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四株水貂肠炎病毒的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 孟祥书 陈汉 +8 位作者 郭杰 姚梦凡 和彦良 陈超阳 孙见 李丽敏 刘聚祥 程悦宁 王建科 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期185-192,共8页
为了调查我国水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)的流行情况,本研究以山东某水貂养殖场疑似发生水貂病毒性肠炎的病貂为材料,对其进行剖检以及病原检测。将PCR检测为MEV阳性的水貂肠道内容物处理后用F81细胞进行病毒分离培养,通过... 为了调查我国水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)的流行情况,本研究以山东某水貂养殖场疑似发生水貂病毒性肠炎的病貂为材料,对其进行剖检以及病原检测。将PCR检测为MEV阳性的水貂肠道内容物处理后用F81细胞进行病毒分离培养,通过电镜形态学观察、血清学、分子生物学等方法证实,分离出的4株病毒为MEV毒株,分别将其命名为MEV SD-1、MEV SD-4、MEV SD-5和MEV SD-6。完成了这4株病毒的近全基因组序列测定分析,对分离株之间以及与参考毒株的主要蛋白氨基酸序列进行了同源性比较。结果显示分离株之间VP2和NS1蛋白的氨基酸相似性分别为99.5%~99.7%和99%~99.9%,而分离株与GenBank的32株参考序列之间VP2和NS1蛋白的氨基酸相似性分别为96.5%~99.7%和98.4%~99.6%。本研究结果为进一步开展MEV的流行病学调查、疫苗研制以及诊断方法研究奠定了基础。 展开更多
关键词 水貂肠炎病毒 分离 鉴定 遗传进化分析
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1例梅花鹿狂犬病的病理学诊断及其病原遗传进化分析
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作者 高雅 智宇 +5 位作者 张迪 乔蕾 邵国玉 丁玉林 葛金英 王金玲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期39-45,共7页
为了探明1例梅花鹿病例的死亡原因,本试验通过组织病理学检查、直接免疫荧光法和免疫组织化学检测对其进行诊断,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增狂犬病病毒(RABV)核蛋白(N)和糖蛋白(G)基因序列,测序后进行同源性、分子进化和系统发... 为了探明1例梅花鹿病例的死亡原因,本试验通过组织病理学检查、直接免疫荧光法和免疫组织化学检测对其进行诊断,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增狂犬病病毒(RABV)核蛋白(N)和糖蛋白(G)基因序列,测序后进行同源性、分子进化和系统发育关系分析。结果显示,患病梅花鹿临床表现出狂暴型神经症状。组织病理学表现为典型的非化脓性脑炎,在大脑、小脑、脑干、脊髓和海马等部位的神经细胞胞浆内均有大小不等、圆形或椭圆形的嗜酸性RABV包涵体。采用直接免疫荧光法和免疫组织化学法均在小脑组织中检测到大量特异性的RABV阳性信号。基因测序和分析结果显示,分离毒株N和G基因分别长1424和1675 bp,均与2015年呼和浩特牛源毒株Rabies virus isolate CNM1101C(KC193267)核苷酸同源性最高,分别为99.5%和99.3%。分离毒株N和G基因与从河南、甘肃、湖北、福建和山东等省分离的毒株位于同一分支,属于Asian谱系。结果表明,该梅花鹿感染狂犬病,RABV分离毒株属于中国地区流行的Asian谱系,与国内流行毒株起源于共同的祖先。 展开更多
关键词 梅花鹿 狂犬病 内基氏小体 病理学 遗传进化
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2株鸭源H10N6亚型禽流感病毒的遗传进化分析及其致病性研究
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作者 朱峻锋 刘朔 +4 位作者 尹馨 彭程 刘华雷 蒋文明 张传美 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第1期77-82,共6页
