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旋毛虫编码新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白对小鼠的免疫保护性研究 被引量：11
1
作者 原丽红 付宝权 +8 位作者 刘明远 张亚兰 高飞 吴秀萍 李莲瑞 林本夫 卢强 陈启军 P.Boireau 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期221-224,共4页
目的　探讨旋毛虫编码新生幼虫p4 6kDa抗原基因重组融合蛋白WN10对小鼠的免疫保护性。 方法　将纯化的重组融合蛋白WN10以 2 0 μg/只的剂量分 3次免疫小鼠后 ,攻击感染旋毛虫肌幼虫 2 0 0条 /只 ,检查旋毛虫 7日龄成虫数、雌虫体外产... 目的　探讨旋毛虫编码新生幼虫p4 6kDa抗原基因重组融合蛋白WN10对小鼠的免疫保护性。 方法　将纯化的重组融合蛋白WN10以 2 0 μg/只的剂量分 3次免疫小鼠后 ,攻击感染旋毛虫肌幼虫 2 0 0条 /只 ,检查旋毛虫 7日龄成虫数、雌虫体外产生新生幼虫数、感染 35d的肌幼虫数并计算减虫率 ,同时用ELISA法检测血清中抗WN10抗体IgG滴度。结果　WN10免疫小鼠后获得旋毛虫 7日龄成虫、肌幼虫的减虫率分别为 6 4 .2 8%和 6 1.2 1% ,均与感染对照组和佐剂对照组差异显著 ;获得雌虫产新生幼虫的减虫率为 16 .4 6 % ,与感染对照组和佐剂对照组差异不显著 ;WN10免疫组小鼠在第 3次免疫后 1周可检测到高滴度的抗WN10抗体IgG ,在攻击感染旋毛虫 9周后仍维持在较高水平。 结论　编码旋毛虫新生幼虫 p4 展开更多
关键词 旋毛虫 新生幼虫 p46 kDa抗原基因 重组融合蛋白 保护性免疫
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重组融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表达及鉴定 被引量：10
2
作者 曹珊珊 吴开春 +4 位作者 颜真 万一 韩宇 赵丽娜 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期360-362,共3页
目的构建胃癌新生血管导向性肽GX1与新型人肿瘤坏死因子(GX1-rmhTNF)基因的原核表达载体,表达GX1-rmhTNF蛋白。方法利用基因工程方法将胃癌血管特异性结合肽融合在新型人肿瘤坏死因子α的氨基末端,构建GX1-rmhTNF原核表达载体,在大肠杆... 目的构建胃癌新生血管导向性肽GX1与新型人肿瘤坏死因子(GX1-rmhTNF)基因的原核表达载体,表达GX1-rmhTNF蛋白。方法利用基因工程方法将胃癌血管特异性结合肽融合在新型人肿瘤坏死因子α的氨基末端,构建GX1-rmhTNF原核表达载体,在大肠杆菌进行表达。对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Westernblot检测分析。结果成功构建了GX1-rmhTNF重组融合表达质粒,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在相对分子质量(Mr)约18000处出现了1条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TNFα单克隆抗体特异性的结合能力。结论成功构建了GX1-rmhT-NF基因的原核表达载体并在原核细胞中表达了该产物,为下一步GX1-rmhTNF的纯化奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体肽段CGNSNPKSC/GX1 GX1-rmhTNFα 重组融合蛋白/表达 温度诱导
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鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原的制备及其免疫保护效果的研究 被引量：5
3
作者 王栋 黄顺军 +5 位作者 邢丽 郭习勤 韩岳 罗德炎 李敏 王希良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期287-291,共5页
