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蛋白酶体抑制剂PS-341靶向干预多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞的实验研究
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作者 陆化 林如峰 +6 位作者 沈文怡 葛峥 刘澎 张建富 吴雨洁 费小明 李建勇 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第24期5708-5711,共4页
目的:分析蛋白酶体抑制剂PS-341对多发性骨髓瘤(MM)骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及其对IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达的影响。方法:含10%FBS的1640培养液培养得到MSCs,流式细胞术(FCM)鉴定所培养细胞的表型,以终浓度分别为0 nmol/L、50 ... 目的:分析蛋白酶体抑制剂PS-341对多发性骨髓瘤(MM)骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及其对IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达的影响。方法:含10%FBS的1640培养液培养得到MSCs,流式细胞术(FCM)鉴定所培养细胞的表型,以终浓度分别为0 nmol/L、50 nmol/L、100 nmol/L、150 nmol/L、200 nmol/L的PS-341作用MSCs 4 h,光学显微镜观察细胞形态改变,荧光显微镜下Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达的变化。结果:PS-341可诱导MSCs凋亡,与其浓度成正比;与对照组(0 nmol/L PS-341)比较,浓度分别为50 nmol/L、100 nmol/L、150 nmol/L、200 nmol/L的PS-341作用MSCs 4 h后明显抑制IL-6、IL-1β、SCF的表达(P<0.05);PS-341对IL-6和SCF的抑制与PS-341浓度成正相关(P<0.05),在初发/难治复发和完全缓解(CR)两组患者间均无显著差异;对IL-1β的抑制在CR组较初发/难治复发组更明显(P<0.05);PS-341作用后IL-1β表达的强弱对IL-6及SCF的表达无影响。结论:PS-341诱导MM患者MSCs凋亡和抑制其IL-6、IL-1β、SCF的表达,是PS-341有效治疗MM的靶点之一。 展开更多
关键词 硼酸化物/治疗应用 吡嗪类/治疗应用 蛋白酶抑制药/治疗应用 多发性骨髓瘤/药物疗法 骨髓细胞/药物作用 细胞/药物作用 人类
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骨质疏松发病过程中骨髓间充质干细胞差异性表达microRNA的筛选及其在干细胞多向分化中的功能 被引量:5
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作者 廖立 杨小红 金岩 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期75-80,共6页
目的:研究去势小鼠骨质疏松模型中骨髓间充质干细胞(BMMSC)microRNA表达谱的改变,确定特异性改变microRNA的功能,明确其在骨质疏松发病中的作用。方法:通过微阵列芯片筛查,寻找在骨质疏松模型骨髓间充质干细胞中差异性表达的microRNA,... 目的:研究去势小鼠骨质疏松模型中骨髓间充质干细胞(BMMSC)microRNA表达谱的改变,确定特异性改变microRNA的功能,明确其在骨质疏松发病中的作用。方法:通过微阵列芯片筛查,寻找在骨质疏松模型骨髓间充质干细胞中差异性表达的microRNA,并在成骨成脂分化诱导后行RT-PCR检测其表达水平,研究其在BMMSC多向分化中的作用。结果:本研究发现了10个在骨质疏松发病过程中有差异性表达的microRNA,其中5个microRNA在BMMSC成骨分化过程中,3个microRNA在成脂分化过程中表达出现明显改变。结论:microRNA表达异常可能导致骨质疏松发病过程中BMMSC的功能缺陷。 展开更多
关键词 微RNAs/药理学 疏松 基因表达调控 细胞/药物作用 细胞分化 芯片分析技术
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不同浓度钙对人腹膜间皮细胞影响的实验研究 被引量:3
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作者 李岩 李军 +3 位作者 彭佑铭 刘虹 刘映红 叶琨 《医学临床研究》 CAS 2006年第2期198-201,共4页
【目的】观察不同浓度钙对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)及细胞外基质的影响。【方法】采用人腹膜间皮细胞株体外培养,用乳酸脱氢酶(LDH)和四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估细胞的活力和增殖能力;... 【目的】观察不同浓度钙对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)及细胞外基质的影响。【方法】采用人腹膜间皮细胞株体外培养,用乳酸脱氢酶(LDH)和四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估细胞的活力和增殖能力;采用免疫细胞化学法来检测纤维连接蛋白(FN)的表达。【结果】不同浓度钙均可促进HPMCs增殖(P<0.01),而以1.25 mmol/L及1.0 mmol/L钙作用最明显,且呈时间依赖关系。不同浓度钙组与对照组相比均可明显升高LDH水平,其中以1.25 mmol/L钙的LDH水平最低(P<0.01),且呈时间依赖关系。2.0 mmol/L和1.75 mmol/L钙可明显上调FN的表达(P<0.01)。【结论】高钙可明显损伤HPMCs及促进FN合成,其在腹膜纤维化的发生中可能起了一定作用;而浓度为1.25 mmol/L钙可保护腹膜,并在一定程度上有预防腹膜纤维化的作用。 展开更多
关键词 腹膜/细胞 间质细胞/药物作用
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过表达NDRG1对TGF-β诱导肺癌A549细胞上皮-间质转化的逆转作用 被引量:4
