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用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中CK20mRNA 被引量：1
1
作者 胡庆宏 易诚予 刘明圭 《实用临床医学（江西）》 CAS 2006年第12期27-28,共2页
目的建立一种简便、快速的检测血中微量大肠癌细胞CK20mRNA的方法。方法用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中大肠癌标准细胞株VoLo的CK20mRNA。结果浓度分别为1、10、100、1000个/mL的大肠癌标准细胞株LoVo的每份标本,均扩增出... 目的建立一种简便、快速的检测血中微量大肠癌细胞CK20mRNA的方法。方法用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中大肠癌标准细胞株VoLo的CK20mRNA。结果浓度分别为1、10、100、1000个/mL的大肠癌标准细胞株LoVo的每份标本,均扩增出了符合所设计片段大小的303bp的目的产物条带。结论用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中微量存在的大肠癌细胞CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,可以大力地推广于临床。 展开更多
关键词 细胞角蛋白20 大肠癌 逆转录聚合酶链反应 巢式逆转录聚合酶链反应
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逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移的临床意义 被引量：16
2
作者 袁宏银 程伏林 +2 位作者 魏正专 杨国樑 陈家宽 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1069-1073,共5页
背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋... 背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋巴结中细胞角质蛋白CK20mRNA,揭示微转移灶的存在,并与常规病理苏木精伊红(HE)染色和免疫组化染色结果进行比较;分析HE染色和RT-PCR检测结果对判定临床病理分期和统计生存率的影响。结果:共检测432个淋巴结,HE染色、免疫组化染色和RT-PCR法淋巴结转移检出率分别为57.2%、62.3%和73.1%。HE染色和免疫组化的检出率无显著性差异(P>0.05),而HE染色和RT-PCR法检测结果有显著性差异(P<0.05)。56例患者中,按HE染色结果确定的PN0、PN1和PN2期,其5年无复发转移生存率分别为80%、60%和50%;通过RT-PCR技术检测,升级后的PN0、PN1和PN2期5年无复发转移生存率分别为100%、61.9%和55.6%,两种方法分析的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:HE染色未确切指出淋巴结微转移癌;RT-PCR法检测CK20mRNA可以推断淋巴结微转移癌的存在,从而有助于确定结直肠癌临床分期和预测预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 淋巴结微转移 逆转录聚合酶链反应 CK20
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应用巢式逆转录聚合酶链反应检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(VHSV) 被引量：10
3
作者 倪穗 余晓巍 +3 位作者 王建平 雷爱莹 曾地刚 吴雄飞 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期489-493,共5页
参照鱼类病毒性出血性败血症病毒序列,根据PCR引物设计的原则,设计巢式PCR引物,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对如何快速检测鱼类病毒性出血性败血症病的方法进行了较为系统的研究,并对RT-PCR的反应条件进行了优化。结果表明... 参照鱼类病毒性出血性败血症病毒序列,根据PCR引物设计的原则,设计巢式PCR引物,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对如何快速检测鱼类病毒性出血性败血症病的方法进行了较为系统的研究,并对RT-PCR的反应条件进行了优化。结果表明,巢式RT-PCR扩增获得279bp的特异性片断,阴性对照无扩增条带。巢式RT-PCR扩增出的特异性片段经测序分析,结果证实与报道的序列完全一致。该方法最低可检测出0.1pg的鱼类病毒性出血性败血症病毒RNA。初步建立了VHSV的巢式RT-PCR检测方法,该方法灵敏、特异,可为VHSV的检测提供一个快速、有效的手段。 展开更多
关键词 病毒性出血性败血症病毒 巢式逆转录聚合酶链反应 检测
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多重逆转录聚合酶链反应检测主要上呼吸道病毒 被引量：8
4
作者 居丽雯 蒋露芳 +3 位作者 甘愉 周联娣 姜庆五 谈兆麟 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期305-307,共3页
