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酵母前体饲喂验证植物次生代谢产物功能基因方法学初探
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作者 刘金凤 黄鹏 +4 位作者 卿志星 刘秀斌 柳亦松 唐其 曾建国 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期559-566,共8页
目的筛选效率最高的酵母前体饲喂方式,为在酵母中进行基因功能验证提供方法学指导。方法首先构建含PsP6H基因和PsCPR基因重组酵母工程菌,然后用4种不同的方法进行前体饲喂,最后质谱检测下游产物二氢血根碱来确定最优方案。结果最优的前... 目的筛选效率最高的酵母前体饲喂方式,为在酵母中进行基因功能验证提供方法学指导。方法首先构建含PsP6H基因和PsCPR基因重组酵母工程菌,然后用4种不同的方法进行前体饲喂,最后质谱检测下游产物二氢血根碱来确定最优方案。结果最优的前体饲喂方法是将酵母工程菌经过半乳糖诱导31 h后在pH 8.0的Tris EDTA溶液中孵育24 h。结论不同的前体饲喂方式对酵母工程菌下游产物产生不同影响,经优化后的酵母前体饲喂方法较稳定,重复性好。 展开更多
关键词 次生代谢 基因功能验证 酵母前体饲喂 PsP6H基因 PsCPR基因
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