转基因植物选择性标记基因 被引量：5

1

作者 肖志新 周冀衡 +2 位作者 杨虹琦 李鹏飞 黎娟 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2004年第5期19-22,共4页

综述了选择性标记基因的分类和应用及其安全性研究进展 ,并对选择性标记基因研究的发展方向进行了探讨。

关键词 转基因植物 选择性标记基因 杀灭作用 生物安全性

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选择性标记法及脂类信号转导途径的检测 被引量：1

2

作者 陈军松 宋建国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期650-654,共5页

确定由脂类分子介导的信号转导途径和细胞内某些信使分子的生成及改变是信号转导研究领域中的一个重要组成部分 .如确定不同磷脂酶活性的调控及细胞内不同来源的第二信使分子及其他脂类生物活性分子的生成与调节 ,成为探讨生长因子或其... 确定由脂类分子介导的信号转导途径和细胞内某些信使分子的生成及改变是信号转导研究领域中的一个重要组成部分 .如确定不同磷脂酶活性的调控及细胞内不同来源的第二信使分子及其他脂类生物活性分子的生成与调节 ,成为探讨生长因子或其他许多分子的生物效应及其作用机理的重要研究内容 .为了增加人们对有关研究工作的了解及在方法上的选择 ,介绍了研究脂类代谢信号转导中广泛运用的一个基本而重要的方法———选择性标记法 ,并且以实际研究结果为例 ,说明如何运用该方法检测不同的信号传递途径和有关信号分子的生成与变化 .该法针对性强而灵活 ,重复性高 ,能有效地检测某些不同来源的信号传递分子的生成及其变化 .此外 。 展开更多

关键词 磷脂 磷脂酶 选择性标记法 信号转导

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血管选择性动脉自旋标记在颅脑疾病中的应用进展

3

作者 李晨 周智鹏 《广东医学》 CAS 2023年第11期1448-1452,共5页

血管选择性动脉自旋标记技术(territorial ASL,t-ASL)不同于常规磁共振灌注技术,是一种不需要注射对比剂的新型磁共振脑灌注技术。在动脉自旋标记的基础上,针对性地选择标记单支血管,描绘每个供血动脉的区域,从而反映一定区域的脑灌注... 血管选择性动脉自旋标记技术(territorial ASL,t-ASL)不同于常规磁共振灌注技术,是一种不需要注射对比剂的新型磁共振脑灌注技术。在动脉自旋标记的基础上,针对性地选择标记单支血管,描绘每个供血动脉的区域,从而反映一定区域的脑灌注分布图像。随着t-ASL无需对比剂、无电离辐射、禁忌证少等优势的突出,近年来t-ASL技术得到飞速发展并具有广泛的发展前景。本文就t-ASL的成像原理及其在颅脑疾病中的临床应用方面及研究进行了综述。 展开更多

关键词 脑灌注成像 血管选择性动脉自旋标记技术 脑血管疾病

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血管选择性动脉自旋标记技术研究进展及临床应用 被引量：10

4

作者 徐慧敏 刘颖 袁慧书 《磁共振成像》 CAS CSCD 2017年第5期378-383,共6页

了解单支脑供血动脉的精确灌注区域对诊断和治疗多种脑血管疾病具有重要意义。血管选择性动脉自旋标记技术(territorial-ASL;t-ASL)在动脉自旋标记基础上,附加针对性的血管选择技术,实现了对单支血管的选择性标记,进而获得脑灌注区域分... 了解单支脑供血动脉的精确灌注区域对诊断和治疗多种脑血管疾病具有重要意义。血管选择性动脉自旋标记技术(territorial-ASL;t-ASL)在动脉自旋标记基础上,附加针对性的血管选择技术,实现了对单支血管的选择性标记,进而获得脑灌注区域分布图像。且鉴于t-ASL具有无需对比剂、无电离辐射的优点,因此,该技术具有非常广泛的应用前景。作者介绍了t-ASL的技术原理及研究进展,并且对基于该技术的临床应用进行了归纳总结。 展开更多

