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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析
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作者 张世伟 吴会玲 +6 位作者 周迎春 王炳志 杨星星 杜业刚 汤璐 冯荣虎 郭继平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期271-276,共6页
建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。 展开更多
关键词 3-氨基-2-恶唑烷酮 夹心酶联免疫分析 表位间隔距离 辣根过氧化物标记亲和素
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间接竞争酶联免疫分析用于薏苡仁中杂色曲霉毒素的快速检测研究
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作者 黄惠强 黄雨心 +4 位作者 廖梦瑶 林懿 王淑美 王峰 张磊 《化学试剂》 CAS 2024年第8期84-90,共7页
杂色曲霉毒素(Sterigmatocystin,ST)是一种主要由杂色曲霉和构巢曲霉等真菌产生的次级代谢产物,其结构与黄曲霉毒素相似,具有潜在的致癌性和毒性,严重危害人类生命健康。研究发现部分中药易ST污染,但目前针对中药中ST的快速检测研究相... 杂色曲霉毒素(Sterigmatocystin,ST)是一种主要由杂色曲霉和构巢曲霉等真菌产生的次级代谢产物,其结构与黄曲霉毒素相似,具有潜在的致癌性和毒性,严重危害人类生命健康。研究发现部分中药易ST污染,但目前针对中药中ST的快速检测研究相对较少。通过系统优化样品前处理条件及影响检测灵敏度的关键参数,建立了简便的间接竞争酶联免疫分析法(ic-ELISA),用于消费量较大的药食同源薏苡仁中ST的快速筛查。所建立ic-ELISA的半数抑制浓度(Half-Maximal Inhibitory Concentration,IC 50)为0.11 ng/mL,线性范围为6.25~100μg/kg,加标回收率在79.27%~99.95%之间,相对标准偏差(RSD)<12%。此外,该方法可抗基质干扰,只需利用溶剂标准曲线即可进行定量。用所建立的ic-ELISA对96批薏苡仁样品进行了检测,并用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对阳性样品进行了确证。该ic-ELISA快速、准确、经济,可作为薏苡仁中ST高通量快筛的技术手段,同时为其他中药中ST的快速检测提供参考。 展开更多
关键词 杂色曲霉毒素 间接竞争酶联免疫分析方法 样品前处理 快速筛查 薏苡仁
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基于酶联免疫分析方法检测畜禽饲料中恩拉霉素
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作者 蔡永辉 王康 +1 位作者 陈敏 王冰清 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期571-576,共6页
本文建立了一种应用于检测畜禽饲料中恩拉霉素的间接竞争酶联免疫分析法。采用羰基二咪唑法将生物活性高的恩拉霉素A组分合成的半抗原偶联卵清蛋白,构建检测原;同时将杂交瘤细胞株2H1F91免疫BALB/c小鼠,制备特异性识别恩拉霉素的单克隆... 本文建立了一种应用于检测畜禽饲料中恩拉霉素的间接竞争酶联免疫分析法。采用羰基二咪唑法将生物活性高的恩拉霉素A组分合成的半抗原偶联卵清蛋白,构建检测原;同时将杂交瘤细胞株2H1F91免疫BALB/c小鼠,制备特异性识别恩拉霉素的单克隆抗体。在此基础上,构建了恩拉霉素的间接竞争酶联免疫分析法的标准曲线,该曲线IC_(50)为91.61ng/mL,线性范围为25.73~471.39ng/mL,检出限为13.11ng/mL。猪饲料样品的添加回收率为91.60%~95.75%,鸡饲料的添加回收率为89.33%~94.80%,并且二者的变异系数均低于12%,这表明建立的方法结果可靠,适用于畜禽饲料中恩拉霉素含量的快速检测。 展开更多
关键词 恩拉霉素 单克隆抗体 间接竞争性免疫吸附分析 猪饲料 鸡饲料
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草甘膦单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立 被引量:3
