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抑制连接蛋白43介导半通道活性促进脂多糖诱导的人牙髓细胞成牙本质分化
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作者 张安妮 丁灿灿 +1 位作者 黄丽苹 李适廷 《上海口腔医学》 CAS 2024年第1期22-29,共8页
目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成牙本质分化过程中的作用和机制。方法:建立SD大鼠上颌第一磨牙损伤模型,免疫荧光(im munofluorescence,IF)... 目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成牙本质分化过程中的作用和机制。方法:建立SD大鼠上颌第一磨牙损伤模型,免疫荧光(im munofluorescence,IF)染色检测Cx43在牙髓组织损伤后修复中的表达模式变化。分别采用0、1、10、100和1 000 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,筛选最适浓度,随后抑制和过表达hDPCs中Cx43的表达。实时定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹法检测Cx43和成牙本质分化相关因子牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dental matrix protein-1,DMP-1)、成骨相关转录因子(osterix,Osx)表达及细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)活性变化。进一步对hDPCs施以特异性Cx43通道抑制剂,检测Cx43介导的通道活性在hDPCs成牙本质分化中的作用,初步探讨Cx43调节LPS诱导的hDPCs成牙本质分化的作用和机制。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学处理。结果:IF结果显示,在健康牙髓组织中,Cx43主要表达于成牙本质细胞层,牙损伤3~24 h,Cx43表达减弱,随后逐渐上调,直至正常水平;损伤后3天~2周,表达呈下调趋势,并且表达于成牙本质细胞层和固有牙髓中。以10 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,可显著上调DSPP的mRNA表达(P<0.01)。抑制Cx43,可显著上调hDPCs内LPS诱导的DSPP、DMP-1和Osx mRNA表达(P<0.05);过表达Cx43,则显著抑制LPS诱导的成牙本质分化相关因子表达(P<0.01)和DSPP荧光强度。以10 ng/mL LPS激活hDPCs内ERK信号,过表达Cx43可显著减弱LPS诱导的ERK信号活性(P<0.01)。抑制Cx43介导的半通道,促进LPS诱导的hDPCs成牙本质分化相关因子mRNA表达和ERK信号活性(P<0.05);而阻断Cx43介导的细胞间通道,则抑制成牙本质分化。结论:Cx43参与调控牙髓组织的损伤后修复,并且其表达整体呈下调趋势;抑制Cx43或阻断HC,可促进LPS诱导的ERK信号活性和hDPCs成牙本质分化。 展开更多
关键词 人牙髓细胞 脂多糖 连接蛋白43 缝隙连接通道 半通道
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连接蛋白43在氧化低密度脂蛋白诱导RAW264.7细胞自噬中的作用
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作者 熊思渊 王璐 +5 位作者 田俊杰 谷扬 马雅静 马克涛 张莹莹 李新芝 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期2572-2578,共7页
目的探究连接蛋白43(Connexins43,Cx43)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7细胞)自噬中的作用。方法利用ox-LDL(100μg/mL,24 h)构建RAW264.7自噬及泡沫化模型。实验分为Cont... 目的探究连接蛋白43(Connexins43,Cx43)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7细胞)自噬中的作用。方法利用ox-LDL(100μg/mL,24 h)构建RAW264.7自噬及泡沫化模型。实验分为Control组、ox-LDL组、ox-LDL+Gap26组、ox-LDL+Gap19组。qRT-PCR检测各组Cx43、自噬蛋白Beclin-1及LC3B mRNA水平。Western blot检测Cx43、Beclin-1及LC3B蛋白水平。细胞免疫荧光技术检测Cx43、Beclin-1及LC3B在RAW264.7细胞上的定位和表达。结果油红O染色结果显示,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,ox-LDL组细胞浆内出现红染脂滴,即细胞发生泡沫化。Western blot、qRT-PCR及免疫荧光结果显示,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,ox-LDL组细胞中Cx43的表达水平升高。此外,Western blot、qRT-PCR及免疫荧光结果表明,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,与Control组相比,ox-LDL组细胞的Beclin-1、LC3BmRNA及蛋白表达水平降低;与ox-LDL组相比,ox-LDL+Gap26组及ox-LDL+Gap19组的自噬相关蛋白表达水平升高。结论阻断Cx43能促进ox-LDL诱导RAW264.7细胞自噬。 展开更多
