-7082处理组和Bay11-7082+TNF-α处理组的TLR2蛋白表达水平高于对照组。Bay11-7082+TNF-α处理组与单独TNF-α处理组TLR2蛋白表达水平无差异。TNF-α刺激后5~120min,pI-κBα蛋白水平升高。结论TNF-α促进原代大鼠肾近端小管上皮细胞TLR2蛋白表达,NF-κB对TLR2的表达可能起负调节作用。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α TOLL样受体2 核因子-ΚB κB抑制物 Bay11-7082 肾脏近端小管上皮细胞
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维生素E对慢性镉染毒小鼠肾近端小管细胞损伤的保护作用 被引量:1
12
作者 苏敏 黄悦 +1 位作者 姜俸蓉 许庭良 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期298-300,共3页
目的探讨维生素EVE对慢性染镉小鼠肾近端小管细胞损伤的保护作用。方法75只昆明种小鼠随机分为对照组、镉组和VE组,每组25只。镉组:每周2次经皮下注射氯化镉2mg/kg,给药体积5ml/kg;VE组:同时按10mg/(kg·d)给予VE;对照组:经皮下注... 目的探讨维生素EVE对慢性染镉小鼠肾近端小管细胞损伤的保护作用。方法75只昆明种小鼠随机分为对照组、镉组和VE组,每组25只。镉组:每周2次经皮下注射氯化镉2mg/kg,给药体积5ml/kg;VE组:同时按10mg/(kg·d)给予VE;对照组:经皮下注射等量生理盐水。3个月后,用光镜、透射电镜、免疫组化细胞凋亡染色(Tunel法)观察经VE处理的慢性染镉小鼠肾近端小管上皮细胞细微结构的改变,并作形态计量分析;观察细胞凋亡情况,对凋亡细胞进行计数。结果经VE处理的慢性染镉小鼠肾近端小管上皮细胞形态结构与正常对照组接近,与镉组比较有明显不同;上皮细胞核的平均截面周长、平均截面积、平均表面积、平均体积和体积密度等形态参数值与镉组比较差异也有显著性(P<0.05);与对照组相比,镉组细胞凋亡染色阳性反应细胞数量明显增多(P<0.01),而VE组数量无明显变化(P>0.05)。结论VE对慢性染镉引起的小鼠肾近端小管上皮细胞损害有保护作用。 展开更多
关键词 维生素E 近端小管 细胞凋亡 形态计量分析
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小鼠肾近端小管的三维重建 被引量:1
13
作者 陈雪 任昊 +1 位作者 杨蓓 翟效月 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期897-900,共4页
目的研究小鼠肾近端小管三维空间走行的特点及规律。方法 C57/BL/6J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块并树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到肾外髓外带共得到1 200张2.5μm厚的连续切片,显微镜下获取数字图像,计算机配准,C语言... 目的研究小鼠肾近端小管三维空间走行的特点及规律。方法 C57/BL/6J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块并树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到肾外髓外带共得到1 200张2.5μm厚的连续切片,显微镜下获取数字图像,计算机配准,C语言编程,追踪并三维重建58条近端小管走行。结果在皮质迷路中,近端小管起始段在离开肾小球后,均先向被膜方向走行约100~1 400μm后返折,在各自肾小球周围盘曲并占据相对独立的区域,很少和其他肾单位近端小管曲部区域重合。浅表皮质肾单位与中间皮质肾单位的近曲小管盘曲紧密,所占空间比近髓肾单位近曲小管小。在髓放线中,近端小管直部的走行有明显的层次:来源于浅表皮质肾单位的近端小管直部走行于中央,来源于皮质深部肾单位的近直小管则依次走行在其外围,皮质最深层的肾单位的近直小管几乎无直部。所有近端小管均止于肾外髓外带与内带的交界处,并移行为髓袢降支细段。结论小鼠近端小管的起始段、曲部和直部在皮质迷路与髓放线都有各自走行区间,其吡邻关系及所处生物学环境不同,这对肾近端小管不同节段对不同物质转运功能的生理及病理评估提供形态依据。 展开更多
