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阴道毛滴虫铁氧还蛋白与甲硝唑抵抗的研究进展 被引量：2
1
作者 朱晓燕 谢辉 王雅静 《四川动物》 CSCD 北大核心 2007年第3期721-724,共4页
氢化酶体是阴道毛滴虫重要的代谢器官,该器官内存在的铁氧还蛋白不仅是虫体代谢过程中主要的电子传递介体,而且也在甲硝唑的激活中起关键作用。近年来阴道毛滴虫的甲硝唑抵抗株在临床和实验室都有报道,实验研究发现活化药物的铁氧还蛋... 氢化酶体是阴道毛滴虫重要的代谢器官,该器官内存在的铁氧还蛋白不仅是虫体代谢过程中主要的电子传递介体,而且也在甲硝唑的激活中起关键作用。近年来阴道毛滴虫的甲硝唑抵抗株在临床和实验室都有报道,实验研究发现活化药物的铁氧还蛋白减少或缺失,因此对铁氧还蛋白与甲硝唑抵抗的相关性研究越来越受到医学及药学界的重视。本文总结近年来该领域的研究成果及发展动态,以期对滴虫药物抵抗的发生机制以及滴虫病防治的研究提供有价值的资料。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫铁氧还蛋白 甲硝唑抵抗 研究进展
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一种新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因(英文) 被引量：3
2
作者 傅玉才 徐虹 +4 位作者 章家新 张可浩 刘红 林晖榕 郑晓虹 《热带医学杂志》 CAS 2004年第4期352-356,381,共6页
目的铁氧还蛋白系铁硫蛋白,在多种反应体系中起着传递电子的作用,也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因,以便进一步探讨其生理功能。方法构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,分离cDNA进行克... 目的铁氧还蛋白系铁硫蛋白,在多种反应体系中起着传递电子的作用,也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因,以便进一步探讨其生理功能。方法构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,分离cDNA进行克隆、测序及序列分析。结果在分离出的cDNA克隆中发现一个新的铁氧还蛋白基因。该基因读码框全长312bp,相应蛋白质序列具103个氨基酸;在该蛋白质前体的N端带有10个氨基酸残基的氢酶体靶片段(MLSQCSPLRF)。序列分析显示该铁氧还蛋白(TvFd2)与已报道的阴道毛滴虫铁氧还蛋白(TvFd)有高度同源性(69%);TvFd2与铁氧还蛋白(2Fe-2S)的两大亚类(氧化酶铁氧还蛋白和光合铁氧还蛋白)均具较低的同源性;可与(2Fe-2S)结合的4个半胱氨酸排列成典型的铁氧还蛋白保守序列(-C-X5-C-X2-C-Xn-C-)。结论分析表明TvFd2是一新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白,其功能有待进一步研究。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 基因克隆
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阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因真核表达质粒的构建
3
作者 谢辉 王雅静 +2 位作者 帖超男 毕世樑 刘佩娜 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期72-73,共2页
作者用螯合树脂(Chelex-100)提取阴道毛滴虫基因组DNA,PCR扩增出阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因,克隆入pMD-18T载体,亚克隆至pcDNA3·1(+)真核表达质粒。经PCR及酶切鉴定,Fd基因体外扩增产物为306bp,与已知序列吻合。成... 作者用螯合树脂(Chelex-100)提取阴道毛滴虫基因组DNA,PCR扩增出阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因,克隆入pMD-18T载体,亚克隆至pcDNA3·1(+)真核表达质粒。经PCR及酶切鉴定,Fd基因体外扩增产物为306bp,与已知序列吻合。成功构建了Fd基因的真核表达质粒。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 真核表达 质粒 基因克隆
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河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因序列分析
4
作者 程晓丽 温雯静 +5 位作者 刘晓东 赵国强 曾昭书 郑红 连建华 薛长贵 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第6期1117-1119,共3页