关键词 连接蛋白43 巨噬细胞 自噬
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连接蛋白43:致盲性眼病治疗新靶点
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作者 程馨仪 李慧 王方 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期407-411,共5页
目前常见的主要致盲性眼病如角膜炎、白内障、青光眼、糖尿病视网膜病变等严重威胁人类健康并影响患者的生存质量。连接蛋白43(Cx43)作为脊椎动物体内最常见的缝隙连接蛋白,广泛分布于眼组织中,参与胚胎发育、代谢调节、组织稳态等生理... 目前常见的主要致盲性眼病如角膜炎、白内障、青光眼、糖尿病视网膜病变等严重威胁人类健康并影响患者的生存质量。连接蛋白43(Cx43)作为脊椎动物体内最常见的缝隙连接蛋白,广泛分布于眼组织中,参与胚胎发育、代谢调节、组织稳态等生理过程及炎症、氧化应激、上皮-间充质样细胞转换、血管渗漏与新生血管形成等病理过程。Cx43在各种致盲性眼病的发生发展中发挥重要作用,本文将就其在上述主要致盲性眼病发病机制中的作用和靶向Cx43治疗进展作一综述。 展开更多
关键词 连接蛋白43 致盲性眼病 分子靶向治疗
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OTUD 3敲除对神经干细胞中缝隙连接蛋白43表达的影响
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作者 徐同迎 焦倩 姜宏 《精准医学杂志》 2023年第2期100-104,共5页
目的探讨OTUD 3敲除对神经干细胞(NSCs)中缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法分离提取妊娠第14天时野生型(WT)和OTUD 3^(-/-)胚胎小鼠的脑皮质组织蛋白,同时进行体外培养WT-NSCs和OTUD 3^(-/-)-NSCs,并根据细胞状态传代,传代至第3代... 目的探讨OTUD 3敲除对神经干细胞(NSCs)中缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法分离提取妊娠第14天时野生型(WT)和OTUD 3^(-/-)胚胎小鼠的脑皮质组织蛋白,同时进行体外培养WT-NSCs和OTUD 3^(-/-)-NSCs,并根据细胞状态传代,传代至第3代时,应用倒置显微镜观察第1、3天时OTUD 3^(-/-)-NSCs和WT-NSCs生长状态。用细胞免疫荧光染色检测WT-NSCs和OTUD 3^(-/-)-NSCs中Ki67、Nestin和β-tubulinⅢ的表达情况,应用Western blotting方法检测WT-NSCs和OTUD 3^(-/-)-NSCs中以及WT和OTUD 3^(-/-)胚胎小鼠脑皮质组织中OTUD3和Cx43表达变化情况。结果培养并传代至第3代的WT-NSCs和OTUD 3^(-/-)-NSCs生长状态良好,细胞免疫荧光染色显示Ki67、Nestin和β-tubulinⅢ染色阳性。与WT-NSCs相比,OTUD 3^(-/-)-NSCs中OTUD3和Cx43表达量显著下调(t=16.82、3.21,P<0.05);与WT胚胎小鼠相比,OTUD 3^(-/-)胚胎小鼠脑皮质组织中OTUD3和Cx43表达量显著下调(t=10.04、20.41,P<0.05)。结论OTUD 3敲除后,NSCs中Cx43表达量显著下调,Cx43可能在促进NSCs的增殖和神经发育过程中发挥调节作用。 展开更多
关键词 神经干细胞 连接蛋白43 去泛素酶类 小鼠 基因敲除 细胞周期 细胞增殖
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连接蛋白43在吡啡尼酮促进小鼠RAW264.7巨噬细胞M2型极化中的作用
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作者 蒋涵 代明星 +4 位作者 谢福 卢洲 丁成鹤 李宗平 何鹏臣 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期569-577,共9页
目的探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)是否能够调节吡啡尼酮(pirfenidone,PFD)介导的小鼠RAW264.7巨噬细胞M2型极化。方法将体外培养的对数生长期小鼠RAW264.7巨噬细胞分为对照组(Control组)、PFD组、PFD+Cx43特异性阻断剂Gap19组(PFD+... 目的探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)是否能够调节吡啡尼酮(pirfenidone,PFD)介导的小鼠RAW264.7巨噬细胞M2型极化。方法将体外培养的对数生长期小鼠RAW264.7巨噬细胞分为对照组(Control组)、PFD组、PFD+Cx43特异性阻断剂Gap19组(PFD+Gap19组)、吡啡尼酮+阴性慢病毒对照组(PFD+NC组)、吡啡尼酮+Cx43过表达慢病毒组(PFD+OE组)。采用慢病毒转染技术,加入含有过表达慢病毒的培养基,使Cx43在巨噬细胞中过表达。采用Western blot技术检测小鼠RAW264.7巨噬细胞Cx43和M2型极化标记物CD206、Arg-1的蛋白表达水平,采用倒置荧光显微镜观察小鼠RAW264.7巨噬细胞I型精氨酸酶(arginase1,Arg-1)和CD206的蛋白表达和定位,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测Cx43,Arg-1和CD206的RNA表达水平。结果PFD组中的Cx43蛋白表达与Control组相比降低;PFD组中的M2型极化标志物CD206和Arg-1与Control组相比大幅升高;与PFD组相比,在PFD+Gap19组中Arg-1和CD206的表达均显著升高;与PFD组相比,在PFD+NC组中Arg-1和CD206的表达无明显改变。与PFD+NC组相比,PFD+OE组中Arg-1和CD206的表达均显著降低。结论PFD可以通过下调Cx43促进小鼠RAW264.7巨噬细胞向M2型极化。通过Gap19和过表达慢病毒调节Cx43的表达,也可调节巨噬细胞M2型极化。 展开更多