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作者 杜斌 岳绪辉 +5 位作者 罗建芝 袁学伟 姚南南 陈海军 杨梅 令狐克勇 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第16期205-212,共8页
目的制备出草甘膦(glyphosate,GLY)单克隆抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测茶叶中GLY的方法。方法首先合成GLY完全抗原(包被原和免疫原),通过免疫小鼠成功制备出GLY单克隆抗体。根据E... 目的制备出草甘膦(glyphosate,GLY)单克隆抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测茶叶中GLY的方法。方法首先合成GLY完全抗原(包被原和免疫原),通过免疫小鼠成功制备出GLY单克隆抗体。根据ELISA的检测流程,采用棋盘法确定最佳包被抗原和抗体的稀释倍数,确定最佳包被的温度和时间,并确定最佳加入一抗、二抗后反应时间,建立检测方法并对其性能进行评价。结果GLY包被抗原和抗体的稀释倍数为1:2000,包被温度为37℃、包被时间为90 min,加入一抗、二抗后反应时间为60 min。该方法的线性方程为Y=-0.2353X+0.6539(r2=0.9871),半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50)为4.508 ng/mL,检出限为1.18 ng/mL。变异系数均在10%以下,与异菌脲、多菌灵、三唑磷、甲基对硫磷、噻菌灵这5种标准品的交叉反应率均低于0.03%,在茶叶中加标回收率为90.86%~110.35%,且相对标准偏差均小于10%。结论该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于茶叶样本中GLY残留的快速检测。 展开更多
关键词 草甘膦 完全抗原 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫分析
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基于简单样品前处理的玉米赤霉烯酮酶联免疫分析方法——以瓜蒌皮和瓜蒌子的检测为例 被引量:5
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作者 张磊 吴旺荣 +2 位作者 黄仁堂 关凯仪 王淑美 《广东药科大学学报》 CAS 2023年第2期32-36,共5页
目的以瓜蒌皮和瓜蒌子中玉米赤霉烯酮的检测为例,探讨简便、高效的样品前处理技术,解决酶联免疫分析法检测中药中真菌毒素的基质干扰问题。方法首先优化抗原-抗体最佳反应浓度,建立间接竞争酶联免疫分析抑制曲线,确定灵敏度和线性范围;... 目的以瓜蒌皮和瓜蒌子中玉米赤霉烯酮的检测为例,探讨简便、高效的样品前处理技术,解决酶联免疫分析法检测中药中真菌毒素的基质干扰问题。方法首先优化抗原-抗体最佳反应浓度,建立间接竞争酶联免疫分析抑制曲线,确定灵敏度和线性范围;再系统对比不同提取溶剂及稀释溶液获取最佳样品前处理过程;经方法学考察后,将所建立的方法用于实际样品测定。结果瓜蒌皮和瓜蒌子的检测限分别为0.017 ng/mL和0.031 ng/mL,线性范围分别为0.0625~2 ng/mL和0.094~2 ng/mL,加标回收率为75.88%~104.7%和78.03%~104.7%(RSD<8%);该方法成功用于11批瓜蒌皮和17批瓜蒌子样品检测,未检出阳性样品。结论适宜的提取溶剂和稀释溶液组合可有效解决基质干扰问题,该方法操作简便,准确性好,为其他中药中真菌毒素快速筛查方法的建立提供参考。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 酶联免疫分析 样品前处理 快速检测 基质效应
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基于QuEChERS样品前处理的间接竞争酶联免疫分析法快速检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1) 被引量:1
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作者 张磊 关凯仪 +1 位作者 黄雨心 王淑美 《广东药科大学学报》 CAS 2023年第6期37-43,共7页
