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菊酯类农药酶联免疫吸附测定研究进展 被引量:14
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作者 刘廷凤 杨敏娜 +2 位作者 刘亚子 顾颖 孙成 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期100-102,共3页
介绍了菊酯类农药残留的酶联免疫分析(ELISA)的技术原理、关键技术环节,综述了国内外的酶联免疫测定菊酯类农药残留的研究动态,并展望了此技术的发展及应用前景。
关键词 免疫吸附测定(elisa) 拟除虫菊酯 农药 进展
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对印度寻常型天疱疮患者的桥粒芯糖蛋白酶联免疫吸附测定(ELISA)试验的评价 被引量:1
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作者 Sharma V.K. Prasad H.R.Y. +2 位作者 Khandpur S. Kumar A. 潘敏 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2006年第8期31-31,共1页
Objective: To evaluate the role of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test for the detection of antibodies to desmoglein 1 (dsg1) and desmoglein 3 (dsg3) in the diagnosis of pemphigus vulgaris (PV), and its... Objective: To evaluate the role of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test for the detection of antibodies to desmoglein 1 (dsg1) and desmoglein 3 (dsg3) in the diagnosis of pemphigus vulgaris (PV), and its correlation with disease severity and clinical presentation (mucosal PV, cutaneous PV, mucocutaneous PV). Methods: Twenty-seven active PV patients and 26 controls with other dermatologic disorders were included in the study. The severity of oral and cutaneous involvement was assessed and recorded. ELISA test for the measurement of anti-dsg1 and anti-dsg3 antibodies was performed (Medical and Biological Laboratories Co. Ltd., Nagoya, Japan). The cut-off ELISA value for both anti-dsg1 and anti-dsg3 was taken as 20. Results: Of the 27 patients, 26 were ELISA positive for anti-dsg1 antibodies and 23 for anti-dsg3 antibodies. Of the controls, two were positive for anti-dsg1 and none for anti-dsg3 antibodies. The sensitivity and specificity of ELISA for anti-dsg1 in the diagnosis of PV were 96.3% and 92.3% , respectively. For anti-dsg3, they were 85.2% and 100% , respectively. The different morphologic types of PV could not be differentiated on the basis of antibody profile; however, a direct correlation between anti-dsg3 titers and the severity of oral disease was noted, and also between antidsg1 titers and the severity of cutaneous disease. Conclusions: ELISA (dsg1 and dsg3) is an efficient tool for confirming the diagnosis of PV. Specific antibody titers correlate with disease severity; however, desmoglein testing cannot differentiate between the various morphologic subtypes of PV. 展开更多
