利用改进的酚-氯仿法从猪毛囊中提取基因组DNA 被引量：17

1

作者 王继英 俞英 +2 位作者 冯利霞 王怀中 张勤 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期752-756,共5页

为提高从猪毛囊组织中提取基因组DNA的效率，文章在借鉴从其他组织提取基因组DNA方法的基础上，对经典的酚-氯仿法的反应体系和步骤进行了改进。利用改进的酚-氯仿抽提法，从猪的毛囊组织中快速、高效地提取了高质量基因组DNA。利用该... 为提高从猪毛囊组织中提取基因组DNA的效率，文章在借鉴从其他组织提取基因组DNA方法的基础上，对经典的酚-氯仿法的反应体系和步骤进行了改进。利用改进的酚-氯仿抽提法，从猪的毛囊组织中快速、高效地提取了高质量基因组DNA。利用该方法从1-6根猪毛囊中提取的基因组DNA可满足基于PCR技术的相关分子生物学实验需要。 展开更多

关键词 猪毛囊组织 基因组DNA 酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

运用酚-氯仿法结合磁珠法提取蝇蛆体内人类DNA 被引量：4

2

作者 王翔 蔡继峰 +3 位作者 钟鸣 李剑波 张金国 兰玲梅 《法医学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期421-424,共4页

目的建立运用酚-氯仿法结合磁珠法从蝇蛆嗉囊内提取人类DNA的方法,从而提高STR分型检验的灵敏度。方法采用酚-氯仿法对蝇蛆嗉囊内容物中的人类DNA进行提取,提取产物经磁珠法纯化浓缩后用QuantifilerTM人类DNA定量试剂盒在7500型实时荧... 目的建立运用酚-氯仿法结合磁珠法从蝇蛆嗉囊内提取人类DNA的方法,从而提高STR分型检验的灵敏度。方法采用酚-氯仿法对蝇蛆嗉囊内容物中的人类DNA进行提取,提取产物经磁珠法纯化浓缩后用QuantifilerTM人类DNA定量试剂盒在7500型实时荧光定量PCR仪上进行PCR定量,再用AmpF■STR IndentifilerTM试剂盒在3130XL-Avant遗传分析仪上对这些DNA样本进行STR分型。结果本研究建立的方法可增加模板DNA浓度约为单独使用酚-氯仿法的2倍。用此方法提取到的DNA浓度[(0.218±0.041)ng/μL]可获得全部16个STR分型结果。结论酚-氯仿法结合磁珠法可以有效地提高提取到的人类DNA样本STR分型检验的灵敏度,对于从事法医昆虫学方面研究的工作者有较好的实用价值。 展开更多

关键词 法医遗传学 昆虫学 提取法 酚-氯仿法 磁珠法 蝇科

下载PDF 职称材料

改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA 被引量：2

3

作者 张玥 徐国昌 +3 位作者 徐凯 王友政 任甫 李红卫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1134-1137,共4页

目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和Godeneye TM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic... 目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和Godeneye TM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic Analyzer软件对基因位点进行检测和分析。结果:改良酚-氯仿法提取及3种试剂盒对陈旧性人骨DNA基因位点检出469、262、588个,高于传统法的307、175、436个。结论:改良酚-氯仿法、3种试剂盒PCR复合扩增能对陈旧性人骨DNA进行有效提取和检测。 展开更多

关键词 DNA检验 酚-氯仿法 复合扩增 陈旧性骨

下载PDF 职称材料

用改进的酚-氯仿法提取鱼类基因组DNA效果的分析 被引量：8

4

作者 马洪雨 郭金峰 岳永生 《家畜生态学报》 2006年第2期85-87,共3页

提取鱼类基因组DNA的研究报道并不多见,效果也各有差异。本文以泰山螭霖鱼、东平湖鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿法提取基因组DNA,并进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取... 提取鱼类基因组DNA的研究报道并不多见,效果也各有差异。本文以泰山螭霖鱼、东平湖鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿法提取基因组DNA,并进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的基因组DNA浓度在0.9μg/μL^3.25μg/μL之间,A260/A280比值在1.79~1.87之间,电泳条带整齐明亮,适合微卫星PCR扩增,且整个操作过程使用试剂较少,简单易行。 展开更多

关键词 鱼类 基因组DNA 酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

不同提取方法和不同组织对中华绒螯蟹DNA提取效果的比较研究 被引量：4

5

作者 刘皓 刘青 +4 位作者 吴旭干 何杰 董鹏生 李彤 成永旭 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期147-150,共4页