为制备鼠疫耶尔森氏菌F1-V重组融合蛋白抗原,观察其免疫原性和免疫保护效果,通过疏水层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原.用氢氧化铝凝胶吸附制备试验性鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原,皮下接种健康BALB/c小鼠,... 为制备鼠疫耶尔森氏菌F1-V重组融合蛋白抗原,观察其免疫原性和免疫保护效果,通过疏水层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原.用氢氧化铝凝胶吸附制备试验性鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原,皮下接种健康BALB/c小鼠,ELISA检测血清F1-V抗体效价、MTT法测定淋巴细胞增殖能力,进一步用400LD50鼠疫耶尔森氏菌141标准毒株皮下攻毒,观察动物的存活情况.通过三步柱层析纯化获得的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原纯度达到90%以上.氢氧化铝凝胶吸附的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原免疫BALB/c小鼠三次,血清抗F1-V抗体效价为1∶(51200±800),对耶尔森氏菌141强毒株攻击的保护率是90%.上述结果表明,制备的鼠疫F1-V重组融合蛋白抗原具有良好的免疫原性和免疫保护效果,为研制鼠疫F1-V重组融合蛋白疫苗奠定了基础. 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 F1-V重组融合蛋白抗原 免疫保护效果
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免疫瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白对SD大鼠脂肪沉积的影响 被引量：2
4
作者 刘闻 吴丽红 +4 位作者 徐名衬 郭日红 顾为望 施振旦 袁进 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期832-837,共6页
目的原核表达瘦素受体（OBR）近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验，观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响。方法设计1对带有BamHI和Hindlll酶切位点特异性引物，扩增OBR胞外近跨膜区基因片段（1705～2364bp），经酶切后连接到表达载体pR... 目的原核表达瘦素受体（OBR）近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验，观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响。方法设计1对带有BamHI和Hindlll酶切位点特异性引物，扩增OBR胞外近跨膜区基因片段（1705～2364bp），经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamHI和HindⅢ两酶切位点之间，构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E．coli BL21（DE3）中表达，SDS．PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物。随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠，观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响。结果SDS．PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示，在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27600左右的融合蛋白。对SD大鼠免疫0BR胞外近跨膜区重组融合蛋白后，体质量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异，而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小。结论成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白，免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积。 展开更多
关键词 瘦素受体 原核表达 重组融合蛋白 脂肪沉积
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分泌型ICOS-mIg重组融合蛋白定量检测方法的建立和应用 被引量：5
5
作者 王健 沈茜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期646-649,共4页
