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从台湾大选看美国对台海两岸的“双遏阻”政策 被引量:1
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作者 吕萍 《东南亚纵横》 北大核心 2004年第12期82-86,共5页
Chen Shui-bian speeds up“Taiwan Independence”in order to gain reelection in the2004Taiwan Referenˉdum.The US government has realized that its“Ambiguous Strategy”can not prevent Cross-straits crisis,so the“Double... Chen Shui-bian speeds up“Taiwan Independence”in order to gain reelection in the2004Taiwan Referenˉdum.The US government has realized that its“Ambiguous Strategy”can not prevent Cross-straits crisis,so the“Double Conˉtainment”policy towards the cross-Straits has been adopted.On one hand,to slowdown Taiwan’s unceasing pursuit of indeˉpendence,on the other hand,to prevent mainland from solving Taiwan problem in pursuit of arms.This article is the analysis of the cause and details of the“Double Containment”policy and it claims that the US government will carry out this policy permaˉnently as well as maintain the situation of the cross-straits separation and independent governing in order to pursue the utmost strategic benefits.Taiwan problem is increasing Americanized.The US plays an extremely important viewin the China,America and Taiwan interaction.However,the Mainland of China must not have any illusion about America as far as the unification is concerned. 展开更多
关键词 台湾省 中国 总统竞选 美国 “双遏阻”政策 台独势力 陈水扁 “台独”分子
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酒东地区测井遏阻的原因分析
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作者 孟贵生 《国外测井技术》 2008年第1期43-46,66,共5页
酒东地区由于井况复杂造成测井遇阻的原因较多。首先是红层垮塌阻塞井眼引起的测井遇阻和井筒中形成的砂桥遇阻;井壁不规则、多处形成台阶也会导致测井仪器的遇阻;另外泥浆比重高、粘切度大也是引起测井遇阻的重要原因。文章通过分析造... 酒东地区由于井况复杂造成测井遇阻的原因较多。首先是红层垮塌阻塞井眼引起的测井遇阻和井筒中形成的砂桥遇阻;井壁不规则、多处形成台阶也会导致测井仪器的遇阻;另外泥浆比重高、粘切度大也是引起测井遇阻的重要原因。文章通过分析造成测井遇阻的原因,针对不同的遇阻情况提出了具体的处理方法,对顺利完成复杂井的测井施工提供了重要的帮助和指导。 展开更多
关键词 测井遏阻 红层垮塌 砂桥 井壁 泥浆 处理方式
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二陈汤通过调控p38MAPK信号通路降低血脂异常痰浊阻遏证小鼠氧化应激水平的效应研究
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作者 张晓栋 薛晓琳 +6 位作者 叶超 赵久丽 杨正 李鹏洋 张珊 陈鹏宇 陈婧 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2024年第4期38-42,共5页
