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电泳法检测肝和血清中醇脱氢酶同工酶
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作者 宓庆梅 曹鲁宁 高春芳 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第8期1175-1177,共3页
目的:建立琼脂糖凝胶电泳法检测人血清醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase isoenzymes ADH EC 1.1.1.1)同工酶。方法:采用自制琼脂糖凝胶板,摸索实验条件,在pH8.6,74mmol/L巴比妥电泳缓冲系统中进行20mA、20min电泳,可清晰地分离出ADH同工... 目的:建立琼脂糖凝胶电泳法检测人血清醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase isoenzymes ADH EC 1.1.1.1)同工酶。方法:采用自制琼脂糖凝胶板,摸索实验条件,在pH8.6,74mmol/L巴比妥电泳缓冲系统中进行20mA、20min电泳,可清晰地分离出ADH同工酶三条区带。结果:检测了67例患者血清ADH总活性0.013-0.021Kat/L,同工酶ADHⅠ占ADH总活性0.0l-0.30,ADHⅡ占ADH总活性0.12-0.31,ADHⅢ占ADH总活性0.39-0.80。检测了10例人健康肝组织匀浆的ADH总活性为0.136-0.196Kat/L,同工酶ADHⅠ占总活性的0.07-0.25,同工酶ADHⅡ占总活性的0.19-0.27和同工酶ADHⅢ占总活性0.56-0.73。结论:正常人血清中ADH酶活性很低,为0-1.8×10^(-3)Kat/L,其同工酶不易被检测出。而肝脏组织中含有大量ADH酶活性,当肝脏受到严重损伤时,ADH即从肝细胞内逸出,进入血液,使血清中ADH酶活性明显升高,同时通过琼脂糖电泳对其同工酶的检测可测出三条区带,帮助临床进一步了解肝细胞损伤程度,对患者预后和病程的监测具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 电泳法 检测 醇脱氢酶同工酶 血清醇脱氢酶同工酶 肝细胞损伤
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血液中一种新的“濒亡标志物”(醇脱氢酶同工酶)的鉴定 被引量:3
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作者 宓庆梅 于嘉屏 王爱华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期203-205,共3页
目的 鉴定血清乳酸脱氢酶 (LD)同工酶检测中出现的第 6条带“LD6”的蛋白质性质。方法 用琼脂糖凝胶电泳分离、提纯“LD6” ,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测“LD6”相对分子质量 ,免疫转移印迹法鉴定人血清中“LD6”抗原性。结果 测定人血... 目的 鉴定血清乳酸脱氢酶 (LD)同工酶检测中出现的第 6条带“LD6”的蛋白质性质。方法 用琼脂糖凝胶电泳分离、提纯“LD6” ,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测“LD6”相对分子质量 ,免疫转移印迹法鉴定人血清中“LD6”抗原性。结果 测定人血清LD同工酶时出现的第 6条带“LD6”为醇脱氢酶 (alcoholdehydrogenase ,AD)同工酶 ,相对分子质量为 80 0 0 0 ,用western免疫固定转印法鉴定核实。正常人肝组织匀浆、肝癌组织匀浆作琼脂糖凝胶电泳分离、提纯“LD6” ,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,表明肝组织匀浆、肝癌组织匀浆的“LD6”与血清“LD6”为同一物质。 1 0 0例患者有 37例血清含有AD ,其中 34例AD活性≥LD总活性7.9% ,病人 1周内死亡 ,死亡率达 91 .9%。结论 正常人血清内不易检测出AD活性 ,而正常肝组织内有强的AD Ⅱ活性。当肝脏受到严重损害时 ,AD从肝细胞内逸出 ,释放入血 ,导致血清AD活性明显升高。血清中AD活性上升可能是一种新的“濒亡标志物”。 展开更多
关键词 濒亡标志物 血液 醇脱氢酶同工酶 乳酸同工 电泳 免疫印迹
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血液“濒亡标志物”醇脱氢酶同工酶的鉴定
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作者 宓庆梅 于嘉屏 《解放军检验医学杂志》 2002年第1期41-43,共3页
目的 鉴定血清乳酸脱氢酶(LDH;EC1.1.1.27)同工酶检测中出现的第6条带“LDH6”蛋白性质,探讨其活性升高时的临床意义。方法 将正常人肝组织匀浆,肝癌组织匀浆与血清作琼脂糖凝胶电泳分离,提纯“LDH6”,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其... 目的 鉴定血清乳酸脱氢酶(LDH;EC1.1.1.27)同工酶检测中出现的第6条带“LDH6”蛋白性质,探讨其活性升高时的临床意义。方法 将正常人肝组织匀浆,肝癌组织匀浆与血清作琼脂糖凝胶电泳分离,提纯“LDH6”,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其相对分子质量。再经免疫印迹验证其抗原性。并检测37例患者中LDH6活性占LDH总活性有百分比。结果 肝级织匀浆,肝癌组织匀浆的“LDH6”与血清“LDH6”为同一物质,为醇脱氢酶同工酶Ⅱ(alcohol edhydro-genase,LDH:EC1.1.1.1),相对分子质量为80kD,34例ADH活性≥LDH总活性7.9%的病人一周内即死亡,死亡率达91.9%(34/37)。结论 LDH6即为ADH,ADH活性在血清中上升可能是一种新的“濒亡标志物”。 展开更多
关键词 ADH活性 死亡 血液 “濒亡标志物” 醇脱氢酶同工酶 鉴定
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