目的: 建立双抗体夹心ELISA法,定量检测重组可诱导共刺激分子(ICOS)-mIg融合蛋白的分泌型表达,并对其灵敏度、特异性及线性检测范围进行评价.方法: 用分子生物学技术制备重组ICOS-mIg融合蛋白.以羊抗小鼠IgG 为包被抗体,HRP标记的马抗小... 目的: 建立双抗体夹心ELISA法,定量检测重组可诱导共刺激分子(ICOS)-mIg融合蛋白的分泌型表达,并对其灵敏度、特异性及线性检测范围进行评价.方法: 用分子生物学技术制备重组ICOS-mIg融合蛋白.以羊抗小鼠IgG 为包被抗体,HRP标记的马抗小鼠IgG为检测抗体,通过配对试验、方阵滴定试验及绘制mIgG浓度与A450值的标准曲线,建立定量检测重组ICOS-mIg融合蛋白的双抗体夹心ELISA法.结果: 建立了双抗体夹心ELISA法,检测的线性范围为7.8～500 μg/L,标准曲线的回归方程为: y=-0.7864+1.1635 log(x),R2=0.9911,P<0.0001.应用该方法可快速检测哺乳动物细胞表达的重组ICOS-mIg融合蛋白的分泌量.结论:建立了一种可快速定量检测重组ICOS-mIg融合蛋白分泌表达的双抗体夹心ELISA法.该法灵敏、准确、快速、实用性好,对优化ICOS-mIg融合蛋白表达细胞的筛选和大规模制备具有重要价值. 展开更多
关键词 重组融合蛋白 ELISA 可诱导共刺激分子 免疫球蛋白恒定片段
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重组融合蛋白 Fab/IFN-αA的表达及其抗乙型肝炎病毒的作用 被引量：2
6
作者 田文 宋少柏 +5 位作者 逯好英 檀华 郑伟 唐云 王琰 余燕星 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期204-206,共3页
关键词 重组融合蛋白质类 Fab/INFαA 乙型肝炎 HBV
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重组融合蛋白Fab/IFNαA体外抗HBV作用的实验研究 被引量：3
7
作者 田文 宋少柏 +5 位作者 逮好英 郑伟 檀华 唐云 王琰 余燕星 《军医进修学院学报》 CAS 2000年第2期141-143,共3页
在体外细胞水平上观察重组融合蛋白 (Fab/IFN αA)对乙型肝炎病毒 (HBV)基因表达的抑制作用。方法 :应用HBVDNA转染细胞系 (HepG2 .2 .15细胞 )作模型 ,通过固相放射免疫方法检测Fab/IFN αA作用后细胞上清液的HBsAg、HBeAg水平的变化 ... 在体外细胞水平上观察重组融合蛋白 (Fab/IFN αA)对乙型肝炎病毒 (HBV)基因表达的抑制作用。方法 :应用HBVDNA转染细胞系 (HepG2 .2 .15细胞 )作模型 ,通过固相放射免疫方法检测Fab/IFN αA作用后细胞上清液的HBsAg、HBeAg水平的变化 ,结合细胞存活率来评价其抗HBV作用 ,并与α 干扰素 (IFN αA)进行比较。结果 :经 12d作用 ,Fab/IFN αA在细胞存活率、对HBsAg、HBeAg抑制率均优于IFN αA ,尤其在 2 5 0 0～5 0 0 0IU/ml浓度下 ,其细胞存活率为 82 .41%～ 83.19% ,HBsAg抑制率 5 5 .5 5 %～ 6 8.18% ,HBeAg抑制率 45 .0 7%～ 48.5 5 % ,而相应浓度IFN αA的HBsAg、HBeAg抑制率均低于Fab/IFN αA (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论 :具有抗体的导向作用和IFN的抗病毒作用的Fab/IFN αA体外抗HBV作用优于IFN αA ,为进一步研制抗乙型病毒性肝炎的生物导向治疗的基因工程多肽类药物提供了依据。 展开更多
关键词 抗HBV作用 乙型肝炎 重组融合蛋白 Fab/IFN-αA
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重组融合蛋白Tumstatin-TNF-α分泌型真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达 被引量：2
8
作者 赵亮 姚丽娟 +4 位作者 孔建新 濮跃晨 孙安源 罗以勤 张林杰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第4期357-361,共5页
目的构建重组融合蛋白Tumstatin-TNF-α的分泌型真核表达载体并检测其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中的稳定表达。方法以人胚肾293细胞为材料,提取总RNA,用RT-PCR方法合成人tumstatin cDNA,将该cDNA克隆到pGEM-T载体获得重组质粒pGEM-T/t... 目的构建重组融合蛋白Tumstatin-TNF-α的分泌型真核表达载体并检测其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中的稳定表达。方法以人胚肾293细胞为材料,提取总RNA,用RT-PCR方法合成人tumstatin cDNA,将该cDNA克隆到pGEM-T载体获得重组质粒pGEM-T/tumstatin。