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姜半夏乙醇提取物对人胃腺癌SGC7901细胞内pH值的影响 被引量:18
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作者 张慈安 武峰 +3 位作者 毛竹君 魏振 李勇进 魏品康 《中西医结合学报》 CAS 2011年第8期894-900,共7页
目的:观察姜半夏乙醇提取物对人胃腺癌SGC7901细胞内pH值的影响。方法:不同浓度姜半夏乙醇提取物(终浓度分别为1、0.5、0.25、0.125mg/mL)处理SGC7901细胞后,通过甲基噻唑基四唑(3-(4,5-di methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium... 目的:观察姜半夏乙醇提取物对人胃腺癌SGC7901细胞内pH值的影响。方法:不同浓度姜半夏乙醇提取物(终浓度分别为1、0.5、0.25、0.125mg/mL)处理SGC7901细胞后,通过甲基噻唑基四唑(3-(4,5-di methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法检测细胞增殖状况,使用2,7-双(2-羧基乙基)-5(6)-羧基荧光素四(丙酰甲酯)(2,7-bis-(2-carboxyethyl)-5-carboxyfluorescein-acetoxymethyl,BCECF-AM)荧光探针检测细胞内pH值,pH计测定胞外培养基的pH值;采用荧光定量聚合酶链反应技术检测药物干预细胞72h后细胞钠氢交换蛋白1(Na+/H+exchangerisoform1,NHE1)和空泡质子转运ATP酶(vacuolar-H+-ATPase,V-ATPase)基因的表达水平。结果:不同浓度姜半夏乙醇提取物均能不同程度地抑制人胃癌SGC7901细胞的增殖,降低细胞内pH值,提高细胞外培养基pH值。0.5mg/mL姜半夏乙醇提取物可下调SGC7901细胞V-ATPase和NHE1mRNA的表达。结论:姜半夏乙醇提取物具有降低SGC7901细胞内pH值的作用,其机制可能与抑制细胞V-ATPase和NHE1mRNA表达有关。 展开更多
关键词 中草药 半夏 胃肿瘤 细胞内PH值 钠氢反向转运物 空泡质子转运ATP酶 细胞系 肿瘤
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Cariporide对肿瘤细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响 被引量:4
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作者 李庆华 庞天翔 +5 位作者 马丽 李彬 芦颖 李洪强 茹永新 袁文肃 《天津医药》 CAS 北大核心 2007年第11期837-839,共3页
目的:探讨特异性抑制剂Cariporide通过抑制钠氢离子交换蛋白1(NHE1)功能而阻止肿瘤细胞增殖的机制。方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Cariporide对细胞增殖的抑制率,共聚焦荧光显微镜测算双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)... 目的:探讨特异性抑制剂Cariporide通过抑制钠氢离子交换蛋白1(NHE1)功能而阻止肿瘤细胞增殖的机制。方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Cariporide对细胞增殖的抑制率,共聚焦荧光显微镜测算双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)的荧光强度,检验其下调细胞内pH值,ELISA试剂盒测定其对体外培养细胞表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,观测其对动物体内肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果:随着Cariporide的剂量增加或作用时间延长,HeLa细胞内pH值逐渐降低,肿瘤细胞表达VEGF减少。伴随着细胞内pH值降低,VEGF分泌水平逐渐下降,两者之间呈显著相关性(P<0.05)。另外,Cariporide能抑制动物体内的肿瘤增殖。结论:Cariporide能够减少肿瘤细胞表达和分泌VEGF,抑制动物体内肿瘤增殖。 展开更多
关键词 钠氢反向转运物 血管内皮生长因子类 离子浓度 细胞系 肿瘤 肿瘤 细胞增殖
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NHE-1与大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡 被引量:6
3
作者 姚伟 钱桂生 杨晓静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期207-209,共3页