为了优化中华绒螯蟹基因组DNA提取方法,采用酚-氯仿法和试剂盒法分别对中华绒螯蟹的鳃、肌肉、血淋巴液和刚毛4种组织进行DNA提取,并从纯度、浓度、片段完整性及微卫星标记PCR扩增效果4个方面评价提取DNA的质量。结果显示:酚-氯仿法提取... 为了优化中华绒螯蟹基因组DNA提取方法,采用酚-氯仿法和试剂盒法分别对中华绒螯蟹的鳃、肌肉、血淋巴液和刚毛4种组织进行DNA提取,并从纯度、浓度、片段完整性及微卫星标记PCR扩增效果4个方面评价提取DNA的质量。结果显示:酚-氯仿法提取的DNA片段比试剂盒法提取的更完整,且DNA浓度较高,但纯度稍低;无论何种提取方法,刚毛和血淋巴液中的DNA纯度都高于鳃和肌肉,4种组织中的DNA含量依次为鳃>肌肉>刚毛>血淋巴液,未剪碎刚毛中未能提取到基因组DNA;微卫星标记的电泳结果表明,两种提取方法下4种组织中提取的DNA均可满足微卫星标记的应用要求。综上,本研究建立了一种简便的非损伤性中华绒螯蟹的采样及其DNA提取方法,这对于进行中华绒螯蟹遗传育种和分子标记研究等方面具有一定的积极作用。 展开更多

关键词 中华绒螯蟹 DNA提取 酚-氯仿法 试剂盒法 不同组织

下载PDF 职称材料

鲫鱼基因组DNA提取方法的探讨 被引量：29

6

作者 刘臻 鲁双庆 +1 位作者 肖调义 陈开键 《水利渔业》 北大核心 2004年第6期20-22,共3页

以鲫鱼的血液、肌肉、肝、肾为材料,采用苯酚-氯仿法、试剂盒法提取鲫鱼基因组DNA,对不同方法提取的结果进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明不同方法提取的鲫鱼基因组DNA浓度在385.8～3167.5ng/... 以鲫鱼的血液、肌肉、肝、肾为材料,采用苯酚-氯仿法、试剂盒法提取鲫鱼基因组DNA,对不同方法提取的结果进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明不同方法提取的鲫鱼基因组DNA浓度在385.8～3167.5ng/μL,A260/280比值处于1.66～1.87,所提取的DNA适合微卫星PCR扩增。因此,用苯酚-氯仿法对鲫鱼的血液、肌肉、肝、肾,用试剂盒法对鲫鱼的血液均能提取鲫鱼基因组DNA。 展开更多

关键词 血液 试剂盒法 基因组DNA 肌肉 比值 琼脂糖凝胶电泳 PCR扩增 鲫鱼 微卫星 酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

一种从鱼类肌肉组织中提取基因组DNA的简易方法 被引量：13

7

作者 马洪雨 姜运良 岳永生 《生物技术通讯》 CAS 2005年第5期531-532,共2页

以泰山螭霖鱼、黄河鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿抽提法和蛋白酶K消化法提取基因组DNA,并对其进行紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的鱼类基因组DNA浓... 以泰山螭霖鱼、黄河鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿抽提法和蛋白酶K消化法提取基因组DNA,并对其进行紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的鱼类基因组DNA浓度为0.9～3.25μg/μL,D260nm/D280nm值为1.79～1.87,电泳条带整齐明亮,适合微卫星PCR扩增。因此,本方法能够从鱼类肌肉组织中获得较为纯净的基因组DNA,适于进一步的分子生物学研究之用。 展开更多

关键词 鱼类 肌肉组织 基因组DNA 提取 酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

一种适于PCR扩增的快速提取猪基因组DNA的碱裂解法 被引量：2

8

作者 赵金艳 刘榜 +2 位作者 王文君 张宇 张庆德 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期90-94,共5页

以大白猪背最长肌、脾脏、耳组织为材料,用碱裂解法和酚-氯仿法分别提取猪基因组DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的产量和质量,结果发现2种方法提取的DNA产量没有明显差异。通过猪MC4R、TEF-1基因特异引物进行PC... 以大白猪背最长肌、脾脏、耳组织为材料,用碱裂解法和酚-氯仿法分别提取猪基因组DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的产量和质量,结果发现2种方法提取的DNA产量没有明显差异。通过猪MC4R、TEF-1基因特异引物进行PCR扩增均能得到目的条带。碱裂解法提取的DNA原液稀释5倍、10倍后作为模板均获得了较为稳定的扩增产物。该结果表明,简单、快速、无毒的碱裂解法适用于动物定性PCR检测时DNA的提取。 展开更多