目的解决间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))的基质干扰问题,建立一种简便的高通量检测方法,用于薏苡仁中AFB_(1)的快速... 目的解决间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)检测薏苡仁中黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))的基质干扰问题,建立一种简便的高通量检测方法,用于薏苡仁中AFB_(1)的快速筛查。方法以ic-ELISA的显色值和抑制率为评价指标优化样品前处理过程,重点考察QuEChERS萃取净化技术、不同稀释溶剂和稀释方式消除基质效应的效果,并对建立的方法进行方法学考察,最后应用于薏苡仁实际样品检测,检测结果用液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行确证。结果建立了一种无需任何校正,可用溶剂标准曲线进行定量分析的ic-ELISA。方法的半数抑制浓度为0.074 ng/mL,线性范围为1.37~20.0μg/kg,加标回收率在75.12%~84.46%之间,RSD小于6%。122批薏苡仁及其相关样品中AFB_(1)的阳性率为20.5%,阳性样品的超标率为24.0%,污染水平为1.76~27.56μg/kg。ic-ELISA与LC-MS/MS检测结果的相关系数(r)为0.98。结论QuEChERS萃取净化技术能够有效去除薏苡仁中的干扰成分,对快速样品前处理方法的建立具有重要应用价值,结合本研究所建立的ic-ELISA,为薏苡仁中AFB_(1)的检测和监测提供简便有效的技术手段。 展开更多
关键词 QuEChERS技术 间接竞争酶联免疫分析方法 快速检测 薏苡仁 黄曲霉毒素B_(1)
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间接竞争酶联免疫分析法快速检测决明子中黄曲霉毒素B_(1)的研究
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作者 张磊 林煜伦 《广东化工》 CAS 2023年第21期20-22,29,共4页
目的:建立适用于中药决明子中黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))快速检测的间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:首先采用棋盘滴定法优化抗原抗体最佳浓度,建立抑... 目的:建立适用于中药决明子中黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))快速检测的间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:首先采用棋盘滴定法优化抗原抗体最佳浓度,建立抑制曲线,然后以显色值和灵敏度为评价指标筛选样品的提取和稀释方法。对所建立的方法进行方法学考察,最后用于实际样品检测。结果:经过优化,确定样品的最佳提取溶剂为乙腈-甲醇溶液(90∶10,v/v),稀释溶液为甲醇-PBS溶液(10∶90,v/v),稀释倍数为20倍。方法的半数抑制浓度为0.078 ng/mL,线性范围为0.016~0.25 ng/mL,回收率为85.00%~109.2%,RSD为0.45%~9.08%。采用所建立的方法对25批决明子进行了检测,经液相色谱-串联质谱法确证,超过限量标准的样品的假阳性率小于5%。结论:本文所建立的ic-ELISA灵敏、简便,适用于决明子中AFB_(1)的快速筛查,但仍存在一定的假阳性率,后续还需要对产生干扰的基质因素进行研究并消除,进一步提高检测的准确度。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 间接竞争酶联免疫分析 样品前处理 决明子 一步稀释法
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探究酶联免疫分析方法在食药安全检测中的应用前景
8
作者 郭伟国 崔磊 +2 位作者 冯西娟 杨梦瑶 陈欢 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2023年第6期196-198,共3页
酶联免疫吸附分析作为一种新型检验检测分析技术,具有高效、快速、高通量等优点,因此在食药安全监测、环境污染控制、医疗卫生等领域得到广泛应用,主要用于食药中农兽药残留的测定,关键控制点(半抗原的制备、人工抗原的合成、抗体的制备... 酶联免疫吸附分析作为一种新型检验检测分析技术,具有高效、快速、高通量等优点,因此在食药安全监测、环境污染控制、医疗卫生等领域得到广泛应用,主要用于食药中农兽药残留的测定,关键控制点(半抗原的制备、人工抗原的合成、抗体的制备)。本文着重介绍酶联免疫分析技术的原理和方法建立,分析酶联免疫分析技术在食药安全检测中的现状,并就酶联免疫分析技术检测农药残留存在的现实问题和应用前景。 展开更多
关键词 酶联免疫分析方法 食药安全检测 农药残留
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中药致肾毒性成分马兜铃酸A单抗制备及酶联免疫分析方法的建立 被引量:19