目的　建立用多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒以及呼吸道合胞病毒 (RSV)A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法 ,以快速检测上呼吸道感染主要病毒及对甲型、甲亚型、乙型流感病毒在上海地区人群感染、... 目的　建立用多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒以及呼吸道合胞病毒 (RSV)A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法 ,以快速检测上呼吸道感染主要病毒及对甲型、甲亚型、乙型流感病毒在上海地区人群感染、流行情况调查。方法　采用经MDCK细胞接种培养的甲 3型、乙型流感病毒和Hep - 2细胞接种培养的RSVA型、B型标准毒株病毒液 ,以及甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒和RSVA型、B型混合毒株病毒液 ,使用 5组引物 ,分别为HA1- 5a1和HAl- 3a1(甲 1型流感病毒 )、HA3 - 5a1和HA3 - 3a1(甲 3型流感病毒 )、NP- 5b1和NP - 3b1(乙型流感病毒 )、RSVAF和RSVAR(RSVA型 )、RSVBF和RSVBR(RSVB型 ) ,经mRT -PCR ,琼脂糖凝胶电泳 ,于紫外灯下观察上述病毒特异核苷酸条带。结果　甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒 ,RSVA型、B型分别在 43 1,2 10 ,3 90 ,3 3 4,183bp处出现清晰的 5条DNA条带。 结论　应用 5组引物 ,mRT -PCR可用于快速检测临床上呼吸道感染标本中的流感病毒和RSV ,并可对其进行分型 。 展开更多
关键词 多重逆转录聚合酶链反应 流感病毒 呼吸道合胞病毒
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应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒(英文) 被引量：6
5
作者 张寿斌 廖华 +3 位作者 黄呈辉 谭庆瑜 张炜灵 陈侃 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第22期33-37,共5页
目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛。特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及16... 目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛。特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及165例可疑EV感染的327份临床标本进行检测。结果EV标准株均在电泳中检测到一清晰312bp扩增条带,而非EV标准株则无扩增条带;共有104份标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%;147例病例同时检测了粪便和咽拭子,粪便阳性49例,咽拭子阳性44例,其中粪便和咽拭子同时阳性35例,粪便和咽拭子EV阳性比较无显著性差异(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%。结论RT-n-PCR可以准确地检测出肠道病毒,特异性强,用时少,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链反应 肠道病毒 通用引物
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实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结肠癌中Syndecan-1 mRNA和HPA-1 mRNA的表达及临床意义 被引量：3
6
作者 王贺 司君利 +3 位作者 张修振 亓玉琴 钮自宇 周长宏 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期310-315,共6页
背景与目的:侵袭转移是导致结肠癌死亡率增加的主要原因,如何阻断肿瘤的侵袭转移成为目前研究的热点。本研究旨在检测Syndecan-1基因和HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者与结肠癌侵袭转移及预后的关系。方法:用实时荧光定量... 背景与目的:侵袭转移是导致结肠癌死亡率增加的主要原因,如何阻断肿瘤的侵袭转移成为目前研究的热点。本研究旨在检测Syndecan-1基因和HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者与结肠癌侵袭转移及预后的关系。方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测49例结肠癌、49例配对的癌旁组织(距癌2cm)和49例配对远离结肠癌的手术切缘正常组织(距癌5cm以上)的Syndecan-1和HPA-1基因的表达水平,分析二者与结肠癌临床病理特征的关系。结果:结肠癌中HPA-1mRNA的表达水平(40.56±11.75)显著高于癌旁组织(18.28±11.33)和正常组织(10.80±10.20)(P均<0.001),癌旁组织明显高于正常组织(P<0.05);正常结肠组织中Syndecan-1mRNA表达水平(61.21±12.96)显著高于癌旁组织(14.35±11.06)和结肠癌组织(10.12±8.58)(P均<0.001),癌旁组织明显高于结肠癌组织(P<0.05)。Syndecan-1mRNA的表达减弱和HPA-1的表达增强与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期显著相关(P均<0.05)。Spearman等级相关分析证明了Syndecan-1mRNA和HPA-1的表达呈明显负相关(r=-0.405,P<0.05)。结论:Syndecan-1mRNA在结肠癌组织中呈低表达,HPA-1mRNA在结肠癌组织中呈高表达,且Syndecan-1mRNA的表达减弱与HPA-1的表达增强可促进结肠癌的侵袭转移。联合检测Syndecan-1mRNA及HPA-1mRNA对于指导结肠癌临床治疗及判断预后有重要价值。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 肿瘤侵袭转移 预后 SYNDECAN-1 HPA-1 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