目的 :探讨Na+ /H+ 交换器 - 1(NHE - 1)、细胞内pH对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的作用。方法 :实验分对照组和低氧 3周组 ,大鼠常压低氧 3周后 ,分离肺动脉平滑肌层 ,测定细胞内pH ,并应用RT -PCR技术 ,检测NHE - 1mRNA表达的变化。... 目的 :探讨Na+ /H+ 交换器 - 1(NHE - 1)、细胞内pH对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的作用。方法 :实验分对照组和低氧 3周组 ,大鼠常压低氧 3周后 ,分离肺动脉平滑肌层 ,测定细胞内pH ,并应用RT -PCR技术 ,检测NHE - 1mRNA表达的变化。体外培养肺动脉平滑肌细胞 ,诱导细胞酸化后 ,原位细胞凋亡检测不同浓度及时间NHE - 1特异性抑制剂作用后 ,细胞凋亡率的改变。结果 :低氧组肺动脉平滑肌细胞内pH及NHE - 1mRNA表达均明显高于正常对照组。随药物浓度增加和作用时间延长 ,细胞凋亡率明显增高。结论 :NHE - 1参与调节细胞内pH 。 展开更多
关键词 钠氢反向转运物 肺性高血压 NHE-1 平滑肌细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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靶向人NHE-1RNAi腺病毒表达载体的构建及细胞内酸化模型的建立 被引量:1
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作者 方伯言 黄美风 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2011年第4期434-439,共6页
目的构建靶向人钠氢交换蛋白-1(NHE-1)RNA干扰(RNAi)腺病毒表达载体,感染SH-SY5Y细胞,建立细胞内酸化模型,为进一步研究细胞内pH值变化与散发性阿尔茨海默病间的关系奠定基础。方法利用基因重组技术构建4个含NHE-1前体微小RNA(miRNA)的... 目的构建靶向人钠氢交换蛋白-1(NHE-1)RNA干扰(RNAi)腺病毒表达载体,感染SH-SY5Y细胞,建立细胞内酸化模型,为进一步研究细胞内pH值变化与散发性阿尔茨海默病间的关系奠定基础。方法利用基因重组技术构建4个含NHE-1前体微小RNA(miRNA)的重组干扰质粒pcDNA^(TM)6.2-GW/miR和阴性对照质粒pcDNA6^(TM)6.2-GW/neg-miR,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NHE-1 mRNA表达变化,筛选最佳干扰靶序列;BP和LR重组系统获得腺病毒干扰质粒pAd-miR-NHE-1,经包装、纯化后检测腺病毒滴度;感染复数(MOI)值梯度试验确定靶向人NHE-1 RNAi腺病毒感染SH-SY5Y细胞最佳MOI值,以最佳条件感染SH-SY5Y细胞,荧光探针法检测不同处理组细胞内pH值。结果聚合酶链反应(PCR)提示最佳靶向人NHE-1 RNAi病毒表达载体构建成功,且能有效抑制NHE-1 mRNA表达;靶向人NHE-1 RNAi腺病毒感染SH-SY5Y细胞最佳MOI值为160。当最佳MOI值为160时,NHE-1 miRNA腺病毒感染24、48和72 h后SH-SY5Y细胞内pH值分别为5.97±0.03、5.98±0.02和5.98±0.02;空载体对照组为6.05±0.04、6.04±0.07和6.03±0.05;空白对照组为6.03±0.06、6.05±0.04和6.03±0.04。不同测量时间点,SH-SY5Y细胞内pH值均显著低于空载体对照组和空白对照组,差异具有统计学意义(24 h:p=0.002,0.015;48 h:p=0.030,0.012;72 h:p=0.018,0.010);但感染RNAi腺病毒后不同测量时间点(24、48和72 h)SH-SY5Y细胞内pH值差异无统计学意义(p=0.762)。结论最佳靶向人NHE-1 RNAi腺病毒表达载体及细胞内酸化模型的成功建立,可为探索细胞内酸碱平衡与β-淀粉样蛋白产生之间的关系提供一种有效工具。 展开更多
关键词 钠氢反向转运物 RNA干扰 酸碱平衡 腺病毒科 遗传载体 转染 聚合 酶链反应 细胞 培养的
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Cariporide对兔心房电重构的影响
5
作者 郑良荣 张庆刚 +3 位作者 陈君柱 朱建华 丁亚辉 宋勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期400-401,414,共3页