9
作者 南铁贵 何素平 +3 位作者 谭桂玉 李刚 王保民 黄璐琦 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1206-1210,共5页
采用活化酯法,将马兜铃酸A分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原马兜铃酸A-BSA和包被抗原马兜铃酸A-OVA。利用马兜铃酸A-BSA免疫Balb/c小鼠,制得鼠单克隆抗体1A11,单抗效价为2×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型;与... 采用活化酯法,将马兜铃酸A分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原马兜铃酸A-BSA和包被抗原马兜铃酸A-OVA。利用马兜铃酸A-BSA免疫Balb/c小鼠,制得鼠单克隆抗体1A11,单抗效价为2×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型;与其结构类似物马兜铃酸B、C和D的交叉反应率分别为2.8%,3.5%和31.2%。基于抗马兜铃酸A单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA)的IC50为1.9μg/L,检测范围为0.5~7.5μg/L。icELISA添加回收率为86%~97%,相对标准偏差在5.2%~11.1%之间。利用所建立的icELISA测定了6个中药材和5个中成药中马兜铃酸A的含量,并用高效液相色谱法(HPLC)进行了验证,其中关木通、广防己、天仙藤、马兜铃和青木香中均检测出马兜铃酸A,而川木通和5个中成药中未检测到马兜铃酸A。结果表明:本方法可用于中药中马兜铃酸A的快速检测。 展开更多
关键词 马兜铃酸A 单克隆抗体 中药 酶联免疫分析
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酶联免疫分析法及其在食品农药残留检测中的应用 被引量:22
10
作者 武中平 徐春祥 +2 位作者 高巍 顾爱国 赵维佳 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第1期198-201,共4页
介绍酶联免疫分析法(ELISA)的原理,酶联免疫分析法在食品农药残留检测中应用的技术要点和存在问题,并对酶联免疫分析法在食品农药残留检测中的应用前景作了展望。
关键词 酶联免疫分析法(ELISA) 食品 农药残留检测 抗体复合物
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谷物中伏马菌素B_1酶联免疫分析法的建立 被引量:20
11
作者 刘师文 何庆华 +1 位作者 邹龙 许杨 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第18期350-354,共5页
以匙孔血蓝蛋白(KLH)为载体,采用碳化亚二胺法人工合成伏马菌素B1(FB1)抗原FB1-KLH,免疫大白兔获得特异性良好的抗FB1多克隆抗体;在多克隆抗体的基础上建立伏马菌素B1的间接竞争酶联免疫吸附分析方法,该方法IC50为11.7μg/L,最低检出限... 以匙孔血蓝蛋白(KLH)为载体,采用碳化亚二胺法人工合成伏马菌素B1(FB1)抗原FB1-KLH,免疫大白兔获得特异性良好的抗FB1多克隆抗体;在多克隆抗体的基础上建立伏马菌素B1的间接竞争酶联免疫吸附分析方法,该方法IC50为11.7μg/L,最低检出限1.1μg/L,平均批内和批间变异系数分别为5.8%、10.2%;分析不同溶剂对标准曲线和加标回收率的影响,确定PBS溶液为样本最佳提取溶剂;在玉米、小麦、大米、高粱谷物样本中添加50~500μg/kg的FB1标准品,平均回收率在70.5%~105.6%之间。将该方法应用于40份谷物样本中FB1的检测,检测结果与高效液相色谱的相关系数(R2)为0.9547。该方法简单、灵敏、快速、准确,适用于谷物中FB1的检测。 展开更多
关键词 伏马菌素B1 酶联免疫分析(ELISA) 谷物
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MAP-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析新体系的光谱及电化学研究 被引量:9
12
作者 张书圣 陈洪渊 +1 位作者 焦奎 李惠静 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第8期922-930,共9页