关键词 免疫吸附测定(elisa) 桥粒芯糖蛋白 寻常型天疱疮 患者 elisa法检测 试验 抗体阳性 疾病严重度 印度
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间接竞争ELISA法测定稻田土壤中除草剂毒莠定的残留量 被引量:11
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作者 黎媛萍 曾光明 +3 位作者 汤琳 章毅 陈耀宁 黄国和 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1222-1226,共5页
通过对反应体系中酶标二抗(辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG)和抗体的最佳稀释浓度等条件的筛选和确定,最终建立了一种快速灵敏地测定污染稻田土壤中毒莠定残留量的方法--间接竞争ELISA分析方法.结果表明,酶标二抗和抗体的最佳稀释度均为... 通过对反应体系中酶标二抗(辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG)和抗体的最佳稀释浓度等条件的筛选和确定,最终建立了一种快速灵敏地测定污染稻田土壤中毒莠定残留量的方法--间接竞争ELISA分析方法.结果表明,酶标二抗和抗体的最佳稀释度均为1:500(体积比),毒莠定的检出下限达到5 ng·mL^-1,在0.07~0.7μg·mL^-1浓度范围内有良好的线性;土壤浸出液加样的平均回收率为104.11%,变异系数在3.13%~11.13%之间,符合农药残留分析的要求;样品基质对检测结果没有干扰. 展开更多
关键词 毒莠定 免疫吸附测定法(elisa) 间接竞争 农药残留 土壤污染
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综合洗消体系对阻断非洲猪瘟病毒传入猪场的作用
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作者 张韵 金睿妍 +2 位作者 何佳蔚 程光胜 丁红雷 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期152-156,F0003,共6页
切断非洲猪瘟病毒(ASFV)传播途径是防控非洲猪瘟的有效手段。本试验旨在通过在某种猪场建立综合洗消体系以阻断ASFV传入。对拟进入猪场的车辆在出发前和距猪场1 km处清洗和消毒,在猪场门口进行第3次消毒;人员进入猪场前洗澡和隔离,并将... 切断非洲猪瘟病毒(ASFV)传播途径是防控非洲猪瘟的有效手段。本试验旨在通过在某种猪场建立综合洗消体系以阻断ASFV传入。对拟进入猪场的车辆在出发前和距猪场1 km处清洗和消毒,在猪场门口进行第3次消毒;人员进入猪场前洗澡和隔离,并将其衣物消毒;输入物资进场前消毒。通过实时荧光定量PCR检测经洗消的车辆、人员、物资和猪场内猪只携带ASFV核酸情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测猪只的ASFV抗体水平。结果显示,2019、2020、2021和2022年,车辆ASFV检出率分别为2.6%、1.3%、0和0,人员ASFV检出率分别为3.0%、1.1%、0和0.9%,物资ASFV检出率分别为12.5%、0、5.9%和0;4年间,猪场内猪只的ASFV核酸和抗体检测均为阴性。结果表明,通过建立完善的洗消体系并开展ASFV检测,能有效阻断ASFV传入猪场。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 实时荧光定量PCR 免疫吸附测定(elisa) 车辆 人员 物资
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抗蝰蛇毒卵黄抗体的制备及其免疫特性研究 被引量:3
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作者 王桂平 廖洪映 +2 位作者 刘新艳 韦敏 周琼 《中国热带医学》 CAS 2008年第8期1285-1287,共3页