关键词 猪基因组DNA 碱裂解法 酚-氯仿法 PCR扩增

下载PDF 职称材料

血液中DNA提取方法的比较研究 被引量：8

9

作者 万发春 王慧 吴乃克 《山东畜牧兽医》 1999年第1期6-7,共2页

通过蛋白酶K和SDS消化破碎细胞，用酚一氧仿去除蛋白质，用异丙醇沉淀解离出DNA。此法获取的DNA与用酚抽提法、甲醇胺解聚法、异丙醇沉淀法、血细胞DNA快速提取法获得的DNA比较，分子长度较大，纯度较高，能够同时满足以噬菌作为载体的... 通过蛋白酶K和SDS消化破碎细胞，用酚一氧仿去除蛋白质，用异丙醇沉淀解离出DNA。此法获取的DNA与用酚抽提法、甲醇胺解聚法、异丙醇沉淀法、血细胞DNA快速提取法获得的DNA比较，分子长度较大，纯度较高，能够同时满足以噬菌作为载体的DNA构建基因组文库和PCR实验的要求。 展开更多

关键词 DNA 提取 琼脂糖凝胶电泳 酚-氯仿法 血液

下载PDF 职称材料

三种提取卤虫基因组DNA方法的比较 被引量：2

10

作者 赵秀娟 蔡禄 《内蒙古科技大学学报》 CAS 2007年第1期63-66,共4页

以盐生动物卤虫为材料,分别用氯化钠高盐沉淀法和两种酚/氯仿抽提法对卤虫基因组DNA进行了提取;并用紫外光分光光度计法、琼脂糖电泳法和PCR对所提取的DNA进行检测,将它们在DNA的产量、质量等方面的优缺点进行比较,通过三种方法的比较,... 以盐生动物卤虫为材料,分别用氯化钠高盐沉淀法和两种酚/氯仿抽提法对卤虫基因组DNA进行了提取;并用紫外光分光光度计法、琼脂糖电泳法和PCR对所提取的DNA进行检测,将它们在DNA的产量、质量等方面的优缺点进行比较,通过三种方法的比较,认为改进的酚-氯仿法是卤虫基因组DNA的最佳提取方法. 展开更多

关键词 卤虫 基因组DNA 氯化钠高盐沉淀法 酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

红碱淖遗鸥血液基因组DNA提取方法的比较研究 被引量：1

11

作者 行文珍 雷忻 +2 位作者 戚珍珠 田鹏飞 张静静 《延安大学学报（自然科学版）》 2014年第1期58-60,69,共4页

采用酚-氯仿法和改良Miller盐析法从红碱淖遗鸥冷冻血液样品中提取基因组DNA,以筛选遗鸥冷冻血液DNA的最佳提取方法。结果显示:酚-氯仿法琼脂糖凝胶电泳DNA样品亮度和清晰度较高,条带较粗,纯度较高;而改良Miller盐析法提取基因组DNA,获... 采用酚-氯仿法和改良Miller盐析法从红碱淖遗鸥冷冻血液样品中提取基因组DNA,以筛选遗鸥冷冻血液DNA的最佳提取方法。结果显示:酚-氯仿法琼脂糖凝胶电泳DNA样品亮度和清晰度较高,条带较粗,纯度较高;而改良Miller盐析法提取基因组DNA,获得率较低,并且难以去除杂质;酚-氯仿法提取时,酶解16 h比酶解10 h的DNA提取效果好,说明在一定时间范围内,延长酶解时间可有效地提高DNA提取效果。上述结果提示,酚-氯仿法对遗鸥冷冻血液基因组DNA提取的效果优于改良Miller盐析法。 展开更多

关键词 遗鸥 DNA提取 酚-氯仿法 改良Miller盐析法

下载PDF 职称材料

3种提取淡水涡虫基因组DNA方法比较

12

作者 孙健 张合彩 +1 位作者 陈广文 刘德增 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期168-171,共4页

分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高... 分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高,试剂盒法是最适合涡虫基因组DNA制备的方法.相同起始物质量条件下,3种方法从活体涡虫中提取的DNA量和纯度均高于95%酒精固定的涡虫标本,但试剂盒法提取95%酒精固定半年以上的涡虫标本,所得DNA产率较高、质量较好,可满足PCR扩增等分子生物学实验的要求. 展开更多

关键词 淡水涡虫 DNA提取 试剂盒法 改良CTAB法 改良酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