关键词 近端小管 三维重建 小鼠
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发生发育小鼠肾近端小管的三维可视化 被引量:1
14
作者 丛敬 顾玲 +3 位作者 张婕 宋科昕 翟效月 王效杰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期789-794,共6页
目的成年肾近端小管(PT)是急性肾小管病变最常累及同时也最易修复的节段,探讨基于三维可视化对发生发育期PT的形态发生进行时空性分析。方法取胚胎期(E)及生后(P)多时间点小鼠肾脏每组各3只,制备5μm石蜡切片,Claudin-2免疫组织化学染... 目的成年肾近端小管(PT)是急性肾小管病变最常累及同时也最易修复的节段,探讨基于三维可视化对发生发育期PT的形态发生进行时空性分析。方法取胚胎期(E)及生后(P)多时间点小鼠肾脏每组各3只,制备5μm石蜡切片,Claudin-2免疫组织化学染色标记PT,体视学测量PT在肾皮质中体积密度;制备2.5μm连续树脂切片并使之图像化,基于数字追踪和可视化软件展示PT的空间走行,同时测量其长度。结果P1小鼠PT在皮质中的体积密度明显大于胚胎期;随后经历了下降(P3、P5)、上升(P7)开始至稳定的成年水平(P28);E14.5、E17.5和P5小管三维可视化显示,发生发育PT的长度、曲部的盘曲数随小管成熟逐渐增加,但低于成年PT;E14.5、E17.5 PT的基本空间走行与成年相似,而PT起始段的走行及PT直部在髓放线走行的毗邻关系则较成年差异较大;P5部分PT的走行接近成年PT。结论PT的发育,无论是皮质中的体积密度、长度、空间走行,与肾的整体发育一致,始于S小体期,贯穿于胚胎期并延续至生后,止于肾发育成熟(P28)。 展开更多
关键词 肾脏 近端小管 发生发育 体积密度 三维重建 小鼠
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灯盏花素治疗糖尿病大鼠血清对近端小管上皮细胞钠钾ATP酶活性的影响 被引量:3
15
作者 杜飞 高原 +1 位作者 姚君 王兴红 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第5期436-437,共2页
目的:观察灯盏花素(Bre)治疗糖尿病大鼠血清对近端小管上皮细胞(PTEC)钠钾ATP酶活性的影响。方法:实验分为模型组(DM组)、灯盏花素治疗组(BR组)和正常对照组(NC组)。前两组以链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。BR组... 目的:观察灯盏花素(Bre)治疗糖尿病大鼠血清对近端小管上皮细胞(PTEC)钠钾ATP酶活性的影响。方法:实验分为模型组(DM组)、灯盏花素治疗组(BR组)和正常对照组(NC组)。前两组以链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。BR组在模型建立成功后连续4周予腹腔注射灯盏花素20mg·kg-1.d-1,NC组和DM组则在相同的时间腹腔注射同体积的溶酶。4周后分别取大鼠血清培养PTEC,作用72h。检测血糖及血、尿的肌酐水平,放免法测定尿微量白蛋白、尿β2-微球蛋白(β2-MG)。液闪法测定PTEC钠钾ATP酶活性。结果:DM组显著高于NC组[(3799.89±440.40)vs(2221.52±459.89)pmol.mg-1.h-1,P<0.05];BR组与DM组比较明显降低[(2193.56±552.57)vs(3799.89±440.40)pmol.mg-1.h-1,P<0.05],与NC组比较无明显差异。BR组的血糖水平明显高于NC组,而与DM组差异无统计学意义,除此之外,其尿量、尿β2-MG、尿白蛋白排泄率(UAER)和肌酐清除率(Ccr)都与DM组有相同性质的变化,但变化幅度都小于DM组(P<0.05)。结论:灯盏花素治疗糖尿病大鼠血清对PTEC钠钾ATP酶活性的升高有明显的抑制作用;其对DN的防治作用可能部分通过抑制PTEC钠钾ATP酶活性实现。 展开更多
关键词 灯盏花素 近端小管上皮细胞 钠钾ATP酶
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川芎嗪对TGF-β_1诱导人胚肾近端小管上皮细胞转分化影响的实验研究 被引量:1