利用PCR从pGEM-T/tumstatin和PBV220-TNF-α载体中分别扩增出sig-tumstatin-linker和linker-TNF片段,将其克隆得到sig-tumstatin-linker-TNF片段,sig-tumstatin-linker-TNF片段经酶切后,插入经同样酶切pIRESneo3质粒,利用克隆PCR、限制性内切酶消化以及序列测定对获得的sig-tumstatin-linker-TNF基因片段及重组载体进行验证。将重组sig-tumstatin-linker-TNF真核表达载体转染到CHO-K1对其表达状况进行检测。结果所获得的sig-tumstatin-linker-TNF片段(1.32kb)序列与报道的序列完全一致。酶切鉴定的结果表明含肿瘤抑素基因的重组pIRESneo3/sig-tumstatin-linker-TNF表达载体构建成功。转染重组pIRESneo3/sig-tumstatin-linker-TNF的CHO-K1表达了肿瘤抑素融合蛋白tumstatin-linker-TNF。从生长曲线结果来看,转染pIRESneo3/sig-tumstatin-linker-TNF真核表达载体和转染pIRESneo3的CHO-K1比未转染的CHO-K1细胞的生长速度要慢。结论成功地构建了重组人肿瘤抑素融合蛋白的真核表达载体,并获得能稳定表达人肿瘤抑素融合蛋白的CHO-K1。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子α 重组融合蛋白质类 遗传载体 真核细胞
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日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关的重组融合蛋白(rSj338/26GST)的免疫原性鉴定 被引量：1
9
作者 李春玲 胡雪梅 +3 位作者 张兆松 季旻珺 苏川 吴海玮 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第3期184-187,共4页
目的　鉴定纯化的重组日本血吸虫线粒体相关融合蛋白 (r Sj3 3 8/2 6GST)的免疫原性。方法　对已构建的阳性表达菌 p GEX-6p-1/Sj3 3 8进行大量诱导表达 ,并对纯化蛋白进行活性分析。将粗提包涵体蛋白、复性包涵体蛋白、经分子筛纯化并... 目的　鉴定纯化的重组日本血吸虫线粒体相关融合蛋白 (r Sj3 3 8/2 6GST)的免疫原性。方法　对已构建的阳性表达菌 p GEX-6p-1/Sj3 3 8进行大量诱导表达 ,并对纯化蛋白进行活性分析。将粗提包涵体蛋白、复性包涵体蛋白、经分子筛纯化并复性的蛋白分别免疫新西兰家兔 2只。用 West-ern blot及 Dot-EL ISA方法检测特异性抗体的免疫原性及各组抗体水平。结果　用分子筛纯化的融合蛋白 r Sj3 3 8/2 6GST经 SDS-PAGE电泳鉴定显示达电泳纯 ;Western blot显示纯化蛋白能够被日本血吸虫重感染兔血清及 r Sj3 3 8/2 6GST免疫兔血清识别。Dot-ELISA法检测结果表明 ,经分子筛纯化并复性的 r Sj3 3 8/2 6GST融合蛋白免疫兔血清中特异性抗体的滴度最高 ,为 1∶ 5 12 0 0。结论　纯化后的融合蛋白 r Sj3 3 8/2 6GST具有较高的纯度及较强的免疫活性 ,可望作为日本血吸虫病疫苗候选分子 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 线粒体 重组融合蛋白 rSj338/26GST 重组抗原 免疫原性
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梅毒螺旋体重组融合蛋白的表达及免疫特性 被引量：1
10
作者 韩雪 屈晓展 +3 位作者 崔勇青 胡子颖 郑义 孔令保 《南昌大学学报（理科版）》 CAS 北大核心 2017年第6期572-575,580,共5页
表达纯化梅毒螺旋体重组融合蛋白,研究其抗原性和免疫原性,为梅毒诊断试剂和疫苗研究提供新候选抗原。合成梅毒螺旋体重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965基因,转入大肠杆菌中进行表达;镍柱纯化重组融合蛋白,western blot鉴定;以重组融合蛋... 表达纯化梅毒螺旋体重组融合蛋白,研究其抗原性和免疫原性,为梅毒诊断试剂和疫苗研究提供新候选抗原。合成梅毒螺旋体重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965基因,转入大肠杆菌中进行表达;镍柱纯化重组融合蛋白,western blot鉴定;以重组融合蛋白作为抗原,酶联免疫法(ELISA)检测人血清样本,分析其抗原性;利用该重组融合蛋白免疫新西兰兔,ELISA检测兔血清抗体滴度水平,评价其免疫原性。梅毒重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965在工程菌中成功表达,分子量为50kD。重组融合蛋白可被梅毒抗体阳性的血清识别,梅毒阴性血清与蛋白无反应。使用重组融合蛋白作为抗原检测人血清梅毒抗体,梅毒患者样本组与非梅毒患者样本组的检测结果存在非常显著性差异。重组融合蛋白免疫兔后,兔血清中可持续检测到高滴度梅毒抗体。梅毒重组融合蛋白Tp0453-TpF1-Tp0965有良好的抗原性和免疫原性,可作为梅毒诊断试剂抗原和梅毒疫苗的候选蛋白。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 重组融合蛋白 表达 抗原性 免疫原性