提出了间氨基酚(MAP)-H_2O_2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系.本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H_2O_2氧化MAP的产物,用于游离HRP和各种HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.测定游离HRP的线性范... 提出了间氨基酚(MAP)-H_2O_2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系.本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H_2O_2氧化MAP的产物,用于游离HRP和各种HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.测定游离HRP的线性范围为1.0×10^(-8)~1.0×10^(-6)g/L,检测限达3.8×10^(-9) g/L.制备出了HRP催化H_2O_2氧化MAP的产物纯品,并应用电化学分析,高效液相色谱,元素分析,紫外-可见光谱,红外光谱,~1H核磁共振谱,^(13)C核磁共振谱及质谱等技术对体系酶促反应进行了深入的研究.在选择的酶促反应条件下,生成的产物为2-氨基-5-[(3-羟苯基)氨基]-2,5-环己二烯基-l,4-二酮.提出了酶催化反应机理及其产物的电极还原过程. 展开更多
关键词 免疫分析 酶联免疫分析 间氨基酚 HRP 伏安法
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有机磷农药纳米磁珠酶联免疫分析方法研究 被引量:11
13
作者 胡寅 沈国清 +2 位作者 朱鸿林 姜官鑫 陆贻通 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期41-45,54,共6页
将有机磷农药通用抗体固化在自行制备的纳米磁珠表面,以甲醇、丙酮、pH及包被纳米磁珠的抗体稀释度为主要影响因素,依据均匀设计法和间接竞争酶联免疫反应原理,对纳米磁珠酶联免疫分析(ELISA)方法进行了优化,并开展了纳米磁珠抗体复合... 将有机磷农药通用抗体固化在自行制备的纳米磁珠表面,以甲醇、丙酮、pH及包被纳米磁珠的抗体稀释度为主要影响因素,依据均匀设计法和间接竞争酶联免疫反应原理,对纳米磁珠酶联免疫分析(ELISA)方法进行了优化,并开展了纳米磁珠抗体复合物对多种有机磷农药识别作用的比较研究。结果表明,无论是甲醇还是丙酮,抗体稀释度与溶剂互作对半抑制浓度(IC50)的影响最大;与传统ELISA相比,纳米磁珠间接竞争ELISA对毒死蜱、喹硫磷、敌百虫、三唑磷、乙拌磷、伏杀磷、对硫磷、敌敌畏和久效磷均有较好的识别作用,IC50为1.29~6.34μg/mL,比传统ELISA降低了68.3%~95.6%,灵敏度大大提高。 展开更多
关键词 酶联免疫分析 纳米磁珠 有机磷农药 通用抗体
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以3,3′,5,5′-四甲基联苯胺为底物的伏安酶联免疫分析体系研究 被引量:17
14
作者 王彤 孙伟 焦奎 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1298-1302,共5页
对 3 ,3′,5 ,5′ 四甲基联苯胺 (TMB) H2 O2 辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系进行了研究。HRP催化H2 O2 氧化TMB ,其氧化产物在汞电极上可以发生还原反应 ,在B R缓冲溶液中 ,-0 .76V(vs.SCE)处产生较为灵敏的伏安波。将此... 对 3 ,3′,5 ,5′ 四甲基联苯胺 (TMB) H2 O2 辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系进行了研究。HRP催化H2 O2 氧化TMB ,其氧化产物在汞电极上可以发生还原反应 ,在B R缓冲溶液中 ,-0 .76V(vs.SCE)处产生较为灵敏的伏安波。将此伏安波应用于测定HRP和HRP的标记物。测定HRP的线性范围为 6.0×1 0 - 1 1 ~ 5 .0× 1 0 - 9g mL ,检测限为 5 .0× 1 0 - 1 1 g mL。 展开更多
关键词 酶联免疫分析体系 底物 3 3' 5 5’-四甲基苯胺 辣根过氧化物 伏安法 免疫分析 抗原 抗体 测定
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双酚A单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立 被引量:8
15