关键词 血管选择性动脉自旋标记 脑灌注区域成像

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血管选择性动脉自旋标记技术在颈动脉内膜切除术围手术期的应用价值 被引量：5

5

作者 徐慧敏 霍然 +3 位作者 刘颖 赵锡海 王涛 袁慧书 《临床神经外科杂志》 CAS 2019年第6期527-531,共5页

目的探讨血管选择性动脉自旋标记(territorial arterial spin labeling,t-ASL)技术在颈动脉内膜切除术(carotid endarterectomy,CEA)围手术期的应用价值。方法30例诊断为颈动脉狭窄并拟行CEA手术患者分别于术前2周及术后1周行t-ASL检查... 目的探讨血管选择性动脉自旋标记(territorial arterial spin labeling,t-ASL)技术在颈动脉内膜切除术(carotid endarterectomy,CEA)围手术期的应用价值。方法30例诊断为颈动脉狭窄并拟行CEA手术患者分别于术前2周及术后1周行t-ASL检查,并生成脑血流量(cerebral blood flow,CBF)图及脑供血分布图。分别测量术前及术后双侧颈内动脉供血区的CBF值、双侧颈内动脉供血区及椎-基底动脉供血区的灌注体积(perfusion volume,PV),计算总PV(PV总)。采用配对样本t检验比较同侧术前与术后的CBF值及PV的差异;采用独立样本t检验比较高灌注组与非高灌注组术前PV总的差异。结果(1)CEA术前的患侧CBF值低于对侧;术后,患侧和对侧的CBF值均上升,且患侧升高幅度大于对侧;(2)CEA术前的患侧PV低于对侧,CEA术后患侧PV明显升高,而对侧PV及椎-基底动脉PV下降;(3)CEA术后发生高灌注患者的术前PV总显著低于非高灌注组,术后两组PV总间未见明显差异。结论t-ASL作为一个无创性脑血流灌注成像方法,既可以于CEA术前对手术疗效及术后发生高灌注综合征的风险进行预测,又可以用于CEA术后疗效评估。 展开更多

关键词 颈动脉狭窄 血管选择性动脉自旋标记 颈动脉内膜切除术 脑血流灌注

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分子标记技术制备选择性莠去津聚合物

6

作者 陈希军 《邯郸农业高等专科学校学报》 1996年第3期43-43,42,共2页

用分子标记技术制备选择性的合成莠去津聚台物,以标记聚合物和非标记聚合物为色谱固定相,莠去津作对照,进行液相色谱试验,其保留时间前者是后者的十三倍。 现今,化学药品不仅大范围地使用在农业上,而且也应用于一些娱乐机构的维护,如... 用分子标记技术制备选择性的合成莠去津聚台物,以标记聚合物和非标记聚合物为色谱固定相,莠去津作对照,进行液相色谱试验,其保留时间前者是后者的十三倍。 现今,化学药品不仅大范围地使用在农业上,而且也应用于一些娱乐机构的维护,如高尔夫球场和公园,除草剂和农药对水资源的污染又重新引起了人们的注意。目前。 展开更多

关键词 分子标记技术 选择性标记莠去津聚合物 除草剂 分析

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基于准等重二甲基化标记的高通量蛋白质组选择性交叉标记装置 被引量：1

7

作者 刘健慧 张晓丹 +4 位作者 周愿 单亦初 方菲 张丽华 张玉奎 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期230-236,共7页