关键词 吡啡尼酮 连接蛋白43 小鼠RAW264.7巨噬细胞 极化
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双重免疫荧光标记及激光共聚焦显微镜技术对不稳定膀胱逼尿肌间隙连接蛋白43的定量和定位实验 被引量:1
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作者 周德荣 章振保 《中国临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2005年第26期155-157,i0007,共4页
目的:建立一种应用荧光免疫组织化学双重标记技术和激光扫描共聚焦显微镜观察不稳定膀胱逼尿肌连接蛋白43表达和分布模式的方法。方法:实验于2003-09/2004-06在汕头大学医学院病理实验室完成。选择健康清洁级wistar大鼠50只,随机分成两... 目的:建立一种应用荧光免疫组织化学双重标记技术和激光扫描共聚焦显微镜观察不稳定膀胱逼尿肌连接蛋白43表达和分布模式的方法。方法:实验于2003-09/2004-06在汕头大学医学院病理实验室完成。选择健康清洁级wistar大鼠50只,随机分成两组,对照组10只,不稳定膀胱组40只。建立膀胱出口梗阻模型之后行充盈性膀胱测压,确定不稳定膀胱组13只。对照组只行尿道分离术而不作结扎术。麻醉未醒即处死大鼠,取下膀胱分离出逼尿肌组织。①荧光免疫组织化学双重标记:应用罗丹明麦芽凝集素标记逼尿肌肌细胞膜,异硫氰酸荧光素素标记间隙连接蛋白43。②激光共聚焦显微镜技术:使用ACAS/Ultima312型激光共聚焦显微镜的检测器1和检测器2同时分别检测连接蛋白43和细胞膜(当只开通检测通道1时,仅显示代表连接蛋白43的绿色小短杆状或小点状荧光斑;当仅开通检测通道2时,仅显示被染成红色的细胞膜,清楚地显示了细胞的外形轮廓,胞浆及胞核则不显示;当两个通道同时开通时,绿色的连接蛋白43与红色细胞膜重叠后变成黄色)。主要参数如下:小孔孔径225μm,X轴扫描点数390,Y轴扫描点数390,扫描步径0.6μm,镜扫描速度10mm/s,扫描强度85%,激光强度360mW,每点采样次数30,物镜40倍,检测器1(最适波长488nm)灵敏度62%,检测器2(最适波长514nm),灵敏度58%。③激光共聚焦显微镜图像分析法:应用ImageAnalysis程序进行图像分析。以连接蛋白43的像素值占总像素值的百分比值作为连接蛋白43的像素密度,其大小代表连接蛋白43量的大小;以连接蛋白43荧光斑面积的大小反映连接蛋白43量的大小。结果:不稳定膀胱组中出现不稳定膀胱的13只和对照组10只进入结果分析。①两组大鼠逼尿肌连接蛋白43的像素密度和荧光斑面积比较:不稳定膀胱组连接蛋白43象素密度值较对照组象素密度值明显增多(3.45±1.58,0.85±0.44,t=5.037,P<0.01);不稳定膀胱组荧光斑面积较对照组显著增大犤(19.92±8.61)μm2,(11.46±2.55)μm2,t=2.995,P<0.01犦。②激光共聚焦显微镜下双重标记的大鼠逼尿肌连接蛋白43荧光图像:对照组逼尿肌肌束细胞平行排列,分布均匀,连接蛋白43表达量极少。不稳定膀胱组细胞大小不一,形状多样,排列紊乱,连接蛋白43数量较对照组明显增多,表现在密度增大,荧光斑面积增大,连接蛋白43的表达主要出现在细胞与细胞连接处。结论:采用双重标记的荧光免疫组织化学和激光共聚焦显微镜技术,抗连接蛋白43单克隆抗体特异地与间隙连接蛋白43结合,在组织原位上准确地标记间隙连接,同时显示细胞膜,既能对其进行定量分析,又能同时对其进行定位。 展开更多
关键词 膀胱疾病 缝隙接合部 连接蛋白43 荧光免疫技术 激光共聚焦显微镜技术 间隙连接蛋白43 不稳定膀胱 膀胱逼尿肌 免疫荧光标记 病理实验室
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肌肉转录调节因子和连接蛋白43基因表达对大鼠成纤维细胞分化的生长特性及生物学功能影响 被引量:10
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作者 汪进益 范慧敏 +2 位作者 刘中民 李杨 马亮 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期857-861,共5页
目的通过观察转染肌肉转录调节因子(myoblast determining,MyoD)基因和连接蛋白43(connexin43,Cx43)基因的大鼠成纤维细胞(fibroblast,FB)分化生长及生物学功能的改变,初步探讨MyoD和Cx43基因转染FB治疗缺血性心脏病(ischemic heart dis... 目的通过观察转染肌肉转录调节因子(myoblast determining,MyoD)基因和连接蛋白43(connexin43,Cx43)基因的大鼠成纤维细胞(fibroblast,FB)分化生长及生物学功能的改变,初步探讨MyoD和Cx43基因转染FB治疗缺血性心脏病(ischemic heart disease,IHD)的可能机制和途径。方法构建真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-MyoD和pLenti6/V5-DEST-Cx43,利用慢病毒表达系统,将MyoD和Cx43基因转入大鼠RFL-6FB;经终浓度为50μg/ml的Blasticidin进行筛选培养后,通过RT-PCR、Western blot等分子生物学手段确定MyoD和Cx43的转录和表达情况;借助免疫细胞化学、显微镜观察等手段对MyoD的肌肉特异性蛋白和Cx43连接蛋白进行检测,并观察转染后FB的生长情况。结果RT-PCR和Western blot检测出MyoD和Cx43基因转染后FB表达了相应mRNA及其蛋白,免疫细胞化学检测转染的FB细胞中Desmin、α-actin呈阳性表达。经分化培养基诱导,培养1周后,FB出现多细胞融合及肌管形成。结论MyoD及Cx43基因转染可改变FB的生物学特性,转向分化为成肌细胞,并能形成多核肌管及连接蛋白,形态学也得以证实,为进一步研究MyoD和Cx43基因转染FB治疗IHD提供了实验基础。 展开更多