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主动免疫猪活化素重组融合蛋白疫苗对巴马小型猪生长性能的影响研究
11
作者 冯雪萍 兰干球 +5 位作者 郭亚芬 陈江伟 阮志华 易德桥 范晶 李柏 《广西农业科学》 CAS CSCD 2009年第7期906-910,共5页
以含有巴马小型猪活化素成熟肽基因的重组质粒pRSETA-ACTA和pRSETA-ACTB的重组融合蛋白疫苗,对60日龄的巴马小型猪进行免疫,以探讨活化素免疫调控动物生长性能的作用机理。结果表明:主动免疫重组融合蛋白疫苗ACTA对巴马小型猪的日增重... 以含有巴马小型猪活化素成熟肽基因的重组质粒pRSETA-ACTA和pRSETA-ACTB的重组融合蛋白疫苗,对60日龄的巴马小型猪进行免疫,以探讨活化素免疫调控动物生长性能的作用机理。结果表明:主动免疫重组融合蛋白疫苗ACTA对巴马小型猪的日增重无显著影响(P>0.05);而主动免疫重组融合蛋白疫苗ACTB后1～28d、29～56d、1～56d,试验组日增重比对照组分别提高了5.3%(P>0.05)、17.4%(P<0.05)和14.2%(P<0.05)。ELISA检测结果发现,试验猪主动免疫ACTA或ACTB重组融合蛋白疫苗后均能显著产生抗活化素抗体(P<0.05);主动免疫ACTB重组融合蛋白疫苗极显著地提高了血清中卵泡抑制素(FS)的浓度(P<0.01)。可见,该研究制备的ACTB重组融合蛋白疫苗可有效促进巴马小型生长猪的生长、提高血清中FS的浓度。 展开更多
关键词 活化素 重组融合蛋白 巴马小型猪 主动免疫 生长性能
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基因重组融合蛋白hNPY对小鼠前脂肪细胞增殖和分化影响的实验研究
12
作者 丁克祥 董萍 +7 位作者 刘敏 杨永鹏 胡平安 丁宇 韩晋云 徐钢 尹晴 丁振华 《国际老年医学杂志》 2011年第6期241-250,共10页
目的：前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞，如能找到可促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物，并在脂肪组织移植的同时使用，则有希望提高脂肪组织的移植效果，本实验探索一种新的人体肥胖关联基因和外... 目的：前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞，如能找到可促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物，并在脂肪组织移植的同时使用，则有希望提高脂肪组织的移植效果，本实验探索一种新的人体肥胖关联基因和外周脂肪细胞激动剂一基因重组融合蛋白hNPY对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响及其分子调控机制。方法：采用基因工程技术设计hNPY基因上下游序列，经过PCR反应合成hNPY的cDNA后与pET28a＋载体重组，再将已构建好、并经测序确认无误的重组质粒pET28a—NPY转导至大肠杆菌BL21（DE3），再由IPTG诱导表达hNPY融合蛋白、并进行纯化；然后，将体外培养的小鼠3T3-L1前脂肪细胞经由3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松进行联合诱导；诱导2d后，再将此细胞分为三组，即空白对照组（未加任何诱导剂组）、经典诱导组（胰岛素诱导）和实验干预组（hNPY融合蛋白干预），其中，实验干预组再按照hNPY融合蛋白浓度不同又分为高、中、低三个浓度组（10^-8mol／L、10^-19mol／L和10^-9 mol／L）。分别于细胞培养的第7d和第12d用相差显微镜观察各组细胞的形态学变化，再于细胞培养的第12d用油红O染色观察脂肪细胞的分化程度；同时，采用MTT法检测该细胞的增殖状况；采用Westernblot法检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体-γ（PPAR-γ）、CAAT／增强子结合蛋白-a（C／EBP-a）蛋白的表达水平。结果：低浓度（10^-10 mol／L）的hNPY融合蛋白，无明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的作用效果；中浓度（10^-9 mol／L）的hNPY融合蛋白，可有效促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖及细胞数量增多；而高浓度（10^-8 mol／L）的hNPY融合蛋白，不仅能明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞的细胞增殖和分化，且能显著提高该细胞C／EBPa和PPARγ的表达水平、而明显降低INSIG-2的表达。结论：高浓度（10^-8mol／L）的基因重组融合蛋白hNPY能够明显促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化，其促进3T3-L1细胞增殖和分化的分子调控机制很可能与上调PPARγ、C／EBPa表达和降低INSIG-2表达水平有关，这提示：hNPY作为脂肪细胞膜上受体NPYR的有效促进剂或激动剂，未来很可能成为人体外周脂肪细胞一个新的作用靶点。 展开更多
