聚丙烯酰胺凝胶快速、高效银染方法的建立 被引量：109

1

作者 梁宏伟 王长忠 +2 位作者 李忠 罗相忠 邹桂伟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1379-1382,共4页

聚丙烯酰胺凝胶电泳目前已经广泛应用在SSR标记、SNP标记以及遗传图谱的构建等过程中,但是一直以来凝胶银染方法由于染色时间长、染色步骤繁琐,使得对于开展大批量的实验研究极为不利。文章通过对常规方法的改良,建立了一个银染步骤只需... 聚丙烯酰胺凝胶电泳目前已经广泛应用在SSR标记、SNP标记以及遗传图谱的构建等过程中,但是一直以来凝胶银染方法由于染色时间长、染色步骤繁琐,使得对于开展大批量的实验研究极为不利。文章通过对常规方法的改良,建立了一个银染步骤只需要10min,整个染胶过程只需约20min的快速、高效的银染方法。 展开更多

关键词 银染方法 DNA 聚丙烯酰胺凝胶

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PAGE凝胶制备方法和银染方法的改进 被引量：17

2

作者 胡建斌 李静 +2 位作者 袁鸣 胡深 李建吾 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期742-745,共4页

PAGE凝胶分析技术已广泛运用于小分子量PCR产物的分离,但因操作环节多、耗时长,不利于大规模分子标记分析工作的开展。对PAGE凝胶的制备和银染方法作些改进,省去常规凝胶制备中亲和硅烷/剥离硅烷处理过程,以及常规银染过程中的固定和定... PAGE凝胶分析技术已广泛运用于小分子量PCR产物的分离,但因操作环节多、耗时长,不利于大规模分子标记分析工作的开展。对PAGE凝胶的制备和银染方法作些改进,省去常规凝胶制备中亲和硅烷/剥离硅烷处理过程,以及常规银染过程中的固定和定影两步骤。与常规方法相比,该方法操作简便、耗时短、带谱的分辨率高,可代替常规方法用于SSR等标记的PCR产物的分离。 展开更多

关键词 聚丙烯酰胺凝胶 制备方法 银染方法 SSR标记

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DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳三种银染方法比较 被引量：14

3

作者 傅占江 刘宝文 +4 位作者 刘体全 谢明 江源 刘晓达 王全立 《临床军医杂志》 CAS 2002年第4期71-73,共3页

目的　探讨DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)三种银染方法的特点及其适用性。方法　采用非变性PAGE垂直板对不同稀释度的 pBR 32 2MspⅠ分子量标准进行电泳分离 ,利用二种硝酸银染色法和一种银氨染色法染色 ,分析其灵敏度和噪声。结果　分... 目的　探讨DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)三种银染方法的特点及其适用性。方法　采用非变性PAGE垂直板对不同稀释度的 pBR 32 2MspⅠ分子量标准进行电泳分离 ,利用二种硝酸银染色法和一种银氨染色法染色 ,分析其灵敏度和噪声。结果　分子量Marker的所有条带都能染出灵敏度均为 2 5ng。在至少一个条带能染出的灵敏度方面 ,银氨染色法 ( 6 .2 5ng)低于其他两种方法。结论　时间方面Carlos等所建立的银染方法最快 ,仅需 2 0min。银氨法的噪声最低 ,结果易于保存。 展开更多

关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染方法 脱氧核糖核酸 硝酸银染色 银氨染色

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DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染方法的探讨 被引量：12

4

作者 李其松 王金玉 +4 位作者 沈华 戴国俊 杨风萍 陈义权 焦彩兰 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2006年第10期79-80,共2页

关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 单链DNA 银染方法 生物大分子结构 聚合酶链反应 种子活力测定 检测灵敏度 蛋白质

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聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染方法 被引量：52

5

作者 石锐 郭长虹 《生物技术》 CAS CSCD 1998年第5期46-48,共3页

The methods of Ultrasensitive silver staining for DNA in Polyacrylamide gels were described. In contrast to traditional radioisotopic methods, these silver -staining protocols are simple, quick and safety. The develop... The methods of Ultrasensitive silver staining for DNA in Polyacrylamide gels were described. In contrast to traditional radioisotopic methods, these silver -staining protocols are simple, quick and safety. The developmpnt and application are reviewed in this paper. 展开更多