目的:对河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白(Fd)基因突变进行检测分析。方法:采用改良法提取阴道毛滴虫全基因组DNA,应用特异性引物对Fd基因进行扩增,随机选取河南省内5个地区来源的10个虫株的Fd基因扩增片段直接进行双向测序,应用Chromas... 目的:对河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白(Fd)基因突变进行检测分析。方法:采用改良法提取阴道毛滴虫全基因组DNA,应用特异性引物对Fd基因进行扩增,随机选取河南省内5个地区来源的10个虫株的Fd基因扩增片段直接进行双向测序,应用Chromas和Clustalx软件对测序结果进行分析,将测序所得Fd基因核苷酸序列与GenBank中的Fd基因(M33717)进行比对,对所得Fd基因的同源性进行分析。结果:河南省内5个地区来源的Fd基因的核苷酸序列无差异,与Fd基因(M33717)对比,在第200位发生碱基插入,插入碱基为ctg,与Fd基因M33717的同源性为99%。结论:经NIHGenBank基因命名委员会认定,本研究中Fd基因为新型基因,收录编号为EU652852。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 DNA测序 铁氧环蛋白
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阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因的原核表达
5
作者 谢辉 王雅静 +3 位作者 帖超男 毕世梁 刘佩娜 廖琳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2007年第1期15-17,共3页
目的在原核细胞中表达阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因。方法构建阴道毛滴虫Fd基因的原核表达重组质粒pUC19-Fd,转化大肠埃希菌JM109感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达。结果经十二烷基磺酸钠-聚丙... 目的在原核细胞中表达阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因。方法构建阴道毛滴虫Fd基因的原核表达重组质粒pUC19-Fd,转化大肠埃希菌JM109感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达。结果经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)分析,重组质粒在大肠埃希菌中表达出Fd。结论在大肠埃希菌中表达出了Fd。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 基因表达
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阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆及序列分析(英文) 被引量：2
6
作者 章家新 傅玉才 +1 位作者 刘红 郑晓红 《医学研究生学报》 CAS 2004年第8期680-684,共5页
目的 :获取阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆 ,研究其还原烷基氢过氧化物和氢过氧化物的抗氧化作用 ,以及调节由氢过氧化物介导的信号转换。　方法 :提取阴道毛滴虫的总RNA ,用λTripIEx2噬菌体载体构建cDNA表达文库 ,阳性质... 目的 :获取阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆 ,研究其还原烷基氢过氧化物和氢过氧化物的抗氧化作用 ,以及调节由氢过氧化物介导的信号转换。　方法 :提取阴道毛滴虫的总RNA ,用λTripIEx2噬菌体载体构建cDNA表达文库 ,阳性质粒cDNA克隆进行测序 ,并用生物软件RPS Blast,NCBIBlast和ClustalW等对 6个读码框架进行序列分析。　结果 :获得一株开放阅读框为 5 88对碱基的cDNA克隆 ,推测肽链有 196个氨基酸。序列分析表明 ,该肽链与衣滴虫过氧化物氧化还原酶 (Prx1蛋白 )及人的自然杀伤增强因子B分别有 5 6 %和 6 1%的同源性 ;除了两个高度保守的半胱氨酸作用基序外 ,还有蛋白激酶C磷酸化和酪氨酸激酶磷酸化作用基序 ,N 豆蔻酰化作用位点 ,脂质运载蛋白信号位点等。　结论 :该蛋白有 >5 6 %的可能性位于胞浆 ,和典型 2 CysPrx亚家族有很高 (5 6 %～ 6 2 % )的同源性 ,很可能是其中的一个新成员。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 硫氧还原蛋白过氧化物酶 过氧化物氧化还原酶
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阴道毛滴虫过氧化物氧化还原酶系统的RNA干扰
7
作者 章家新 傅玉才 +2 位作者 徐晓园 吴统健 曹凤玲 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期437-440,共4页
