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里氏木霉RutC-30产纤维素酶条件优化研究 被引量：2
1
作者 安莉颖 施思 +1 位作者 谭德勇 伍红 《安徽农业科学》 CAS 2012年第8期4818-4820,共3页
[目的]优化里氏木霉RutC-30产纤维素酶的液体发酵条件。[方法]以里氏木霉RutC-30为出发菌株,通过单因素试验研究培养基不同氮源(硫酸铵、尿素、蛋白胨)及浓度、不同碳源(纤维素、乳糖、甘油、葡萄糖)及浓度和不同的初始pH(3.0、4.0、5.0... [目的]优化里氏木霉RutC-30产纤维素酶的液体发酵条件。[方法]以里氏木霉RutC-30为出发菌株,通过单因素试验研究培养基不同氮源(硫酸铵、尿素、蛋白胨)及浓度、不同碳源(纤维素、乳糖、甘油、葡萄糖)及浓度和不同的初始pH(3.0、4.0、5.0、6.0、7.0)对产酶的影响,在此基础上选取氮源、碳源和pH为影响因子采用正交试验探讨里氏木霉RutC-30产纤维素酶的优化条件。[结果]正交试验分析表明,各因素对产酶影响顺序依次为碳源>氮源>pH,里氏木霉RutC-30产纤维素酶的最佳条件是:以1%纤维素为碳源、以0.5%蛋白胨为氮源,初始pH值为4.0,在30℃产酶发酵培养5 d,纤维素酶活力高达7.303 U。[结论]里氏木霉RutC-30经优化培养后,产酶能力可得到大幅度提高,具有潜在的工业应用价值。 展开更多
关键词 里氏木霉rutc-30 纤维素酶 正交试验 培养条件优化
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里氏木霉RutC-30β-甘露聚糖酶的制备与纯化方法的研究 被引量：7
2
作者 王和平 范文斌 +2 位作者 张七斤 王龙 郭绥芝 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第3期44-48,共5页
里氏木霉以槐豆胶为基础培养基、以乳糖为诱导物,用7.5升液态发酵罐发酵产生β-甘露聚糖酶,经两次硫酸铵分级分离(饱和度为40％～60％)和两次聚丙烯酰胺凝胶制备电泳,结果得到高纯度均一的单体β-甘露聚糖酶,经SDS-PAGE测得酶分子量为53... 里氏木霉以槐豆胶为基础培养基、以乳糖为诱导物,用7.5升液态发酵罐发酵产生β-甘露聚糖酶,经两次硫酸铵分级分离(饱和度为40％～60％)和两次聚丙烯酰胺凝胶制备电泳,结果得到高纯度均一的单体β-甘露聚糖酶,经SDS-PAGE测得酶分子量为53KD,比活力为100u/mg,这为β-甘露聚糖酶单克隆抗体的制备提供了高纯度的样品。 展开更多
关键词 里氏木霉 RutC^30β-甘露聚糖酶 制备技术 纯化方法 酶分子量 组织活动力
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响应面法优化里氏木霉Rut C-30产纤维素酶液体培养基 被引量：20
3
作者 李勇昊 姜永生 +3 位作者 周长海 顾芮萌 孙文良 田朝光 《中国酿造》 CAS 2012年第4期29-32,共4页
该试验在单因素对里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30产纤维素酶的液体培养基优化的基础上,以滤纸酶活为响应值,采用响应面法确定其最佳培养基。首先通过Plackett-Burman(PB)设计筛选出影响滤纸酶活的显著因素,结晶纤维素和麸皮;通... 该试验在单因素对里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30产纤维素酶的液体培养基优化的基础上,以滤纸酶活为响应值,采用响应面法确定其最佳培养基。首先通过Plackett-Burman(PB)设计筛选出影响滤纸酶活的显著因素,结晶纤维素和麸皮;通过最陡爬坡试验逼近最大酶活力区域;最后通过Central Composite Design(CCD)设计及响应面分析确定产酶最佳培养基,其中影响酶活的显著性因素结晶纤维素41.8g,麸皮19.1g。经过优化,滤纸酶活力最高为8.21U/mL,比单因素优化结果7.03U/mL提高了16.78%,同时测得CMC酶活为63.64IU/mL,木聚糖酶活为27.4IU/mL,葡萄糖苷酶酶活0.96IU/mL。 展开更多
