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酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B对肺癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响
1
作者 王嘉琪 鄢文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期1212-1217,共6页
目的探究酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine⁃rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肺癌(lung cancer,LC)中的作用机制。方法利用TCGA公共数据库,分析肺癌组织中ANP32B的表达情况。通过Kaplan⁃Meier Plotter生物信息数据库,... 目的探究酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine⁃rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肺癌(lung cancer,LC)中的作用机制。方法利用TCGA公共数据库,分析肺癌组织中ANP32B的表达情况。通过Kaplan⁃Meier Plotter生物信息数据库,检索分析ANP32B表达与患者预后的关系。通过体外细胞实验检测ANP32B在肺癌细胞及正常肺上皮细胞的表达差距。在肺癌细胞系中沉默ANP32B的表达水平,利用平板克隆实验计数细胞克隆团数目,利用划痕实验观察伤口愈合情况。Western blot检测ANP32B对通路蛋白的影响。结果通过TCGA数据库分析发现ANP32B在肺癌组织中表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);通过Kaplan⁃Meier Plotter生物信息数据库发现ANP32B高表达的肺癌患者的总体生存期(overall survival,OS)较短(P<0.001)。通过体外细胞实验证明ANP32B在肺癌细胞的表达量高于正常肺上皮细胞。沉默ANP32B后,肺癌细胞增殖较对照组明显减慢(P<0.01),迁移能力明显下降(P<0.001)。ANP32B沉默后,凋亡相关蛋白Cleaved⁃Caspase3明显下调。结论ANP32B在肺癌组织及肺癌细胞系中高表达。沉默ANP32B表达水平后,可明显抑制A549细胞增殖、迁移。ANP32B可能抑制A549细胞的凋亡。 展开更多
关键词 酸性亮氨酸核磷酸蛋白32b 肺癌 细胞凋亡
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酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B在肝癌组织表达增强并促进肝癌细胞生长的研究 被引量：2
2
作者 朱迪 朱晓娜 +3 位作者 杨烁 何平 沈少明 余韵 《诊断学理论与实践》 2019年第2期170-176,共7页
目的 :检测酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肝细胞肝癌组织中的表达水平,并探讨其在肝癌细胞生长中的作用。方法:利用国际权威公共数据库,分析肝细胞肝癌组织中ANP32B mRNA的表达及... 目的 :检测酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肝细胞肝癌组织中的表达水平,并探讨其在肝癌细胞生长中的作用。方法:利用国际权威公共数据库,分析肝细胞肝癌组织中ANP32B mRNA的表达及其与患者生存期间的关系;用蛋白免疫印迹法检测患者肝癌组织样本和敲除ANP32B的肝癌细胞系中的ANP32B蛋白表达水平;并用RNA干扰技术在肝癌细胞系中沉默ANP32B的表达,通过计数检测细胞生长及克隆形成,用流式细胞仪检测其细胞周期和细胞凋亡。结果:通过数据库及肝癌组织样本分析发现,肝癌组织中的ANP32B mRNA表达值(9.763±0.04)相较于癌旁组织(9.293±0.03)明显升高,蛋白表达升高1.78倍,且ANP32B高表达的肝癌患者与ANP32B低表达的患者相比,5年总生存率明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。体外实验发现,2组敲除ANP32B的肝癌细胞和对照组肝癌细胞相比,细胞生长速度明显减慢(29.9×10~5比23.2×10~5,15.5×10~5),克隆形成数目减少(300个比146个比135个),细胞周期发生S期阻滞(47.9%比61.5%比57.1%),细胞凋亡数略有增加(1.8%比7.3%比4.9%)。结论:ANP32B在肝癌组织中高表达,在肝癌细胞系中沉默ANP32B表达后可明显抑制细胞生长,细胞周期发生阻滞,细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 酸性亮氨酸核磷酸蛋白32b 肝癌 细胞生长
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酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B促肿瘤机制的体外研究
3
作者 朱晓娜 杨烁 +3 位作者 何平 张辉林 冯茹 余韵 《诊断学理论与实践》 2018年第2期186-190,共5页
