应用分光光度计建立一种简便检测β D 半乳糖苷酶(GAL)活性的方法。酶反应条件研究表明,在总体积为1mL的0.1mol/L柠檬酸反应缓冲体系(pH值为4.5)中含0.8μmol的底物邻硝基苯β D 吡喃半乳糖(ONPG),含相当于2mg左右蛋白质的酶提取液,37...应用分光光度计建立一种简便检测β D 半乳糖苷酶(GAL)活性的方法。酶反应条件研究表明,在总体积为1mL的0.1mol/L柠檬酸反应缓冲体系(pH值为4.5)中含0.8μmol的底物邻硝基苯β D 吡喃半乳糖(ONPG),含相当于2mg左右蛋白质的酶提取液,37℃孵育30min后用0.5mol/L碳酸钠1mL终止反应,用紫外分光光度计于405nm波长测定的吸光度值最能反映该酶活性。结果显示,该方法的批内变异系数在3.92%～4.89%之间,批间变异系数为3.8%,均小于5%;在所检测该酶质量浓度范围(1～2.5mg/mL)内线性关系良好,当反应体系的蛋白含量低于0.5mg/mL时,酶活性不能被检出;每组的平均回收率均在95%～105%之间,说明在所检测浓度范围内回收良好。因此,该方法具有稳定性好、灵敏度高、简便易行等特点,适合一般实验室应用。展开更多
为了更好的测定红平菇纤维素酶活性,对其纤维素酶活性测定条件进行了优化。在单因素试验的基础上,选择了pH值、温度、酶量为自变量,红平菇纤维素酶活性为响应值;利用响应面分析方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明,红...为了更好的测定红平菇纤维素酶活性,对其纤维素酶活性测定条件进行了优化。在单因素试验的基础上,选择了pH值、温度、酶量为自变量,红平菇纤维素酶活性为响应值;利用响应面分析方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明,红平菇纤维素酶活性测定最佳条件为温度40.3℃,酶量1.36 m L,pH 7.0。在此条件下,测得纤维素酶活性为4.5638 U。展开更多
文摘应用分光光度计建立一种简便检测β D 半乳糖苷酶(GAL)活性的方法。酶反应条件研究表明,在总体积为1mL的0.1mol/L柠檬酸反应缓冲体系(pH值为4.5)中含0.8μmol的底物邻硝基苯β D 吡喃半乳糖(ONPG),含相当于2mg左右蛋白质的酶提取液,37℃孵育30min后用0.5mol/L碳酸钠1mL终止反应,用紫外分光光度计于405nm波长测定的吸光度值最能反映该酶活性。结果显示,该方法的批内变异系数在3.92%～4.89%之间,批间变异系数为3.8%,均小于5%;在所检测该酶质量浓度范围(1～2.5mg/mL)内线性关系良好,当反应体系的蛋白含量低于0.5mg/mL时,酶活性不能被检出;每组的平均回收率均在95%～105%之间,说明在所检测浓度范围内回收良好。因此,该方法具有稳定性好、灵敏度高、简便易行等特点,适合一般实验室应用。
文摘为了更好的测定红平菇纤维素酶活性,对其纤维素酶活性测定条件进行了优化。在单因素试验的基础上,选择了pH值、温度、酶量为自变量,红平菇纤维素酶活性为响应值;利用响应面分析方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明,红平菇纤维素酶活性测定最佳条件为温度40.3℃,酶量1.36 m L,pH 7.0。在此条件下,测得纤维素酶活性为4.5638 U。