关键词 纤维素酶 里氏木霉rutc-30 液体发酵 响应面法 滤纸酶活
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对里氏木霉Rut C-30所产非淀粉多糖酶系的分析 被引量：4
4
作者 程池 乐易林 +2 位作者 熊涛 姚粟 曾哲灵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期64-67,共4页
通过里氏木霉RutC 3 0以稻草和麸皮为基质进行固态发酵 ,对其产生的非淀粉多糖酶(NSP酶 )进行分析 ,试验表明里氏木霉RutC 3 0产生的NSP酶系较全 ,分别有纤维素酶、木聚糖酶、β 葡聚糖酶、β 甘露聚糖酶、果胶酶等 5种不同的NSP酶。并... 通过里氏木霉RutC 3 0以稻草和麸皮为基质进行固态发酵 ,对其产生的非淀粉多糖酶(NSP酶 )进行分析 ,试验表明里氏木霉RutC 3 0产生的NSP酶系较全 ,分别有纤维素酶、木聚糖酶、β 葡聚糖酶、β 甘露聚糖酶、果胶酶等 5种不同的NSP酶。并探讨了不同碳源及添加不同底物诱导物对里氏木霉RutC 3 展开更多
关键词 里氏木霉rutc-30 非淀粉多糖酶系 稻草 固态发酵 碳源 底物诱导物 产酶种类
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里氏木霉Rut—30产纤维素酶发酵条件的优化 被引量：14
5
作者 杜先林 李辉 +2 位作者 王义强 陈介南 张伟涛 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期112-119,共8页
采用单因素试验、正交试验设计对产纤维素酶的里氏木霉RutC—30菌株进行了液体摇瓶发酵条件优化实验。结果表明,在pH为4.8、每50 mL发酵液接种2.5 mL菌种时,里氏木霉RutC—30菌株产酶发酵最优培养条件是:工业纤维素30 g/L、(NH4)2SO412 ... 采用单因素试验、正交试验设计对产纤维素酶的里氏木霉RutC—30菌株进行了液体摇瓶发酵条件优化实验。结果表明,在pH为4.8、每50 mL发酵液接种2.5 mL菌种时,里氏木霉RutC—30菌株产酶发酵最优培养条件是:工业纤维素30 g/L、(NH4)2SO412 g/L、Mandels营养盐浓缩液125 mL/L。在此条件下,发酵产生的纤维素酶滤纸酶活达到4.845 U.m L-1,相对于微晶纤维素碳源提高了49.6%。同时,在本实验中还发现里氏木霉RutC—30菌株的生长与产酶存在着偶联性。通过优化实验,里氏木霉RutC—30菌株达到了比较高的产纤维素酶能力,为纤维素酶进一步工业化生产奠定了一定基础。 展开更多
关键词 纤维素酶 里氏木霉Rut—30 发酵优化 滤纸酶活 正交实验设计
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里氏木霉Rut-C30β-甘露聚糖酶基因表达载体的构建
6
作者 文静 王和平 +1 位作者 鄂迎春 周平 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第4期55-59,共5页
　将含有β-甘露聚糖酶基因的重组质粒pGEM-ManΙ经EcoRΙ、绿豆芽核酸酶、HindⅢ酶切处理和纯化后,与含有Ω序列和T7启动子以及信号肽OmpT序列的分泌型表达载体pTOO2连接,将质粒pGEM-ManΙ中的β-甘露聚糖酶基因连接在pTOO2质粒信号肽O... 　将含有β-甘露聚糖酶基因的重组质粒pGEM-ManΙ经EcoRΙ、绿豆芽核酸酶、HindⅢ酶切处理和纯化后,与含有Ω序列和T7启动子以及信号肽OmpT序列的分泌型表达载体pTOO2连接,将质粒pGEM-ManΙ中的β-甘露聚糖酶基因连接在pTOO2质粒信号肽OmpT之后,构建成表达载体pTOO2-ManΙ。将表达载体pTOO2-ManΙ转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,克隆转化子,pCR测序,结果获得了β-甘露聚糖酶编码的成熟肽cDNA,其序列与GeneBank报道完全一样。并从该克隆转化的大肠杆菌的周质中检测到了β-甘露聚糖酶的活性同时,证明β-甘露聚糖酶基因在分泌型过程中得到正确加工。 展开更多