关键词 肌肉转录调节因子 连接蛋白43 基因转染 慢病毒载体 成纤维细胞
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体外LPS诱导血管内皮细胞通透性改变及其与连接蛋白43的关系 被引量:8
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作者 明佳 袁侨英 +2 位作者 周艳 苟元彬 刘良明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期2582-2585,共4页
目的研究缝隙连接蛋白(connexin,Cx)43在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)通透性中的表达变化及其意义。方法以1、2、3、4μg/ml LPS刺激原代培养的大鼠VEC,观察作用15、30 min,1... 目的研究缝隙连接蛋白(connexin,Cx)43在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)通透性中的表达变化及其意义。方法以1、2、3、4μg/ml LPS刺激原代培养的大鼠VEC,观察作用15、30 min,1、2、3、4、5、6、7 h后VEC增殖活力和通透性的变化;2μg/ml LPS刺激VEC后,采用RT-PCR和Western blot等方法检测Cx43的表达变化;分析VEC通透性和Cx43表达之间的相关性。结果 1、2μg/ml的LPS对VEC增殖活力无明显影响,3、4μg/ml的LPS明显降低了VEC的增殖(P<0.01);2μg/ml的LPS能够较好地模拟脓毒性休克的血管高通透性(P<0.01);用此浓度的LPS刺激VEC后Cx43的mRNA和蛋白表达均逐渐降低(P<0.01);Cx43的表达与LPS引起的VEC通透性改变呈负相关关系(r=-0.877,P<0.01)。结论 Cx43可能参与了脓毒性休克后VEC通透性的调节;Cx43可能具有抑制脓毒性休克后血管内膜通透性的作用。[关键词]脓毒性休克;脂多糖;血管通透性;血管内皮细胞; 展开更多
关键词 脓毒性休克 脂多糖 血管通透性 血管内皮细胞 连接蛋白43
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生脉注射液联合血塞通注射液对心肌梗死大鼠室颤阈值和心肌连接蛋白43表达的影响 被引量:9
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作者 吴爱明 张冬梅 +4 位作者 娄利霞 翟建英 吕晞滢 柴立民 王硕仁 《中西医结合学报》 CAS 2011年第7期775-782,共8页
目的:探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠室颤阈值、心脏大小、心肌梗死百分比及心肌缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达的影响。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型... 目的:探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠室颤阈值、心脏大小、心肌梗死百分比及心肌缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达的影响。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血组和卡托普利组,采用结扎冠状动脉前降支的方法建立MI模型,假手术组只穿线,不结扎。于造模成功后第2天开始给予相应药物治疗,疗程为1个月。治疗结束后,采用在体心脏电刺激法检测心脏室颤阈值,称取全心质量后计算心脏质量指数(全心质量/体质量),图像分析测量左室内径和心肌梗死百分比,实时荧光定量聚合酶链式反应检测心肌Cx43mRNA的表达,免疫组织化学法检测心肌Cx43蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠室颤阈值显著降低,心脏质量指数和左室内径明显增大,心肌Cx43mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组和卡托普利组室颤阈值显著提高,心脏质量指数、左室内径和心肌梗死百分比均明显减小(P<0.05或P<0.01)。益气活血组Cx43mRNA和蛋白的表达水平均显著提高(P<0.05或P<0.01),而卡托普利组仅Cx43蛋白表达的光密度均值和综合光密度均值有明显的提高(P<0.05)。益气活血中药提高MI大鼠心肌Cx43mRNA和蛋白表达的作用优于卡托普利(P<0.05)。结论:生脉注射液联合血塞通注射液能提高MI大鼠心脏室颤阈值,其机制与改善MI后心脏结构重构和减轻心肌Cx43的表达有关。 展开更多
关键词 生脉注射液 血塞通注射液 心肌梗死 室颤阈值 连接蛋白43 心室重构 大鼠