关键词 DNA 聚丙烯酰胺凝胶 银染方法

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微量蛋白检测中不同银染方法的比较与分析 被引量：1

6

作者 温秀荣 康现江 +2 位作者 李云峰 韩力强 谢琳 《生物技术通讯》 CAS 2005年第2期163-165,共3页

随着生物化学技术的不断发展,作为检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中微量蛋白的银染方法也在不断改进和发展。采用4种不同的银染方法检测不同含量的牛血清白蛋白,结果显示单纯的银染过程中如果使用戊二醛固定会使蛋白检出更快速灵... 随着生物化学技术的不断发展,作为检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中微量蛋白的银染方法也在不断改进和发展。采用4种不同的银染方法检测不同含量的牛血清白蛋白,结果显示单纯的银染过程中如果使用戊二醛固定会使蛋白检出更快速灵敏,而结合考马斯亮蓝的复合银染则较单纯银染灵敏度提高了5～7个数量级。 展开更多

关键词 微量蛋白 银染方法 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 牛血清白蛋白 含量检测

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PCR－SSCP－银染方法检测肺癌患者支气管活检标本的p53基因突变

7

作者 朱朝晖 李龙芸 +2 位作者 朱元珏 司静懿 李昆 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期168-168,共1页

ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染方法检测肺癌患者支气管活检标本的ｐ５３基因突变朱朝晖，李龙芸，朱元珏，司静懿，李昆ｐ５３基因在小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）和非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的突变频率均很高（４０～１００％），是肺癌发生过... ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染方法检测肺癌患者支气管活检标本的ｐ５３基因突变朱朝晖，李龙芸，朱元珏，司静懿，李昆ｐ５３基因在小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）和非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的突变频率均很高（４０～１００％），是肺癌发生过程中的重要基因。实验已证明，野生型... 展开更多

关键词 P53基因 PCR-SSCP 银染方法 活检标本 肺癌患者 基因突变 非小细胞肺癌 基因治疗 支气管活检 外显子

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研究质膜蛋白质的一种银染方法 被引量：1

8

作者 刘风霞 薛刚 《新疆农业科学》 CAS CSCD 1994年第3期113-114,共2页

研究质膜蛋白质的一种银染方法刘风霞，薛刚（塔里木农垦大学，阿拉尔，８４３３００）有生命的细胞膜具有保持生长发育、运动与信息传递所需离子与代谢物质梯度的能力，而细胞膜中的蛋白质能够控制所需离子与代谢物质的移动。研究质膜... 研究质膜蛋白质的一种银染方法刘风霞，薛刚（塔里木农垦大学，阿拉尔，８４３３００）有生命的细胞膜具有保持生长发育、运动与信息传递所需离子与代谢物质梯度的能力，而细胞膜中的蛋白质能够控制所需离子与代谢物质的移动。研究质膜蛋白质的组成，对了解细胞膜的结构和... 展开更多

关键词 作物 质膜蛋白质 银染方法

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银染mRNA差异显示方法的建立 被引量：8

9

作者 陈晓梨 陈鑫基 +2 位作者 郑静 张昭秀 胡建达 《福建医科大学学报》 2002年第3期247-249,共3页

目的　建立银染 m RNA差异显示方法 ,为差异表达基因片断的分离克隆奠定基础。　方法　采用随机引物和锚定引物各 1条 ,建立差异显示反转录聚合酶链式反应 (DDRT- PCR)和银染方法 ,对 DDRT- PCR过程中各实验影响因素进行优化 ,割取差异... 目的　建立银染 m RNA差异显示方法 ,为差异表达基因片断的分离克隆奠定基础。　方法　采用随机引物和锚定引物各 1条 ,建立差异显示反转录聚合酶链式反应 (DDRT- PCR)和银染方法 ,对 DDRT- PCR过程中各实验影响因素进行优化 ,割取差异条带进行二次扩增。　结果　当总 RNA用量为 0 .2μg,引物浓度为 0 .6～ 1.0μm ol/ L ,d NTP浓度为 2 0 0μmol/ L ,Mg Cl2 浓度为 1.6～ 2 .0 mm ol/ L时 ,同时起始 5个循环的退火温度为 5 0℃ ,扩增效率最佳 ,特异性好 ,背景干净。　结论　 DDRT- PCR方法简便、快捷、灵敏、高效 ,可用于分离差异表达基因。 展开更多