为了掌握H10N6亚型禽流感病毒在我国的遗传进化特征和生物学特性,本研究通过基因组测序和遗传演化分析,对2020年在福建某活禽市场上分离得到的F1464和F1473两株鸭源H10N6亚型禽流感病毒基因组进行分析,并进一步研究了其对SPF鸡及小鼠的... 为了掌握H10N6亚型禽流感病毒在我国的遗传进化特征和生物学特性,本研究通过基因组测序和遗传演化分析,对2020年在福建某活禽市场上分离得到的F1464和F1473两株鸭源H10N6亚型禽流感病毒基因组进行分析,并进一步研究了其对SPF鸡及小鼠的致病性。结果:序列分析显示,HA基因与人感染的H10N8和H10N3亚型禽流感病毒同源性分别为91.4%~91.5%和95.3%~95.4%;遗传进化分析显示,2株病毒属于欧亚谱系分支,可能是由包括H1、H2、H3、H4、H9、H10和H11在内的多种AIV亚型重组而来;SPF鸡感染试验显示,F1464和F1473毒株均为低致病性病毒;小鼠感染试验显示,F1464毒株可以在小鼠鼻甲、肺、脾脏中高效复制,并导致小鼠体重下降,而F1473毒株仅在鼻甲和肺中复制,对小鼠的致病力更低。本研究为H10亚型禽流感的防控和公共卫生风险评估提供了数据支持。 展开更多
关键词 H10N6 禽流感病毒 遗传进化 致病性
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病毒宏基因组学检测猪博卡病毒及其遗传进化分析
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作者 孙晓瑜 单虎 黄娟 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期50-57,共8页
为了探明导致某养猪场中仔猪腹泻的病原,本试验将患病仔猪样本处理并提取核酸后进行病毒宏基因组测序,对测序结果进行序列比对分析和遗传进化分析,并对样本核酸进行PCR检测验证。结果显示,RNA样本中只注释到A型流感病毒(H1N1和H3N2),读... 为了探明导致某养猪场中仔猪腹泻的病原,本试验将患病仔猪样本处理并提取核酸后进行病毒宏基因组测序,对测序结果进行序列比对分析和遗传进化分析,并对样本核酸进行PCR检测验证。结果显示,RNA样本中只注释到A型流感病毒(H1N1和H3N2),读数比为6.8%,未发现其他猪病相关RNA病毒。DNA样本注释到的病毒主要为猪博卡病毒(PBoV),读数比为34.5%,命名为PBoV-SDPD-2022;其余猪病相关病毒包括猪巨细胞病毒、猪乳腺腺病毒和猪细环病毒,读数比均小于1.0%。基于全基因组、NS 1基因和VP 1基因构建的系统发育进化树均显示,PBoV-SDPD-2022与参考毒株PBoV3_VIRES_HuB01_C1处于同一分支,属于PBoV G3群。与21株参考毒株相比,PBoV-SDPD-2022 NS1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为49.6%~97.2%和38.5%~95.3%;VP1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为47.9%~97.9%和34.8%~98.8%;NP1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为35.2%~98.5%和26.9%~97.4%。与G3群参考毒株相比,PBoV-SDPD-2022 NS1蛋白在第654位点处有1个氨基酸的缺失;VP1蛋白在第151、152位点处有2个氨基酸的插入,且包含基序YLGPF(VPl aa 18~22)和HDLAY(VP1 aa 41~45);NP1蛋白在第15、16、35、36、212位点处发生氨基酸的缺失,在第95位点处有1个氨基酸的插入。PCR检测证实样本核酸为PBoV阳性。结果表明,导致该养猪场仔猪腹泻的优势病原是G3群PBoV。本试验有助于进一步了解我国PBoV基因组序列特征,并为未来PBoV流行病学调查提供了参考依据。 展开更多
关键词 病毒宏基因组学 猪博卡病毒 遗传进化分析
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黑龙江地区G6P[5]型牛轮状病毒分离鉴定及遗传进化分析
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作者 王笑冉 朱庆贺 +2 位作者 宋军 郭东华 孙东波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第2期29-36,共8页
牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)是引起犊牛急性病毒性胃肠炎的主要病原体之一。为调查黑龙江省牛群BRV的基因型及其遗传进化多样性,利用恒河猴胚肾细胞(MA-104)对BRV阳性粪便样本进行病毒分离,通过逆转录-聚合酶链反应(reverse trans... 牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)是引起犊牛急性病毒性胃肠炎的主要病原体之一。为调查黑龙江省牛群BRV的基因型及其遗传进化多样性,利用恒河猴胚肾细胞(MA-104)对BRV阳性粪便样本进行病毒分离,通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测、间接免疫荧光鉴定和电镜观察方法对分离毒株进行鉴定;进一步通过Illumina二代测序技术获得分离毒株全基因组,对其进行序列分析,并构建VP4、VP7进化树。