面对生物学及精准医学等领域多变量、大样本量的蛋白质组定量分析的需求,高通量的定量标记及分析已经成为近年来蛋白质组学方法发展的趋势。发展了一种基于准等重二甲基化标记策略的高通量肽段末端选择性交叉标记装置(pIDL-StageTip),... 面对生物学及精准医学等领域多变量、大样本量的蛋白质组定量分析的需求,高通量的定量标记及分析已经成为近年来蛋白质组学方法发展的趋势。发展了一种基于准等重二甲基化标记策略的高通量肽段末端选择性交叉标记装置(pIDL-StageTip),借助简单的装置及离心力,有效地增加了定量标记的通量,并保证了肽段末端两步标记反应时间的可控性及操作的简便性。通过优化酸性条件下NaBD_3CN与NaBH_3CN体系的标记条件,得到了标准蛋白质酶解产物100%的标记效率、95%以上的标记选择性;在人源蛋白质组复杂体系下,标记效率大于99%,标记选择性为100%。基于该装置的定量方法具有很高的定量准确度及精密度。该装置为实现高可操作性、高准确度、高通量的蛋白质组定量标记提供了一个可靠的解决方案。 展开更多

关键词 蛋白质组标记装置 准等重二甲基化 选择性交叉标记 高通量

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产生无标记农杆菌突变体方法的建立及优化(英文) 被引量：7

8

作者 郭敏亮 诸庆 高佃坤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期556-565,共10页

农杆菌已经用作许多生物过程研究的模型细菌,为了解析这些生物过程的分子机理,对农杆菌的某些基因进行突变就显得非常重要.以自杀性基因sacB作为反向可选择性标记基因,利用同源重组的原理,建立了一种可对农杆菌基因进行准确插入、删除... 农杆菌已经用作许多生物过程研究的模型细菌,为了解析这些生物过程的分子机理,对农杆菌的某些基因进行突变就显得非常重要.以自杀性基因sacB作为反向可选择性标记基因,利用同源重组的原理,建立了一种可对农杆菌基因进行准确插入、删除和位点置换的突变方法,所获突变体不带任何不需要的外源DNA序列.通过详细研究同源序列的长度对农杆菌同源重组效率和突变体产生概率的影响,以及对农杆菌中的同源重组机理的分析,提出了优化该突变体产生方法的方案,即通过设计不等长的上下游同源序列和选择其中一种类型的单交换重组体来筛选二次交换重组体的方法,可以显著地提高理想突变体的产生概率.研究结果对如何提高突变体的产生概率和减少突变体筛选的工作量具重要的参考价值.利用该方法成功地获得了两个基因被同时删除而且不含抗性标记的农杆菌突变株. 展开更多

关键词 农杆菌 反向可选择性标记基因 同源重组机理 无标记突变体

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基于TASL的急性前循环缺血性脑卒中药物治疗预后因素分析

9

作者 李小雷 单春辉 +3 位作者 赵明娟 张晖 暴云锋 陈英敏 《磁共振成像》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期28-33,共6页