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TGF-β1对大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白43介导缝隙连接通讯功能的影响 被引量:10
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作者 刘镘利 张志红 +1 位作者 王宗仁 马静 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期99-104,共6页
目的:观察转化生长因子TGF-β1对成年大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白Cx43表达以及由Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的影响,旨在探讨TGF-β1对Leydig细胞的影响是否与其改变细胞间GJIC功能相关。方法:将原代培养纯化的Leydig细... 目的:观察转化生长因子TGF-β1对成年大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白Cx43表达以及由Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的影响,旨在探讨TGF-β1对Leydig细胞的影响是否与其改变细胞间GJIC功能相关。方法:将原代培养纯化的Leydig细胞分为6组:实验组分别以1、2、5、10 ng/ml的TGF-β1处理细胞20 h,空白对照组以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液处理细胞,部分实验中以GJIC抑制剂甘珀酸(Carbenox-olone)处理细胞作为阳性对照组。采用免疫荧光法和Western印迹观察Cx43在细胞中的定位和表达变化,用荧光漂白恢复实验(FRAP)检测细胞间GJIC功能的改变。结果:Cx43表达呈斑点状散在分布于Leydig细胞的胞质和胞膜中,TGF-β1处理20 h后,Cx43在胞质中的表达强度随着TGF-β1浓度的增加较空白对照组明显增强,而其在胞膜中的表达则无明显改变。Western印迹结果显示磷酸化状态的Cx43随着TGF-β1浓度增加表现出较空白对照明显增强的趋势(P<0.05),而非磷酸化状态则无显著差异。FRAP结果显示经5 ng/ml TGF-β1作用20 h后细胞内荧光强度较空白对照明显减弱,具有显著性差异(P<0.01),且其平均荧光恢复率仅为(43.58±1.87)%。结论:TGF-β1可显著下调Leydig细胞间的GJIC功能,这种抑制作用可能通过增加其连接蛋白Cx43在细胞质中的表达,提高其磷酸化水平来实现。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 LEYDIG细胞 连接蛋白43 缝隙连接细胞间通讯
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急性心肌缺血时连接蛋白43降解对传导速度影响的研究 被引量:9
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作者 林吉进 李玉光 +1 位作者 谭学瑞 曾欣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期786-788,T004,共4页
目的 :探讨急性短时间缺血时心肌细胞连接蛋白 4 3(Cx4 3)的降解对缺血心肌电传导速度的影响。方法 :16只犬随机分为正常对照组 (n =4 )和缺血组 (n =12 ) ,缺血组结扎冠状动脉 1h造成急性心肌缺血 ,测定缺血区心肌电传导速度 ,应用激... 目的 :探讨急性短时间缺血时心肌细胞连接蛋白 4 3(Cx4 3)的降解对缺血心肌电传导速度的影响。方法 :16只犬随机分为正常对照组 (n =4 )和缺血组 (n =12 ) ,缺血组结扎冠状动脉 1h造成急性心肌缺血 ,测定缺血区心肌电传导速度 ,应用激光共聚焦显微镜技术和荧光免疫组织化学方法对缺血心肌Cx4 3含量进行定量检测。结果 :(1)急性心肌缺血时Cx4 3迅速降解 ,心肌电传导速度明显下降 ;(2 )缺血区各局部传导速度与该部位Cx4 3像素密度呈明显正相关 ;(3)出现持久传导阻滞的区域其Cx4 3降解程度均大于 5 0 %。结论 :急性短时间 (1h)缺血时Cx4 3的降解已经开始对心肌传导速度产生明显的影响 ,而局部心肌Cx4 3的严重降解将导致该区域出现持久传导阻滞。 展开更多
关键词 心肌缺血 连接蛋白43 传导速度 激光扫描共焦显微镜检查
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成人与新生儿心脏连接蛋白43表达差异 被引量:6
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作者 徐振平 郭志坤 +1 位作者 文小军 张光谋 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期509-512,共4页
目的 探讨成人与新生儿心脏连接蛋白 4 3(Cx4 3)表达差异。 方法 应用SP免疫组织化学和图像分析方法 ,观测成人与新生儿心脏Cx4 3的蛋白表达。 结果  1 新生儿心脏Cx4 3在心房和心室均呈斑点状遍布于心肌细胞侧面连接处和细胞质内 ... 目的 探讨成人与新生儿心脏连接蛋白 4 3(Cx4 3)表达差异。 方法 应用SP免疫组织化学和图像分析方法 ,观测成人与新生儿心脏Cx4 3的蛋白表达。 结果  1 新生儿心脏Cx4 3在心房和心室均呈斑点状遍布于心肌细胞侧面连接处和细胞质内 ,闰盘处极少。 2 成人Cx4 3表达在心房肌非均质分布于细胞侧面连接处和端闰盘处 ;心室肌典型地排列在闰盘处。 3 图像分析表明 ,心肌细胞Cx4 3分布密度 ,新生儿心房 <心室 ,成人心房 >心室。成人心房、心室均低于新生儿。 结论 新生儿Cx4 3主要分布于心肌细胞侧连接处 ,成人心房和心室存在差异。Cx4 3分布密度新生儿心房 <心室 ,成人心房 >心室 ;成人心脏低于新生儿。提示 ,Cx4 3有增龄变化。 展开更多