结果显示,MA-104细胞盲传至第5代出现细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),传至第8代稳定出现CPE,分离毒株经RT-PCR检测、间接免疫荧光鉴定为BRV阳性,电镜观察结果显示在细胞培养物中观察到呈典型车轮状的无囊膜病毒粒子,符合BRV形态特征,表明成功分离得到一株BRV,将其命名为BRV HLJ-J7;全基因组测序分析显示基因型为G6-P[5]-I2-R2-C2-M2-A11-N2-T6-E2-H3型;遗传进化分析结果显示,VP4基因与中国分离毒株Y3亲缘关系最近,同源性为98.2%;VP7基因与中国分离毒株LN19-4亲缘关系最近,同源性为98.8%。研究成功分离到一株G6P[5]型BRV,为黑龙江省BRV遗传进化及分子流行病学的研究奠定基础。 展开更多
关键词 牛轮状病毒 分离鉴定 遗传进化
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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GD2022株的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 邓可辉 王修武 +3 位作者 郭智轩 韩淑杰 孙守湖 贺东生 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期34-41,共8页
为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-... 为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-1和PRRSV-2参考毒株序列进行同源性及遗传进化分析。结果显示,成功分离1株PRRSV-1,命名为GD2022株,其接种PAMs可引起典型的细胞病变,从出现病变的F5细胞中提取核酸,用PCR分段扩增出PRRSV-1 GD2022株10个基因组片段,分别连接到pCE2 TA/Blunt-Zero载体进行测序,拼接后获得PRRSV-1 GD2022株全基因组长15058个核苷酸(不包含polyA尾)。同源性分析显示,该分离株全基因组序列与PRRSV-1参考毒株(LV株)和PRRSV-2参考毒株(VR2333株)核苷酸序列同源性分别为87%和59.7%。遗传进化树分析显示,全基因序列和ORF5基因与国内外PRRSV-1毒株为同一进化分支,且与疫苗毒分支较远,推断分离株为1株PRRSV-1,属于基因亚型1。氨基酸序列比对分析显示,ORF3和ORF4重叠区域缺失3个核苷酸,导致GP3蛋白和GP4蛋白分别在第245和第65氨基酸位点缺失了1个氨基酸,且与LV株比对,GD2022毒株GP5的氨基酸序列在中和抗原表位第33氨基酸位点(D→A)出现点突变,在高变区第56氨基酸位点(D→A)和第63氨基酸位点(G→D)出现两处突变。重组分析显示,GD2022毒株未发生重组事件。成功分离鉴定1株PRRSV-1毒株,为国内PRRSV-1生物学特性研究提供了材料,也为了解广东省内PRRSV-1流行情况及变异特点提供参考依据。 展开更多
关键词 欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 全基因组测序 遗传进化分析
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6株鸽源新城疫病毒广东分离株F、HN基因的克隆及遗传进化分析
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作者 云骜 张思远 +2 位作者 成子强 林举攀 杨家兴 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期106-112,共7页
为研究广东省鸽源新城疫病毒(NDV)的遗传进化规律,试验于2021—2022年从广东6家疑似感染NDV的鸽场采集病鸽临床样品,进行RT-PCR诊断、病毒分离鉴定和动物回归试验,并对分离毒株进行生物学毒力测定以及F基因、HN基因的同源性和遗传进化... 为研究广东省鸽源新城疫病毒(NDV)的遗传进化规律,试验于2021—2022年从广东6家疑似感染NDV的鸽场采集病鸽临床样品,进行RT-PCR诊断、病毒分离鉴定和动物回归试验,并对分离毒株进行生物学毒力测定以及F基因、HN基因的同源性和遗传进化分析。结果显示:共分离到6株鸽源NDV,对幼鸽进行分组攻毒14 d后,发病率均为100%,死亡率为60%~80%;6株毒株的F蛋白裂解位点氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117/112R-R-R-K-R-F117,具有NDV强毒株的典型分子特征,和分离毒株ICPI的测定结果共同表明6株毒株均为强毒株;6株毒株均为NDV的ClassⅡ基因Ⅵ.2.1.1.2.2型;与传统疫苗株La Sota的同源性较低,且F、HN蛋白氨基酸出现多处位点变异。研究表明,广东省鸽源NDV流行以Class Ⅱ基因Ⅵ.2.1.1.2.2型为主,常用的疫苗株La Sota可能对广东地区流行的鸽源NDV保护效果不佳。 展开更多