目的探讨基于血管选择性动脉自旋标记(territorial arterial spin labeling,TASL)技术的急性前循环缺血性脑卒中(acute anterior circulation ischemic stroke,AACIS)药物治疗预后因素的影响性分析。材料与方法回顾性连续纳入确诊AACIS... 目的探讨基于血管选择性动脉自旋标记(territorial arterial spin labeling,TASL)技术的急性前循环缺血性脑卒中(acute anterior circulation ischemic stroke,AACIS)药物治疗预后因素的影响性分析。材料与方法回顾性连续纳入确诊AACIS患者136例并根据其治疗后90 d的预后情况分为预后良好(70例)与预后不良(66例)两组。记录责任血管狭窄度、疗前选择性脑血流量(territorial cerebral blood flow,TCBF)、疗后TCBF_(10 d)、相对选择性脑血流量(relative CBF,rTCBF)以及病灶体积,同时收集患者的基线美国国立卫生研究院卒中量表评分(National Institute of Health Stroke Scale,NIHSS)、卒中分型、年龄、性别、身体质量指数等风险因素信息,将上述指标纳入统计模型。对两组间的计量资料使用Mann-Whitney U检验、计数资料使用χ^(2)检验统计其单因素差异性,对具有统计学意义的指标进行多因素联合logisitic回归分析,使用受试者工作特性曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)对结果进行诊断效能评判。结果单因素分析中,年龄(Z=16.022)、基线NIHSS评分(Z=148.400)、卒中分型(Z=49.640)、责任血管狭窄度(Z=27.193)、TCBF_(疗前)(Z=693.000)、rTCBF(Z=18.874)及病灶体积(Z=-10.140)差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素联合分析中,年龄(OR=0.108)、基线NIHSS评分(OR=0.615)、卒中分型中的穿支动脉疾病(OR=90.154)、TCBF_(疗前)(OR=4.611)及病灶体积(OR=0.138)对预后具有显著影响(P<0.05),且5者联合对预后预测的判定方法切实有效(P<0.05),ROC曲线下面积为0.962,具有较高价值。责任血管灌注的改变对预后无显著影响(P>0.05)。结论在药物保守治疗方法下,患者90 d预后更易受到年龄、基线NIHSS评分、卒中种类、CBF_(疗前)及病灶体积的影响,并不依赖于责任血管的灌注改善情况。 展开更多

关键词 急性前循环缺血性脑卒中 药物治疗 磁共振成像 血管选择性动脉自旋标记 脑血流量

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转基因植物中标记基因去除方法的研究进展

10

作者 郎遥玲 管晓燕 +1 位作者 白国辉 刘建国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期41-47,共7页

随着越来越多的转基因植物品种的出现,转基因植物的环境安全及食用安全越来越受到人们的广泛关注。目前存在的问题之一是转基因植物中抗生素或除草剂抗性的选择标记基因的存留。为了提高转基因植物的安全性,将转基因植物中选择性标记基... 随着越来越多的转基因植物品种的出现,转基因植物的环境安全及食用安全越来越受到人们的广泛关注。目前存在的问题之一是转基因植物中抗生素或除草剂抗性的选择标记基因的存留。为了提高转基因植物的安全性,将转基因植物中选择性标记基因去除,不仅利于同一转基因植物的多次操作,而且更容易被人们所接受。就目前转基因植物中选择性标记基因去除的方法及其优缺点进行了横纵向的比较,希望对相关研究领域方法的选择方向具有指导意义。 展开更多

关键词 转基因植物 选择性标记基因 安全性

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13C6-酪氨酸标记的蛋清溶菌酶的表达及NMR测定

11

作者 王瑞英 余飞 刘万卉 《烟台大学学报（自然科学与工程版）》 CAS 2019年第3期233-237,共5页

针对蛋白质核磁共振(NMR)信号复杂难以解析的问题,选用选择性标记方法可简化蛋白质NMR谱图。本实验以蛋清溶菌酶(HEL)为目标蛋白,构建了pET-HEL蛋白表达载体,转入到大肠杆菌Ε.coliBL21(DE3)中,得到重组菌株。然后通过改变诱导温度、诱... 针对蛋白质核磁共振(NMR)信号复杂难以解析的问题,选用选择性标记方法可简化蛋白质NMR谱图。本实验以蛋清溶菌酶(HEL)为目标蛋白,构建了pET-HEL蛋白表达载体,转入到大肠杆菌Ε.coliBL21(DE3)中,得到重组菌株。然后通过改变诱导温度、诱导浓度以及诱导时间等条件来优化HEL在大肠杆菌Ε.coliBL21(DE3)中的表达条件,通过SDS-PAGE电泳分析,确定了最佳表达条件:37℃、0.4mmol/LIPTG诱导8h。按最佳条件于诱导前加入13C6-酪氨酸进行选择性标记,扩大表达,经过变复性处理与Ni柱纯化后,获得选择性标记的HEL。进一步制备标记蛋白核磁样品进行测定,得到简化的NMR谱。本研究为采用NMR简化分析蛋白质的结构奠定了基础。 展开更多