关键词 连接蛋白43 免疫组织化学 图像分析 人心脏
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超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4、连接蛋白43和平足蛋白在小鼠胚胎心的表达与心传导系的发生 被引量:4
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作者 乔爱秀 景雅 +5 位作者 蔡玉瑾 杨艳萍 李海荣 乔从进 张涛 王晓燕 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期405-411,共7页
目的探讨小鼠胚胎心传导系的发生机制。方法用抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)、抗缝隙连接蛋白43(CX43)和抗平足蛋白(podoplanin)抗体,对40只胚龄9~16d小鼠胚胎心进行连续石蜡切片并免疫组织化... 目的探讨小鼠胚胎心传导系的发生机制。方法用抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)、抗缝隙连接蛋白43(CX43)和抗平足蛋白(podoplanin)抗体,对40只胚龄9~16d小鼠胚胎心进行连续石蜡切片并免疫组织化学或免疫荧光染色。结果胚龄9d,较强的HCN4阳性表达集中在MHC阴性的静脉窦壁,随心脏发育,HCN4较强阳性表达逐渐向窦房结转移。胚龄11d开始,CX43阴性表达显示部位特异性。CX43阴性染色经窦房结沿右心房背侧壁和左、右静脉瓣向房室管背侧壁延伸。胚龄13d,左、右静脉瓣与房间隔底部融合后,进一步延续为房室管背侧壁发育中的CX43阴性染色的房室结,继而与室间隔顶部CX43阴性的房室束相连。胚龄9~10d,在MHC阳性心肌、心包腔背侧壁脏壁中胚层心肌前体细胞及静脉窦周间充质均显示podoplanin阳性表达。胚龄11~13d,podoplanin阳性间充质细胞沿心脏外表面扩展形成podoplanin阳性间皮样心外膜。结论心脏发育早期,主起搏点位于静脉窦壁,起搏电位的产生早于收缩功能的发生。CX43阴性心肌是发育中的心传导系心肌,在胚龄11d即可观察到心传导系早期雏形。podoplanin参与促进心肌前体细胞向心肌细胞的分化。 展开更多
关键词 胚胎 心传导系 发育 超级化激活环核苷酸门控阳离子通道4 连接蛋白43 平足蛋白 免疫组织 化学 小鼠
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自发性高血压大鼠肾损伤伴随调节性T淋巴细胞下降及连接蛋白43的表达增强 被引量:6
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作者 张海超 王爱 +4 位作者 张亮 李新芝 李丽 司军强 马克涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期941-944,950,共5页
目的探讨高血压大鼠肾损伤时调节性T淋巴细胞(regulatory T lymphocytes,Treg)及连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在外周血的表达变化。方法选取16~17周龄雄性自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rats,SHR)和正常Wistar京都... 目的探讨高血压大鼠肾损伤时调节性T淋巴细胞(regulatory T lymphocytes,Treg)及连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在外周血的表达变化。方法选取16~17周龄雄性自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rats,SHR)和正常Wistar京都(Wistar-Kyoto,WKY)大鼠,各17只,测量血压后,采用苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察大鼠肾脏组织的病理学改变,应用流式细胞术检测大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞以及Cx43在CD4+和CD8+T细胞的表达比率。结果与WKY大鼠比较,SHR肾脏血管壁增厚,部分血管周围炎性细胞浸润和肾小球萎缩等肾损伤现象;WKY大鼠和SHR外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞所占CD4+T细胞的频率分别为(3.1±0.1)%和(1.9±0.1)%,两者间有显著性差异(P〈0.01);WKY大鼠和SHR外周血中CD4+Cx43+的表达比率分别为(0.76±0.20)%和(1.83±0.34)%;CD8+Cx43+的表达比率分别为(25.33±1.71)%和(36.46±2.87)%,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论自发性高血压大鼠肾损伤伴随其外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的频率下调,且Cx43在CD4+和CD8+T淋巴细胞的表达增加。 展开更多
关键词 连接蛋白43 调节性T淋巴细胞 高血压肾损伤 流式细胞术
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Cajal间质细胞和缝隙连接蛋白43在先天性巨结肠中的表达 被引量:8