关键词 鸽源新城疫病毒 F基因 HN基因 遗传进化分析
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一株PEDV广东流行株S1基因遗传进化分析及其在昆虫细胞中的表达纯化
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作者 刘郁夫 林晓慧 +1 位作者 谭银娟 冯美莹 《肇庆学院学报》 2024年第2期16-21,共6页
为了解猪流行性腹泻病毒广东流行株的S1基因流行变异情况,制备相应的诊断试剂,试验采用RT-PCR从猪流行性腹泻疑似发病仔猪的肠道内容物中扩增获得S1基因,利用生物信息学软件构建S1基因的遗传进化树.将S1基因克隆至杆状病毒穿梭质粒pFast... 为了解猪流行性腹泻病毒广东流行株的S1基因流行变异情况,制备相应的诊断试剂,试验采用RT-PCR从猪流行性腹泻疑似发病仔猪的肠道内容物中扩增获得S1基因,利用生物信息学软件构建S1基因的遗传进化树.将S1基因克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac1,转化至DH10Bac感受态细胞中,经抗生素筛选重组杆粒,把重组杆粒转染到昆虫细胞Sf9,盲传3代后进行间接免疫荧光试验和Western blot鉴定.结果表明:该猪流行性腹泻病毒广东流行株分布于GII-b分支,与国内猪流行性腹泻病毒分离株(HN-HB1-2018、HBHA2015)的核苷酸相似性为98.0%~98.3%,而与猪流行性腹泻病毒经典毒株CV777、DR13的核苷酸相似性仅为89.9%~90.0%.且S1重组蛋白可在昆虫细胞Sf9中以细胞培养分泌上清的形式表达.本研究可为猪流行性腹泻病毒的流行现状研究提供参考,以及后续猪流行性腹泻病毒诊断制品的研发提供前期基础. 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S1基因 遗传进化 昆虫细胞
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鹅细小病毒强毒株的分离鉴定与遗传进化分析
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作者 王志强 黄宇翔 +4 位作者 邹跃 张红 杨昊天 董佳强 杨坤 《家禽科学》 2024年第4期16-21,I0007,共7页
为了了解齐齐哈尔地区鹅细小病毒(GPV)现地强毒株的流行及抗原变异情况,试验从齐齐哈尔龙江县某养殖场采集疑似小鹅瘟病死雏鹅的肝脾病料进行病毒分离培养,对获得的疑似尿囊液进行PCR检测、血凝性检测、动物回归试验及VP3基因序列分析... 为了了解齐齐哈尔地区鹅细小病毒(GPV)现地强毒株的流行及抗原变异情况,试验从齐齐哈尔龙江县某养殖场采集疑似小鹅瘟病死雏鹅的肝脾病料进行病毒分离培养,对获得的疑似尿囊液进行PCR检测、血凝性检测、动物回归试验及VP3基因序列分析。结果表明,分离到的病毒株能使12日龄鹅胚在144 h内死亡;血凝性检测未检测出血凝价;动物回归试验,可复制该病,致使5日龄雏鹅在96~144 h内全部死亡;VP3基因PCR扩增条带大约为1 600 bp,与目的条带大小相符;对其进行序列分析,判定该分离株为鹅细小病毒毒株,与我室之前分离鉴定的鹅细小病毒HH10强毒株核苷酸同源性为98.17%,与标准B株核苷酸同源性为97.13%。说明鹅细小病毒基因保守。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 现地株分离鉴定 动物回归试验 遗传进化分析
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云南省2022年牛传染性鼻气管炎病原学监测及遗传进化分析
10
作者 张懿 赵屹钦 +3 位作者 何依蓉 张然 赵珍 周源依 《中南农业科技》 2024年第2期43-45,50,共4页
为了解牛传染性鼻气管炎在云南省牛群中的流行、分布情况,保障肉牛产业健康发展,根据2022年云南省主要动物疫病监测流调方案,利用定额抽样的方法分4个季度采集牛口鼻肛棉拭子及脾肺淋巴组织样品共计2 901份,进行qPCR病原学监测并对部分... 为了解牛传染性鼻气管炎在云南省牛群中的流行、分布情况,保障肉牛产业健康发展,根据2022年云南省主要动物疫病监测流调方案,利用定额抽样的方法分4个季度采集牛口鼻肛棉拭子及脾肺淋巴组织样品共计2 901份,进行qPCR病原学监测并对部分阳性样品gC基因进行遗传进化分析。病原学监测结果表明,2022年云南省检出牛传染性鼻气管炎阳性样品16份,样品阳性率0.55%,场点阳性率2.73%,其中规模场阳性率高于散养户;不同地区牛传染性鼻气管炎感染程度不同,除滇东北地区外均有感染,最高县(区)阳性率为11.11%;牛传染性鼻气管炎病毒在云南省活跃时间较长,除第1季度外,其余时间均监测到阳性牛只。遗传分析结果表明,所选3株阳性毒株间gC基因核苷酸同源性为97.3%~100.0%,且在BoHV-1.1和BoHV-1.2亚型上均有分布,其中YNKM22株属于BoHV-1.1亚型,与BoHV-1.1亚型参考株的gC基因核苷酸同源性为98.2%;YNPE-NG2、YNPE-NG3属于BoHV-1.2亚型,与BoHV-1.2亚型参考株B589的gC基因核苷酸同源性为99.6%。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛疱疹病毒Ⅰ型(BoHV-Ⅰ) 病原学监测 遗传进化分析 云南省