作者 许龙 章英 +5 位作者 朱立鑫 范艳 赖肖 孟玮 胡娜 刘仁荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第20期202-206,共5页
采用活泼酯法将双酚A的结构类似物双酚酸与载体蛋白偶联制备人工抗原,用制备的人工抗原免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇法进行细胞融合制备双酚A单克隆抗体,成功获得一株分泌抗双酚A单克隆抗体的细胞株3H1,经鉴定抗体属于Ig G1亚型,轻链为... 采用活泼酯法将双酚A的结构类似物双酚酸与载体蛋白偶联制备人工抗原,用制备的人工抗原免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇法进行细胞融合制备双酚A单克隆抗体,成功获得一株分泌抗双酚A单克隆抗体的细胞株3H1,经鉴定抗体属于Ig G1亚型,轻链为κ,并建立了间接竞争酶联免疫分析法。线性范围为1~50 ng/m L,最低检测限为0.43 ng/m L,半数抑制浓度为6.56 ng/m L。回收率为82.83%~101.94%,变异系数为2.94%~12.95%。该方法具有较高的灵敏度和特异性,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 双酚A 单克隆抗体 酶联免疫分析
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水解衍生-酶联免疫分析在动物肌肉中呋喃唑酮代谢物残留量检测中的应用 被引量:8
16
作者 秦燕 朱柳明 +2 位作者 庄逸林 林峰 相大鹏 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期685-688,共4页
目的:优化并评估了水解衍生-酶联免疫方法在测定动物肌肉中抗生素呋喃唑酮代谢后结合残留物中的应用。方法:样品中的呋喃唑酮代谢物3-氨基-唑烷酮(3-amino-2-oxazolidone,AOZ)的蛋白结合残留物经酸水解释放 AOZ,经2-硝基苯甲醛(2-nitrob... 目的:优化并评估了水解衍生-酶联免疫方法在测定动物肌肉中抗生素呋喃唑酮代谢后结合残留物中的应用。方法:样品中的呋喃唑酮代谢物3-氨基-唑烷酮(3-amino-2-oxazolidone,AOZ)的蛋白结合残留物经酸水解释放 AOZ,经2-硝基苯甲醛(2-nitrobenzaldehyde,NBA)衍生生成3{[(2-nitrophenyl)methylene]-amino}-2-oxazolidinone(NPAOZ)后,调 pH 至7.2-7.4,经乙酸乙酯萃取后,10min/4000r·min^(-1)离心取上层氮气流于30℃吹干并用缓冲液溶解,正己烷脱脂后取下层水相进行 NPAOZ 的竞争性酶联免疫吸附分析(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。结果:方法定量检测限为200ng·kg^(-1),样本加标水平为1.0μg·kg^(-1)时,回收率在85%以上。实际样本对照实验显示 AOZ 质量浓度>1.0μg·kg^(-1)时,方法与 LC-MS-MS 结果的相对误差<25%。结论:此方法可实现动物肌肉中呋喃唑酮代谢物残留量的高通量筛选。 展开更多
关键词 呋喃唑酮 动物肌肉 代谢物 酶联免疫分析 残留量 衍生 免疫吸附分析 免疫方法 乙酸乙酯萃取 高通量筛选 蛋白结合 质量浓度 对照实验 相对误差 残留物 抗生素 唑烷酮 酸水解 苯甲醛 缓冲液 竞争性 正己烷 检测限
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间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B1 被引量:17
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作者 潘明飞 李诗洁 +2 位作者 郭丹丹 王俊平 王硕 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期255-261,共7页
目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B1(AFB1)建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。方法:制备了AFB1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,p... 目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B1(AFB1)建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。