犬细小病毒临床样品基因组快速分离方法

13

作者 马金友 李涛 +2 位作者 于之清 刘俊伟 陈金山 《河南科技学院学报（自然科学版）》 2012年第2期51-54,共4页

犬细小病毒是一种具有单链基因组DNA且没有囊膜的病毒,是引起幼犬出血性肠炎和心肌炎的高度接触传染性病原.研究采集疑似细小病毒感染病死犬的肠管和心脏等组织,通过组织匀浆的方法分离病毒,采用3种方法提取病毒基因组DNA.根据犬细小病... 犬细小病毒是一种具有单链基因组DNA且没有囊膜的病毒,是引起幼犬出血性肠炎和心肌炎的高度接触传染性病原.研究采集疑似细小病毒感染病死犬的肠管和心脏等组织,通过组织匀浆的方法分离病毒,采用3种方法提取病毒基因组DNA.根据犬细小病毒基因序列设计特异性引物,采用PCR方法扩增病毒基因片段,琼脂糖凝胶电泳检验的扩增结果与预计结果完全一致.结果表明:CPV的分离和基因组DNA的提取方法可靠,为CPV的分离和检测及进一步研究奠定了基础. 展开更多

关键词 犬细小病毒 基因组DNA 酚-氯仿法 硅藻土法

下载PDF 职称材料

白细胞介素-6基因多态性与高脂血症的关联性研究

14

作者 何美霞 张莉蓉 +1 位作者 张明明 华海婴 《中国药理通讯》 2009年第2期45-46,共2页

目的：探讨高血脂患者白细胞介素-6（IL-6）启动子-634C／G基因在中国人群中的多态性，旨在了解其是否为高脂血症的遗传因素。方法：筛选高脂血症患者197例，健康志愿者200例。采用酚-氯仿法提取外周血DNA，聚合酶链反应-限制性片断长... 目的：探讨高血脂患者白细胞介素-6（IL-6）启动子-634C／G基因在中国人群中的多态性，旨在了解其是否为高脂血症的遗传因素。方法：筛选高脂血症患者197例，健康志愿者200例。采用酚-氯仿法提取外周血DNA，聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（PCR_RFLP）技术检测IL-6基因多态性。结果：高脂血症组CC、CG和GG基因型的频率分别为51．3％（101／197），37.6％（74／197）和11.1％（22／197），与正常对照组[CC：65％（130／200）：CG：28．5％（57／200）：GG：6．5％（13／200）]相比差异具有显著性（P〈0．05）。 展开更多

关键词 高脂血症患者 白细胞介素-6 基因多态性 外周血DNA 聚合酶链反应 高血脂患者 健康志愿者 酚-氯仿法

下载PDF 职称材料

DNA提取方法的比较及改良 被引量：24

15

作者 童大跃 伍新尧 +4 位作者 陆惠玲 蔡贵庆 区敬华 陈勇 曾艳红 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期411-412,共2页

用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1～ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时... 用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1～ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时则很难达到这样的要求.本文就几种常用的方法进行了改良及它们效果比较. 展开更多

关键词 DNA提取方法 酚-氯仿提取法 Chelex-100处理法 酶裂解法 序列分析

下载PDF 职称材料

不同方法提取鳗鲡病原菌DNA模板的差异分析 被引量：3

16

作者 熊静 关瑞章 +2 位作者 郭松林 黄文树 关淑芳 《集美大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第3期161-166,共6页

利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DN... 利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16S rD-NA和外膜蛋白的保守序列.其中,酚-氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低.2)电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16S rDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异. 展开更多

关键词 模板DNA 水煮法 碱裂解法 酚-氯仿提取法 16SrDNA 外膜蛋白基因

下载PDF 职称材料

两种DNA提取法对不同色泽肋软骨STR分型成功率的比较 被引量：6

17

作者 徐庆文 吴丹 胡伟 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期436-437,共2页

目的比较两种DNA提取法对不同色泽肋软骨的DNASTR分型结果的影响。方法利用Chelex-100法和酚-氯仿法,分别对30例不同色泽的腐败尸体肋软骨进行DNA提取,STR复合扩增,ABI3100型基因分析仪对扩增产物进行检测。结果用酚-氯仿法提取的30例... 目的比较两种DNA提取法对不同色泽肋软骨的DNASTR分型结果的影响。方法利用Chelex-100法和酚-氯仿法,分别对30例不同色泽的腐败尸体肋软骨进行DNA提取,STR复合扩增,ABI3100型基因分析仪对扩增产物进行检测。结果用酚-氯仿法提取的30例腐败尸体肋软骨,均检测到全部STR基因座的等位基因型。用Chelex-100法提取的肋软骨中,22例(11例白色、8例淡黄色、3例黄色)检测出全部STR基因座的等位基因型;7例(3例黄色、4例黄褐色)检测出部分STR基因座的等位基因型;1例黑灰色的腐败尸体肋软骨,未检测出STR基因座的等位基因型。结论根据肋软骨的色泽,选择适宜的DNA提取方法。对于颜色较深的肋软骨,用酚-氯仿法进行DNA提取有助于提高其STR基因座的检出率。 展开更多