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青海岩羊源小反刍兽疫病毒N、F基因的遗传进化分析 被引量:1
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作者 阚威 李雷斌 +3 位作者 赵旭阳 杨林 孙雨 蔡金山 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期171-181,共11页
2021年1月19日,青海省海西州都兰县巴隆乡伊克高里村发生岩羊不明原因的死亡,表现为离群独处、卧地不起、体质虚弱、觅食困难、肛门周围黑色附着物等现象。通过临床症状、病理学解剖及实时荧光RT-PCR诊断,为小反刍兽疫病毒(PPRV)感染。... 2021年1月19日,青海省海西州都兰县巴隆乡伊克高里村发生岩羊不明原因的死亡,表现为离群独处、卧地不起、体质虚弱、觅食困难、肛门周围黑色附着物等现象。通过临床症状、病理学解剖及实时荧光RT-PCR诊断,为小反刍兽疫病毒(PPRV)感染。采用RT-PCR技术从病死岩羊病料组织中扩增出了PPRV N、F基因的部分片段。采用MegAlig、NT1和MEGA6.0软件对岩羊PPRV株N、F基因序列进行了比对和分析,绘制系统进化树,结果显示:此次岩羊感染的PPRV株N、F基因片段与新疆株(China/Xinjiang/2015/16)序列片段的同源性分别为99.43%和99.73%。遗传进化分析,该病原属于基因Ⅳ系。在N、F基因核酸序列水平上,与国内新疆地区分离毒株亲缘关系最近,同在一个小的分支;与国外毒株相比,N基因与塞内加尔和尼日利亚分离毒株亲缘关系较远,F基因与国外分离毒株亲缘关系较远。综上所述,青海岩羊源PPRV株属于基因Ⅳ系,与当前我国流行的野毒株属于同一个谱系。 展开更多
关键词 岩羊 小反刍兽疫 诊断 遗传进化
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青藏高原田鼠源多刺带绦虫囊尾蚴的鉴定及遗传进化分析
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作者 张学勇 简莹娜 +8 位作者 朵红 郭志宏 马霄 张青 赵存哲 郭帅 马万里 李志 付永 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1193-1198,共6页
为鉴定我国青藏高原分离的田鼠源绦虫囊尾蚴的种类及其遗传进化特征,本研究通过对该囊尾蚴进行形态学观察,采用绦虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该囊尾蚴。形态学观察结果显示,该囊尾蚴为小型虫体,虫体背部和腹部稍扁平... 为鉴定我国青藏高原分离的田鼠源绦虫囊尾蚴的种类及其遗传进化特征,本研究通过对该囊尾蚴进行形态学观察,采用绦虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该囊尾蚴。形态学观察结果显示,该囊尾蚴为小型虫体,虫体背部和腹部稍扁平,长度约为200.0 mm,虫体横截面直径约为2.5 mm;虫体分为3部分:前端部分直径通常略小,中间部分表面为皱褶区域,约占整个虫体的一半,后端部分细长,相对光滑,有平行的横向凹陷;PCR结果显示,在约440 bp处出现与预期目的片段大小相符的条带,测序结果显示,该基因序列与多刺带绦虫(T.polyacantha)cox1基因序列(EU544581)的同源性高达97.0%。初步表明该囊尾蚴属于多刺带绦虫囊尾蚴。采用多刺带绦虫线粒体cox1、nad1和12S rRNA特异性基因引物经PCR进一步鉴定并测序。将3个基因测序结果与GenBank登录的多刺带绦虫的相应基因序列比对,分析它们之间的同源性,并构建这3个基因的进化树,分析它们之间的遗传进化关系。PCR结果显示,分别扩增到约390 bp(cox1)、480 bp(nad1)和240 bp(12S rRNA)的目的条带。同源性分析结果显示,3个基因序列与GenBank登录的多刺带绦虫相应基因序列的同源性最高分别达99.4%、98.7%和100.0%。进化树结果显示,该虫株的3个基因均与不同宿主的多刺带绦虫处于同一分支。本研究在国内首次鉴定到青藏高原田鼠源多刺带绦虫囊尾蚴,并分析其线粒体基因的同源性及遗传演化关系,为多刺带绦虫的分类、鉴定和种群遗传进化分析及分子流行病学调查等奠定了研究基础。 展开更多