目的制备一种新的抗蝰蛇毒卵黄抗体,并研究其免疫特性。方法将产卵母鸡分为低剂量(A组)和高剂量(B组)免疫组。以甲醛减毒法制备的蝰蛇毒抗原免疫母鸡;以水稀释法联合硫酸铵沉淀和超滤法分离纯化卵黄抗体;总蛋白质通过改良Lowry法测定;以... 目的制备一种新的抗蝰蛇毒卵黄抗体,并研究其免疫特性。方法将产卵母鸡分为低剂量(A组)和高剂量(B组)免疫组。以甲醛减毒法制备的蝰蛇毒抗原免疫母鸡;以水稀释法联合硫酸铵沉淀和超滤法分离纯化卵黄抗体;总蛋白质通过改良Lowry法测定;以ELISA法测定卵黄抗体的效价、总卵黄抗体与特异抗体含量、交叉反应。结果低、高剂量组均诱导母鸡产生有效免疫应答。高剂量组免疫效价高于低剂量组(P<0.05),高剂量组于免疫后约40d抗体效价达高峰,持续约4周;而低剂量组在免疫后约50d抗体效价达高峰,持续约2周。免疫过程中,两组总卵黄蛋白无显差异(P>0.05),但高剂量组卵黄中平均特异性抗体(0.29±0.04)mg/ml明显高于低剂量组(0.21±0.03)mg/ml(P<0.05).制备的抗蝰蛇毒IgY与蝰蛇毒抗原具有较高特异性,但与五步蛇(54.3%)、蝮蛇(47.5%)及竹叶青蛇(43.1%)有明显交叉反应,与眼镜蛇(11.7%)有轻度的交叉反应。结论研究证实蝰毒抗原易诱导母鸡产生良好的免疫应答,并成功制备了抗蝰蛇毒的卵黄抗体,为蛇伤防治提供新的途径。 展开更多
关键词 蝰蛇 卵黄抗体(IgY) 免疫特性 免疫吸附测定(elisa)
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糖皮质激素对结核性胸腔积液T淋巴细胞免疫学特征的影响 被引量:1
6
作者 杜先智 周向东 《中国药物与临床》 CAS 2005年第6期433-435,共3页
目的探讨糖皮质激素对结核性胸腔积液T淋巴细胞特征的影响。方法将肺炎性胸腔积液患者作为对照组;结核性渗出性胸膜炎(简称:结胸)患者随机分为3组,即尚未使用任何药物组(结胸组)、单纯使用抗结核药物组(抗结核组)及抗结核药物联合使用... 目的探讨糖皮质激素对结核性胸腔积液T淋巴细胞特征的影响。方法将肺炎性胸腔积液患者作为对照组;结核性渗出性胸膜炎(简称:结胸)患者随机分为3组,即尚未使用任何药物组(结胸组)、单纯使用抗结核药物组(抗结核组)及抗结核药物联合使用糖皮质激素组(激素组),收集各组的胸腔积液淋巴细胞,体外培养48h后取上清液,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定不同T淋巴细胞亚群所分泌相应的细胞因子的水平改变。结果代表辅助T细胞1(Th1细胞)的γ干扰素(IFN-γ)在结胸组水平较对照组明显升高(P<0.01),而代表Th2细胞的白介素-4(IL-4)水平则较对照组有所下降(P<0.05);结核性胸膜炎的治疗过程中,激素组较抗结核组IFN-γ水平明显下降(P<0.01),而IL-4水平变化不明显(P>0.05)。结论结核性胸腔积液T淋巴细胞特征是Th1细胞优势表达,而糖皮质激素可改变这一特征,使Th1细胞优势表达受到抑制。 展开更多
关键词 结核性胸腔积液 糖皮质激素 免疫学特征 免疫吸附测定(elisa) 结核性渗出性胸膜炎 Th1细胞 T淋巴细胞亚群 抗结核药物 结核性胸膜炎 细胞特征 辅助T细胞 Th2细胞 对照组 合使用 体外培养 细胞因子 治疗过程 水平变化
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应用ELISA间接法检测抗IBDV单克隆抗体 被引量:1
7
作者 陆苹 周培 王国丰 《上海交通大学学报(农业科学版)》 1990年第3期179-181,共3页
本文用 ELISA 间接法,研究并建立了抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的检测体系。实验证明,该法具有简便、灵敏、迅速、特异性强、准确性高及重复性好的优点。是研究筛选抗 IBDV单抗杂交瘤细胞的可靠方法。
关键词 免疫吸附测定(elisa) 鸡传染性法氏囊病毒(IBDV) 单克隆抗体(McAb)
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基于胆汁泡相糖蛋白特征而研制诊断胆结石ELISA药盒的可行性分析
8
作者 项建斌 马保金 +4 位作者 蔡端 张延龄 王丽影 莫汉庆 查锡良 《外科理论与实践》 2004年第3期180-184,共5页
目的:分析胆汁泡相糖蛋白的特征并评估其ELISA药盒临床应用的可行性。方法:应用凝集素探针介导的点印迹法分析泡蛋白糖链的组成与结构,利用酶解方法测定泡蛋白各组分的构成,并分析其氨基酸组成。利用Westernblot法分析胆汁与血清泡蛋白... 目的:分析胆汁泡相糖蛋白的特征并评估其ELISA药盒临床应用的可行性。方法:应用凝集素探针介导的点印迹法分析泡蛋白糖链的组成与结构,利用酶解方法测定泡蛋白各组分的构成,并分析其氨基酸组成。利用Westernblot法分析胆汁与血清泡蛋白的同源性,根据ELISAkit测定泡蛋白的含量分布,并以ROC曲线判别ELISAkit的临床应用价值。结果:化学分析泡蛋白由多肽和寡糖组成,其中多肽分子量约为21u,糖链约占总蛋白含量的37.3%,为核心岩藻糖丰富的多天线复杂型聚糖。泡蛋白具胆汁与血清分布两相性,胆固醇性结石组胆囊胆汁和血清33.5u泡蛋白含量分别为(213.4±70.1)μg/ml、(179.8±97.9)μg/ml,明显高于胆色素性结石症组和正常对照组(P<0.05),而后两者间差异无显著性(P>0.05)。ELISAkit判断胆固醇性结石的胆汁相敏感度和特异度分别为85%和90%,而血清相为61.7%和93.3%。结论:胆汁泡蛋白是一种新认识的胆结石促成核因子,其在不同人群中具有表达谱的异质性,ELISAkit辅助诊断胆石症具有一定的临床应用价值,但尚需更多病例的积累和验证。 展开更多