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作者 王俊然 郑素琴 邢红英 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期578-580,F0004,共4页
目的利用原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞作为研究对象,探讨川芎嗪(TMP)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肾近端小管上皮细胞转分化的影响。方法采用胶原酶消化后系列网筛过滤,再用密度梯度离心分离纯化细胞的方法,进行人胚肾近... 目的利用原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞作为研究对象,探讨川芎嗪(TMP)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肾近端小管上皮细胞转分化的影响。方法采用胶原酶消化后系列网筛过滤,再用密度梯度离心分离纯化细胞的方法,进行人胚肾近端小管上皮细胞的原代培养。原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞传至第2代后分为5组,空白对照组、10ng/mL TGF-β1刺激组、5ng/mLTMP+10ng/mL TGF-β1刺激组、10ng/mLTMP+10ng/mL TGF-β1刺激组及20ng/mLTMP+10ng/mL TGF-β1刺激组。刺激48h后,采用倒置相差显微镜、透射电子显微镜、酶化学染色和免疫细胞化学方法检测细胞的转分化情况。结果 TGF-β1刺激人胚肾近端小管上皮细胞后细胞拉长呈梭形,细胞间隙加大;电子显微镜下细胞失去极性,微绒毛减少直至消失;碱性磷酸酶染色阴性;细胞角蛋白18(CK-18)表达减弱,波形蛋白(Vimentin)表达增强,并表达α平滑肌肌动蛋白抗体(α-SMA)。各浓度TMP+10ng/mL TGF-β1刺激组细胞的上述变化均有不同程度的减弱,减弱程度与TMP浓度呈正比。结论 TMP能以浓度依赖方式阻止TGF-β1诱导的人胚肾近端小管上皮细胞的转分化。 展开更多
关键词 细胞转分化 转化生长因子Β1 川芎嗪 人胚肾近端小管上皮细胞 肾间质纤维化
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甲状腺低功大鼠肾近端小管结构变化的立体计量 被引量:1
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作者 郭敏 邵佑之 王敬之 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期363-366,共4页
本文对过氯酸钠诱导的甲状腺低功大鼠肾皮质迷路内的近端小管进行了光镜,电镜下的立体计量学分析。结果表明甲状腺低功时近端小管管径、上皮高度、刷状缘长度、以及细胞内线粒体体密度、侧基底细胞膜面密度、面积均减少。为甲低功肾脏... 本文对过氯酸钠诱导的甲状腺低功大鼠肾皮质迷路内的近端小管进行了光镜,电镜下的立体计量学分析。结果表明甲状腺低功时近端小管管径、上皮高度、刷状缘长度、以及细胞内线粒体体密度、侧基底细胞膜面密度、面积均减少。为甲低功肾脏近端小管重吸收能力下降提供了一个形态学依据。 展开更多
关键词 甲状腺低功 近端小管 立体计量
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利拉鲁肽对高糖诱导大鼠近端小管上皮细胞Toll样受体4表达和钠钾ATP酶活性影响 被引量:1
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作者 王兴红 郑亚萍 王丽菲 《医药导报》 CAS 2015年第8期998-1001,共4页