目的:探讨酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)促进肿瘤发生、发展的分子机制,为其可能作为治疗靶点提供理论依据。方法:利用免疫沉淀联合质谱技术寻找和验证ANP32B相互作用蛋白;免疫荧光... 目的:探讨酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)促进肿瘤发生、发展的分子机制,为其可能作为治疗靶点提供理论依据。方法:利用免疫沉淀联合质谱技术寻找和验证ANP32B相互作用蛋白;免疫荧光技术检测ANP32B和核浆转运蛋白α6(karyopherinα6,KPNA6)在细胞内的定位;采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)沉默KPNA6的表达;行GST-pulldown实验明确ANP32B与KPNA6直接结合及相互作用的区域。结果:通过免疫沉淀和质谱鉴定发现,ANP32B与KPNA6间存在相互作用,两者的结合不依赖ANP32B N端1~161氨基酸序列。体外GST-pulldown实验证实,KPNA6与ANP32B间存在直接的相互作用,且两者结合依赖ANP32B的核定位信号。利用sh RNA抑制KPNA6的表达后,并不影响ANP32B的核内定位。结论:ANP32B通过核定位信号序列与KPNA6结合,两者在细胞核中有明显的共定位,而敲除KPNA6并不影响ANP32B的核内定位。 展开更多
关键词 酸性亮氨酸核磷酸蛋白32b 核浆转运蛋白α6 相互作用 bT549细胞株
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酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A对心肌细胞肥大的影响及机制研究
4
作者 沈立君 黄永平 +2 位作者 祝学勇 刘叶 李红良 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2018年第3期273-277,共5页
目的探讨酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A(Anp32a)对心肌细胞肥大的作用及机制。方法通过挖掘数据库小鼠心脏假手术组及主动脉缩窄手术组芯片数据,进行差异基因分析。选取8~10周龄小鼠,随机分为模型组和假手术组(n=7或8),终末取材... 目的探讨酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A(Anp32a)对心肌细胞肥大的作用及机制。方法通过挖掘数据库小鼠心脏假手术组及主动脉缩窄手术组芯片数据,进行差异基因分析。选取8~10周龄小鼠,随机分为模型组和假手术组(n=7或8),终末取材提取心脏组织RNA检测Anp32amRNA表达水平。构建Anp32a敲低(AdshAnp32a),Anp32a过表达(AdAnp32a)及其相应的对照组AdshRNA,AdGFP腺病毒并转染H9C2心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激H9C2心肌细胞诱导心肌细胞肥大,提取细胞RNA通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测心肌肥厚指标[心房利钠肽(AnP),脑利钠肽(Bnp),β-肌球蛋白重链(β-Mhc)]表达变化,并通过心肌细胞骨架蛋白(α-actinin)的免疫荧光染色观察Anp32a对心肌细胞大小的影响。机制研究方面,通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测Anp32a在调节心肌肥厚过程中涉及的信号通路的变化。结果 Anp32a在心肌肥厚模型中表达下调。AngⅡ刺激细胞,免疫荧光染色检测AdAnp32a组细胞明显较其对照组(AdGFP)减小,而AdshAnp32a组心肌细胞与其对照组(AdshRNA)相比显著增大。qPCR检测显示AdAnp32a组心肌肥厚基因(Anp、Bnp、β-Mhc)的mRNA表达降低,而AdshAnp32a组表达则相反。Western blot检测发现Anp32a能够抑制AngII诱导的Akt蛋白磷酸化水平的升高。结论 Anp32a通过AKT信号通路抑制心肌细胞肥大,可作为防治心肌肥厚及心力衰竭的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 心血管病学 酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A 心肌肥厚 信号转导
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抗MCV抗体与RANKL、OPG、TRACP-5b及RA疾病活动度的相关性研究 被引量：3
5
作者 邓皓莹 文振华 +1 位作者 凌青 李敬扬 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期713-716,共4页
目的探索类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者抗突变型瓜氨酸波形蛋白(mutant citrulline vimentin,MCV)抗体与骨代谢标志物及疾病活动度之间的关系。方法收集119例RA患者临床资料和血清,检测抗MCV抗体及RANKL、OPG和TRACP-5b等... 目的探索类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者抗突变型瓜氨酸波形蛋白(mutant citrulline vimentin,MCV)抗体与骨代谢标志物及疾病活动度之间的关系。方法收集119例RA患者临床资料和血清,检测抗MCV抗体及RANKL、OPG和TRACP-5b等骨代谢标志物,分析抗MCV抗体与骨代谢标志物之间的相关性,并探索抗MCV抗体与疾病活动是否有关联。结果RA患者抗MCV抗体滴度与RANKL、TRACP-5b水平及RANKL/OPG均无显著相关性(P>0.05),与OPG呈正相关但相关系数低(r=0.183,P<0.05)。②抗MCV抗体与DAS28(r=0.376,P<0.01)、ESR(r=0.440,P<0.01)、RF-IgM(r=0.376,P<0.01)呈正相关。结论抗MCV抗体与血清中骨代谢相关标志物TRACP-5b、RANKL、OPG、RANKL/OPG均无显著相关性,提示抗MCV抗体可能不直接通过影响骨代谢参与RA骨侵蚀进展。抗MCV抗体与疾病活动度呈正相关,提示它对RA病情评估可能有一定的价值。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 抗突变型瓜氨酸波形蛋白 核因子Κb受体活化因子配体 骨保护素 抗酒石酸酸性磷酸酶5b
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