关键词 糖蛋白 泡蛋白 免疫吸附测定(elisa) ROC曲线
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采供血机构应用ELISA法筛查梅毒的必要性
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作者 陈颖 林洪铿 +2 位作者 林海娟 林豪 郑莹 《海峡预防医学杂志》 CAS 2005年第3期56-57,共2页
[目的]探讨无偿献血模式下梅毒抗体筛查方法的选择。[方法]比较福州市13248名无偿献血者梅毒ELISA(双抗原夹心)法与TRUST法的检测结果,并与TPPA结果对照。[结果]梅毒抗体阳性97例,其中TRUST法检出率0.23%(31例),ELISA法0.68%(90例)。[结... [目的]探讨无偿献血模式下梅毒抗体筛查方法的选择。[方法]比较福州市13248名无偿献血者梅毒ELISA(双抗原夹心)法与TRUST法的检测结果,并与TPPA结果对照。[结果]梅毒抗体阳性97例,其中TRUST法检出率0.23%(31例),ELISA法0.68%(90例)。[结论]TRUST法检出率低于ELISA法,无法满足安全血液的要求,不宜作为无偿献血常规筛查方法。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体抗体(TP-Ab) 免疫吸附测定(elisa) TPPA 疾病控制
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ELISA检查HCV-Ab(IgG)复检结果的分析及其灰区的确定
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作者 张波 董莉 《内蒙古医学院学报》 2006年第6期582-583,共2页
关键词 免疫吸附测定(elisa) 丙型肝炎病毒抗体(HCV—Ab) S/Co比值
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牦牛肉品质相关的去饱和脂肪酶1基因表达差异分析 被引量:3
11
作者 谢凤莲 孙万成 罗毅皓 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第5期1-5,共5页
检测牦牛组织中去饱和脂肪酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)基因表达量,分别选择1月份、4月份、9月份年龄相近,取其肝脏、肾脏、结肠、背最长肌4个组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymer... 检测牦牛组织中去饱和脂肪酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)基因表达量,分别选择1月份、4月份、9月份年龄相近,取其肝脏、肾脏、结肠、背最长肌4个组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)技术和酶联免疫反应测定牦牛不同组织中SCD1的表达量和含量。结果表明:以肝脏为对照组,SCD1基因在牦牛肝脏、肾脏、结肠、背最长肌4个组织中均有表达,且SCD1基因表达量和蛋白含量均在牦牛背最长肌中最高,差异显著(P<0.05)。不同月份间,1月份牦牛SCD1基因表达量和蛋白含量都低于9月份和4月份。说明SCD1基因在牦牛不同组织均有表达,且在寒冷季节表达量较低。 展开更多
关键词 牦牛肉 去饱和脂肪1 实时定量聚合链式反应(RT-PCR) 免疫吸附测定(elisa) 表达量
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果蔬和谷物制品中多菌灵的免疫检测 被引量:4
12
作者 柳双 谢春花 +2 位作者 王敏思 张志军 宋洋 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第6期35-40,61,共7页
