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花生AhFAD2作为选择标记构建含油量遗传群体
1
作者 邱晓臣 李晶晶 +7 位作者 李鑫 吴兰荣 唐艳艳 朱虹 隋炯明 张晓军 王晶珊 乔利仙 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期542-548,共7页
有性杂交是花生(Arachis hypogaea L.)育种的重要途径,真杂种鉴定对于遗传群体的构建以及新品种选育至关重要。花生含油量的表型鉴定极易受到环境条件的影响,且目前缺少可用的分子标记。本研究选用高油及普通油酸亲本宇花14号与低油及... 有性杂交是花生(Arachis hypogaea L.)育种的重要途径,真杂种鉴定对于遗传群体的构建以及新品种选育至关重要。花生含油量的表型鉴定极易受到环境条件的影响,且目前缺少可用的分子标记。本研究选用高油及普通油酸亲本宇花14号与低油及高油酸亲本LOP215杂交构建含油量相关遗传群体。宇花14号含有AhFAD2A及AhFAD2B位点,基因型为AABB,LOP215含有AhFAD2a及AhFAD2b位点,基因型为aabb。以宇花14号为母本、LOP215为父本杂交,收获F_(1)杂交籽仁,采用竞争性等位基因特异性PCR(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)检测AhFAD2基因型,剔除AhFAD2基因型为纯合的籽仁,选留FAD2基因型为杂合的F_(1)真杂种。F_(1)真杂种单粒播种收获后,单株检测含油量,对于F_(2)表型无明显分离的株系,取各单株叶片等量混合后提取DNA,进行AhFAD2基因型检测再次确认AhFAD2位点的杂合性。经二次验证后的F_(2)籽粒经连续自交6代后选育出包含460个家系的重组自交系(recombinant inbred lines,RIL)群体,其含油量呈连续正态分布,可作为含油量基因定位的有效分离群体。本试验以AhFAD2作为选择标记能简单高效地筛选出真杂种,构建目标性状分离群体,为花生含油量基因定位及高低油花生品种选育提供材料。 展开更多
关键词 花生 AhFAD2 选择标记 遗传群体 真杂种
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无抗性选择标记转基因技术在蔬菜作物上的应用 被引量：3
2
作者 王烨 顾兴芳 《中国蔬菜》 北大核心 2011年第12期1-9,共9页
在广为应用的植物转基因技术中,绝大多数采用各种抗性基因作为选择标记,而这正是转基因植物对生态环境和食品、药品安全影响的隐患所在。目前主要通过无抗性选择标记转基因技术即安全选择标记的利用和标记基因删除法来克服这一问题。本... 在广为应用的植物转基因技术中,绝大多数采用各种抗性基因作为选择标记,而这正是转基因植物对生态环境和食品、药品安全影响的隐患所在。目前主要通过无抗性选择标记转基因技术即安全选择标记的利用和标记基因删除法来克服这一问题。本文对正在应用的安全选择标记和标记基因删除法的最新研究进展及其在蔬菜作物上的应用情况进行综述,并简要分析了各方法的利弊和发展前景。 展开更多
关键词 无抗性选择标记 转基因植物 安全选择标记 删除基因 综述
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无抗性选择标记的转高赖氨酸蛋白(LRP)基因籼稻恢复系的获得 被引量：19
3
作者 唐俐 刘巧泉 +2 位作者 邓晓湘 武小金 辛世文 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1248-1251,共4页
将四棱豆中高赖氨酸含量蛋白基因转移到水稻恢复系R893中,获得了较好表达高赖氨酸含量蛋白基因、且无抗生素选择标记的籼稻恢复系C28。赖氨酸分析结果表明,C28为3.752 mg/g,对照R893为3.503 mg/g;杂交组合准S/C28为3.338 mg/g,对照准S/R... 将四棱豆中高赖氨酸含量蛋白基因转移到水稻恢复系R893中,获得了较好表达高赖氨酸含量蛋白基因、且无抗生素选择标记的籼稻恢复系C28。赖氨酸分析结果表明,C28为3.752 mg/g,对照R893为3.503 mg/g;杂交组合准S/C28为3.338 mg/g,对照准S/R893为3.175 mg/g。转基因水稻的赖氨酸含量都有所提高。但C28的结实率为76.37%,而R893为78.56%,转基因恢复系略低于对照;准S/C28为76.63%,对照准S/R893为89.35%,转基因的杂种极显著地低于对照。 展开更多
关键词 水稻 恢复系 转化 赖氨酸 无选择标记
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海带基因工程选择标记的研究 被引量：28
4
作者 武建秋 王希华 +1 位作者 秦松 曾呈奎 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期42-45,共4页