关键词 基因重组融合蛋白 人神经肽 脂肪细胞激动剂 3T3-L1细胞 增殖 分化
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基因重组融合蛋白的纯化
13
作者 余顺惠 《重庆三峡学院学报》 2005年第3期96-97,共2页
本文论述了基因重组融合蛋白纯化过程和存在的问题。
关键词 基因重组融合蛋白 纯化 问题
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重组融合蛋白TGFα－PE40的分离纯化和热稳定性研究 被引量：1
14
作者 沈敏慧 徐亚男 +1 位作者 张红宇 徐永华 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第7期41-45,共5页
报告了重组融合蛋白ＴＧＦα－ＰＥ４０的分离纯化方法及稳定性研究。采用对原生质体进行超声破碎，抽得纯度为８０％的包涵体。包涵体用８Ｍ尿素变性后，再对ｐＨ９．０的缓冲液进行透析复性，最后经过ＭｏｎｏＱ柱及Ｓｕｐｅｒｄｅｘ... 报告了重组融合蛋白ＴＧＦα－ＰＥ４０的分离纯化方法及稳定性研究。采用对原生质体进行超声破碎，抽得纯度为８０％的包涵体。包涵体用８Ｍ尿素变性后，再对ｐＨ９．０的缓冲液进行透析复性，最后经过ＭｏｎｏＱ柱及Ｓｕｐｅｒｄｅｘ－７５柱进行分离，可得到纯度为９８％的高活性ＴＧＦα－ＰＥ４０。经稳定性测试，纯化的ＴＧＦα－ＰＥ４０在４℃中可存放半年以上，并在５０℃以下活力稳定。 展开更多
关键词 蛋白 重组融合蛋白 分离纯化 热稳定性
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梅毒螺旋体Tp0453-Tp0257重组融合蛋白的表达及作为梅毒诊断候选抗原的初步研究 被引量：2
15
作者 郭龙华 彭小丽 +2 位作者 伍晓飞 吴文权 刘梦琼 《湖北科技学院学报（医学版）》 2016年第2期140-142,F0003,共4页
目的本研究旨在探讨梅毒螺旋体Tp0453-Tp0257重组融合蛋白检测梅毒感染的可能性。方法用基因合成的方法构建重组p ET-28a-Tp0453-Tp0257质粒,重组融合蛋白的鉴定用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,重组融合蛋白作为抗原用于ELISA实验,... 目的本研究旨在探讨梅毒螺旋体Tp0453-Tp0257重组融合蛋白检测梅毒感染的可能性。方法用基因合成的方法构建重组p ET-28a-Tp0453-Tp0257质粒,重组融合蛋白的鉴定用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,重组融合蛋白作为抗原用于ELISA实验,该蛋白的灵敏度用来自一期、二期、三期和隐性梅毒患者的血清(90例)进行评估,其特异性用正常体检者的血清(120例)评估。结果 Western Blot分析证实了Tp0453-Tp0257重组融合蛋白能与梅毒阳性血清反应。该蛋白对梅毒诊断的总灵敏度为97.8%、总特异性为100.0%。结论本实验Tp0453-Tp0257重组融合蛋白作为新的梅毒特异诊断的候选抗原,取得较好的实验效果,有望进入临床推广使用。 展开更多
关键词 梅毒 TP0453 Tp0257 重组融合蛋白 酶联免疫吸附试验(ELISA)
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包含艰难梭菌毒素A和B非毒性域及鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白的重组融合蛋白疫苗
16
作者 卓晓琴 《微生物学免疫学进展》 2014年第3期43-43,共1页
艰难梭菌是一种芽胞杆菌，可产生毒素介导性疾病。艰难梭菌表达2种主要毒力因子，即毒素A（TcdA）和毒素B（TcdB）。在人类和动物研究中结果表明，人类抗这些毒素的免疫力与抗艰难梭菌感染（CDI）明确相关，已知TcdA和TcdB的受体结合域... 艰难梭菌是一种芽胞杆菌，可产生毒素介导性疾病。艰难梭菌表达2种主要毒力因子，即毒素A（TcdA）和毒素B（TcdB）。在人类和动物研究中结果表明，人类抗这些毒素的免疫力与抗艰难梭菌感染（CDI）明确相关，已知TcdA和TcdB的受体结合域（RBDs）是具免疫原性的。在本项研究中， 展开更多