关键词 里氏木霉 Rut-C30β-甘露聚糖酶 基因表达 载体构建 猪 饲料利用率
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里氏木霉Rut-C30发酵热水预处理稻草产纤维素酶 被引量：4
7
作者 苏存生 贺建龙 +3 位作者 熊鹏 岳春 于凤川 孙付保 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期14-22,共9页
为提高工业生产菌Trichoderma reesei Rut-C30产酶能力,以热水预处理稻草(hot water pretreated rice straw,HWPRS)为碳源,开展系统优化培养基与培养条件以及采用添加剂等方面的实验工作。菌株初始摇瓶发酵HWPR产纤维素酶在168 h时滤纸... 为提高工业生产菌Trichoderma reesei Rut-C30产酶能力,以热水预处理稻草(hot water pretreated rice straw,HWPRS)为碳源,开展系统优化培养基与培养条件以及采用添加剂等方面的实验工作。菌株初始摇瓶发酵HWPR产纤维素酶在168 h时滤纸酶活(FPA)为1.20 U/m L。通过单因素实验与正交实验,获得最佳培养基(g/L):HWPRS 50.0、玉米浆6.0、(NH_4)_2SO_44.0、KH_2PO_41.0、尿素0.2、MgSO_4·7H_2O 0.4、CaCl_20.3;最佳培养条件:pH6.0、转速220 r/min、温度30℃、接种量φ6%;优化后菌株产酶FPA达2.69 U/m L,是优化前2倍以上。添加吐温-80能显著提高产酶,β-葡萄糖苷酶活(BG)提高26%;添加乳糖主要能提高BG酶活;实验中首次发现壳聚糖类物质能促进纤维素酶发酵,其中壳聚糖效果最明显,添加1.5 g/L壳聚糖时纤维素酶FPA与BG分别提高了10%和30%,使纤维素酶FPA、CMCase和BG分别达到3.67、8.65和1.76 U/m L。该产酶稳定性为上罐实验证实,所产纤维素酶FPA水平是初始摇瓶发酵的3倍,初步显示了其工业发酵潜力。 展开更多
关键词 热水预处理稻草 里氏木霉Rut-C30 纤维素酶 发酵优化 壳聚糖
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里氏木霉以稻草和麸皮为基质产木聚糖酶的研究 被引量：2
8
作者 熊涛 乐易林 +1 位作者 程池 曾哲灵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期141-143,共3页
以稻草和麸皮为主要基质,对里氏木霉RutC-30产木聚糖酶的固体发酵条件进行研究。试验表明:固态发酵培养基中添加麸皮不利于产木聚糖酶,最适氮源为(NH4)2SO4,干料与水分的比例为1∶3·5,并分析了无机盐对里氏木霉RutC-30产木聚糖酶... 以稻草和麸皮为主要基质,对里氏木霉RutC-30产木聚糖酶的固体发酵条件进行研究。试验表明:固态发酵培养基中添加麸皮不利于产木聚糖酶,最适氮源为(NH4)2SO4,干料与水分的比例为1∶3·5,并分析了无机盐对里氏木霉RutC-30产木聚糖酶的影响:MgSO4·7H2O>MnSO4·H2O>ZnSO4·H2O>FeSO4·7H2O。酶粗酶液的最适作用pH为4·8,最适反应温度为55℃。 展开更多
关键词 里氏木霉Rut C-30 固态发酵 木聚糖酶 里氏木霉 麸皮 基质 稻草 (NH4)2SO4 发酵培养基
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