海带幼孢子体对抗生素的敏感性实验证明，氯霉素可以作为海带基因工 程中较理想的选择压力。本文得出了氯霉素对海带的半致死剂量，提示 ＣＡＴ（氯霉 素乙酸转移酶）基因可以用作海带基因工程的阳性选择标记基因。
关键词 海带 基因工程 选择标记 抗生素 氯霉素
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BADH/pepB双价基因无选择标记表达载体转化苜蓿的初步研究 被引量：16
5
作者 杨金慧 王丕武 +2 位作者 曲静 王巍 王俊玲 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期20-23,共4页
选用公农1号紫花苜蓿，以5～7d苗龄的无菌子叶为外植体，通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶（BADH）和酸性蛋白酶（pepB）双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中，并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选，得到抗... 选用公农1号紫花苜蓿，以5～7d苗龄的无菌子叶为外植体，通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶（BADH）和酸性蛋白酶（pepB）双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中，并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选，得到抗盐碱转化植株。碱性盐浓度48mmol／L宜于子叶愈伤诱导，有利于转化植株的获得。对转化植株进行PCR检测，初步证明目的基因序列已经整合到苜蓿基因组中。移栽成活的13棵碱性盐抗性植株经PCR检测有3棵植株呈阳性。 展开更多
关键词 无选择标记表达载体 BADH pepB 转化 苜蓿
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利用双T-DNA载体系统获得无选择标记转基因菊花 被引量：13
6
作者 孙磊 张启翔 +2 位作者 周琳 陆苗 蔡明 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期727-734,共8页
为获得具有无选择标记的转基因菊花,构建了一个双T-DNA超级双元载体pCAMBIA1301-gus,其中一个T-DNA结构域中含有选择标记基因hpt,另一个T-DNA结构域中含有目的基因gus,而且两个T-DNA结构顺序相连,中间没有其他插入序列。利用农杆菌介导... 为获得具有无选择标记的转基因菊花,构建了一个双T-DNA超级双元载体pCAMBIA1301-gus,其中一个T-DNA结构域中含有选择标记基因hpt,另一个T-DNA结构域中含有目的基因gus,而且两个T-DNA结构顺序相连,中间没有其他插入序列。利用农杆菌介导转化菊花幼嫩茎尖薄层细胞,共获得506个抗性植株,通过PCR和Southern杂交检测表明共转化率为38.4%,对其中17个同时整合了hpt和gus基因的植株自交获得的T1代株系进行检测,发现约有15.8%的T1代植株中不含选择标记基因hpt,结果表明双T-DNA载体系统能有效地用于培育无选择标记转基因植物。 展开更多
关键词 菊花 转基因 双T-DNA 共转化 无选择标记
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利用共转化和花药培养技术快速获得无选择标记的三价转基因水稻 被引量：13
7
作者 朱丽 傅亚萍 +4 位作者 刘文真 胡国成 斯华敏 唐克轩 孙宗修 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期475-481,共7页
采用农杆菌介导的水稻转化体系,将包含选择标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)和目的基因人乳铁蛋白(hLF)、高赖氨酸(SB401)、高甲硫氨酸(RZ10)基因的双T-DNA表达载体p13HSR转化水稻。筛选潮霉素磷酸转移酶基因和目的基因都是阳性的转基因植... 采用农杆菌介导的水稻转化体系,将包含选择标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)和目的基因人乳铁蛋白(hLF)、高赖氨酸(SB401)、高甲硫氨酸(RZ10)基因的双T-DNA表达载体p13HSR转化水稻。筛选潮霉素磷酸转移酶基因和目的基因都是阳性的转基因植株,按单株进行花药培养,快速得到无选择标记而目的基因阳性的转基因纯合植株,得率为9.87%。RT-PCR检测结果显示外源基因已整合到转基因水稻基因组中并转录。同时观测到三价表达载体在转化过程中部分目的基因丢失。 展开更多
关键词 花药培养 共转化 无选择标记 转基因水稻 双T-DNA结构
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以潮霉素抗性为选择标记的毛壳霉原生质体转化 被引量：19