目的用干扰RNA的方法特异性降解阴道毛滴虫细胞过氧化物酶(Prx)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的mR-NA,并观察其对虫体生长情况的影响。方法取患者阴道毛滴虫培养,用酚、氯仿法提取其基因组DNA,反转录合成双链RNA(dsRNA)后用RNaseⅢ消化过柱... 目的用干扰RNA的方法特异性降解阴道毛滴虫细胞过氧化物酶(Prx)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的mR-NA,并观察其对虫体生长情况的影响。方法取患者阴道毛滴虫培养,用酚、氯仿法提取其基因组DNA,反转录合成双链RNA(dsRNA)后用RNaseⅢ消化过柱,合成小分子(21～23 bp)干扰RNA(siRNA);由脂质载体介导分A、B、C等3组转染,分别降解毛滴虫细胞Prx、TrxR及Prx+TrxR,转染前的细胞作为对照组(D组);收集转染前、转染后24 h和48 h的毛滴虫细胞,用半定量反转录-PCR(RT-PCR)检测Prx和TrxR的mRNA水平;转染36 h后显微镜下计数并观察细胞活力。结果转染后阴道毛滴虫Prx和TrxR的mRNA水平显著下降,组间细胞的活力差异无统计学意义(P>0.05),但组间细胞数差异具有统计学意义(P<0.01),4组的细胞均数:A、B、C、和D组分别为7.2×107/L、14.2×107/L、3.8×107/L和20.3×107/L。结论用干扰RNA的方法可以抑制Prx和TrxR的mRNA水平,对阴道毛滴虫的细胞周期有明显延长作用,而对细胞活力无明显影响。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 RNA干扰 过氧化物酶 硫氧还蛋白还原酶
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阴道毛滴虫多克隆抗体的制备及Fd基因的原核表达
8
作者 谢辉 王雅静 +3 位作者 帖超男 毕世樑 刘佩娜 廖琳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2006年第4期692-694,共3页
目的-将阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因在大肠埃希菌中诱导表达。方法-制备阴道毛滴虫可溶性抗原,多点注射免疫家兔,获得的血清用ELISA测定其抗体效价。将原核表达重组质粒pET3C-Fd转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,异... 目的-将阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因在大肠埃希菌中诱导表达。方法-制备阴道毛滴虫可溶性抗原,多点注射免疫家兔,获得的血清用ELISA测定其抗体效价。将原核表达重组质粒pET3C-Fd转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达。结果-制备出抗阴道毛滴虫多克隆抗体,抗体效价在1∶8000以上,用于免疫印迹实验。经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)分析,重组质粒在大肠埃希菌中表达出Fd。结论-在大肠埃希菌中表达出了Fd。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 多克隆抗体 基因表达
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阴道毛滴虫与人型支原体共生对铁氧还蛋白基因影响 被引量：3
9
作者 刘晓东 温雯静 薛长贵 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期800-803,共4页
采用人型支原体16s rDNA的特异引物,对从郑州大学附属医院妇科门诊患者分离到的30株阴道毛滴虫进行PCR检测,结果有25株感染人型支原体,感染率为83.33%,这显示了阴道毛滴虫和人型支原体之间的共生关系在中国具有普遍性。并对10株阴道毛滴... 采用人型支原体16s rDNA的特异引物,对从郑州大学附属医院妇科门诊患者分离到的30株阴道毛滴虫进行PCR检测,结果有25株感染人型支原体,感染率为83.33%,这显示了阴道毛滴虫和人型支原体之间的共生关系在中国具有普遍性。并对10株阴道毛滴虫(5株人型支原体阳性和5株人型支原体阴性)的铁氧还蛋白(Fd)基因进行测序,探讨人型支原体对Fd基因的影响,结果发现10株阴道毛滴虫的Fd基因完全相同,但与GenBank中的基因进行比较分析,在第200位多出ctg三个碱基,编码亮氨酸,但并未导致读码框架改变。基因同源性为99%。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 人型支原体 PCR检测 铁氧还蛋白
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细菌性阴道病益生菌治疗方案的研究进展
10
作者 张晓宇 刘朝晖 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期173-176,共4页
细菌性阴道病(BV)是常见的阴道感染性疾病之一。BV的主要特征是阴道微生态失调,乳杆菌减少的同时厌氧菌大量增多。传统的BV治疗方法是使用甲硝唑等抗菌药物,抗菌药物的过多使用不仅副作用多,且治愈后易复发,而大量研究表明,通过益生菌... 细菌性阴道病(BV)是常见的阴道感染性疾病之一。BV的主要特征是阴道微生态失调,乳杆菌减少的同时厌氧菌大量增多。传统的BV治疗方法是使用甲硝唑等抗菌药物,抗菌药物的过多使用不仅副作用多,且治愈后易复发,而大量研究表明,通过益生菌的干预有助于恢复正常阴道菌群,缓解BV症状,减少复发。本文荟萃了近年来益生菌制剂在针对BV治疗上的不同方案,为以后应用于临床提供一定的依据。经过对文献的综合分析,益生菌可单独治疗BV,同时使用益生菌制剂和抗菌药物对BV的治疗效果更好,抗菌药物与益生菌联用比单独使用抗菌药物可显著降低BV的复发率,益生菌与其他物质如雌激素、乳铁蛋白或噬菌体联合也可治疗BV。 展开更多
关键词 细菌性阴道病 阴道菌群 抗菌药物 益生菌制剂 阴道感染性疾病 厌氧菌 乳铁蛋白 甲硝唑
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