关键词 多刺带绦虫 囊尾蚴 田鼠 鉴定 遗传进化
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基于RAD-Seq简化基因组测序分析琅琊鸡的遗传进化
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作者 殷建玫 朱云芬 +6 位作者 李国辉 张会永 薛倩 周成浩 蒋一秀 苏一军 韩威 《中国家禽》 北大核心 2023年第5期19-23,共5页
为在基因组水平上探讨琅琊鸡的遗传进化,试验以琅琊鸡与其他22个地方鸡品种资源及2个国外引进品种为研究对象,利用简化基因组测序(RAD-seq)鉴定25个品种基因组SNP,计算琅琊鸡的遗传统计量,分析遗传多样性和遗传结构,基于Fst选择信号检... 为在基因组水平上探讨琅琊鸡的遗传进化,试验以琅琊鸡与其他22个地方鸡品种资源及2个国外引进品种为研究对象,利用简化基因组测序(RAD-seq)鉴定25个品种基因组SNP,计算琅琊鸡的遗传统计量,分析遗传多样性和遗传结构,基于Fst选择信号检验方法,筛选受选择基因并进行功能富集分析。结果显示:在琅琊鸡群体中鉴定出299648个SNPs,琅琊鸡的平均杂合度(Ho)为0.220,核苷酸多样度为0.266,近交系数为0.173;琅琊鸡与汶上芦花鸡、元宝鸡、天津猴鸡和狼山鸡聚为一类,亲缘关系较近。共筛选出113个受选择基因,受选择基因主要富集在谷氨酸受体活性、钙黏蛋白结合、4铁,4硫团簇结合、G蛋白偶联谷氨酸受体信号通路等生物学过程,主要参与柠檬酸循环(TCA循环)、代谢、类固醇激素生物合成等信号通路。研究表明,选择作用主要影响琅琊鸡的繁殖性状、适应性免疫和代谢等,结果为琅琊鸡的品种保护、鉴定评价及开发利用提供分子理论支撑。 展开更多
关键词 琅琊鸡 简化基因组测序 遗传进化 选择信号
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狂犬病毒GSQY-Dog-China-2013株全基因组序列测定和遗传进化分析
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作者 邢广旭 姜中毅 +2 位作者 焦文强 王方雨 张改平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期8-13,共6页
为了全面分析我国狂犬病病毒遗传进化情况,本试验使用反转录PCR(RT-PCR)方法将狂犬病病毒GSQY-Dog-China-2013分为10个片段进行扩增,回收目的片段并与pMD20-T simple载体连接,转化JM109感受态细胞,挑取阳性克隆进行测序;使用DNASTAR软... 为了全面分析我国狂犬病病毒遗传进化情况,本试验使用反转录PCR(RT-PCR)方法将狂犬病病毒GSQY-Dog-China-2013分为10个片段进行扩增,回收目的片段并与pMD20-T simple载体连接,转化JM109感受态细胞,挑取阳性克隆进行测序;使用DNASTAR软件中的Edit Seq通过拼接相邻片段之间的重叠序列获得GSQY-Dog-China-2013全基因组序列,构建系统进化树进行遗传进化分析。结果显示,GSQY-Dog-China-2013全长11924核苷酸(nt),包含5个开放阅读框,分别编码核蛋白(N)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、糖蛋白(G)和转录大蛋白(L);基于全基因组序列的进化树分析显示,GSQY-Dog-China-2013株和国内分离株形成一个分支,在国内分离株中与SXYL15株和SXBJ15株形成一个分支,亲缘关系最接近,提示GSQY-Dog-China-2013可能源自我国陕西省。本试验系甘肃省首次报道狂犬病病毒全基因组序列,进一步丰富了我国狂犬病病毒遗传进化数据,为狂犬病全面防治以及疫苗研发提供了数据支持。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 GSQY-Dog-China-2013 全基因组序列测定 遗传进化分析
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猫传染性腹膜炎病毒的检测及ORF 7 ab、N和S基因遗传进化分析
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作者 高雅 黄金田 +5 位作者 冯心如 付胜 高娃 王文龙 丁玉林 王金玲 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期60-65,共6页