基于多菌灵多克隆抗体,建立快速、高效、灵敏的直接竞争酶联免疫吸附测定(CD-ELISA)方法检测果蔬和谷物中的多菌灵残留,对反应条件进行优化,绘制CD-ELISA标准曲线.以橙子、橙汁、黄瓜、小麦和香菇为检测材料,经酸化乙腈(醋酸和乙腈体积... 基于多菌灵多克隆抗体,建立快速、高效、灵敏的直接竞争酶联免疫吸附测定(CD-ELISA)方法检测果蔬和谷物中的多菌灵残留,对反应条件进行优化,绘制CD-ELISA标准曲线.以橙子、橙汁、黄瓜、小麦和香菇为检测材料,经酸化乙腈(醋酸和乙腈体积比为1∶99)提取,提取液用PBSB缓冲液稀释20倍即可用于CD-ELISA方法检测.分别利用CD-ELISA法和高效液相色谱法对香菇和小麦进行检测,比较二者的检测结果.利用CD-ELISA法对橙子、橙汁、黄瓜、小麦和香菇的30个样品进行多菌灵残留检测.结果表明:优化反应条件并消除基质影响后,CD-ELISA校正曲线的检测限为(0.30±0.15)μg/L,灵敏度为(2.70±0.30)μg/L.采用有机试剂提取和PSA净化的简单前处理后,用CD-ELISA法检测5种果蔬和谷物样品中的多菌灵含量,其添加回收率为84.3%~112.7%,变异系数小于12.3%.CD-ELISA法对香菇和小麦的多菌灵检测结果与高效液相色谱法的检测结果呈线性正相关,相关系数为0.993 3.30个样品CD-ELISA检测结果显示,多菌灵检出率为30%,超标率为3.33%.这些结果表明,构建的CD-ELISA法具有较高的灵敏度、精密度及准确度,可以作为快速检测食品中多菌灵残留的方法. 展开更多
关键词 免疫吸附测定(elisa) 多菌灵 免疫检测
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饲料中喹乙醇残留的免疫快速检测 被引量:1
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作者 王敏思 朱文博 +2 位作者 柳双 张志军 宋洋 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第4期59-63,共5页
基于间接竞争酶联免疫吸附测定(ic-ELISA)方法,建立了一种快捷、灵敏、准确的检测饲料中喹乙醇残留的方法.结果显示:以猪饲料、鸡饲料、鱼饲料为样品原材料,最佳反应条件下得到的标准曲线检测限为(0.6±0.2)μg/L,灵敏度为(3.2±... 基于间接竞争酶联免疫吸附测定(ic-ELISA)方法,建立了一种快捷、灵敏、准确的检测饲料中喹乙醇残留的方法.结果显示:以猪饲料、鸡饲料、鱼饲料为样品原材料,最佳反应条件下得到的标准曲线检测限为(0.6±0.2)μg/L,灵敏度为(3.2±0.3)μg/L,在0.9~8.0μg/L质量浓度范围内线性良好.3种饲料样品中的喹乙醇在低、中、高3个加标浓度水平下的添加回收率为88.7%~100.0%,变异系数为2.3%~11.1%,其结果与高效液相色谱法(HPLC)一致;市售18个饲料样品中,喹乙醇的检出率为50.0%.利用HPLC法对ic-ELISA的结果进行验证,结果一致. 展开更多
关键词 饲料 喹乙醇(OLA) 免疫吸附测定(elisa) 快速检测
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食用菌中硫酸链霉素残留的免疫快速检测
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作者 柳双 王敏思 +3 位作者 谢春花 周永斌 柳桃 宋洋 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2020年第14期163-168,共6页
研究基于间接竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法,建立一种快捷、灵敏、准确的检测食用菌中硫酸链霉素残留的方法。以杏鲍菇、双孢菇、香菇等食用菌为样品原材料,采用磷酸钠缓冲液(phosphate buffered ... 研究基于间接竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法,建立一种快捷、灵敏、准确的检测食用菌中硫酸链霉素残留的方法。以杏鲍菇、双孢菇、香菇等食用菌为样品原材料,采用磷酸钠缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)提取和5%三氯乙酸净化的简单前处理方法即可基本消除基质影响。得到的校正曲线检测限为:(0.2±0.05)μg/L,灵敏度为:(0.87±0.15)μg/L;5种食用菌样品中的硫酸链霉素的添加回收率为:88.5%~99.5%,变异系数小于7.7%,其结果与高效液相色谱串联质谱法(high performance liquid chromatography-mass spect-rometry,HPLC-MS)一致。 展开更多
关键词 食用菌 硫酸链霉素(STR) 免疫吸附测定(elisa) 抗生素 快速检测
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牛奶和婴儿配方奶粉中三聚氰胺筛选和定量方法的验证及测定效果(一)
15
作者 Petra Lutter Marie Claude +2 位作者 Savoy Perroud 季昀 庞学燕 《中国乳业》 2012年第4期44-46,共3页