目的探讨利拉鲁肽(Li)对高糖诱导大鼠近端小管上皮细胞(PTEC)的保护作用。方法体外原代培养大鼠PTEC。将细胞分为正常对照组、模型对照组、Li小剂量组、Li中剂量组、Li大剂量组,每组设6个复孔,作用72 h后液闪法测定PTEC钠钾ATP酶活性;We... 目的探讨利拉鲁肽(Li)对高糖诱导大鼠近端小管上皮细胞(PTEC)的保护作用。方法体外原代培养大鼠PTEC。将细胞分为正常对照组、模型对照组、Li小剂量组、Li中剂量组、Li大剂量组,每组设6个复孔,作用72 h后液闪法测定PTEC钠钾ATP酶活性;Western blot测定Toll样受体4(TLR4)蛋白表达;酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞培养上清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的含量。结果与正常对照组比较,高糖培养72 h PTEC钠钾ATP酶活性[(2 737.88±317.22)μmol·g-1·h-1]升高,细胞和培养液中TLR4蛋白表达、IL-6、TNF-α和PAI-1增加,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,Li中、大剂量组作用72 h后PTEC钠钾ATP酶活性[(2 487.76±215.54),(2 301.55±207.63)μmol·g-1·h-1]明显降低,细胞和培养液中TLR4蛋白表达、IL-6、TNF-α和PAI-1降低,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 Li在一定程度上抑制高糖环境炎症细胞因子表达并能稳定钠钾ATP酶活性,可能对肾脏有一定的保护作用。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 近端小管上皮细胞 钠钾ATP酶 炎症 TOLL样受体4
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兔肾近端小管细胞的培养 被引量:2
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作者 邵佑之 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期297-300,T002,共5页
本文将percoll分离的兔肾近端小管细胞,应用微细胞培养插盘,在Ham F 12和Dulbecco's modified Eagle混合培养液中进行双室培养。应用充氧的培养液培养3周后,获得一层完整的近端小管细胞。透射电镜观察表明,细胞具有近端小管细胞的特... 本文将percoll分离的兔肾近端小管细胞,应用微细胞培养插盘,在Ham F 12和Dulbecco's modified Eagle混合培养液中进行双室培养。应用充氧的培养液培养3周后,获得一层完整的近端小管细胞。透射电镜观察表明,细胞具有近端小管细胞的特点,如微绒毛的出现、较丰富的线粒体、吞饮小泡、溶酶体以及不规则的质膜内褶。^(14)C标记的葡萄糖吸收试验,以及“^(14)CO_2释放的测定,说明培养出的一层近端小管细胞重吸收功能完好,代谢旺盛。本文并对该方法进行了较详细的介绍和分析。 展开更多
关键词 近端小管 细胞培养
原文传递
糖肾宁对高糖培养肾近端小管上皮细胞FN分泌及TGF-β1 mRNA表达作用 被引量:1
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作者 何立群 曹和欣 《临床肾脏病杂志》 2005年第5期227-229,共3页
目的研究中药复方糖肾宁对高糖诱导的肾近端小管上皮细胞转化生长因子β1(TGF-β1)表达和分泌纤维连接蛋白(FN)的影响,探讨其治疗糖尿病肾病(DN)的机制。方法分别采用RT-PCR和ELISA方法检测不同时间下高糖对肾近端小管上皮细胞T... 目的研究中药复方糖肾宁对高糖诱导的肾近端小管上皮细胞转化生长因子β1(TGF-β1)表达和分泌纤维连接蛋白(FN)的影响,探讨其治疗糖尿病肾病(DN)的机制。方法分别采用RT-PCR和ELISA方法检测不同时间下高糖对肾近端小管上皮细胞TGF-β1 mRNA表达和分泌FN的作用,及糖肾宁药物血清对上述指标的影响。结果高糖呈时间依赖性增加肾小管上皮细胞TGF-β1 mRNA表达,高糖培养24h后细胞分泌FN也明显增多,加入糖肾宁药物血清后上述指标均有下降(P〈0.05)。结论糖肾宁抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞TGF-β1和FN表达可能是其治疗DN的分子机制之一。 展开更多
关键词 糖肾宁 近端小管上皮细胞 TGF-Β1 MRNA 基因表达 分泌纤维连接蛋白 糖尿病肾病 中药制剂
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