目的探讨二陈汤通过调控p38MAPK信号通路降低血脂异常痰浊阻遏证小鼠氧化应激水平的效应,基于“方证相应”,研究该病-证的证候特点。方法将C57BL/6J小鼠5只设为正常组,ApoE基因敲除小鼠20只,应用多因素复合建模的方法构建血脂异常痰浊... 目的探讨二陈汤通过调控p38MAPK信号通路降低血脂异常痰浊阻遏证小鼠氧化应激水平的效应,基于“方证相应”,研究该病-证的证候特点。方法将C57BL/6J小鼠5只设为正常组,ApoE基因敲除小鼠20只,应用多因素复合建模的方法构建血脂异常痰浊阻遏证模型,设为模型组、二陈汤低剂量治疗组、二陈汤中剂量治疗组、二陈汤高剂量治疗组。采用生化法检测血清MDA浓度水平,实时荧光定量PCR法检测主动脉内皮ICAM、E-Selectin基因转录水平,蛋白免疫印迹法检测主动脉内皮p38、p-p38蛋白表达水平。结果①与正常组相比,模型组小鼠血清MDA浓度水平、ICAM、E-Selectin基因转录水平、p-p38蛋白表达水平显著升高(P<0.05);②与模型组相比,二陈汤中、高剂量治疗组血清MDA浓度水平、ICAM、E-Selectin基因转录水平、p-p38蛋白表达水平降低(P<0.05);③与二陈汤低剂量治疗组相比,二陈汤中剂量治疗组小鼠主动脉内皮p-p38蛋白表达水平明显下降(P<0.05),二陈汤高剂量治疗组小鼠血清MDA浓度水平、E-Selectin基因转录水平明显下降(P<0.05);④与二陈汤中剂量治疗组相比,二陈汤高剂量治疗组小鼠主动脉内皮ICAM基因转录水平明显下降(P<0.05)。结论二陈汤可改善血脂异常痰浊阻遏证ICAM、E-Selectin基因转录水平,降低氧化应激程度,进而发挥对于血管内皮的保护作用,该作用的发挥机制可能与下调p38MAPK信号通路激活水平有关。方证相应,氧化应激水平增强所致的血管内皮损伤,可能是血脂异常痰浊阻遏的证候特点之一。 展开更多
关键词 二陈汤 血脂异常 痰浊 P38MAPK信号通路 氧化应激
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高脂血症痰浊阻遏证动物模型评价量表的初步构建思路
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作者 张珊 李宁 +4 位作者 薛晓琳 陈婧 叶超 葛肖波 于彤 《世界中西医结合杂志》 2024年第5期1051-1056,共6页
目的 归纳痰浊内涵,确定痰浊阻遏证动物宏观表征,搭建量表理论框架,为高脂血症痰浊阻遏证动物模型的评价提供可借鉴的方法。方法 检索2012年1月1日—2022年7月1日期间《中医基础理论》《中医大辞典》《中药新药临床指导原则》《中医临... 目的 归纳痰浊内涵,确定痰浊阻遏证动物宏观表征,搭建量表理论框架,为高脂血症痰浊阻遏证动物模型的评价提供可借鉴的方法。方法 检索2012年1月1日—2022年7月1日期间《中医基础理论》《中医大辞典》《中药新药临床指导原则》《中医临床诊疗术语·证候部分》等相关著作中痰浊阻遏证的内容及中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)和维普(VIP)数据库发表的与痰浊阻遏证动物模型相关的实验文献,归纳痰浊的具体概念及表现,并以此为依据,确定量表基本框架,建立条目池并赋分。结果 高脂血症痰浊阻遏证动物模型评价量表共包括8个维度,5个测量指标以及7个观察指标。结论 引入量表的评价方式,可完善动物模型的评价体系,提高模型评价的稳定性和可靠性,为保证基于动物模型进行证候生物学基础及干预效果研究的同质性奠定基础。 展开更多
关键词 高脂血症 痰浊 量表
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脾肾阳虚证和痰浊阻遏证血脂异常病人中医证候积分与血清Apelin-13、NLR水平的相关性
5
作者 张树珺 杨惠民 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第11期2055-2058,共4页
目的:探讨脾肾阳虚证和痰浊阻遏证血脂异常病人中医证候积分与血清爱帕琳肽13(Apelin-13)水平、血清中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)的相关性。方法:选取2019年1月—2022年4月北京中医药大学东直门医院的住院及门诊病人符合血脂异常诊断... 目的:探讨脾肾阳虚证和痰浊阻遏证血脂异常病人中医证候积分与血清爱帕琳肽13(Apelin-13)水平、血清中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)的相关性。方法:选取2019年1月—2022年4月北京中医药大学东直门医院的住院及门诊病人符合血脂异常诊断的病人71例,其中,脾肾阳虚证组34例,痰浊阻遏证组37例。采用中医证候积分对脾肾阳虚证和痰浊阻遏证病人进行量化评分,脾肾阳虚证和痰浊阻遏证血脂异常病人中医证候程度与血清Apelin-13、NLR水平的关系。结果:相关性分析显示,脾肾阳虚证病人中医证候积分与Apelin-13水平呈正相关(r=0.619,P<0.001),痰浊阻遏证病人中医证候积分与Apelin13水平呈负相关(r=-0.660,P<0.001)。脾肾阳虚证病人中医证候积分与NLR呈负相关(r=-0.481,P=0.004),痰浊阻遏证病人中医证候积分与NLR呈正相关(r=0.328,P=0.048)。结论:血清Apein-13、NLR水平可反映脾肾阳虚证和痰浊阻遏证间的不同证候特点。 展开更多
关键词 血脂异常 脾肾阳虚证 痰浊 爱帕琳肽13 中性粒细胞/淋巴细胞比值
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瑞舒伐他汀联合中医针药疗法治疗痰浊阻遏型高胆固醇血症患者的效果分析
6
作者 陈艳馨 冯志文 +2 位作者 周海 陈柏书 冯梓润 《反射疗法与康复医学》 2024年第8期41-44,共4页