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作者 刘浩 宋莹 贺智敏 《中国医师杂志》 CAS 2015年第5期710-713,718,共5页
目的 探讨NDRG1对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人肺癌A549细胞上皮-间质转化(EMT)的逆转作用及可能机制.方法 转染NDRG1过表达质粒至A549细胞,采用5 μg/L TGF-β1处理细胞,相差显微镜观察细胞形态学变化;Transwell侵袭实验检测A54... 目的 探讨NDRG1对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人肺癌A549细胞上皮-间质转化(EMT)的逆转作用及可能机制.方法 转染NDRG1过表达质粒至A549细胞,采用5 μg/L TGF-β1处理细胞,相差显微镜观察细胞形态学变化;Transwell侵袭实验检测A549细胞侵袭能力;Real-time RT-PCR、Western blot分别检测NDRGl mRNA、蛋白的表达,Western blot检测EMT相关标志物钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin),以及EMT相关信号分子Snail、AKT、Smad的表达.结果 TGF-131可诱导A549细胞向间质样细胞表型转化,上调间质样标志物Vimentin表达和下调上皮样标志物E-cadherin表达,并增强细胞侵袭能力;过表达NDRG1可逆转TGF-131的上述作用;且过表达NDRG1能够抑制AKT的磷酸化,下调EMT转录因子Snail的表达.结论 NDRG1能够逆转TGF-B1对人肺癌A549细胞上皮一间质转化的诱导作用,并降低细胞的侵袭能力,其机制可能与NDRG1抑制AKT/Snail信号有关. 展开更多
关键词 信号肽类和蛋白类/药理学/代谢 转化生长因子β/副作用 肺肿瘤/药物疗法/病理学 细胞转化 肿瘤/药物作用 上皮细胞/药物作用/病理学 间质细胞/药物作用/病理学
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过表达MIF对宫颈癌SiHa细胞上皮-间质转化的影响 被引量:3
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作者 张素玉 吴素慧 李慧 《中国医师杂志》 CAS 2015年第4期484-486,490,共4页
目的 研究过表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对宫颈癌SiHa细胞上皮间质转化(EMT)的影响作用.方法 通过构建重组真核表达载体构建pEGFP-N1-MIF,转染宫颈癌SiHa细胞(SiHa-pEGFP-N1-MIF组),同时设空载体转染组(SiHa-pEGFP-N1组)和... 目的 研究过表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对宫颈癌SiHa细胞上皮间质转化(EMT)的影响作用.方法 通过构建重组真核表达载体构建pEGFP-N1-MIF,转染宫颈癌SiHa细胞(SiHa-pEGFP-N1-MIF组),同时设空载体转染组(SiHa-pEGFP-N1组)和空白对照组(SiHa细胞组),采用蛋白质印迹法(western blot W.B)检测SiHa细胞中MIF蛋白表达的变化,并检测转染前后SiHa细胞中EMT相关指标E-cadherin和Vimentin的表达变化.结果 pEGFP-N1-MIF转染SiHa细胞后MIF蛋白的表达量增加,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且过表达MIF基因后,与对照组相比,pEGFP-N1-MIF组SiHa细胞上皮标志物E-cadherin的蛋白表达水平下调(P<0.05),间叶标志物Vimentin的蛋白表达水平显著上调(P<0.05).结论 过表达MIF基因可促进宫颈癌SiHa细胞发生上皮-间质转化的能力. 展开更多
关键词 印迹法 蛋白 巨噬细胞游走抑制因子/代谢/药理学 宫颈肿瘤/代谢/病理学/药物疗法 细胞转化 肿瘤/药物作用 上皮细胞/药物作用/病理学 间质细胞/药物作用/病理学
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不同浓度钙对人腹膜间皮细胞生长及其分泌TNF—α的影响
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作者 李岩 李军 彭佑铭 《中国医师杂志》 CAS 2011年第6期746-749,共4页
目的观察不同浓度钙对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)生长及其分泌肿瘤坏死因子-α【(TNF.仅)的影响。方法采用人腹膜间皮细胞株体外培养,用乳酸脱氢酶(LDH)和四甲基偶氮唑盐比色法(MT... 目的观察不同浓度钙对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)生长及其分泌肿瘤坏死因子-α【(TNF.仅)的影响。方法采用人腹膜间皮细胞株体外培养,用乳酸脱氢酶(LDH)和四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估细胞的活力和增殖能力;采用免疫细胞化学法来检测HPMCs胞浆TNF-α的表达。结果不同浓度钙均可促进HPMCs增殖(P〈0.01),而以1.25mmol/L。(0.5098±0.016,0.67634±0.048)及1.0mmol/L(0.4853±0.016,0.6678±0.076)钙作用最明显,且呈时间依赖关系。不同浓度钙组与对照组(16.08±1.41,17.27±1.63)相比均可明显升高LDH水平,其中以1.25mmol/L钙的LDH水平最低(17.78±1.18,23.60±1.39,P〈0.01),且呈时间依赖关系。2.0mmol/L[(42.614-3.29)%]和1.75mmol/L[(33.32±1.88)%]钙可明显上调TNF-α的表达(P〈0.01)。结论高浓度钙能损伤HPMCs、促进TNF-α分泌,其在腹膜硬化的发生中可能起了一定作用;而低钙可能有保护腹膜,并在一定程度上有预防腹膜纤维化的作用。 展开更多
关键词 钙/投药和剂量 腹膜/细胞学/代谢 间质细胞/药物作用 肿瘤坏死因子∥代谢
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