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原核表达牦牛朊蛋白的纯化及其活性测定 被引量:5
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作者 伍志伟 吴润 +1 位作者 刘湘涛 陈豪泰 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第2期133-137,共5页
以原核表达的GST-BoPrP(23~242)融合蛋白为抗原,免疫BALB/C小鼠,制备抗牦牛朊蛋白的特异性抗血清。经Western blotting和间接ELISA鉴定,该抗血清可与牦牛重组成熟PrP(23~242)和牛脑组织提取物发生反应,蛋白酶K消化各抗原可消除免疫反... 以原核表达的GST-BoPrP(23~242)融合蛋白为抗原,免疫BALB/C小鼠,制备抗牦牛朊蛋白的特异性抗血清。经Western blotting和间接ELISA鉴定,该抗血清可与牦牛重组成熟PrP(23~242)和牛脑组织提取物发生反应,蛋白酶K消化各抗原可消除免疫反应,但不与GST蛋白和E.coli BL21(DE3)的菌体蛋白发生反应,表明该抗血清为抗牦牛重组成熟PrP(23~242)的抗血清,其效价高达1∶12800,并能识别黄牛脑组织中的天然朊蛋白。原核表达的GST-BoPrP(23~242)融合蛋白能有效地刺激免疫动物产生PrP特异性抗体,所制备的抗血清可适用于天然朊蛋白的检测。 展开更多
关键词 牦牛 重组成熟朊蛋白 纯化 活性测定 抗血清 原核表达 疯牛病
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