目的评估瑞舒伐他汀联合中医针药疗法治疗痰浊阻遏型高胆固醇血症患者的疗效及安全性。方法选择本院2022年9月—2023年10月收治的60例痰浊阻遏型高胆固醇血症患者为研究对象。采用随机数字表法将其分为对照组和试验组,各30例。对照组采... 目的评估瑞舒伐他汀联合中医针药疗法治疗痰浊阻遏型高胆固醇血症患者的疗效及安全性。方法选择本院2022年9月—2023年10月收治的60例痰浊阻遏型高胆固醇血症患者为研究对象。采用随机数字表法将其分为对照组和试验组,各30例。对照组采用瑞舒伐他汀治疗,试验组采用瑞舒伐他汀联合中医针药疗法。对比两组的治疗总有效率、血脂水平、中医证候积分、体质量、腰围及不良反应发生率。结果试验组治疗总有效率为100.00%,高于对照组的86.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组总胆固醇水平为(4.55±0.86)mmol/L,三酰甘油水平为(1.14±0.57)mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇水平为(2.53±0.74)mmol/L,均低于对照组的(5.87±0.98)mmol/L、(2.05±0.66)mmol/L、(3.62±0.75)mmol/L,而高密度脂蛋白胆固醇水平为(1.65±0.43)mmol/L,高于对照组的(1.21±0.32)mmol/L,组间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组中医证候积分、体质量均低于对照组,腰围小于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论瑞舒伐他汀联合中医针药疗法对痰浊阻遏型高胆固醇血症患者具有显著疗效,且安全性较高,该联合疗法值得在临床中进一步推广和应用。 展开更多
关键词 高胆固醇血症 痰浊 瑞舒伐他汀 中医针药疗法 血脂水平
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鹧鸪茶对高脂血症痰浊阻遏证患者的降脂效果及肠道菌群的影响 被引量:3
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作者 卓书江 张明 林道斌 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第2期300-308,共9页
【目的】探讨鹧鸪茶对高脂血症痰浊阻遏证患者的降脂效果及肠道菌群的影响。【方法】将40例高脂血症痰浊阻遏证患者随机分为试验组和对照组,每组各20例。所有患者均按照指南推荐的运动方法进行降脂治疗,试验组在此基础上加用鹧鸪茶治疗... 【目的】探讨鹧鸪茶对高脂血症痰浊阻遏证患者的降脂效果及肠道菌群的影响。【方法】将40例高脂血症痰浊阻遏证患者随机分为试验组和对照组,每组各20例。所有患者均按照指南推荐的运动方法进行降脂治疗,试验组在此基础上加用鹧鸪茶治疗,治疗周期为8周。观察2组患者干预前后的中医证候积分、体质量指数(BMI)和血脂指标的变化情况,评价2组患者的中医证候疗效。此外,在治疗结束后采集2组患者和10例健康人的新鲜粪便检测肠道菌群。【结果】(1)干预8周后,试验组的总有效率为95.0%(19/20),对照组为15.0%(3/20),组间比较,试验组的中医证候疗效明显优于对照组(P<0.01)。(2)治疗后,试验组的形体肥胖、头重如裹、呕吐痰涎、口淡及食少等证候积分均较治疗前改善(P<0.05或P<0.01),而对照组仅形体肥胖及口淡等证候积分较治疗前改善(P<0.05);组间比较,试验组对各项中医证候积分的改善作用均明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,试验组的BMI较治疗前明显降低(P<0.05),对照组的BMI较治疗前有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);组间比较,试验组对BMI的降低作用明显优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后,2组患者的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均较治疗前降低(P<0.01),试验组患者的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平较治疗前升高(P<0.01),对照组的HDL-C水平较治疗前有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);组间比较,试验组对TC和LDL-C水平的降低作用及对HDL-C水平的升高作用均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(5)肠道菌群方面,对照组厚壁菌门含量较健康人群及试验组上升(P<0.05),而试验组厚壁菌门含量较对照组明显下降(P<0.05),拟杆菌门和变形菌门含量较对照组明显升高(P<0.05)。【结论】鹧鸪茶可有效改善高脂血症痰浊阻遏证患者的中医证侯、体质量指数和血脂指标,其可能是通过调节患者的肠道菌群途径实现的。 展开更多
关键词 高脂血症 痰浊 鹧鸪茶 体质量指数 血脂 肠道菌群
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健脾化痰方联合阿托伐他汀治疗高脂血症痰湿阻遏证的临床研究
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作者 沈铁 王肖龙 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第24期4565-4569,共5页