关键词 银染mRNA差异显示方法 基因扩增 差异表达基因 克隆 DDRT-PCR

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银染mRNA差异显示方法的改进与优化 被引量：1

10

作者 杨荣华 黄其林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第14期1393-1394,共2页

目的对银染mRNA差异显示方法进行改进与优化,建立具有良好重复性和稳定性的银染mRNA差异显示新方法。方法通过对银染mRNA差异显示方法中的PCR参数进行优化以及凝胶电泳和加样方式进行改进。结果经改进与优化的银染mRNA差异显示方法具有... 目的对银染mRNA差异显示方法进行改进与优化,建立具有良好重复性和稳定性的银染mRNA差异显示新方法。方法通过对银染mRNA差异显示方法中的PCR参数进行优化以及凝胶电泳和加样方式进行改进。结果经改进与优化的银染mRNA差异显示方法具有良好的重复性、稳定性,差异条带清晰易辨。结论经改进和优化的银染mRNA差异显示方法具有良好的重复性、稳定性,可以代替传统的放射性同位素方法,应用于基因差异表达的研究。 展开更多

关键词 银染mRNA差异显示方法 优化 放射性同位素 基因差异表达 稳定性 重复性 凝胶电泳 PCR

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干旱胁迫下新疆野生沙生冰草的银染mRNA差异显示分析 被引量：3

11

作者 李莉 贾纳提 +1 位作者 朱昊 王希东 《草食家畜》 2010年第4期26-28,32,共4页

运用非同位素银染mRNA差异显示方法,分析新疆野生沙生冰草抗旱基因表达差异。用10%(-1.0Mpa)PEG-6000溶液处理三叶一心期冰草,以叶片mRNA为模板采用锚定引物和随机引物组合,进行反转录差异显示PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后用... 运用非同位素银染mRNA差异显示方法,分析新疆野生沙生冰草抗旱基因表达差异。用10%(-1.0Mpa)PEG-6000溶液处理三叶一心期冰草,以叶片mRNA为模板采用锚定引物和随机引物组合,进行反转录差异显示PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后用银染方法差异显示DNA条带,在直观下,从凝胶中回收差异带并进行再扩增,2%琼脂糖电泳得到了DNA的单一条带。通过分离与冰草抗旱性状相关的基因片段,为进一步从分子水平上认识冰草抗旱机理、进行抗旱相关基因的遗传操作奠定基础。 展开更多

关键词 银染方法 差异显示 锚定引物 MRNA

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用DNA银染法研究传染性软疣病毒的形态发生发育过程 被引量：1

12

作者 李德忠 肖同浩 吴宁 《中国病毒学》 CSCD 1996年第3期214-219,共6页

用ＤＮＡ银染技术显示了传染性软疣病毒（ＭＣＶ）形态发生发育及其过程中ＤＮＡ的变化。结果显示：在被感染的皮肤表皮细胞内都有一个大小及构型不同的银染区（病毒工厂）。ＭＣＶ的发生发育均在银染区内而不在胞质区内。其发生过程是... 用ＤＮＡ银染技术显示了传染性软疣病毒（ＭＣＶ）形态发生发育及其过程中ＤＮＡ的变化。结果显示：在被感染的皮肤表皮细胞内都有一个大小及构型不同的银染区（病毒工厂）。ＭＣＶ的发生发育均在银染区内而不在胞质区内。其发生过程是先在细胞一侧的胞质内复制合成病毒ＤＮＡ等物质，形成中等密度的银粒大小不等的银染区（病毒前包涵体区），然后在其中形成致密的细粒状银染区（病毒前基质区），接着在后者的周围出现弧形的粗粒银沉淀（初期ＭＣＶ的外膜），逐渐分割包围病毒前基质而形成初期ＭＣＶ。在发育过程中，初期ＭＣＶ的外膜、基质，核心外膜及核心均经过一系列的形态变化。侧体是中期ＭＣＶ向成熟期发育中出现的暂时性结构，其本质为含ＤＮＡ成分的病毒基质。本研究提示：ＭＣＶ的ＤＮＡ物质进入皮肤表皮细胞后能大量复制，合成大量的病毒蛋白质，自主地装配成完整的初期ＭＣＶ，后者有独特的形态发育过程。 展开更多