采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个... 采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个病例均表现典型的混合型FIP的大体病变,腹腔积满浆液纤维素性渗出物,在腹腔浆膜面散在或弥漫分布细小的灰白色结节。组织病理学显示腹膜表面上附着大小不等的炎性细胞浸润灶,以及坏死性肠炎、间质性胰腺炎和间质性肺炎。免疫组织化学染色结果显示,FPIV特异性的强阳性信号见于炎性细胞浸润灶、脾脏和胰腺内。基因同源性和遗传进化分析结果显示,2例基因均属于FCoVⅠ型。IMAU No.11685与浙江杭州ZJU1709毒株(MT239440)同源性最高,亲缘关系最近;IMAU No.11824与湖北武汉QS毒株(MW030108)同源性最高,亲缘关系最近。说明2例FIPV与国内流行毒株起源于共同祖先,其中ORF 7 ab、N基因相对保守,变异不明显,S基因发生一定的变异。研究结果可为我国FIP的分子流行病学研究和防控提供参考。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎 猫传染性腹膜炎病毒 免疫组织化学 遗传进化
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上海地区猪萨佩罗病毒的检测及遗传进化分析
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作者 李本强 刘惠莉 +5 位作者 刘佳佳 陶洁 程靖华 石迎 乔长涛 沈晓晖 《上海农业学报》 2023年第2期64-70,共7页
为了明确猪萨佩罗病毒在仔猪腹泻病情中的作用,2016—2020年采集上海市及周边11个猪场腹泻病料,共计1446份。利用RT-PCR方法对其进行PSV筛检,并对阳性样品进行病原分离及病毒特性研究。结果显示:共筛检出256份PSV核酸阳性样品,阳性率17... 为了明确猪萨佩罗病毒在仔猪腹泻病情中的作用,2016—2020年采集上海市及周边11个猪场腹泻病料,共计1446份。利用RT-PCR方法对其进行PSV筛检,并对阳性样品进行病原分离及病毒特性研究。结果显示:共筛检出256份PSV核酸阳性样品,阳性率17.7%。从阳性样品中成功分离到2株PSV病毒,全基因序列遗传进化分析显示2株PSV分离株聚集在中国PSV毒株集群上,分离株在3D区域4696—5945 bp处存在重组区域。病毒核苷酸分析发现中国PSV毒株与韩国PSV毒株核苷酸相似性为87%—88.5%,与欧洲PSV毒株核苷酸相似性为84.9%—87.3%。对VP1基因氨基酸序列分析发现分离株与参考株存在氨基酸位点突变,中间氨基酸序列保守,无突变及插入和缺少现象。PSV分离株与参考株均含有173位潜在糖基化位点,VP1蛋白分子表面抗原表位分布均匀。该研究可为猪萨佩罗病毒病原学及其疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒分离株 流行病学调查 VP1基因 遗传进化分析
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农村火力发电机组二氧化碳排放控制技术研究--基于遗传进化和PID控制
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作者 张丽 盛青山 朱成俊 《农机化研究》 北大核心 2023年第4期260-264,共5页
在农村秸秆火力发电机组运行时,秸秆燃烧会产生大量的二氧化碳。为此,将PID控制器应用到了二氧化碳分离器的设计上,通过对分离效果的监测和反馈有效控制了二氧化碳的排放。同时,将遗传进化算法使用到了PID控制器的设计上,通过算法优化... 在农村秸秆火力发电机组运行时,秸秆燃烧会产生大量的二氧化碳。为此,将PID控制器应用到了二氧化碳分离器的设计上,通过对分离效果的监测和反馈有效控制了二氧化碳的排放。同时,将遗传进化算法使用到了PID控制器的设计上,通过算法优化提高了控制器的精度,进而提升了二氧化碳的吸收效果,降低了气体的排放。 展开更多
关键词 CO_(2)排放控制 火力发电 遗传进化 PID控制器 分离器
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基于SLAF-seq简化基因组技术的疆岳驴遗传进化分析
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作者 肖海霞 阿布来提·苏来曼 +10 位作者 托乎提·阿及德 努尔尼萨·莫拉尼亚孜 张国庭 帕热哈提江·吾甫尔 王琼 苏玲玲 谢立荣 刘应进 买买提·克玉木 田可川 刘武军 《安徽农学通报》 2023年第1期15-18,32,共5页