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逆转录聚合酶链反应检测和鉴定疟原虫的研究 被引量：4
7
作者 胡锡敏 林世干 +3 位作者 陈冬燕 崔宜庆 童重锦 王善青 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第10期894-896,共3页
在同一反应体系中建立能同时检测和鉴定恶性疟、间日疟及混合感染的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法,并用于现场采集血样检测。先以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段,设计1对针对恶性疟原虫的特异性引物,建立RT-PCR检... 在同一反应体系中建立能同时检测和鉴定恶性疟、间日疟及混合感染的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法,并用于现场采集血样检测。先以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段,设计1对针对恶性疟原虫的特异性引物,建立RT-PCR检测恶性疟原虫方法,在此基础上,增加1条针对间日疟原虫的种特异性引物,使在同一反应体系中,能够同时扩增恶性疟原虫和间日疟原虫的特异片段。恶性疟原虫和间日疟原虫模板在同一反应体系中分别被扩增出预期大小为359bp和449bp特定扩增带,健康人血样和空白对照均未见扩增带。用建立的RT-PCR检测方法对现场采集128份血样进行检测,与镜检的阳性符合率为9609%,14份镜检为阴性的发热病人全血标本中2份RT-PCR检测为间日疟阳性。RT-PCR检测疟原虫方法具有敏感性高、特异性强的特点,对疟疾诊断、镜检质量控制和流行病学研究具有较大的实用价值。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 间日疟原虫 逆转录聚合酶链反应 检测
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逆转录聚合酶链反应方法检测新生儿病房柯萨奇B_3病毒感染 被引量：4
8
作者 鄂文 刘叔平 郑杰 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期225-227,共3页
目的:探讨逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法在检测柯萨奇病毒B3(CoxB3)感染中的作用。方法:采用RT-PCR方法对北京某医院31对(62例)疑似有母婴传播性CoxB3感染的新生儿和母亲血样进行CoxB3病毒的RNA检测。结果:62例样本经血清学检测,只有... 目的:探讨逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法在检测柯萨奇病毒B3(CoxB3)感染中的作用。方法:采用RT-PCR方法对北京某医院31对(62例)疑似有母婴传播性CoxB3感染的新生儿和母亲血样进行CoxB3病毒的RNA检测。结果:62例样本经血清学检测,只有1例新生儿CoxB3病毒抗体阳性,阳性率为1.61%。经RT-PCR方法检测,62例血样中有12例检测结果为阳性,阳性率为19.35%;其中4对母、婴均阳性,2对新生儿阳性、母亲阴性,还有2对母亲阳性、新生儿阴性。其余23对母婴均为阴性。结论:RT-PCR法对于早期CoxB3感染检测的阳性率优于血清学检测方法,对确定病毒的传播途径有参考价值,同时可以早期预防病毒感染在新生儿中的爆发。RT-PCR法具有快速、敏感、特异性强等特点,是快速、有效检测CoxB3病毒感染的诊断方法之一。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒感染 婴儿 新生 逆转录聚合酶链反应 病房 心肌炎
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逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移 被引量：2
9
作者 孙青 丁彦青 +2 位作者 张福明 李国新 张素娟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期643-645,共3页
目的　探讨用逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)检测结直肠癌淋巴结微转移 ,为临床肿瘤分期并制定合理的治疗方案提供指导性依据。方法　以CK2 0mRNA为标志物 ,应用RT PCR对 2 0例常规病理检... 目的　探讨用逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)检测结直肠癌淋巴结微转移 ,为临床肿瘤分期并制定合理的治疗方案提供指导性依据。方法　以CK2 0mRNA为标志物 ,应用RT PCR对 2 0例常规病理检查未检见淋巴道转移的结直肠癌及其所属 186枚淋巴结进行了检测。结果　有 8例 (4 0 % ) 5 4枚 (2 9 0 3% )淋巴结呈现阳性扩增 ,对照的非癌淋巴结呈阴性。结论　RT PCR是检测结直肠癌淋巴结微转移最敏感和特异的方法 ,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链反应 检测 结直肠癌 淋巴结微转移