8
作者 陈振明 郭泽建 +1 位作者 林福呈 李德葆 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期19-22,共4页
利用 PEG方法 ,将含有潮霉素抗性标记的质粒 p CB10 0 3转化毛壳霉原生质体 ,并在高于毛壳霉敏感的潮霉素浓度下筛选转化子。转化率达 1～ 2个转化子 / μg质粒 DNA。以潮霉素抗性的毛壳霉转化子的基因组 DNA为模板进行 PCR扩增及其产物... 利用 PEG方法 ,将含有潮霉素抗性标记的质粒 p CB10 0 3转化毛壳霉原生质体 ,并在高于毛壳霉敏感的潮霉素浓度下筛选转化子。转化率达 1～ 2个转化子 / μg质粒 DNA。以潮霉素抗性的毛壳霉转化子的基因组 DNA为模板进行 PCR扩增及其产物的 Southern杂交。结果表明 ,潮霉素抗性基因已整合入毛壳霉染色体。稳定性试验表明 。 展开更多
关键词 毛壳霉 潮霉素抗体 原生质体转化 选择标记
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不同转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻效率的比较 被引量：11
9
作者 于恒秀 陆美芳 +3 位作者 陈秀花 龚志云 刘巧泉 顾铭洪 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期120-126,共7页
为研究不同的转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻的效果,以4个籼粳稻品种为受体材料,比较了用农杆菌介导的双菌双载体和双T-DNA单载体两种共转化技术的共转化频率及随后获得的无抗性选择标记基因转化子的效率。结果表明,在双菌双载... 为研究不同的转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻的效果,以4个籼粳稻品种为受体材料,比较了用农杆菌介导的双菌双载体和双T-DNA单载体两种共转化技术的共转化频率及随后获得的无抗性选择标记基因转化子的效率。结果表明,在双菌双载体介导的转化中,4个水稻品种的平均共转化频率为10.1%,其中55.6%的共转化植株自交后代中可筛选出无抗性选择标记的转基因水稻植株。在单载体双T-DNA介导的共转化中,平均共转化频率为45.0%,从其中60.0%的共转化植株自交后代中可获得无抗性选择标记的转基因植株,即双T-DNA单载体法的去选择标记的效率(27.0%)要较双菌双载体法(5.6%)高。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌 无抗性选择标记 共转化
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无抗性选择标记转AP1基因抗病水稻新品系的选育 被引量：9
10
作者 于恒秀 刘巧泉 +6 位作者 王玲 赵志鹏 徐丽 黄奔立 龚志云 汤述翥 顾铭洪 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期2373-2379,共7页
为获得无任何抗生素抗性基因的抗病转基因水稻新品系,将克隆自甜椒的两亲性蛋白AP1基因与潮霉素抗性选择标记基因(HPT)分别构建位于同一农杆菌双元载体上的两个独立的T-DNA区中,并经农杆菌介导,将其导入江苏省推广的两个粳稻品种广陵香... 为获得无任何抗生素抗性基因的抗病转基因水稻新品系,将克隆自甜椒的两亲性蛋白AP1基因与潮霉素抗性选择标记基因(HPT)分别构建位于同一农杆菌双元载体上的两个独立的T-DNA区中,并经农杆菌介导,将其导入江苏省推广的两个粳稻品种广陵香粳和武香粳9号中,获得了一批转基因水稻植株。PCR和Southern杂交分析表明,AP1基因和HPT基因已同时导入受体基因组中,并从共转化植株的自交后代中筛选到了无HPT基因的转AP1基因水稻植株。结合田间农艺性状考察,选育了多个无抗性选择标记基因的纯合转AP1基因水稻新品系;抗病性鉴定结果表明,转AP1基因水稻对稻白叶枯病的抗性与未转化对照相比有显著提高,部分转基因水稻对纹枯病的抗性与未转化对照相比也有一定程度的提高。 展开更多
关键词 水稻 抗病 AP1基因 无抗性选择标记 白叶枯病 纹枯病
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Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能评价 被引量：10
11
作者 王志蕊 刘西梅 +4 位作者 周荆荣 郑新民 魏庆信 董发明 毕延震 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期194-201,共8页