畜禽资源是中国种业创新、打赢种业翻身仗的根基。疆岳驴是陕西关中驴(大型驴)和新疆驴(小型驴)经过半个多世纪杂交改良、横交固定、选育提高、培育而成的良种驴,旨在基因组水平上揭示疆岳驴的遗传进化,解析疆岳驴的遗传结构及遗传多样... 畜禽资源是中国种业创新、打赢种业翻身仗的根基。疆岳驴是陕西关中驴(大型驴)和新疆驴(小型驴)经过半个多世纪杂交改良、横交固定、选育提高、培育而成的良种驴,旨在基因组水平上揭示疆岳驴的遗传进化,解析疆岳驴的遗传结构及遗传多样性。该研究利用SLAF-seq简化基因组测序鉴定疆岳驴SNP标记,构建125头样品群体进化树并进行分析。共鉴定SNP标记4887196个;通过MEGA 5软件neighbor-joining算法,构建的群体进化树显示,125头疆岳驴聚集为2个大的分支:一个分支46头聚集在一起,亲缘关系较近;另一分支79头聚集在一起,亲缘关系较近。这2个分支间亲缘关系较远。通过admixture软件、EIGENSOFT软件、SPAGe⁃Di软件进一步佐证了125头疆岳驴可分为2个群体,利用SLAF-seq简化基因组测序能全面准确地揭示疆岳驴的遗传多样性和遗传结构,为疆岳驴的关联遗传学研究和重要性状QTL定位提供依据,为争取在第3次全国畜禽遗传资源普查申报新培育品种(配套系)和疆岳驴重要性状QTL定位奠定基础。 展开更多
关键词 疆岳驴 简化基因组技术 遗传进化分析
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猪圆环病毒2d亚型黑龙江株的分离鉴定与遗传进化分析 被引量:1
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作者 马明爽 周娜娜 +7 位作者 马茹梦 李月 王晓娜 李佳璇 姜艳平 崔文 李一经 唐丽杰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1262-1269,共8页
为了鉴定黑龙江省某猪场疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染死亡的猪只病料,采集疑似PCV2感染的组织并对病毒进行分离培养,通过PCR、免疫荧光、免疫电镜对分离的病毒进行鉴定。对阳性样品进行全基因组扩增,测序后与GenBank上其他不同国家和地... 为了鉴定黑龙江省某猪场疑似猪圆环病毒2型(PCV2)感染死亡的猪只病料,采集疑似PCV2感染的组织并对病毒进行分离培养,通过PCR、免疫荧光、免疫电镜对分离的病毒进行鉴定。对阳性样品进行全基因组扩增,测序后与GenBank上其他不同国家和地区来源的24株PCV的同源性、系统发育树和重组特性进行分析。结果显示,该毒株能够感染PK-15细胞,与藻红蛋白标记的PCV2 Cap蛋白单克隆抗体结合产生特异性荧光,电镜下可见约20 nm的病毒颗粒。分离得到的毒株基因型为PCV2d,命名为LJ0616株,其基因组全长1767 bp,序列上传至GenBank的登录号为ON500676。通过对其核苷酸同源性和重组特性分析,LJ0616株PCV2d与其他21株PCV2毒株的核苷酸序列同源性为55.2%~99.8%,且并未发现重组现象。本研究结果为黑龙江省PCV2的流行病学提供了基础数据,也为该病原的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2d亚型 分离与鉴定 遗传进化分析
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3株猫细小病毒的分离鉴定及其遗传进化分析 被引量:1
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作者 汤傲星 刘春草 +7 位作者 王真真 孟春春 朱杰 唐井玉 李传锋 郭宏元 宋新宇 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期86-92,共7页
为了解猫细小病毒(FPV)在国内的流行状况及其遗传变异和演化方向,本研究对采集的30份疑似感染FPV的肛拭子进行检测,利用常规方法从中分离并鉴定出3株FPV。然后扩增出3株FPV的VP2基因,利用DNAstar等软件将获得的VP2基因与国内外报道的流... 为了解猫细小病毒(FPV)在国内的流行状况及其遗传变异和演化方向,本研究对采集的30份疑似感染FPV的肛拭子进行检测,利用常规方法从中分离并鉴定出3株FPV。然后扩增出3株FPV的VP2基因,利用DNAstar等软件将获得的VP2基因与国内外报道的流行株和疫苗株的VP2基因序列进行比对和遗传进化分析。研究结果显示,本文分离的3株FPV均能在猫肾细胞中良好增殖,并产生典型致细胞病变(CPE),在电子显微镜下呈现典型的细小病毒形态特征。序列比对结果显示,此3株FPV的VP2序列与国内外参考毒株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.6%~99.8%和98.5%~99.8%;与疫苗株的VP2基因的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.1%~99.4%和99.1%~99.5%;进化树分析结果显示,本研究分离的FPV与国内流行株及疫苗株均具有较近的遗传距离,并处于同一拓朴群,但是SH612株和ZZ6293株与疫苗株的距离稍微远些,处于不同的拓朴亚群。本文研究结果丰富了中国FPV的流行病学资料,为进一步研发FPV疫苗提供了参考资料。 展开更多
关键词 猫细小病毒 VP2 序列同源性 遗传进化
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