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逆转录聚合酶链反应用于检测恶性疟原虫的初步研究 被引量：2
10
作者 胡锡敏 王善青 +4 位作者 金玉明 童重锦 华德 陈冬燕 曾文 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期396-397,共2页
目的　建立逆转录聚合酶链反应系统 ,用于检测恶性疟原虫感染。方法　以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段 ,设计一对特异引物 ,分别采用RT -PCR技术和PCR技术进行检测恶性疟原虫血样并比较两者检测的敏感性。结果　从培养... 目的　建立逆转录聚合酶链反应系统 ,用于检测恶性疟原虫感染。方法　以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段 ,设计一对特异引物 ,分别采用RT -PCR技术和PCR技术进行检测恶性疟原虫血样并比较两者检测的敏感性。结果　从培养的恶性疟血样中扩增出 35 9bp特定扩增带 ,而间日疟和健康人血样均未见扩增带。经限制性内切酶分析证实扩增产物为目的片段。检测系统初步显示可检出恶性疟血样中 0 34个疟原虫所含的RNA模板。以RNA为检测对象的RT -PCR肉眼可见条带的检测水平较以DNA为检测对象的PCR扩增高。结论　RT -PCR检测恶性疟原虫方法具有敏感性高、特异性强的特点 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 逆转录聚合酶链反应 诊断
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粘蛋白基因逆转录聚合酶链反应法检测声门上型喉癌N0颈淋巴结微转移 被引量：4
11
作者 蔡群峰 关超 任重 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期247-249,共3页
目的　探讨检测颈淋巴结微灶转移的新途径 ,提高声门上型喉癌颈淋巴结微转移的检出率。方法　应用逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)法 ,对 2 5例临床诊断为N0的声门上型喉癌行颈淋巴结清扫术 ... 目的　探讨检测颈淋巴结微灶转移的新途径 ,提高声门上型喉癌颈淋巴结微转移的检出率。方法　应用逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)法 ,对 2 5例临床诊断为N0的声门上型喉癌行颈淋巴结清扫术 ,将取出的淋巴结行常规病理检查 (HE染色 )和粘蛋白 (mucin ,MUC1)基因mRNA检测。结果　 2 5例颈淋巴结常规病理检查 (HE染色 )发现 6例有转移 (阳性率为 2 4% )者 ,RT PCR检测也为阳性 ;常规病理检查未发现转移的 19例中 ,RT PCR检测 4例阳性 ,其中 2例为颈淋巴结连续切片检查证实 ,另有 1例术后为转移癌病理证实。RT PCR检测的阳性率为 40 %。结论　MUC1基因RT PCR法检测颈淋巴结微转移较常规病理检查更敏感 。 展开更多
关键词 颈淋巴结清扫术 颈淋巴转移 淋巴结阴性 粘蛋白基因 逆转录聚合酶链反应 声门上型喉癌
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多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应快速检出含漱液中的乙型流感病毒 被引量：4
12
作者 张严峻 卢亦愚 +1 位作者 严菊英 周敏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2001年第1期6-8,共3页
目的建立特异敏感的快速检测含漱液中的流感病毒的分子生物学方法。方法用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲１、甲３和乙型流感病毒ＨＡ基因的ＨＡ１片段，得到各病毒与特异性大小的扩增产物的对应关系。用同样的... 目的建立特异敏感的快速检测含漱液中的流感病毒的分子生物学方法。方法用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲１、甲３和乙型流感病毒ＨＡ基因的ＨＡ１片段，得到各病毒与特异性大小的扩增产物的对应关系。用同样的方法扩增含漱液中流感病毒的ＨＡ基因的ＨＡ１片段。根据这对应关系检测含漱液中的流感病毒。结果以流感病毒的ＨＡ基因为模板设计的三对引物，用多重逆转录聚合酶链反应能特异性地扩增出９４２ｂｐ、１１１７ｂｐ和 ７５１ｂｐ的核酸片段，它们分别和甲１、甲３和乙型流感病毒有稳定对应关系。用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增含漱液中流感病毒ＨＡ基因的ＨＡ１片段，根据扩增产物的大小检出含漱液中的乙型流感病毒。结论 多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应能特异敏感地检出含漱液中的乙型流感病毒。 展开更多
关键词 含嗽液 乙型流感病毒 血凝素基因 多重逆转录聚合酶链反应 半巢式多重聚合酶链反应
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介绍一种改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术 被引量：4
13
作者 胡庆宏 刘明 +2 位作者 栾树清 易诚予 彭燕 《实用临床医学（江西）》 CAS 2005年第11期49-50,共2页
关键词 逆转录聚合酶链反应 改良技术
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逆转录聚合酶链反应检测恶性疟原虫的应用研究 被引量：1
14