关键词 选择性标记 NMR 蛋清溶菌酶 酪氨酸 蛋白质的表达纯化 包涵体

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动脉自旋标记的新进展及其在缺血性脑血管病的应用 被引量：19

12

作者 罗海龙 黄力 《国际医学放射学杂志》 2014年第1期58-62,共5页

动脉自旋标记是一种利用血液中的水作为示踪剂的MR成像技术,它具有安全无创的优点,可用于灌注成像或血管成像,但其固有信噪比较低,易受多种因素干扰。近年出现多种兼具独特应用价值的改良技术,比如可以实现高选择性血管成像或灌注成像... 动脉自旋标记是一种利用血液中的水作为示踪剂的MR成像技术,它具有安全无创的优点,可用于灌注成像或血管成像,但其固有信噪比较低,易受多种因素干扰。近年出现多种兼具独特应用价值的改良技术,比如可以实现高选择性血管成像或灌注成像血管编码动脉自旋标记和可以对特定流速血流进行标记的流速选择动脉自旋标记。这些技术除了提高信噪比、改善影像质量外,也拓宽了动脉自旋标记技术的应用范围。就这些技术的新进展及其在缺血性脑血管病的应用现状予以综述。 展开更多

关键词 磁共振成像 灌注成像 动脉自旋标记 伪连续动脉自旋标记 选择性动脉自旋标记 流速选择动脉 自旋标记 血管编码动脉自旋标记

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细胞色素c甲硫氨酸氧化机制的NMR研究 被引量：1

13

作者 赵蓓蓓 占建华 +3 位作者 胡琴 朱勤俊 刘买利 张许 《波谱学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期246-257,共12页

细胞在呼吸作用中产生活性氧,活性氧含量处于低水平时有利于信号传导,累积过量时会引发蛋白质氧化修饰.细胞色素c是位于线粒体内的多功能金属蛋白,其发生氧化修饰特别是甲硫氨酸Met80的亚砜化修饰可能影响蛋白构象变化,但其机制仍不清楚... 细胞在呼吸作用中产生活性氧,活性氧含量处于低水平时有利于信号传导,累积过量时会引发蛋白质氧化修饰.细胞色素c是位于线粒体内的多功能金属蛋白,其发生氧化修饰特别是甲硫氨酸Met80的亚砜化修饰可能影响蛋白构象变化,但其机制仍不清楚.本研究通过13C选择性标记细胞色素c上甲硫氨酸的末端甲基,利用液体核磁共振技术,追踪了细胞色素c在氧化环境中的氧化修饰变化.发现在氧化环境中,该蛋白质先由还原态转化为氧化态,当活性氧达到一定量时,再发生甲硫氨酸Met80的亚砜化修饰,但在活性氧作用初期未导致明显的蛋白结构变化.这表明细胞色素c具有一定抵御活性氧的作用. 展开更多

关键词 氧化修饰 细胞色素C 液体核磁共振 选择性标记

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丝状真菌遗传转化系统研究进展 被引量：20

14

作者 黄卫 汪天虹 +2 位作者 吴志红 吴静 李滢冰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期40-44,共5页

丝状真菌是自然界中普遍存在的 ,并具有重要经济价值的一类真核微生物。近年来 ,对其分子生物学的研究取得了长足进展。本文对丝状真菌遗传转化系统的最新研究进展进行了综述 ,主要包括以下几个方面 :转化方法、载体、选择性标记、整合... 丝状真菌是自然界中普遍存在的 ,并具有重要经济价值的一类真核微生物。近年来 ,对其分子生物学的研究取得了长足进展。本文对丝状真菌遗传转化系统的最新研究进展进行了综述 ,主要包括以下几个方面 :转化方法、载体、选择性标记、整合机制以及转化在丝状真菌研究中的应用。 展开更多