目的:观察健脾化痰方联合阿托伐他汀治疗高脂血症痰湿阻遏证的临床疗效。方法:选取2020年1月—2022年6月就诊于上海市浦东新区航头鹤沙社区卫生服务中心中医科的高脂血症且辨证为痰湿阻遏证的病人90例,随机分为治疗组和对照组,各45例。... 目的:观察健脾化痰方联合阿托伐他汀治疗高脂血症痰湿阻遏证的临床疗效。方法:选取2020年1月—2022年6月就诊于上海市浦东新区航头鹤沙社区卫生服务中心中医科的高脂血症且辨证为痰湿阻遏证的病人90例,随机分为治疗组和对照组,各45例。对照组采用阿托伐他汀治疗,治疗组在对照组基础上加用健脾化痰方治疗,两组均治疗8周。比较两组临床疗效,中医证候评分,血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)],颈动脉超声指标[内中膜厚度(IMT)、舒张末期流速(EDV)及收缩期峰值流速(PSV)],血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶Kexin-9(PCSK-9)及安全性指标。结果:治疗后,两组TC、TG、LDL-C、ApoB较治疗前降低,HDL-C、ApoA1、ApoA1/ApoB较治疗前升高,且组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(84.4%与66.7%,P<0.05)。治疗后,两组IMT、PSV、EDV较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清NO水平较治疗前升高,血清ET-1、hs-CRP、PCSK-9水平较治疗前降低,且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组中医证候主症、次症和总分均较治疗前降低,且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾化痰汤联合阿托伐他汀可进一步改善高脂血症痰湿阻遏证病人临床症状和血脂水平,其降脂作用可能是通过抑制PCSK-9表达,同时改善内皮功能,抑制血管内皮炎症反应。 展开更多
关键词 高脂血症 痰湿 健脾化痰方 阿托伐他汀 疗效
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健脾泄浊汤治疗痰浊阻遏型高脂血症的效果及对血脂水平的影响 被引量:2
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作者 胡建峰 《中国民间疗法》 2023年第4期72-74,87,共4页
目的:探讨健脾泄浊汤治疗痰浊阻遏型高脂血症的效果及对血脂水平的影响。方法:选取82例痰浊阻遏型高脂血症患者,根据治疗方案分为观察组及对照组,每组41例。对照组应用常规西药治疗,观察组在此基础上应用健脾泄浊汤治疗。比较两组患者... 目的:探讨健脾泄浊汤治疗痰浊阻遏型高脂血症的效果及对血脂水平的影响。方法:选取82例痰浊阻遏型高脂血症患者,根据治疗方案分为观察组及对照组,每组41例。对照组应用常规西药治疗,观察组在此基础上应用健脾泄浊汤治疗。比较两组患者临床疗效、不良反应情况及治疗前后中医证候积分、血脂水平[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、颈动脉内膜中层厚度(IMT)]。结果:观察组总有效率为95.12%(39/41),较对照组的80.49%(33/41)高(P<0.05)。治疗后,两组患者主症、次症积分均低于治疗前,且观察组上述积分均较对照组低(P<0.05);两组患者TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均较治疗前有差异(P<0.05),且观察组各指标水平均优于对照组(P<0.05);两组患者IMT均低于治疗前(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率为2.44%(1/41),较对照组14.63%(6/41)低(P<0.05)。结论:健脾泄浊汤治疗痰浊阻遏型高脂血症疗效确切,可降低患者中医证候积分,调节血脂水平,值得应用。 展开更多
关键词 高脂血症 痰浊 健脾泄浊汤 血脂水平 内膜中层厚度
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拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)UV III纤维素酶合成的诱导与阻遏 被引量:10
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作者 韩峰 孙彩云 +2 位作者 宋小焱 宋桂经 于文功 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期23-26,共4页
拟康氏木霉 (T .pseudokoningii)TH经紫外诱变获得一抗高浓度葡萄糖阻遏突变株UVIII,纤维素酶产量显著提高。研究表明 ,UVIII对诱导物的敏感性增加了 10 0倍 ,并且对葡萄糖的吸收能力明显下降 ,导致部分解除了葡萄糖阻遏作用 。
关键词 诱导 纤维素酶 诱导 拟康氏木霉
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RhoA和血清反应因子(SRF)介导E1A激活基因阻遏子诱导人血管平滑肌细胞分化 被引量:9