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作者 张娟 王维林 +1 位作者 张志波 王伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期227-229,共3页
目的本研究通过观察Cajal间质细胞(ICCs)和缝隙连接蛋白43(connexin 43)在先天性巨结肠(HD)肠管中的分布情况,探讨HD的发病机制。方法采用兔抗人多克隆c-kit抗体和connexin 43抗体,通过SABC双标免疫组化染色方法观察35例HD患儿肠管c-kit... 目的本研究通过观察Cajal间质细胞(ICCs)和缝隙连接蛋白43(connexin 43)在先天性巨结肠(HD)肠管中的分布情况,探讨HD的发病机制。方法采用兔抗人多克隆c-kit抗体和connexin 43抗体,通过SABC双标免疫组化染色方法观察35例HD患儿肠管c-kit+ICCs和connexin 43的分布情况。结果ICCs分布在环肌内和肌间神经丛周围,ICCs彼此及与平滑肌细胞形成缝隙连接。在HD病变肠管ICCs数目明显减少甚至消失,与HD正常肠管相比,差异十分显著(P<0.01)。在HD病变肠管connexin 43表达明显减弱。结论ICCs和connexin 43分布异常导致了HD病变肠管慢波节律和兴奋传导异常,从而引起或加重HD发病。 展开更多
关键词 先天性巨结肠 CAJAL间质细胞 连接蛋白43
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连接蛋白43与心性猝死的相关性研究进展 被引量:6
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作者 程灵犀 罗斌 +6 位作者 林俊莲 刘水平 阳宇 汪冠三 许心舒 张能培 韩奇杰 《中国法医学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第3期179-181,共3页
部分心性猝死者死后尸检时心脏没有发现明显病理学异常征象,过去均将其归属原因不明的猝死范畴。近年来研究显示,心肌连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达对于心性猝死的诊断具有十分重要的意义。本文就Cx43结构、功能以及在心血管疾病发... 部分心性猝死者死后尸检时心脏没有发现明显病理学异常征象,过去均将其归属原因不明的猝死范畴。近年来研究显示,心肌连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达对于心性猝死的诊断具有十分重要的意义。本文就Cx43结构、功能以及在心血管疾病发生发展中的作用与法医学意义作一综述。 展开更多
关键词 法医病理学 连接蛋白43 心血管疾病 心性猝死
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正加速度重复暴露后大鼠心室肌缝隙连接蛋白43表达及分布的改变 被引量:4
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作者 周瑛 孙喜庆 +2 位作者 王冰 耿捷 王永春 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期320-326,共7页
本文旨在探讨不同水平的一周重复多次正加速度(+Gz)暴露后大鼠心室肌缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达及分布的改变。36只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、+6Gz组和+10Gz组,每组12只。+Gz组大鼠分别暴露于+6Gz和+10Gz各3mi... 本文旨在探讨不同水平的一周重复多次正加速度(+Gz)暴露后大鼠心室肌缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达及分布的改变。36只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、+6Gz组和+10Gz组,每组12只。+Gz组大鼠分别暴露于+6Gz和+10Gz各3min,1次/d,共1周,分别于末次暴露后即刻、1d、3d、7d(各3只)取心室肌作免疫组织化学染色和Western blot分析,检测Cx43的表达和分布。免疫组织化学结果显示,+Gz重复暴露可引起大鼠心室肌Cx43分布方式明显紊乱,Cx43在心肌细胞侧-侧连接处的表达明显增加,在心肌细胞端-端连接处的表达减少。Western Blot结果显示,+6Gz组与+10Gz组的Cx43蛋白表达量于末次暴露后即刻、1d、3d、7d与对照组相应时刻相比均明显减少(P<0.001),以暴露后即刻减少最为明显,且随着+Gz暴露时间的延长,表达逐渐恢复,但在暴露后7d,两组的Cx43表达量仍未恢复至对照组水平。Cx43蛋白表达的上述改变在+10Gz组比+6Gz组更为显著。以上结果提示+Gz重复暴露可引起大鼠心室肌Cx43表达量的一过性减少,分布方式明显紊乱,这种改变很可能是+Gz致心律失常发生的重要原因之一。 展开更多
关键词 加速度 心肌 连接蛋白43 免疫组织化学 蛋白印迹法
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脂联素对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43表达的影响 被引量:9
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作者 乔英艳 王晋青 张玖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期464-469,共6页