作者 胡锡敏 王善青 +2 位作者 林世干 陈冬燕 童重锦 《中国热带医学》 CAS 2001年第3期201-203,共3页
目的 建立逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测恶性疟原虫的新方法，并用于检测现场采集血样。方法以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段，设计一对特异引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，恶性疟原虫预期被扩增出３５９ｂｐ... 目的 建立逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测恶性疟原虫的新方法，并用于检测现场采集血样。方法以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段，设计一对特异引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，恶性疟原虫预期被扩增出３５９ｂｐ特定扩增带。结果 从培养的恶性疟血样和现场采集的恶性疟血样中扩增出３５９ｂｐ特定扩增带，而间日疟和健康人血样均禾见扩增带。经限制性内切酶分析证实扩增产物为目的片段。本检测系统初步显示可检出０．３４个疟原虫／μι血样，３７份现场采集经镜检确诊的恶性疟血样中，３６份ＲＴ－ＰＣＲ检测为阳性，１份ＲＴ－ＰＣＲ检测为阴性，阳性符合率为９７．３５％。结论　ＲＴ－ＰＣＲ检测恶性疟原虫方法具有敏感性高、特异性强的特点，对疟疾诊断、镜检质量控制和流行病学研究具有较大的实用价值。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链反应 检测 恶性疟原虫 恶性疟 质量控制 诊断
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逆转录聚合酶链反应检测鼻息肉环氧合酶-2mRNA表达 被引量：1
15
作者 林海 李湘平 +1 位作者 甄泽年 杨浦文 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期509-511,共3页
目的检测研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-,COX-2)mRNA在鼻息肉组织中的表达水平,深入认识鼻息肉炎性发病机制。方法利用逆转录-聚合链反应(RT-PCR反应)检测35例鼻息肉组织及23例下鼻甲标本的环氧合酶-2的表达。结果鼻息肉组织中COX-2mRN... 目的检测研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-,COX-2)mRNA在鼻息肉组织中的表达水平,深入认识鼻息肉炎性发病机制。方法利用逆转录-聚合链反应(RT-PCR反应)检测35例鼻息肉组织及23例下鼻甲标本的环氧合酶-2的表达。结果鼻息肉组织中COX-2mRNA表达明显高于下鼻甲正常黏膜。结论鼻息肉组织中COX-2表达明显增高,鼻息肉发病过程中有前列腺素参与。 展开更多
关键词 鼻息肉 环氧合酶-2 前列腺素 逆转录聚合酶链反应
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实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结肠癌患者血CK19 mRNA水平及其意义 被引量：1
16
作者 张黎明 吴晓宇 +2 位作者 赖卫强 朱珊珊 李招云 《实用医学杂志》 CAS 2007年第1期106-108,共3页
目的:了解结肠癌患者外周血CK19mRNA的水平,探讨其临床意义。方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应,检测结肠癌患者75例、炎症性肠病(IBD)患者30例、健康志愿者41例外周血CK19mRNA的水平。结果:75例结肠癌患者外周血CK19mRNA的水平... 目的:了解结肠癌患者外周血CK19mRNA的水平,探讨其临床意义。方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应,检测结肠癌患者75例、炎症性肠病(IBD)患者30例、健康志愿者41例外周血CK19mRNA的水平。结果:75例结肠癌患者外周血CK19mRNA的水平为(12600±73100)copies/mL,其中39例阳性,阳性率为52%。健康志愿者未检测到CK19mRNA。CK19mRNA水平与肿瘤病理分期和分化程度相关;CK19mRNA阳性组中CK19蛋白阳性者显著多于CK19mRNA阴性组(P<0.05)。结论:外周血CK19mRNA可作为结肠癌辅助诊断指标,定量检测外周血CK19mRNA有助于结肠癌微转移的监测。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 肿瘤转移 逆转录聚合酶链反应 CK19 mRNA
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微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究 被引量：1
17
作者 居丽雯 蒋露芳 +4 位作者 陈民 杨国翠 林玉尊 朱炜明 姜庆五 《上海预防医学》 CAS 2004年第4期157-160,共4页