11
作者 韩雅玲 徐红梅 +3 位作者 闫承慧 胡叶 康建 刘海伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期438-445,共8页
为探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的调控机制,应用重组逆转录病毒表达载体pLNCX2(+)/CREG及pLXSN(-)/CREG制备稳定感染HITASY细胞模型,观察CREG蛋白过表达及表达抑制对人VSMCs分化的影响并探讨其调控机制.... 为探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的调控机制,应用重组逆转录病毒表达载体pLNCX2(+)/CREG及pLXSN(-)/CREG制备稳定感染HITASY细胞模型,观察CREG蛋白过表达及表达抑制对人VSMCs分化的影响并探讨其调控机制.结果显示:pLNCX2(+)/CREG稳定感染细胞呈分化表型,细胞细长变成组织样聚集生长趋势,细胞中CREG蛋白和平滑肌分化标志蛋白平滑肌α-肌动蛋白(SMα-actin)表达显著增加,同时SMα-actin相关调控因子——血清反应因子(SRF)入核转位,RhoA总蛋白表达上调,以Rho激酶特异性抑制剂Y-27632作用后,CREG诱导的SMα-actin表达下调的同时SRF出核转位;pLXSN(-)/CREG稳定感染的细胞体积变大,细胞极性消失,呈无序生长,细胞中CREG和SMα-actin蛋白表达显著降低,同时伴有SRF出核转位及RhoA总蛋白表达下调.免疫共沉淀分析发现,CREG蛋白能被分泌到VSMCs培养基中表达,并可与细胞膜受体6-磷酸甘露糖/胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(M6P/IGF2R)发生直接相互作用.用蛋白磷酸酶PP2A特异性抑制剂okadaicacid减少M6P/IGF2R在细胞膜表面分布,可明显抑制CREG过表达引起的RhoA、SRF和SMα-actin表达.上述结果提示,在体外培养的人VSMCs中,CREG可能作为一种分泌型蛋白质通过与细胞膜受体M6P/IGF2R相互作用,依次激活SMα-actin蛋白相关调控因子RhoA和SRF引起SMα-actin表达增加,促进VSMCs向分化表型转换. 展开更多
关键词 蛋白 E1A 表型 细胞 血管平滑肌
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E1A激活基因阻遏子过表达抑制体外人血管平滑肌细胞凋亡 被引量:11
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作者 韩雅玲 徐红梅 +4 位作者 邓捷 胡叶 康建 刘海伟 闫承慧 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期324-330,共7页
为探讨EIA激活基因阻遏子(cellular repressor of EIA-stimulated genes,CREG)对人血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)凋亡的影响及调控机制,应用正、反义重组逆转录病毒表达载体pLNCX_2(+)/CREG及pLXSN(-)/CREG制备... 为探讨EIA激活基因阻遏子(cellular repressor of EIA-stimulated genes,CREG)对人血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)凋亡的影响及调控机制,应用正、反义重组逆转录病毒表达载体pLNCX_2(+)/CREG及pLXSN(-)/CREG制备稳定感染人胸廓内动脉平滑肌细胞克隆株(human internal thoracic artery-Shenyang,HITASY)细胞模型.观察CREG蛋白过表达及表达抑制对平滑肌细胞凋亡的影响。荧光显微镜下观察DAPI染色后凋亡细胞核形态,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR技术分析凋亡相关基因caspase-9mRNA的表达,蛋白质印迹法分析p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)的表达变化。研究结果显示,CREG蛋白过表达明显抑制血清饥饿诱导的HITASY细胞凋亡的发生;同时细胞中p38 MAPK、p-p38 MAPK的表达增加。相反,抑制CREG蛋白表达则引起正常血清培养状态下VSMCs的自发凋亡明显增加,同时细胞内p38 MAPK、p-p38 MAPK表达显著下降。进一步研究发现,预先应用特异性抑制剂SB203580阻断p38 MAPK信号转导通路后,CREG蛋白过表达引起的细胞凋亡抑制作用被明显减弱,血清饥饿后CREG蛋白过表达引起的HITASY细胞凋亡现象明显增加。上述结果提示,CREG蛋白过表达可以抑制体外培养的VSMCs凋亡.p38 MAPK信号转导通路可能介导CREG蛋白对VSMCs凋亡的抑制作用。 展开更多
关键词 蛋白 腺病毒E1A蛋白 凋亡 细胞 血管平滑肌
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E1A激活基因阻遏子促进人血管平滑肌细胞分化和迁移 被引量:11