关键词 丝状真菌 载体 整合 遗传转化 选择性标记

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真菌遗传转化系统的研究进展 被引量：16

15

作者 黄亚丽 叶婧 +1 位作者 蒋细良 朱昌雄 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1213-1217,共5页

真菌遗传转化是功能基因研究的重要方法,就真菌遗传转化系统的最新研究进展进行了综述,主要包括真菌遗传转化的方法、各种方法的优缺点、选择标记的种类、标记基因的分离方法以及转化系统的应用等。

关键词 真菌 转化系统 选择性标记 功能基因组

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单子叶植物的FLP/frt位点特异性重组系统的构建 被引量：2

16

作者 李蓓 单晓 +1 位作者 尹小燕 张举仁 《山东大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期149-156,共8页

来自于啤酒酵母2μm质粒的FLP/frt位点特异性重组系统可用于转基因植物(细胞)筛选完成后去除选择标记基因.水稻肌动蛋白actin基因启动子和玉米泛素ubiquitin基因启动子可有效驱动单子叶植物中外源基因的转录.为培育去除选择标记基因的... 来自于啤酒酵母2μm质粒的FLP/frt位点特异性重组系统可用于转基因植物(细胞)筛选完成后去除选择标记基因.水稻肌动蛋白actin基因启动子和玉米泛素ubiquitin基因启动子可有效驱动单子叶植物中外源基因的转录.为培育去除选择标记基因的抗盐耐旱单子叶转基因植物,构建了适合于单子叶植物的FLP/frt位点特异性重组系统.该系统由含有FLP重组酶基因的植物表达载体pCAMBIA3300-Ubi-FLP-bar和含有frt位点的植物双抗(抗除草剂、抗盐耐旱)表达载体pCAMBIA1300-Ubi-TsPPasef-rt-alsf-rtm以及pCAMBIA1300-Actin1-AtNHX1f-rt-alsf-rtm组成. 展开更多

关键词 选择性标记去除 FLP/frt 位点特异性重组系统 Actinl UBI 单子叶植物

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烟草bar基因的转化及其转化体快速检测方法的研制 被引量：5

17

作者 周锺信 李明 +1 位作者 王英超 张丽香 《天津农学院学报》 CAS 2003年第4期5-12,共8页

用改良的叶圆盘法进行了烟草bar基因高效转化并获得 11个转基因株系 ,转化率高达 32 .4 %。提出构建以bar基因为选择标记的新型植物表达载体的设想 ,实验分析了不同PPT浓度与GS酶的解抑制量及外植体存活、分化率的关系 ,结果表明 ,10 0m... 用改良的叶圆盘法进行了烟草bar基因高效转化并获得 11个转基因株系 ,转化率高达 32 .4 %。提出构建以bar基因为选择标记的新型植物表达载体的设想 ,实验分析了不同PPT浓度与GS酶的解抑制量及外植体存活、分化率的关系 ,结果表明 ,10 0mg L以上的PPT可完全抑制非转化外植体的存活 ,从而证实了设想的可行性。研制出检测抗除草剂转基因植物的微量、快速、有效的检测新方法 ,并用实际检测实验和统计学手段验证了该方法的可靠性和实用性。 展开更多

关键词 烟草 bar基因转化 选择性标记 转bar基因检测

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抗除草剂转基因水稻和大豆快速准确检测技术研究 被引量：6

18

作者 马林 周练 +3 位作者 周正剑 唐桂香 沈志成 寿惠霞 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期647-654,共8页