关键词 痘病毒 传染性软疣病毒 DNA 银染方法 形态发生

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甜菜SRAP扩增产物两种不同检测方法的比较 被引量：1

13

作者 吴则东 王华忠 韩英 《中国糖料》 2010年第2期9-11,共3页

为了研究不同电泳及染色方法对甜菜SRAP扩增产物的影响,以6个甜菜二倍体品系为材料,比较变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对SRAP-PCR扩增产物用不同银染方法的检测效果进行了比较分析。结果显示:非变性聚丙烯酰胺凝胶... 为了研究不同电泳及染色方法对甜菜SRAP扩增产物的影响,以6个甜菜二倍体品系为材料,比较变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对SRAP-PCR扩增产物用不同银染方法的检测效果进行了比较分析。结果显示:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨率差异不大,但非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳具有灌胶简单易学,显色时间短,节省药品等特点,可以作为今后甜菜SRAP电泳及显色的首选方法。 展开更多

关键词 甜菜 SRAP 电泳方法 银染方法

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棉花微卫星标记的PAGE/银染快速检测 被引量：299

14

作者 张军 武耀廷 +1 位作者 郭旺珍 张天真 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期267-269,共3页

利用一种简便、快速的 PAGE/银染方法检测了异源四倍体棉花栽培种陆地棉与海岛棉之间的微卫星多态性 ,并检测到了微卫星在陆地棉品种间的多态及微卫星标记位点在陆地棉品种间的复等位性。

关键词 棉花 微卫星标记 PAGE 银染方法 遗传多样性

全文增补中

显示基因表达差异的PAGE-银染技术 被引量：5

15

作者 谭巍 李强 +2 位作者 王勇 王淑芳 王宁宁 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 1999年第6期477-481,共5页

关键词 DDRT-PCR 基因分离法 银染方法 基因表达

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侵袭性骨肿瘤端粒酶活性检测及其意义

16

作者 孙来保 文剑明 《深圳医学》 1999年第1期23-26,共4页

目的 检测端粒酶在侵袭性骨肿瘤中的活性及评估其作为骨肿瘤恶性诊断的意义。方法 采用非放射性同位素ＴＲＡＰ－银染方法侵袭性骨肿瘤组织及骨源细胞素／株两方面进行端粒酶活性检测，并将此方法与ＴＲＡＰ－ＥＢ染色进行了比较。结... 目的 检测端粒酶在侵袭性骨肿瘤中的活性及评估其作为骨肿瘤恶性诊断的意义。方法 采用非放射性同位素ＴＲＡＰ－银染方法侵袭性骨肿瘤组织及骨源细胞素／株两方面进行端粒酶活性检测，并将此方法与ＴＲＡＰ－ＥＢ染色进行了比较。结果 ５３例侵袭性骨肿瘤组织端粒酶活性检出率８３．０％（４４／５３）；同时检测的１９例同一患者的肿瘤旁对照组织和１例骨的瘤样病变－动脉样骨衰肿均未检测到端粒酶活性； 展开更多

关键词 胃肿瘤 银染方法 同位素 端粒酶 诊断

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核仁组织者区与核仁 被引量：3

17

作者 Schwarzacher HG Wachtler F 范耀山 《国际遗传学杂志》 CAS 1984年第2期91-96,共6页

术语和定义用现代的术语可以下这样的定义:核仁组织者区(NOR)就是含有主要rRNA基因(18S和28S的rDNA)的一个染色体区段。核仁是间或细胞内由于NOR中基因的活动而形成的可见结构。也就是说,NOR是染色体中的一段,核仁是由这段染色体再加上... 术语和定义用现代的术语可以下这样的定义:核仁组织者区(NOR)就是含有主要rRNA基因(18S和28S的rDNA)的一个染色体区段。核仁是间或细胞内由于NOR中基因的活动而形成的可见结构。也就是说,NOR是染色体中的一段,核仁是由这段染色体再加上在NOR周围累积的物质一主要是rRNA和它们的前体以及特殊的核糖体蛋白质共同形成的结构。 展开更多

关键词 核仁丝 银染技术 rDNA NOR 银染方法 纤维物质 RRNA 致密

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甲状腺良恶性病变中核仁组织区的观察

18

作者 徐曙光 左大镒 张亚历 《华南国防医学杂志》 CAS 1991年第3期36-37,共2页

自1987年 Crocker 及其同事发现用 NORs 银染方法(简称 AgNoRs)可用于临床肿瘤病理组织学研究以来,我们曾用该方法相继观察了皮肤、结直肠和脑胶质瘤等部位良恶性病变 AgNORs 的改变,本文报告甲状腺良恶性病变中核仁组织区的AgNoRs 观... 自1987年 Crocker 及其同事发现用 NORs 银染方法(简称 AgNoRs)可用于临床肿瘤病理组织学研究以来,我们曾用该方法相继观察了皮肤、结直肠和脑胶质瘤等部位良恶性病变 AgNORs 的改变,本文报告甲状腺良恶性病变中核仁组织区的AgNoRs 观察结果。 展开更多