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作者 韩雅玲 胡叶 +3 位作者 刘海伟 康建 闫承慧 李少华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期517-522,共6页
为探讨E1A激活基因阻遏子(cellularrepressorofE1A-stimulatedgenes,CREG)蛋白在人血管平滑肌细胞株HITASY分化和迁移中的调控作用,构建了重组逆转录病毒载体pLNCX2(+)/CREG和pLXSN(-)/CREG.以带绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,G... 为探讨E1A激活基因阻遏子(cellularrepressorofE1A-stimulatedgenes,CREG)蛋白在人血管平滑肌细胞株HITASY分化和迁移中的调控作用,构建了重组逆转录病毒载体pLNCX2(+)/CREG和pLXSN(-)/CREG.以带绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)的空载体pLNCX(+)/GFP和正常HITASY为对照,用磷酸钙共沉淀法将重组逆转录病毒载体转染293细胞,包装出完整的逆转录病毒后,感染HITASY.经G418筛选,获得稳定感染的细胞克隆.应用免疫荧光染色、蛋白质印迹等方法检测CREG和平滑肌分化标志蛋白α-肌动蛋白(SMα-actin)表达,同时通过刮伤实验、慢速显微摄像技术检测细胞迁移能力以及用明胶酶谱方法分析细胞基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMPs)的活性.结果表明:pLNCX2(+)/CREG稳定感染的HITASY中CREG和SMα-actin蛋白表达上调,MMP-2和MMP-9活性升高,细胞迁移速度加快;pLXSN(-)/CREG稳定感染的HITASY中CREG和SMα-actin蛋白表达下调,MMP-2和MMP-9活性降低,细胞迁移速度减慢.上述研究提示CREG在诱导血管平滑肌细胞分化的同时促进细胞迁移. 展开更多
关键词 腺病毒蛋白E1A 分化 迁移 逆转录病毒载体 平滑肌
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快速筛选产β-葡聚糖酶曲霉及抗阻遏育种 被引量:7
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作者 郑毅 段慧明 +2 位作者 施巧琴 王水顺 李志康 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期21-24,共4页
采用改良琼脂块鉴定平板法进行产β-葡聚糖酶曲霉的快速筛选。其中温度、初始pH、平板厚度及去氧胆酸钠的浓度都影响曲霉产β-葡聚糖酶分解底物所形成水解圈大小及透明度。同时研究发现,高浓度的葡萄糖对曲霉合成β-葡聚糖酶具有... 采用改良琼脂块鉴定平板法进行产β-葡聚糖酶曲霉的快速筛选。其中温度、初始pH、平板厚度及去氧胆酸钠的浓度都影响曲霉产β-葡聚糖酶分解底物所形成水解圈大小及透明度。同时研究发现,高浓度的葡萄糖对曲霉合成β-葡聚糖酶具有阻遏作用,通过改变分离培养基的葡萄糖浓度,结合诱变育种可以快速筛选到抗葡萄糖阻遏的高产β-葡聚糖酶的菌株。 展开更多
关键词 Β-葡聚糖酶 曲霉 育种 抗葡萄糖
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逆转录病毒介导的E1A激活基因阻遏子抑制大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜形成 被引量:6
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作者 韩雅玲 邓捷 +4 位作者 梁明 康建 刘海伟 徐红梅 闫承慧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1873-1877,共5页
目的:探讨逆转录病毒介导的E1A激活基因阻遇子(CREG)过表达对球囊损伤后大鼠颈动脉新生内膜形成的影响。方法:以球囊拉伤法制备大鼠颈动脉损伤模型,应用Pluronic F127胶分别包裹含有pLNCX/CREG、pLNCX/GFP载体的逆转录病毒,并于损伤即... 目的:探讨逆转录病毒介导的E1A激活基因阻遇子(CREG)过表达对球囊损伤后大鼠颈动脉新生内膜形成的影响。方法:以球囊拉伤法制备大鼠颈动脉损伤模型,应用Pluronic F127胶分别包裹含有pLNCX/CREG、pLNCX/GFP载体的逆转录病毒,并于损伤即刻涂抹于血管外壁。随后在损伤不同时点取出损伤动脉,测量内膜面积及内膜/中膜面积比。用免疫组织化学法观察CREG、SMα-actin及Ki-67变化,Western blotting检测CREG蛋白表达。结果:血管损伤后2 d pLNCX/GFP组血管中膜平滑肌层GFP表达。pLNCX/CREG组大鼠血管CREG表达明显多于单纯损伤组。感染CREG组大鼠球囊损伤后血管新生内膜的形成明显受抑,Ki-67蛋白表达明显少于、而SMα-actin表达则明显多于单纯损伤组。结论:CREG过表达能抑制血管损伤后平滑肌细胞的增殖并促进其分化,提示调控CREG基因的表达可能为预防PCI术后再狭窄提供有效手段。 展开更多
关键词 蛋白质类 血管 大鼠
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大豆根系特征对氮阻遏的适应性调节 被引量:11