选择标记的使用和残留可引起消费者对转基因生物环境安全和产品安全的担忧,建立消除选择标记的有效对策甚为必要.本研究的目标是评价Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能,为猪安全转基因研究提供实验依据和技术支撑.本文所用... 选择标记的使用和残留可引起消费者对转基因生物环境安全和产品安全的担忧,建立消除选择标记的有效对策甚为必要.本研究的目标是评价Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能,为猪安全转基因研究提供实验依据和技术支撑.本文所用的打靶载体ΔMSTN含有LoxP位点锚定的选择标记表达框(LoxP-CMV-NeoR-IRES-EGFP-LoxP).经电穿孔将该打靶载体导入猪肾PK15细胞,经G418筛选,获得稳定整合该载体、EGFP表达均一的单克隆细胞系.将Cre重组酶表达载体pTurbo-Cre导入该细胞系,借助流式分选(FACS)、终点PCR、荧光定量PCR、TA克隆与测序等手段,证明Cre-LoxP重组系统可在猪细胞内高效介导内源性选择标记基因的删除反应,EGFP水平的删除效率达到46.1%,DNA水平的删除效率则达到97%.本文的研究结果为消除选择标记的安全隐患提供了可靠的解决方案,为建立猪安全转基因技术提供了重要的科学依据. 展开更多
关键词 CRE LOXP 安全转基因 选择标记 绿色荧光蛋白 删除
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杜氏盐藻基因工程选择标记的研究 被引量：23
12
作者 耿德贵 王义琴 +1 位作者 李文彬 孙勇如 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第5期1-2,共2页
研究了杜氏盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素、G4 18和氯霉素 5种常用抗生素的敏感性。结果表明 ,经 4周培养 ,盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素和G4 18不敏感 ,浓度高达 6 0 0 μg/ml时 ,也不能抑制盐藻生长。对氯霉素很敏感 ,6 0 μg/m... 研究了杜氏盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素、G4 18和氯霉素 5种常用抗生素的敏感性。结果表明 ,经 4周培养 ,盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素和G4 18不敏感 ,浓度高达 6 0 0 μg/ml时 ,也不能抑制盐藻生长。对氯霉素很敏感 ,6 0 μg/ml即可完全抑制固体和液体培养中盐藻的生长。氯霉素适合作为盐藻基因工程的筛选抗生素 。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 基因工程 选择标记 抗生素 氯霉素
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无选择标记和载体骨干序列的Xa21转基因水稻的获得 被引量：10
13
作者 夏志辉 李晓兵 +4 位作者 陈彩艳 范海阔 江光怀 朱立煌 翟文学 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期204-210,共7页
利用双右边界T-DNA载体通过根癌农杆菌介导法将水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa21导入杂交稻重要恢复系C418中。T0代共获得27个独立转基因株系,通过田间抗性鉴定与PCR分析,有17个株系的Xa21基因分子鉴定为阳性,且对白叶枯病原菌P6生理小种... 利用双右边界T-DNA载体通过根癌农杆菌介导法将水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa21导入杂交稻重要恢复系C418中。T0代共获得27个独立转基因株系,通过田间抗性鉴定与PCR分析,有17个株系的Xa21基因分子鉴定为阳性,且对白叶枯病原菌P6生理小种具有抗性。通过对17个株系的后代植株进行田间抗性鉴定,分子标记辅助选择及Southern杂交分析,结果显示4个株系的T1代植株中能分离出无潮霉素标记基因的Xa21转基因植株。无选择标记Xa21转基因株系的获得率为15%。PCR检测还表明,这些无选择标记的Xa21转基因植株不带有载体骨架序列。通过对转基因后代进一步的抗性鉴定与PCR辅助选择,获得了无选择标记和载体骨架序列的转基因Xa21纯合的抗白叶枯病水稻。 展开更多
关键词 转基因水稻 XA21 白叶枯病抗性 无选择标记 无载体骨干 双右边界T-DNA载体
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无选择标记转基因植物的培育 被引量：19
14
作者 陈松彪 李旭刚 +1 位作者 王锋 朱祯 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期1-7,共7页