[目的 ]　建立应用微流芯片检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)产物的方法 ,在mRT -PCR扩增核酸的基础上自动化灵敏的定量检测扩增产物 ,快速检测甲亚型、乙型流感病毒 ,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其... [目的 ]　建立应用微流芯片检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)产物的方法 ,在mRT -PCR扩增核酸的基础上自动化灵敏的定量检测扩增产物 ,快速检测甲亚型、乙型流感病毒 ,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其他呼吸道病毒感染 ,以及明确流感病毒在人群中感染、流行情况。　 [方法 ]　采用经MDCK细胞分离培养的甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒毒株病毒液 ,使用 3组特异引物经mRT -PCR扩增核酸 ,扩增产物分别采用毛细管电泳技术经Caliper10 0 0微流芯片分析仪自动化检测和经 2 %琼脂糖凝胶电泳法检测。　[结果 ]　设计三组引物对相应甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒靶基因的mRT -PCR扩增产物片段分别为 43 0bp、2 10bp、3 91bp ,本实验mRT -PCR扩增产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,与Marker比照 ,DNA条带基本在此位点附近 ;产物采用毛细管电泳法经Caliper10 0 0微流芯片分析仪后 ,分别于 413bp、2 0 3bp、3 79bp处出现陡峭的峰 ,如图所示。　[结论 ]　应用微流芯片采用毛细管电泳法可对流感病毒mRT -PCR产物进行定位及相对定量 ,有助于快速诊断流感病毒感染 ,有助于对流感的监测。 展开更多
关键词 微流芯片 多重逆转录聚合酶链反应 流感病毒 鉴别诊断 呼吸道疾病
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逆转录聚合酶链反应在中医药治疗抑郁症分子机制研究中的应用 被引量：1
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作者 张颖 黄世敬 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期986-987,共2页
逆转录聚合酶链反应主要用于检测或定量细胞中基因表达水平,是目前生物学及医学等领域研究基因表达调控的一种主要方法,中医药在治疗抑郁症上取得了很好的疗效,为了进一步探索中药对抑郁症的干预途径和寻找作用靶点,许多中医学者近年来... 逆转录聚合酶链反应主要用于检测或定量细胞中基因表达水平,是目前生物学及医学等领域研究基因表达调控的一种主要方法,中医药在治疗抑郁症上取得了很好的疗效,为了进一步探索中药对抑郁症的干预途径和寻找作用靶点,许多中医学者近年来成功设计了抑郁症动物模型,并采用逆转录聚合酶链反应技术对抑郁症模型动物的某些神经递质及受体、神经营养因子等进行基因表达分析,在基因水平为揭示中医药对抑郁症的治疗提供了崭新的思路。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链反应 抑郁证 5-HT PDE4 CREB TRKB BDNF
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逆转录聚合酶链反应、间接免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验检测严重急性呼吸综合征相关冠状病毒感染的探讨
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作者 周志统 蒋伟伦 +5 位作者 袁正宏 沈芳 瞿涤 顾仕民 傅龙亭 张仁芳 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期936-938,共3页
关键词 相关冠状病毒 逆转录聚合酶链反应 严重急性呼吸综合征 酶联免疫吸附试验 诊断 SARS 爆发流行 南部地区 月经
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巢式逆转录聚合酶链反应检测肝癌患者外周血AFP mRNA的临床意义
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作者 李文清 王承党 +1 位作者 陈玉丽 林经安 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期283-285,共3页
目的　评估肝细胞癌 ( HCC)患者外周血甲胎蛋白 m RNA( AFP m RNA)检测的临床意义。方法　采用巢式逆转录聚合酶链反应技术 ,对肝癌患者外周血 AFP m RNA进行检测。结果　 37例肝癌患者中 AFP m RNA阳性 16例 ( 4 3.2 % ) ,2 5例肝硬变... 目的　评估肝细胞癌 ( HCC)患者外周血甲胎蛋白 m RNA( AFP m RNA)检测的临床意义。方法　采用巢式逆转录聚合酶链反应技术 ,对肝癌患者外周血 AFP m RNA进行检测。结果　 37例肝癌患者中 AFP m RNA阳性 16例 ( 4 3.2 % ) ,2 5例肝硬变患者中 AFP m RNA阳性 2例 ( 8.0 % ) ,2 0例正常对照无 1例阳性 ;AFP m RNA阳性的 HCC患者肝外转移发生率 ( 87.5 % )显著高于 AFP m RNA阴性的 HCC患者 ( 33.3% ) ,差异有显著性 (χ2 =10 .85 6 ,P≤ 0 .0 0 1,OR=14 .0 0 ,95 %可信区间 CI=2 .4 6 4～ 79.5 5 0 ) ;不同临床分期的 HCC患者其 AFP m RNA检出率不同 , 期患者检出率 ( 6 1.9% )明显高于 、 期检出率 ( 18.8% ) ;AFP m RNA的检出率与血清 AFP水平不同无明显相关。结论　巢式 RT- PCR方法是检测外周血残癌细胞 AFP m RNA的一种灵敏可靠技术 ,检测外周血中的 AFP m 展开更多
关键词 巢式逆转录聚合酶链反应 检测 肝癌 外周血 AFPMRNA
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