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作者 石海 苗淑杰 柏会子 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期501-505,511,共6页
以黑农35为材料,采用盆栽培养方法,在2011年筛选的氮阻遏阈值基础上,设置低量氮、临界氮和阻遏氮3个施氮水平,探讨了大豆根系特征对氮阻遏的响应。结果表明:随着大豆的生长发育,不同氮水平条件下大豆根系形态指标、根瘤数及其干重、根... 以黑农35为材料,采用盆栽培养方法,在2011年筛选的氮阻遏阈值基础上,设置低量氮、临界氮和阻遏氮3个施氮水平,探讨了大豆根系特征对氮阻遏的响应。结果表明:随着大豆的生长发育,不同氮水平条件下大豆根系形态指标、根瘤数及其干重、根干重及碳氮积累均呈单峰曲线变化,峰值出现在播种后65 d;根冠比、根瘤豆血红蛋白含量随生育进程而降低;在播种后65 d,根碳氮比处于最小值。根干物质重和根磷、氮积累量(播种后45 d除外)与施氮水平正相关,均在阻遏氮水平下(108 mg.kg-1)达最大值,而碳氮比在临界氮水平下达最大值;各个时期,根系形态各指标(播种后45 d根尖数除外)均在临界氮水平下(54 mg.kg-1)出现最大值;根瘤数、根瘤干重(播种后45 d除外)、根瘤豆血红蛋白含量与根系形态各指标变化规律相同。因此,初步认定在本试验条件下适宜大豆根系生长的最佳氮水平为54 mg.kg-1。 展开更多
关键词 根系特征 氮肥 适应性调节
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禾豆间距对间作豌豆“氮阻遏”减缓效应的影响 被引量:27
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作者 赵财 柴强 +1 位作者 乔寅英 王建康 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1169-1176,共8页
针对禾豆间作协同利用化学氮肥和豆科固氮潜力调控依据薄弱问题,以河西走廊区主导间作模式玉米/豌豆间作系统为研究对象,研究了禾豆间作间距为15 cm、30 cm和45 cm空间结构对间作豌豆氮阻遏减缓效应的影响,以期为禾豆间作种植模式优化... 针对禾豆间作协同利用化学氮肥和豆科固氮潜力调控依据薄弱问题,以河西走廊区主导间作模式玉米/豌豆间作系统为研究对象,研究了禾豆间作间距为15 cm、30 cm和45 cm空间结构对间作豌豆氮阻遏减缓效应的影响,以期为禾豆间作种植模式优化空间结构、减缓氮阻遏、提高氮素利用效率提供理论依据。2013和2014两年研究结果表明,与单作相比,间作豌豆有效根瘤个数和根瘤重均有显著提高,根瘤数提高幅度达0~500%,其中间距为30 cm时,豌豆的根瘤数和瘤重达最大。以根瘤数和根瘤重计算的氮阻遏消减效应(Ca)均为正值,施氮条件下,玉米与豌豆间距为30 cm处理的氮阻遏消减效应显著高于15 cm和45 cm间距处理,2013年和2014年以根瘤数计算的Ca值分别达78.70%和161.21%,说明间作相对于单作都具有减缓氮阻遏的作用。而在此期豌豆的营养竞争比率(CRpm)大于1,豌豆相对于玉米具有较强的种间竞争能力。禾豆间作可显著提高氮素利用效率,以间距为30 cm的间作处理最高,2013年和2014年两年平均较间距为15 cm和45 cm空间结构的间作模式分别提高21.90%和21.88%。说明优化空间结构可有效增加间作豌豆的结瘤数和瘤重,增强氮阻遏减缓效应,调控禾豆间作系统氮素吸收利用,提高氮素利用效率。 展开更多
关键词 玉米/豌豆间作 空间结构 间作作物间距 根瘤 氮素利用效率 营养竞争比率
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E1A激活基因阻遏子(CREG)过表达通过抑制p38/JNK信号分子活化对抗人血管平滑肌细胞凋亡 被引量:5
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作者 吴光哲 闫承慧 +7 位作者 韩雅玲 陶杰 邓捷 田孝祥 张保海 王涛 康建 张效林 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1597-1606,共10页
血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡参与了动脉粥样硬化(AS)及冠状动脉介入治疗(PCI)术后再狭窄(RS)等心血管疾病的发生发展过程.E1A激活基因阻遏子(CREG)是新近发现的一种分泌型糖蛋白,在维持细胞和组织稳态方面发挥重要作用.前期研究发现CREG... 血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡参与了动脉粥样硬化(AS)及冠状动脉介入治疗(PCI)术后再狭窄(RS)等心血管疾病的发生发展过程.E1A激活基因阻遏子(CREG)是新近发现的一种分泌型糖蛋白,在维持细胞和组织稳态方面发挥重要作用.前期研究发现CREG蛋白过表达能够对抗血清饥饿诱导的人血管平滑肌细胞(hVSMCs)凋亡,进一步探讨CREG对hVSMCs凋亡的调控作用及相关的分子机制.以逆转录病毒稳定转染的CREG过表达及表达抑制的hVSMCs为模型,应用两种药物Staurosporine(STS)和Etoposide(VP-16)诱导细胞发生凋亡,检测细胞凋亡和相关信号通路变化.结果显示,在药物干预后,CREG表达抑制时细胞凋亡明显增多,而CREG过表达明显抑制hVSMCs凋亡.同时也发现,CREG表达抑制时p38及JNK活性明显增强,而CREG过表达时p38和JNK活性被抑制.经腺病毒转染和药物干预抑制p38表达后,细胞凋亡均受到抑制,而且在p38活性被抑制的同时,JNK活化也受到抑制.说明p38和JNK表现为协同作用.结果也显示,VSMCs分化指标SMα-actin和SM MHC与CREG表达呈一致趋势,而细胞外基质蛋白Fibronection与CREG表达呈负相关.以上结果提示,CREG在维持VSMCs表型转换方面发挥重要作用,并且通过p38和JNK信号转导通路对hVSMCs凋亡进行调控.CREG可能对于AS和PCI术后RS的防治具有重要价值. 展开更多