近年来在中国发生了向宠物食物和婴儿配方奶粉中添加三聚氰胺这种富含氮的极性化合物的事件。这些事件促使了分析多种食品和原料中三聚氰胺及相关化合物的分析方法的建立。从高度精密的色谱质谱联用仪到选择性免疫试验,这些方法的建立... 近年来在中国发生了向宠物食物和婴儿配方奶粉中添加三聚氰胺这种富含氮的极性化合物的事件。这些事件促使了分析多种食品和原料中三聚氰胺及相关化合物的分析方法的建立。从高度精密的色谱质谱联用仪到选择性免疫试验,这些方法的建立主要集中在筛选和定量2个目的上。本问主要研究了2种筛选方法和2种定量方法。筛选方法是酶联免疫吸附测定(ELISA)和液相色谱法联合紫外线(HPLC-UV)检测,而定量方法是气相色谱质谱联用(GC-MS)和液相层析串联质谱(LC-MS/MS)分析技术。本文的试验得到了4种方法的效果和测定数据以及以国内和欧洲的测定效果为体系的结果,这些方法有助于牛奶及以牛奶为原料的婴儿配方奶粉中三聚氰胺及相关化合物的测定。 展开更多
关键词 三聚氰胺 牛奶 免疫吸附测定(elisa) 液相色谱法合紫外线(HPLC-UV) 气相色谱质谱用(GC-MS) 液相层析串质谱(LC-MS/MS)
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玉米赤霉醇人工抗原合成及其多克隆抗体的制备 被引量:17
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作者 刘媛 刘贤进 +4 位作者 余向阳 张存政 陈育如 龚振明 周全 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第1期1-4,共4页
对玉米赤霉醇(ZER)16-OH进行改造,设计合成了模拟玉米赤霉醇特征结构的半抗原——ZER-16-羧丙基丁醚。用混合酸酐法将其与载体蛋白BSA连接,用于免疫新西兰大白兔,制备的抗血清效价达1:102400。基于活性酯法合成的包被抗原建立了CI... 对玉米赤霉醇(ZER)16-OH进行改造,设计合成了模拟玉米赤霉醇特征结构的半抗原——ZER-16-羧丙基丁醚。用混合酸酐法将其与载体蛋白BSA连接,用于免疫新西兰大白兔,制备的抗血清效价达1:102400。基于活性酯法合成的包被抗原建立了CI-ELISA检测方法,该法对玉米赤霉醇检测的线性范围为18.39~1744.70ng/mL,检出限为8.61ng/mL。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 人工抗原 多克隆抗体 免疫吸附测定(elisa)
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转基因抗虫玉米Bt蛋白表达量的研究 被引量:19
17
作者 李葱葱 刘娜 +3 位作者 康岭生 王丹 赵洪锟 张明 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期40-41,共2页
应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测转基因抗虫玉米不同生长期不同部位的Bt蛋白表达量。结果显示:Bt毒蛋白在玉米乳熟末期的第15叶中表达量(0.225%)最高,在花粉中表达量(0.011%)最低。叶、茎、髓、花丝、穗轴及粒的Bt蛋白含量及比... 应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测转基因抗虫玉米不同生长期不同部位的Bt蛋白表达量。结果显示:Bt毒蛋白在玉米乳熟末期的第15叶中表达量(0.225%)最高,在花粉中表达量(0.011%)最低。叶、茎、髓、花丝、穗轴及粒的Bt蛋白含量及比例随着作物的生长呈上升的趋势。Bt毒蛋白最低检出量为0.5ng/mL。 展开更多
关键词 免疫吸附测定法(elisa) 转基因抗虫玉米 BT毒蛋白
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抗异丙隆多克隆抗体的研制 被引量:9
18
作者 李方实 孙峰 +1 位作者 刘贤进 崔恒华 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期298-303,共6页
【目的】为了建立测定脲类除草剂异丙隆残留的免疫分析方法(ELISA),对制备高效价抗异丙隆多克隆抗体的方法进行了研究。【方法】以对异丙基苯基异氰酸酯、N-甲基吡咯环酮和N-甲基己内酰胺为反应原料,经两步化学反应合成了两种异丙隆半抗... 【目的】为了建立测定脲类除草剂异丙隆残留的免疫分析方法(ELISA),对制备高效价抗异丙隆多克隆抗体的方法进行了研究。【方法】以对异丙基苯基异氰酸酯、N-甲基吡咯环酮和N-甲基己内酰胺为反应原料,经两步化学反应合成了两种异丙隆半抗原:1-(3-丙基羧基)-3-(4-异丙基苯基)-1-甲基脲(HAPTEN 4C)和1-(5-戊基羧基)-3-(4-异丙基苯基)-1-甲基脲(HAPTEN 6C)。通过活性酯法将半抗原与载体蛋白(BSA、OVA)偶联制备了两种异丙隆的人工抗原HAPTEN 6C-BSA和HAPTEN 4C-OVA。利用免疫抗原HAPTEN 6C-BSA免疫新西兰大白兔获得了高效价的异丙隆的多克隆抗体。建立了以HAPTEN 4C-OVA为包被原的间接竞争ELISA方法。【结果】合成的半抗原经薄层色谱、IR、1HNMR确证;人工抗原HAPTEN 6C-BSA和HAPTEN 4C-OVA的结合比分别为46﹕1和36﹕1。抗血清的最高效价为1.6×105。经优化确定的间接竞争ELISA分析方法中包被抗原的浓度为0.1μg.ml-1,抗血清的工作稀释倍数为1.0×105。根据异丙隆的标准抑制曲线,异丙隆对免疫反应的的IC50值为0.07μg.ml-1。抗体对氯溴隆、绿谷隆、特丁塞隆等6种取代脲类除草剂的交叉反应率都小于0.1%。【结论】异丙隆是小分子,本身没有免疫活性,也没有与载体蛋白偶联的活性基团。高效价、高特异性抗体的制备是利用免疫学方法进行异丙隆残留分析的最关键因素。本研究合成的两种异丙隆的相似物具有不同长度碳链的羧基,并且使异丙基和苯基充分暴露,具备了异丙隆半抗原的特点。将半抗原偶联到载体蛋白上获得的人工抗原经免疫兔子后获得了高效价、高特异性的抗异丙隆抗体。 展开更多