目的:探讨钠氢交换体Ⅰ型(NHE-1)特异性抑制剂cariporide对快速起搏所致兔心房电重构的影响。方法:30只兔随机等分为3组:对照组、起搏组和cariporide组。起搏组和cariporide组给予6h600beats/min的快速心房起搏。测定各组不同时点的心... 目的:探讨钠氢交换体Ⅰ型(NHE-1)特异性抑制剂cariporide对快速起搏所致兔心房电重构的影响。方法:30只兔随机等分为3组:对照组、起搏组和cariporide组。起搏组和cariporide组给予6h600beats/min的快速心房起搏。测定各组不同时点的心房有效不应期(AERP200,AERP150,AERP130),连续刺激6h后取左右心耳组织,用Western blotting测定NHE-1的含量。结果:在快速起搏后1h后,起搏组的AERP200较起搏前明显缩短,2h时达高峰,相对缩短量为(15·63±9·04)ms,而对照组和cariporide组AERP未发生明显变化,起搏2h时相对缩短量为(1·43±2·44)ms和(1·43±6·90)ms(P<0·05,与起搏组相比),这些变化一直保持至快速起搏后6h;起搏组的AERP频率适应性下降,起搏前AERP130较AERP200缩短(11·88±15·57)ms,起搏后6h只缩短(4·38±5·63)ms。而cariporide组的AERP频率适应性则未发生显著变化。起搏组右心耳组织的NHE-1含量显著少于对照组(P<0·05),cari-poride组的右心耳组织NHE-1含量与对照组差异不显著。结论:Cariporide可有效阻止快速心房起搏引起的AERP缩短,但不影响起搏引起的NHE-1含量的下降。 展开更多
关键词 心房颤动 钠氢反向转运物 CARIPORIDE
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钠氢交换子1在醛固酮导致脏器纤维化中的可能作用
6
作者 张敏敏 陈靖 顾勇 《国际泌尿系统杂志》 2006年第4期523-526,共4页
研究表明醛固酮和脏器纤维化关系密切,而Na+/H+交换子1(NHE1)可能也参与了脏器纤维化的发生,本文就NHE的结构和活性调节、醛固酮的合成和作用机制以及NHE1在醛固酮导致脏器纤维化中可能起到的作用作一综述。
关键词 纤维变性 醛固酮 钠氢反向转运物
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先心病肺高压患者肺组织中NHE-1mRNA的表达变化及其意义 被引量:2
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作者 何红兵 张宝仁 朱家麟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期193-195,共3页
目的 :检测肺组织中钠氢交换体 1型 (NHE- 1) m RNA的表达变化 ,初步探讨引起先天性心脏病 (先心病 )肺动脉高压 (肺高压 )的机制。 方法 :先心病手术病例分为无肺高压组 (12例 ,s PAP<3.99k Pa)和伴肺高压组 (9例 ,s PAP≥ 3.99k Pa... 目的 :检测肺组织中钠氢交换体 1型 (NHE- 1) m RNA的表达变化 ,初步探讨引起先天性心脏病 (先心病 )肺动脉高压 (肺高压 )的机制。 方法 :先心病手术病例分为无肺高压组 (12例 ,s PAP<3.99k Pa)和伴肺高压组 (9例 ,s PAP≥ 3.99k Pa) ,以正常普胸手术病例 (6例 )为对照。标本取自右肺中叶 ,切片 H- E染色作病理检查 ,采用 Northern印迹法检测标本中NHE- 1m RNA的表达。结果 :先心病患者肺组织中 NHE- 1m RNA的表达水平均显著高于对照组 (P<0 .0 1) ,而先心病伴肺高压组又显著高于无肺高压组 (P<0 .0 5 )。结论 :(1) NHE- 1m RNA表达水平增高早于肺动脉压力的变化及肺血管平滑肌的增殖 ;(2 ) NHE- 1m RNA表达水平增高 ,通过蛋白数量的增加来调节工作效率 ,可能是先心病异常的肺血流引起肺小血管中层增厚。 展开更多
关键词 先天性心脏缺损 肺性高血压 钠氢反向转运物 血管平滑肌细胞 血管重建
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心肌钠氢交换体1的结构、调节及其在心肌肥厚中的作用
8
作者 李沙(综述) 吴华君(综述) 宁阳根(审校) 《中国医师杂志》 CAS 2010年第6期861-862,共2页
心肌肥厚是多因素疾病,机械压力刺激及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素1(ET-1)等神经内分泌和细胞因子均可造成心肌肥厚,这些导致心肌肥厚的刺激因素能通过激活细胞内多种信号分子(如丝裂原蛋白激酶家族等)诱导心肌肥厚[1].
关键词 钠氢反向转运物 心肌病 肥厚性 综述
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钠氢交换器-1与缺血缺氧性损伤
9
作者 陈亮(综述) 董文斌(审校) 《国际儿科学杂志》 2009年第1期34-37,共4页
钠氢交换器-1(NHE1)是一种定位于细胞膜上的跨膜转运糖蛋白,能调节细胞内pH值稳定,同时调节细胞容量的重要离子通道。NHE1在体内细胞中广泛分布,对细胞功能发挥重要作用。在机体受到缺血缺氧性损伤时,NHE1在细胞中的活性增强,表... 钠氢交换器-1(NHE1)是一种定位于细胞膜上的跨膜转运糖蛋白,能调节细胞内pH值稳定,同时调节细胞容量的重要离子通道。NHE1在体内细胞中广泛分布,对细胞功能发挥重要作用。在机体受到缺血缺氧性损伤时,NHE1在细胞中的活性增强,表达增加,引起细胞内pH值及Na^+-Ca^+交换等变化,在细胞的增殖、分化、损伤和凋亡中发挥重要作用。 展开更多
关键词 钠氢反向转运物 缺血缺氧 细胞损伤
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