关键词 E1A激活基因 血管平滑肌细胞 细胞凋亡 信号通路
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人E1A激活基因阻遏子的表达、抗体制备及生物学活性分析 被引量:5
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作者 韩雅玲 刘海伟 +3 位作者 闫承慧 康建 王效增 胡叶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期570-574,共5页
目的:构建人E1A激活基因阻遏子(humancellularrepressorofE1A-stimulatedgene,hCREG)基因的原核表达载体,纯化重组的hCREG融合蛋白并制备兔抗hCREG抗体。探讨hCREG蛋白在人血管平滑肌细胞克隆株(HITASY)中的表达、定位。方法:用PCR技术... 目的:构建人E1A激活基因阻遏子(humancellularrepressorofE1A-stimulatedgene,hCREG)基因的原核表达载体,纯化重组的hCREG融合蛋白并制备兔抗hCREG抗体。探讨hCREG蛋白在人血管平滑肌细胞克隆株(HITASY)中的表达、定位。方法:用PCR技术,扩增hCREG并构建pGEX-4T-1/hCREG原核表达载体。诱导表达重组谷胱甘肽巯基转移酶(glutathioneS-transferase,GST)-hCREG融合蛋白。以GST-hCREG为抗原,制备兔抗人GST-hCREG的抗血清,并通过蛋白A和GST亲和层析纯化。用ELISA和Westernblot法检测抗体的效价和特异性;用免疫荧光染色法检查去血清培养前后HITASY细胞中hCREG蛋白的表达及定位;用BrdU染色观察分泌型hCREG蛋白对HITASY细胞增殖的影响。结果:经鉴定证实构建的重组质粒正确。诱导后pGEX-4T-1/hCREG菌株可表达大量的GST-hCREG融合蛋白,层析纯化后其纯度达90%。Westernblot检测表明,纯化的兔抗hCREG抗体可与hCREG蛋白特异性结合。ELISA测得该抗体的效价>1∶105。免疫荧光染色检测显示,去血清培养诱导的HITA-SY细胞中hCREG蛋白的表达增加且定位在核周围。BrdU染色表明,hCREG可明显抑制HITASY细胞增殖。结论:成功地获得兔抗hCREG抗体。证实去血清培养的血管平滑肌细胞中CREG蛋白的表达上调。表达的hCREG蛋白可抑制HI-TASY细胞增殖,提示hCREG可能参与调控血管平滑肌细胞的增殖与分化。 展开更多
关键词 腺病毒E1A蛋白(E1A) 纯化 抗体 增殖 血管平滑肌细胞
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斜卧青霉114-2 cbh1基因的TAIL-PCR克隆及与抗阻遏突变株JU-A10的比较 被引量:5
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作者 刘自勇 孙宪昀 曲音波 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期667-671,共5页
【目的】研究斜卧青霉(Penicillium decumbens)114-2与其抗阻遏突变株JU-A10外切酶基因序列的差异。【方法】用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和RT-PCR扩增得到斜卧青霉114-2外切葡聚糖酶Ⅰ(cbh1)基因全长和cDNA全长。【结果】cbh1基因全长... 【目的】研究斜卧青霉(Penicillium decumbens)114-2与其抗阻遏突变株JU-A10外切酶基因序列的差异。【方法】用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和RT-PCR扩增得到斜卧青霉114-2外切葡聚糖酶Ⅰ(cbh1)基因全长和cDNA全长。【结果】cbh1基因全长为1500bp,含有两个内含子,编码453个氨基酸(GenBank,EF397602)。克隆并分析了1.9kb的cbh1基因上游序列,分别发现了葡萄糖代谢抑制因子CREⅠ与纤维素酶转录调控蛋白ACEΙ的两个的潜在结合位点。【结论】在相同的培养条件下,其抗阻遏突变株JU-A10的外切酶活明显高于野生株114-2。两菌株的cbh1基因序列完全一致,说明外切酶活明显提高不是由于cbh1基因发生突变引起的。 展开更多
关键词 斜卧青霉 TAIL-PCR cbh1 突变株
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