关键词 异丙隆 半抗原 人工抗原 多克隆抗体 免疫吸附测定(elisa)
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人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:7
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作者 赵寿经 侯春喜 +2 位作者 钱延春 徐立新 孙莉丽 《吉林大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期245-248,共4页
用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)反应合成了交联抗原GRb1-BSA(GRb1与BSA的结合比为10:1)和GRb1—OVA(GRb1与OVA的结合比为8:1)。以GRb1—BSA为免疫原,分5次免疫3只BAuyC小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓... 用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)反应合成了交联抗原GRb1-BSA(GRb1与BSA的结合比为10:1)和GRb1—OVA(GRb1与OVA的结合比为8:1)。以GRb1—BSA为免疫原,分5次免疫3只BAuyC小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,Hat筛选,有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA(酶联免疫吸附测定)间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1:16000,并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系,分别命名为1F7和1G3,单抗检测显示在0.01~1μg/mL呈线性关系,GRb1的检测范围达50~350ng/mL,两株单抗针对相同的抗原决定簇,制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。 展开更多
关键词 生物化学工程 单克隆抗体 人参皂苷RB1 免疫吸附测定(elisa)
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高血压合并肾损害患者血清抗β1和α1受体自身抗体与血清肌酐水平的相互性分析 被引量:6
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作者 赵林双 廖玉华 +5 位作者 王敏 向光大 周子华 候洁 乐岭 蒋文 《高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期549-551,共3页
目的探讨高血压合并肾损害患者血清β1肾上腺素受体(β1受体)和α1胆碱能受体(α1受体)自身抗体与血清肌酐水平的关系。方法以合成的α1受体和β1受体多肽片段为抗原,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测了118例(高血压并肾损害60例,... 目的探讨高血压合并肾损害患者血清β1肾上腺素受体(β1受体)和α1胆碱能受体(α1受体)自身抗体与血清肌酐水平的关系。方法以合成的α1受体和β1受体多肽片段为抗原,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测了118例(高血压并肾损害60例,高血压无肾损害58例,正常对照40例)。结果高血压病并肾损害组抗β1和α1受体自身抗体阳性率分别为(67·9%、46·4%)明显高于高血压无肾损害组的19%和20·7%及正常对照组17·5%和15%(P<0·01)。结论抗G-蛋白偶联型受体自身抗体可能与高血压合并肾损害有关,与血清肌酐水平有关。 展开更多
关键词 高血压合并肾损害 受体 自身抗体 高血压病 血清肌酐 Α1受体 肾损害 免疫吸附测定(elisa) 水平 患者
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