目的探讨关于中东呼吸综合征-冠状病毒(middle east respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)调控非小细胞肺癌细胞A549补体系统抑制因子补体成分4结合蛋白Alpha(complement component 4 binding protein alpha,C4BPA)的机制。方法...目的探讨关于中东呼吸综合征-冠状病毒(middle east respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)调控非小细胞肺癌细胞A549补体系统抑制因子补体成分4结合蛋白Alpha(complement component 4 binding protein alpha,C4BPA)的机制。方法以是否MERS-CoV感染非小细胞肺癌细胞A549分为感染组和对照组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹和实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测2组细胞C4BPA的蛋白和mRNA表达情况。TargetScanHuman预测与C4BPA结合的miRNA,实时荧光定量PCR和荧光素酶报告试验确定靶向C4BPA的miRNA。在MERS-CoV感染的情况下,过表达或敲低靶向C4BPA的miRNA,ELISA或qPCR检测C4BPA的表达和分泌情况。同时分析人肺成纤维细胞和小鼠感染MERS-CoV后,C4BPA和miR-451b的表达情况。结果非小细胞肺癌细胞A549感染MERS-CoV后,其分泌的C4BPA增加(P<0.05)。通过TargetScanHuman在线分析和qPCR发现MERS-CoV抑制非小细胞肺癌细胞A549 miR-451b的表达(P<0.05),并且miR-451b靶向C4BPA的3‘UTR(P<0.05)。过表达miR-451b后,C4BPA的表达和分泌受到抑制(P<0.05)。敲低miR-451b后,C4BPA的表达和分泌受到促进(P<0.05)。同时,MERS-CoV感染人肺成纤维细胞和小鼠后,miR-451b的表达受到抑制(P<0.05),C4BPA的表达增强。并且,MERSCoV感染引起的C4BPA增多能够抑制补体经典系统的溶血活性。结论MERS-CoV通过下调miR-451b促进C4BPA的分泌。展开更多
文摘目的探讨关于中东呼吸综合征-冠状病毒(middle east respiratory syndrome-coronavirus,MERS-CoV)调控非小细胞肺癌细胞A549补体系统抑制因子补体成分4结合蛋白Alpha(complement component 4 binding protein alpha,C4BPA)的机制。方法以是否MERS-CoV感染非小细胞肺癌细胞A549分为感染组和对照组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹和实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测2组细胞C4BPA的蛋白和mRNA表达情况。TargetScanHuman预测与C4BPA结合的miRNA,实时荧光定量PCR和荧光素酶报告试验确定靶向C4BPA的miRNA。在MERS-CoV感染的情况下,过表达或敲低靶向C4BPA的miRNA,ELISA或qPCR检测C4BPA的表达和分泌情况。同时分析人肺成纤维细胞和小鼠感染MERS-CoV后,C4BPA和miR-451b的表达情况。结果非小细胞肺癌细胞A549感染MERS-CoV后,其分泌的C4BPA增加(P<0.05)。通过TargetScanHuman在线分析和qPCR发现MERS-CoV抑制非小细胞肺癌细胞A549 miR-451b的表达(P<0.05),并且miR-451b靶向C4BPA的3‘UTR(P<0.05)。过表达miR-451b后,C4BPA的表达和分泌受到抑制(P<0.05)。敲低miR-451b后,C4BPA的表达和分泌受到促进(P<0.05)。同时,MERS-CoV感染人肺成纤维细胞和小鼠后,miR-451b的表达受到抑制(P<0.05),C4BPA的表达增强。并且,MERSCoV感染引起的C4BPA增多能够抑制补体经典系统的溶血活性。结论MERS-CoV通过下调miR-451b促进C4BPA的分泌。