植物转基因研究中通常都要使用选择标记基因来筛选转化细胞并获得转基因植株。但是当转基因植株育成后,选择标记基因就失去了存在的意义。为了消除由选择标记基因引起的安全性隐患,人们发展了一些培育无选择标记转基因植物的策略。这些... 植物转基因研究中通常都要使用选择标记基因来筛选转化细胞并获得转基因植株。但是当转基因植株育成后,选择标记基因就失去了存在的意义。为了消除由选择标记基因引起的安全性隐患,人们发展了一些培育无选择标记转基因植物的策略。这些策略主要包括共转化、位点特异性重组和转座子转座等。去除选择标记基因将促进公众对转基因作物的接受。评述了无选择标记转基因植物的研究进展。 展开更多
关键词 选择标记 转基因植物 转座子 位点特异性 植物转基因 共转化 细胞 转基因植株 培育 育成
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用绿色荧光蛋白监测转基因植物中选择标记基因的消除 被引量：8
15
作者 贾洪革 吕玲飞 +2 位作者 庞永奇 陈晓英 方荣祥 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期10-15,共6页
绿色荧光蛋白 (GFP)可直接进行活体观察 ,它的这个优点可被用于监测转基因植物中选择标记基因的消除。为此 ,构建了植物表达载体pGNG ,将绿色荧光蛋白基因 (gfp)和卡那霉素抗性基因表达盒 (NosP nptII NosT)一起克隆在两个同向的lox位点... 绿色荧光蛋白 (GFP)可直接进行活体观察 ,它的这个优点可被用于监测转基因植物中选择标记基因的消除。为此 ,构建了植物表达载体pGNG ,将绿色荧光蛋白基因 (gfp)和卡那霉素抗性基因表达盒 (NosP nptII NosT)一起克隆在两个同向的lox位点间 ,在第一个lox位点上游置有CaMV 35S启动子以驱动GFP表达 ,第二个lox位点下游置有不含启动子的大肠杆菌 β 葡萄糖醛酸酶 (GUS)基因。首先在含卡那霉素 (Kan)的培养基上筛选出转pGNG的烟草 ,借助绿色荧光可容易地检出表达GFP的转化体。然后用另一转化载体pCambia130 0 Cre二次转化表达GFP的转基因植物 ,利用另一选择标记基因 潮霉素抗性基因 (hpt)进行筛选 ,在获得的再生植株中 ,Cre重组酶的表达消除了转化体中两lox位点间的gfp和nptII。实验结果表明可借助GFP荧光的消失 ,快速选出nptII被消除的二次转化体 ,同时GUS(作为目的蛋白 )在CaMV 35S启动子驱动下获得表达。最后利用后代的分离将hpt和cre除去。 展开更多
关键词 选择标记基因 转基因植物 绿色荧光蛋白 瞬间表达 化学诱导表达
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裙带菜基因工程选择标记的研究 被引量：10
16
作者 于道展 杨玲玲 +2 位作者 姜鹏 秦松 曾呈奎 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第6期74-77,共4页
研究了裙带菜幼孢子体对10种选择试剂的敏感性。结果发现裙带菜幼孢子体对氯霉素、潮霉素敏感,对除草剂草丁膦极敏感(2天的LD50为8.57mg/L)。根据统计学的要求得出了这3种选择试剂对裙带菜幼孢子体的半致死剂量和95％可信限。本文的结... 研究了裙带菜幼孢子体对10种选择试剂的敏感性。结果发现裙带菜幼孢子体对氯霉素、潮霉素敏感,对除草剂草丁膦极敏感(2天的LD50为8.57mg/L)。根据统计学的要求得出了这3种选择试剂对裙带菜幼孢子体的半致死剂量和95％可信限。本文的结果能为裙带菜基因工程选择标记的建立提供依据。 展开更多
关键词 裙带菜 幼袍子体 基因工程 选择标记 氯霉素 潮霉素 草丁膦 敏感性
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利用Cre/lox定位重组系统获得无选择标记GFP转基因烟草 被引量：9
17
作者 宋洪元 任雪松 +2 位作者 司军 李成琼 宋明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期2973-2982,共10页
【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Bast... 【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Basta的GFP转基因植株。GFP转基因植株叶盘二次转化导入重组酶Cre基因后,实现与GFP基因连锁的Bar基因表达盒剔除,剔除Bar基因的植株开花后自交使重组酶Cre基因分离,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【结果】将含Bar基因表达盒以及GFP基因表达盒的植物表达载体转化烟草Wisconsin38后获得了抗除草剂Basta以及GFP荧光表达的转基因植株。随机抽取5株转基因植株二次转化导入Cre基因,所获得的再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,绝大多数单株对应叶盘在含8mg·L-1PPT(phosphinothricin)的筛选培养基上无法再生死亡,删除效率在76%～100%。对Bar基因删除后区域片段进行克隆测序分析显示,Bar基因表达盒已经被精确删除。Bar基因删除植株开花后自交,获得的自交后代进行NPTⅡ抗性检测,NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有GFP基因。【结论】利用Cre/lox系统获得烟草无选择标记的转基因植物是稳定可行的,可广泛应用于其它无选择标记转基因植物的培育。 展开更多