目的:观察脂联素(APN)对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,进一步探讨其抗心律失常的可能机制。方法:将48只雄性Wistar大鼠随机分成:(1)假手术(SM)组;(2)缺血再灌注(I/R)组:结扎冠状动脉左前降支,30 min后松开结扎线,... 目的:观察脂联素(APN)对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,进一步探讨其抗心律失常的可能机制。方法:将48只雄性Wistar大鼠随机分成:(1)假手术(SM)组;(2)缺血再灌注(I/R)组:结扎冠状动脉左前降支,30 min后松开结扎线,再灌注120 min;(3)脂联素+缺血再灌注组1(L/R+APN1):先阻断血流30 min,于再灌注120 min开始时给予3.5μg/kg APN;(4)脂联素+缺血再灌注组2(I/R+APN2):缺血前10 min给予3.5μg/kg APN,余同I/R组。观察各组心律失常的发生情况;应用RT-PCR观察各组心室肌细胞Cx43基因表达;用免疫组织化学方法观察Cx43分布的变化;应用硫代巴比妥酸(TBA)法和黄嘌呤氧化酶法测各组动物血清中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;用RT-PCR及Western blotting法分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及蛋白的表达,用电镜观察各组心室肌超微结构的改变。结果:(1)I/R组与SM组比较,心律失常评分和血清MDA含量显著增高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01);心室肌Cx43表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),Cx43分布紊乱,失去正常的规律性;心肌细胞超微结构有明显损伤;心室肌eNOS mRNA及蛋白的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)无论缺血前还是缺血后使用脂联素处理,与I/R组相比,心律失常评分显著降低(P<0.01);Cx43及eNOS表达增高(P<0.01),Cx43分布紊乱的程度减轻;心肌细胞超微结构损伤明显改善。结论:APN可能通过氧化应激调节Cx43的功能,从而发挥抗缺血/再灌注心律失常的作用。 展开更多
关键词 脂联素 连接蛋白43 再灌注 心律失常 一氧化氮合酶
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心肌病猝死者心肌连接蛋白43的免疫组化染色观察 被引量:9
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作者 陈新山 金秀文 张益鹄 《中国法医学杂志》 CSCD 2006年第2期76-78,i0001,共4页
目的探讨心肌病猝死者心肌连接蛋白43(Cx43)染色变化及其与猝死的关系。方法运用免疫组化和图像分析技术,分2组(A和B组)检测20例心肌病猝死者心室肌的Cx43染色情况;并与14例非心肌病猝死者(C组)的检测结果对照。结果扩张型心肌病(DCM)... 目的探讨心肌病猝死者心肌连接蛋白43(Cx43)染色变化及其与猝死的关系。方法运用免疫组化和图像分析技术,分2组(A和B组)检测20例心肌病猝死者心室肌的Cx43染色情况;并与14例非心肌病猝死者(C组)的检测结果对照。结果扩张型心肌病(DCM)猝死组(A组,11例)心肌Cx43染色明显减弱,阳性着色斑点大小不等、深浅不一、分布不均,有的呈散在颗粒状;其它类型的心肌病猝死组(B组,9例)亦见类似变化;非心肌病猝死的对照组(C组,14例)未见明显变化。定量检测并经统计分析发现,Cx43蛋白染色阳性的面积,A组与B组和C组的差异有非常显著性意义(P<0.01),B组与C组的差异无显著性意义(P>0.05);而平均光密度各组之间的差异无显著性意义(P>0.05)。结论心肌病猝死者心肌Cx43免疫组化染色明显减弱,尤以扩张型心肌病明显;心肌病猝死者心肌Cx43变化可能与其猝死有一定关系。 展开更多
关键词 法医病理学 心肌病 猝死 连接蛋白43(Cx43) 免疫组织化学
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胎儿心脏连接蛋白43的表达 被引量:5
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作者 徐振平 郭志坤 +1 位作者 张光谋 文小军 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期454-456,共3页
目的:研究胎儿心脏不同部位连接蛋白43(Cx43)的表达。方法:应用SP免疫组化方法和图像处理系统,分析和比较胎儿心脏不同腔室心肌细胞Cx43的表达。结果:(1)胎儿心脏Cx43的蛋白表达在心脏4个腔均有,呈斑点状遍布于整个心房肌和心室肌的细... 目的:研究胎儿心脏不同部位连接蛋白43(Cx43)的表达。方法:应用SP免疫组化方法和图像处理系统,分析和比较胎儿心脏不同腔室心肌细胞Cx43的表达。结果:(1)胎儿心脏Cx43的蛋白表达在心脏4个腔均有,呈斑点状遍布于整个心房肌和心室肌的细胞质内和细胞膜表面,少数位于闰盘处。(2)Cx43主要在心室肌表达,心房较少。左、右心房肌和房间隔之间及左、右心室肌和室间隔之间的分布相似。结论:胎儿心脏Cx43蛋白表达主要分布于心肌细胞质内和细胞表面。心室表达多于心房,这种差异可能与胎儿期心房和心室之间功能差异有关。 展开更多
关键词 胎儿 心脏 连接蛋白43 表达
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