关键词 核仁组织区 良恶性病变 脑胶质瘤 银染方法 肿瘤病理 乳头状癌 滤泡性癌 结节性甲状腺肿 南方医院病理科 瘤细胞

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三个短串联重复序列位点的等位基因遗传变异研究 被引量：17

19

作者 庾蕾 李建金 +4 位作者 伍新尧 曹露媚 刘秋玲 曾艳红 区敬华 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第4期308-312,共5页

目的　探讨短串联重复序列 (short tandem repeats,STRs)遗传变异的方式及机理。方法用银染方法对 3个 STR位点 (FGA、D12 S391、D11S5 5 4 )共 19个发生突变的家系父、母、子的 DNA样本进行 STR基因分型 ,将需测序的等位基因条带从凝... 目的　探讨短串联重复序列 (short tandem repeats,STRs)遗传变异的方式及机理。方法用银染方法对 3个 STR位点 (FGA、D12 S391、D11S5 5 4 )共 19个发生突变的家系父、母、子的 DNA样本进行 STR基因分型 ,将需测序的等位基因条带从凝胶上切下 ,再进行 PCR扩增 ,产物经纯化作为测序模板 ,采用循环测序法测序。结果　 19个家系中有 18个家系子代新产生的等位基因变异表现为一个重复单位的增加或减少 (表现为一个重复单位增加的有 8个家系 ,减少的有 7个家系 ,不确定的有 3个家系 ) ,只有 1个家系表现为 2个重复单位的减少。子代新产生的等位基因来自父亲的有 13个家系 ,来自母亲的有 3个家系 ,不能确定的有 3个家系。来自父与母的比例约为 4∶ 1。 3个 STR位点等位基因突变都出现在长的、连续的四核苷酸重复区 (FGA的“CTTT”区、 D12 S391的“AGAT”区、 D11S5 5 4的“AAAG”区 )。结论FGA、D12 S391和 D11S5 5 4 3个 STR位点的等位基因突变主要表现为一个重复单位的增加或减少占95 % ,其次是两个重复单位的变化 ,没有碱基的插入或缺失。突变主要来自父亲。在这 3个 STR位点中的长的。 展开更多

关键词 等位基因 遗传变异 短串联重复序列 突变 测序 STRS 银染方法

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宁夏地区回族人群五个短串联重复序列位点的分析 被引量：4

20

作者 王玉炯 郭辰虹 +2 位作者 舒畅 马力通 岳媛 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期102-104,共3页

目的分析宁夏地区回族人群5个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)位点的遗传多态性。方法选择位于11号、14号、17号和19号染色体上的5个STR多态位点D11S1984、D14S306、D14S617、D17S1290和D19S433,采用PCR扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶... 目的分析宁夏地区回族人群5个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)位点的遗传多态性。方法选择位于11号、14号、17号和19号染色体上的5个STR多态位点D11S1984、D14S306、D14S617、D17S1290和D19S433,采用PCR扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染方法对宁夏地区144名无血缘关系的回族人群进行遗传多态性分析。结果5个STR位点在宁夏回族人群中分别检出等位基因10、8、11、13和8个,基因型30、25、33、40和23种;杂合度分别为0.8413、0.8033、0.8331、0.8369和0.7703;多态信息量为0.8217、0.7746、0.8121、0.8174和0.7332;个体识别率0.9516、0.9257、0.9611、0.9660和0.9135,累积个体识别率为0.9999995;非父排除率0.7046、0.6367、0.6911、0.7012和0.5801,累积非父排除率为0.9958。基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡。结论这5个STR位点在宁夏地区回族人群中具有较高的多态性,是较好的遗传标记,可应用于群体遗传学的研究及法医学的个体识别和亲子鉴定中。 展开更多

关键词 回族人群 宁夏地区 短串联重复序列 基因型分布 银染方法 检出 遗传多态性 STR位点 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 群体遗传学

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