以实验室培育的转基因水稻和大豆为研究材料,对含草铵膦乙酰转移酶基因(phosphinothricin acetyl transferase gene,bar)和不与草甘膦结合的突变型5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶编码基因(5-enolpyruvylshi-kimate-3-phosate synthase gen... 以实验室培育的转基因水稻和大豆为研究材料,对含草铵膦乙酰转移酶基因(phosphinothricin acetyl transferase gene,bar)和不与草甘膦结合的突变型5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶编码基因(5-enolpyruvylshi-kimate-3-phosate synthase gene,EPSPS)2种不同除草剂筛选标记的转基因植株进行叶片喷涂、叶片离体平板培养、种子萌发试验,以建立快速、准确的转基因鉴定方法,并探索可有效区分转化和非转化植株鉴定用的筛选剂剂量.结果表明:这3种方法都能快速、简便、准确地鉴定相应的转基因植株;水稻和大豆叶片对农药吸收具有一定的差异,用300或135 mg/L草铵膦可有效区分是否转入bar基因,用1%或0.25%农达喷施可区分是否转入EPSPS基因;用含有50 mg/L草甘膦的平板培养离体大豆叶片可以方便地区分出转基因株系;种子萌发对除草剂剂量十分敏感,用远低于10 mg/L的2种除草剂即可有效区分阳性与阴性种子.本研究建立的快速鉴定转基因植株的方法在转基因研究材料的鉴定及转基因安全评估中具有重要意义. 展开更多

关键词 转基因 大豆 水稻 选择性标记基因 快速检测 草铵膦 草甘膦

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便于抗性基因分离和分子重组的系列质粒的构建 被引量：2

19

作者 刘大伟 牛丹丹 +2 位作者 张梁 石贵阳 王正祥 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期926-928,共3页

在分子克隆实验中,选择性标记特别是抗生素抗性标记是最常用和不可或缺的分子材料。为便于实验室获得和使用携带有不同末端序列的选择性标记,以质粒pBlueScriptSK(-)为基础,构建了分别携带有卡那霉素、博莱霉素、红霉素、潮霉素和庆大... 在分子克隆实验中,选择性标记特别是抗生素抗性标记是最常用和不可或缺的分子材料。为便于实验室获得和使用携带有不同末端序列的选择性标记,以质粒pBlueScriptSK(-)为基础,构建了分别携带有卡那霉素、博莱霉素、红霉素、潮霉素和庆大霉素等抗性基因的系列质粒pSKsymKm、pSKsymBle、pSKsymEry、pSKsymHyg和pSKsymGm。通过限制性酶切和胶回收技术,可以从上述构建的质粒中方便地获得带有理想接头的抗生素抗性基因。 展开更多

关键词 选择性标记 抗性基因 分离

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一步光化学法制备的低毒性量子点及其在细胞成像中的应用

20

作者 高小童 秦志龙 蒲巧生 《微纳电子技术》 CAS 北大核心 2022年第9期882-890,共9页

通过一步光化学法制备了荧光颜色可调的聚丙烯酸(PAA)包覆CdS(Te)量子点(QD)。在紫外光作用下,丙烯酸(AA)接枝聚合到量子点表面配体上,形成致密的聚合物包覆层,有效防止量子点中Cd^(2+)的释放,降低毒性,同时钝化量子点的表面缺陷,减小... 通过一步光化学法制备了荧光颜色可调的聚丙烯酸(PAA)包覆CdS(Te)量子点(QD)。在紫外光作用下,丙烯酸(AA)接枝聚合到量子点表面配体上,形成致密的聚合物包覆层,有效防止量子点中Cd^(2+)的释放,降低毒性,同时钝化量子点的表面缺陷,减小非辐射跃迁的概率,提高量子产率至74%。大肠杆菌1136实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析结果表明,PAA的包覆可以明显降低量子点的细胞毒性。采用自制的共聚焦激光诱导荧光检测器和负压进样系统将PAA包覆的QD和未经包覆的QD进行微流控芯片电泳分离。将PAA包覆的QD应用于膀胱癌细胞HTB-95637的成像实验,结果表明,PAA包覆的QD可以选择性标记HTB-95637细胞的细胞膜。 展开更多

关键词 量子点 光化学法 细胞毒性 细胞成像 选择性标记

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