方法:制备了AFB1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH7.4)为样品稀释液;结果:在最优的试验条件下,建立的ic-ELISA对目标物AFB1的检测线性范围为0.0097~0.088μg/L(R2=0.999);灵敏度(IC50)和检出限(IC15)分别达到0.027μg/L和0.0066μg/L。板内变异系数(n=6)为0.29%~16.9%,板间变异系数(n=6)为0.22%~21.19%。在花生样品中AFB1的检测灵敏度(IC50)为1.04μg/kg,回收率为96.67%~106.51%。结论:本研究建立的ic-ELISA方法操作相对简便,检测灵敏度高、准确性好,可稳定地用于花生样品中AFB1污染物的定量分析检测。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 间接竞争酶联免疫分析方法 花生
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硝基磺酚S作为酶联免疫分析中辣根过氧化物酶测定底物的研究 被引量:5
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作者 朱敏 韩树波 +1 位作者 袁倬斌 沈含熙 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期440-443,共4页
提出一种新的HRP底物-硝基磺酚S,初步探讨了在HRP催化下被过氧化氢氧化的机制,以硝基磺酚S为底物测定了酶促反应动力学常数K_m和K_o分别为4.51×10^(-5)mol/L和28.1mol/L·s^(-1).分别用于酶联免疫显色光度法和伏安酶联免疫分... 提出一种新的HRP底物-硝基磺酚S,初步探讨了在HRP催化下被过氧化氢氧化的机制,以硝基磺酚S为底物测定了酶促反应动力学常数K_m和K_o分别为4.51×10^(-5)mol/L和28.1mol/L·s^(-1).分别用于酶联免疫显色光度法和伏安酶联免疫分析法测定IgG-HRP,其所能测定的最高稀释比分别为1:1.6×10~5和1:4.8×10~5. 展开更多
关键词 硝基磺酚S 酶联免疫分析 HRP 底物 免疫分析
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西维因毛细管电泳免疫分析方法的建立及其与固相酶联免疫分析方法(ELISA)的比较 被引量:5
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作者 张灿 王硕 +2 位作者 段玉清 韩及华 徐杰 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期297-300,共4页
以氨基甲酸酯农药西维因为研究对象,采用小分子荧光素标记西维因半抗原,建立毛细管电泳荧光免疫分析方法。该方法对抗原抗体结合反应达到平衡的时间为30min,5min即可获得检测结果,对西维因检测的线性范围和最低检测限分别为0.16~50ng/m... 以氨基甲酸酯农药西维因为研究对象,采用小分子荧光素标记西维因半抗原,建立毛细管电泳荧光免疫分析方法。该方法对抗原抗体结合反应达到平衡的时间为30min,5min即可获得检测结果,对西维因检测的线性范围和最低检测限分别为0.16~50ng/mL和0.05ng/mL,具有快速、灵敏的特点,与固相酶联免疫分析方法相比更适合于食品或环境中痕量西维因残留的分析检测。 展开更多
关键词 西维因 毛细管电泳荧光免疫分析 快速灵敏 痕量检测 固相酶联免疫分析
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酶联免疫分析技术及其在进出口动物产品兽药残留检测中的应用 被引量:7
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作者 余华 严玉宝 +5 位作者 谢晶 胡娟 廖党金 周岷江 崔鹏博 叶健强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期76-79,共4页
进出口动物产品兽药残留对食品安全的影响越来越明显,日益成为阻碍国际间贸易的重要因素,这对食品兽药残留的快速检测提出了高要求。作者主要介绍酶联免疫分析技术的基本原理、分类和技术要点,并对其在动物产品兽药残留检测中的应用、... 进出口动物产品兽药残留对食品安全的影响越来越明显,日益成为阻碍国际间贸易的重要因素,这对食品兽药残留的快速检测提出了高要求。作者主要介绍酶联免疫分析技术的基本原理、分类和技术要点,并对其在动物产品兽药残留检测中的应用、问题和前景进行综述。 展开更多
关键词 酶联免疫分析 兽药残留 检测
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