关键词 艰难梭菌 重组融合蛋白 鼠伤寒沙门菌 毒素 鞭毛蛋白 疫苗 毒性 芽胞杆菌
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采用重组融合蛋白和合成肽测定戊型肝炎
17
作者 李军 《传染病信息》 1994年第3期121-121,共1页
来自于戊型肝炎病毒(HEV)开读框架2和3的重组抗原在大肠杆菌中表达为胞苷单磷酸盐-2-酮-3-deoxyctulosonit酸合成酶融合蛋白、经提纯产生ELA,用于检测抗体。在使用该CKS/HEVELA法对Somalia HEV暴发中检测的102份标本进行检测时,该法在... 来自于戊型肝炎病毒(HEV)开读框架2和3的重组抗原在大肠杆菌中表达为胞苷单磷酸盐-2-酮-3-deoxyctulosonit酸合成酶融合蛋白、经提纯产生ELA,用于检测抗体。在使用该CKS/HEVELA法对Somalia HEV暴发中检测的102份标本进行检测时,该法在先前有阳性反应的97份标本中全部检出抗HEV。 展开更多
关键词 戊型肝炎 合成肽 重组融合蛋白 重组抗原 斑点试验 阳性反应 胞苷 急性病例 丙型肝炎 合成肤
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重组融合蛋白Atacicept
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作者 巫凤娟 杨臻峥 《药学进展》 CAS 2009年第8期382-383,共2页
关键词 ATACICEPT 重组融合蛋白 抗肿瘤作用 自身免疫性疾病
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接种重组融合蛋白后对犬钩口线虫栖息地选择的影响
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作者 邱宗文 《国外医学（寄生虫病分册）》 2003年第4期190-191,共2页
关键词 犬钩口线虫 栖息地选择 重组融合蛋白 抗体 动物实验
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重组结核杆菌融合蛋白在肺结核密切接触者中筛查结核分枝杆菌感染效果分析
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作者 徐春华 朱士玉 +7 位作者 胡屹 易可华 宋灿磊 王紫纯 邬勇 王青 杨芊茹 沈鑫 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期897-902,共6页
目的:探讨重组结核杆菌融合蛋白(recombinant mycobacterium tuberculosis fusion protein,EC)皮肤试验在筛查肺结核患者密切接触者结核分枝杆菌感染中的实用性和有效性,为进一步优化结核感染检测提供技术建议,了解密切接触者结核分枝... 目的:探讨重组结核杆菌融合蛋白(recombinant mycobacterium tuberculosis fusion protein,EC)皮肤试验在筛查肺结核患者密切接触者结核分枝杆菌感染中的实用性和有效性,为进一步优化结核感染检测提供技术建议,了解密切接触者结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)现状。方法:2023年10月23日至11月14日在上海市奉贤区和金山区共选取140名肺结核密切接触者作为研究对象,对每名研究对象同时采用γ-干扰素释放试验(IGRA)和EC皮肤试验进行结核感染检测,采用Kappa值检验两种方法结果一致性,采用χ^(2)检验比较两组检测方法之间的差异,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:140名研究对象,包括男性55例,女性85例;IGRA阳性率为15.00%(21/140),EC皮肤试验阳性率为14.29%(20/140),两种试验方法一致性检验Kappa值为0.857,差异无统计学意义(χ^(2)=0.029,P=0.866),两种检测方法检测结果为高度一致性;以IGRA作为结核感染的参考标准,EC皮肤试验的敏感度为85.71%(18/21)、特异度为98.32%(117/119)、阳性预测值为90.00%(18/20)、阴性预测值为97.50%(117/120);男性EC阳性率(32.73%,18/55)明显高于女性(2.35%,2/85),差异有统计学意义(χ^(2)=17.983,P<0.001)。结论:EC皮肤试验具有较强的特异性,可用于肺结核密切接触者结核分枝杆菌感染筛查,但受限于使用年龄和接种禁忌证,可采用IGRA对无法进行EC皮肤试验者进行补充检测。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 接触者追踪 分枝杆菌感染 重组结核杆菌融合蛋白
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