关键词 Cre/lox定位重组系统 无选择标记转基因烟草 绿色荧光蛋白 转基因
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无抗性选择标记转基因软米和糯稻新品系的选育及中间试验 被引量：6
18
作者 于恒秀 刘巧泉 +6 位作者 徐丽 陆美芳 蔡秀玲 龚志云 裔传灯 王宗阳 顾铭洪 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期967-973,共7页
直链淀粉含量是影响稻米品质的最主要因素之一。为培育直链淀粉含量较低的软米和糯稻新品系,在经共转化法获得的转反义Wx基因水稻自交后代中筛选获得了不含抗性选择标记基因的纯合体。对这些纯合转基因水稻的分析表明,其未成熟种子胚乳... 直链淀粉含量是影响稻米品质的最主要因素之一。为培育直链淀粉含量较低的软米和糯稻新品系,在经共转化法获得的转反义Wx基因水稻自交后代中筛选获得了不含抗性选择标记基因的纯合体。对这些纯合转基因水稻的分析表明,其未成熟种子胚乳中Wx基因表达水平和成熟种子中Wx蛋白量较未转化对照有不同程度的降低。转基因水稻成熟种子中直链淀粉含量较未转化对照有不同程度的下降,2个转基因系降低至10%左右,相当于软米的直链淀粉含量,1个转基因系降到了2%以下,形成了糯稻新品系。转基因稻米中直链淀粉含量降低后,其胶稠度相应变软,而糊化温度未发生明显改变。田间试验结果表明,转基因水稻的大部分农艺性状与受体品种武香粳9号无显著差异。因此,本研究成功培育了无抗性选择标记且淀粉品质改良的转反义Wx基因水稻新品系。 展开更多
关键词 转基因水稻 反义WX基因 软米 糯稻 无抗性选择标记
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培育具有安全选择标记或无选择标记的转基因植物 被引量：14
19
作者 李晓兵 陈彩艳 翟文学 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期345-349,共5页
转基因植物中选择标记的安全性已成为植物基因工程研究的热点之一。从两个方面可以解决转基因植物中的选择标记问题。一是选用安全的正向选择标记,主要是与糖代谢和激素代谢相关的基因。二是构建能去除选择标记基因的转化系统,主要有共... 转基因植物中选择标记的安全性已成为植物基因工程研究的热点之一。从两个方面可以解决转基因植物中的选择标记问题。一是选用安全的正向选择标记,主要是与糖代谢和激素代谢相关的基因。二是构建能去除选择标记基因的转化系统,主要有共转化系统、双T DNA边界载体系统、位点特异性重组系统和转座子系统等。这些植物基因工程的方法将有助于培育安全的转基因植物。 展开更多
关键词 转基因植物 生物安全性 选择标记 植物基因工程 糖代谢 激素代谢 转化系统
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大型绿藻浒苔转化表达系统选择标记的筛选 被引量：10
20
作者 叶静 张喆 +2 位作者 李富超 秦松 何培民 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第3期63-67,共5页
主要研究了条浒苔对抗生素氯霉素和除草剂Basta的敏感性,以确定适合的阳性选择标记基因。应用不同浓度氯霉素(0、25、50、75、100、125μg/ml)和Basta(0、5、12.5、25、37.5、50μg/ml)对不同发育时期条浒苔细胞存活率影响进行了测定。... 主要研究了条浒苔对抗生素氯霉素和除草剂Basta的敏感性,以确定适合的阳性选择标记基因。应用不同浓度氯霉素(0、25、50、75、100、125μg/ml)和Basta(0、5、12.5、25、37.5、50μg/ml)对不同发育时期条浒苔细胞存活率影响进行了测定。实验结果表明:不同发育时期条浒苔对氯霉素和Basta的敏感性不同。其中最大浓度125μg/ml浓度的氯霉素在15d内对条浒苔孢子和小苗两个不同发育时期的细胞均难以达到全部杀死效果,相对存活率仍分别为1%和20%;而Basta对条浒苔孢子和小苗均具有很强的杀生作用,其中5μg/ml浓度的Basta在3d内可将条浒苔孢子全部杀死,12.5μg/ml浓度下约一周时间可以将浒苔小苗全部致死。本实验结果提示bar基因有可能成为浒苔基因工程较理想的选择标记基因。 展开更多
关键词 条浒苔 选择标记 氯霉素 Basta
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