关键词 Chelex-100法 酚-氯仿法 DNA提取 肋软骨

下载PDF 职称材料

血清HCV RNA不同提取方法的对比研究 被引量：2

18

作者 高淑平 《九江医学》 2009年第2期12-14,共3页

目的:探讨不同方法提取丙型肝炎患者血清HCVRNA,比较每种方法提取的RNA用于RT-PCR荧光定量检测的敏感度。方法:分别采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法、固相吸附法、柱式总RNA抽提法提取7例疑似HCV感染者血清标本中的HCVRNA,... 目的:探讨不同方法提取丙型肝炎患者血清HCVRNA,比较每种方法提取的RNA用于RT-PCR荧光定量检测的敏感度。方法:分别采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法、固相吸附法、柱式总RNA抽提法提取7例疑似HCV感染者血清标本中的HCVRNA,采用实时荧光定量PCR法进行检测。结果:采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法提取HCVRNA用于核酸检测有漏检现象,而采用固相吸附法和柱式总RNA抽提法,敏感度均可达到100%。结论采用固相吸附法和柱式总RNA抽提法提取血清HCVRNA具有较高的敏感度,在实时荧光定量PCR法检测中具有重要的临床价值。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 荧光定量PCR 异硫氰酸胍-酚氯仿法 蛋白酶K-酚氯仿法 固相吸附法 柱式总RNA抽提法

下载PDF 职称材料

紫薇叶片DNA的提取及AFLP反应体系的建立 被引量：17

19

作者 王献 柴永生 职永普 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期189-192,230,共5页

以紫薇叶片为材料,利用改进的酚—氯仿法,提取到了高质量的紫薇叶片DNA,并建立了20个紫薇品种和南紫薇的AFLP银染反应体系,首次在紫薇DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等实验过程取得了成功,得到了清晰的紫薇品种的AFLP指纹图谱,... 以紫薇叶片为材料,利用改进的酚—氯仿法,提取到了高质量的紫薇叶片DNA,并建立了20个紫薇品种和南紫薇的AFLP银染反应体系,首次在紫薇DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等实验过程取得了成功,得到了清晰的紫薇品种的AFLP指纹图谱,为紫薇基因库的建立、优良品种选育以及亲缘关系的系列研究奠定了理论基础. 展开更多

关键词 紫薇 叶片DNA 提取 AFLP 反应体系 酚-氯仿法 基因库 指纹图谱

下载PDF 职称材料

烧骨DNA提取与检测技术的实验研究 被引量：5

20

作者 徐国昌 侯续伟 +1 位作者 任甫 刘海东 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第1期91-95,共5页

目的探索烧骨DNA提取与检测方法。方法常压下以200℃分别对30例成人股骨焚烧1h后,生物冷冻研磨,EDTA脱钙,改良酚-氯仿提取DNA,光度计检测DNA浓度和纯度;5色荧光标记,PCR复合扩增,基因分析仪毛细管电泳,软件收集数据和分析。结果改良酚-... 目的探索烧骨DNA提取与检测方法。方法常压下以200℃分别对30例成人股骨焚烧1h后,生物冷冻研磨,EDTA脱钙,改良酚-氯仿提取DNA,光度计检测DNA浓度和纯度;5色荧光标记,PCR复合扩增,基因分析仪毛细管电泳,软件收集数据和分析。结果改良酚-氯仿法提取烧骨DNA浓度为(28.5±1.7)ng/μl,16个基因位点基本齐全,相对荧光单位(RFU)>500;传统酚-氯仿法提取烧骨DNA浓度为(4.7±0.8)ng/μl,基因位点检出不全,RFU<500。结论改良酚-氯仿法、PCR复合扩增、基因分析能对烧骨DNA进行有效提取和检测,但操作时要严格规程。 展开更多

关键词 DNA检验 酚-氯仿法 复合扩增 烧骨

原文传递