用非放射性标记MYO探针进行DNA指纹分析 被引量：3

1

作者 邹浪萍 申滨 +4 位作者 褚嘉佑 申志明 李长久 龚文明 杨松 《法医学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期100-103,F003,共5页

用非放射性标记ＭＹＯ探针进行人的ＤＮＡ指纹分析，获得了清晰易读的ＤＮＡ指纹图，并用该方法调查了云南省的７８名无关个体，经统计学分析，计算出无关个体的相关几率是３．４×１０－１０，高于３２Ｐ标记的Ｍｙｏ探针。研究结... 用非放射性标记ＭＹＯ探针进行人的ＤＮＡ指纹分析，获得了清晰易读的ＤＮＡ指纹图，并用该方法调查了云南省的７８名无关个体，经统计学分析，计算出无关个体的相关几率是３．４×１０－１０，高于３２Ｐ标记的Ｍｙｏ探针。研究结果表明该方法是一种简便、快速、灵敏、可靠、经济的ＤＮＡ指纹图检测技术，可在法医鉴定及其它领域里得到更广泛的应用。 展开更多

关键词 DNA指纹分析 非放射性标记 MYO 探针 DNA指纹图 经统计学分析 ^32P标记 方法调查 检测技术 法医鉴定 云南省 MYO 个体

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耐热性碱性磷酸酯酶作为非放射性标记物的研究 被引量：2

2

作者 朱运良 盛小禹 +2 位作者 董海 周宗祥 毛裕民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期805-807,共3页

通过生物素与亲和素－酶复合物系统或地高辛与抗地高辛－酶复合物系统可把酶间接标记到探针上．Ｒｅｎｚ等通过不同的化学方法直接把酶标记到探针上［１～３］．耐热性碱性磷酸酯酶ＦＤ－ＴＡＰ（ｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅａｌｋａｌｉ... 通过生物素与亲和素－酶复合物系统或地高辛与抗地高辛－酶复合物系统可把酶间接标记到探针上．Ｒｅｎｚ等通过不同的化学方法直接把酶标记到探针上［１～３］．耐热性碱性磷酸酯酶ＦＤ－ＴＡＰ（ｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ）具有耐... 展开更多

关键词 碱性磷酸酯酶 FD-TAP 非放射性标记物 耐热性

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介绍一种非放射性标记的原位杂交新方法 被引量：2

3

作者 张魁华 舒斯云 蔡宝塔 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期123-,128,共2页

在病理诊断和科研工作中，原位杂交是一种常用的检测技术。原位杂交组织化学方法是将核酸分子杂交技术与组织细胞原位显示某种特定ＤＮＡｍＲＮＡ及其产物的定性定量及变化规律相结合的一种新技术。目前，在检测特异ｍＲＮＡ的原位杂交... 在病理诊断和科研工作中，原位杂交是一种常用的检测技术。原位杂交组织化学方法是将核酸分子杂交技术与组织细胞原位显示某种特定ＤＮＡｍＲＮＡ及其产物的定性定量及变化规律相结合的一种新技术。目前，在检测特异ｍＲＮＡ的原位杂交组织细胞化学中多采用同位素标记的探... 展开更多

关键词 原位杂交 非放射性标记 基因表达 组织细胞化学 组织化学 同位素标记 地高辛配基 磷酸缓冲液 多聚甲醛 核酸探针

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三种非放射性标记DNA探针杂交灵敏度的比较 被引量：2

4

作者 李奎 胡敏 +2 位作者 余其兴 赵则春 张纯斌 《武汉大学学报（自然科学版）》 CSCD 1994年第1期96-100,共5页

以地高辛配基、光敏生物素及补骨脂素标记的Ｎ－ｒａｓＤＮＡ片段为探针，采用点渍法和ＤＮＡ印渍法，比较了这三种非放射性标记探针的杂交灵敏度．在点渍法中，三者能检测到的低限ＤＮＡ浓度分别为０．１μｇ·Ｌ－１，１μｇ·... 以地高辛配基、光敏生物素及补骨脂素标记的Ｎ－ｒａｓＤＮＡ片段为探针，采用点渍法和ＤＮＡ印渍法，比较了这三种非放射性标记探针的杂交灵敏度．在点渍法中，三者能检测到的低限ＤＮＡ浓度分别为０．１μｇ·Ｌ－１，１μｇ·Ｌ－１和１μｇ·Ｌ－１．在ＤＮＡ印渍法中，地高辛配基能检测到的低限ＤＮＡ浓度亦为０．１μｇ·Ｌ－１．本文还讨论了影响上述三者灵敏度的有关因素． 展开更多

关键词 杂交灵敏度 DNA探针 非放射性标记

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三种非放射性标记法的原理及其在分子生物学中的应用 被引量：2

5

作者 叶昌荣 戴陆园 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 1998年第3期100-105,共6页

本文结合笔者利用非放射性标记法进行限制性酶切片断长度多态性（ＲＦＬＰ）研究的实践经验，综述了近年来逐渐被广泛应用的三种非放射性标记法的产生、发展、原理和应用。

关键词 非放射性标记法 分子生物学 应用

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生物大分子的非放射性标记 被引量：2

6

作者 王洪新 董夫贵 胡志昂 《植物学通报》 CSCD 1993年第2期7-9,共3页

无论是克隆植物基因还是研究基因表达都离不开探针的标记和检测。历来所用的放射性同位素标记方法存在一些缺点。一是要预防核辐射对人体的损伤,操作不方便;二是为防止污染环境,必须谨慎地处置放射性废弃物;三是放射性标记的探针使用时... 无论是克隆植物基因还是研究基因表达都离不开探针的标记和检测。历来所用的放射性同位素标记方法存在一些缺点。一是要预防核辐射对人体的损伤,操作不方便;二是为防止污染环境,必须谨慎地处置放射性废弃物;三是放射性标记的探针使用时间短,例如最常用的^(32)P半衰期仅14.3天,标记的探针要随时标记随时使用,放置不用则放射性随时间指数下降。 展开更多

关键词 生物大分子 非放射性标记 生物素

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提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨

7

作者 王伯云 彭玮丹 +1 位作者 吴人亮 李玉松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1994年第4期32-33,共2页

提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨王伯云，彭玮丹，吴人亮，李玉松（西安第四军医大学病理学教研室，西安７１００３２）非同位素标记核酸探针应用于分子杂交技术，已受到重视，正在生物学和医学领域推广，在临床检测中已用于... 提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨王伯云，彭玮丹，吴人亮，李玉松（西安第四军医大学病理学教研室，西安７１００３２）非同位素标记核酸探针应用于分子杂交技术，已受到重视，正在生物学和医学领域推广，在临床检测中已用于一些疾病的诊断，称多基因诊断。分子... 展开更多

关键词 核酸分子杂交 非放射性标记 非同位素标记 核酸探针 光敏生物素 斑点杂交 地高辛标记 基因诊断 医学领域 玉松

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非放射性标记的原位杂交技术及其应用 被引量：1

8

作者 刘妙良 刘国仰 程在玉 《国外医学（遗传学分册）》 1990年第5期225-229,共5页

核酸原位杂交技术就是利用碱基序列已知的带有标记的核酸探针与组织切片、细胞或染色体上待测同源核酸进行杂交,从而对样品中待测核酸进行定性、定位和相对定量分析的一种研究方法。依标记物性质不同,可分为放射性和非放射性。前者标记... 核酸原位杂交技术就是利用碱基序列已知的带有标记的核酸探针与组织切片、细胞或染色体上待测同源核酸进行杂交,从而对样品中待测核酸进行定性、定位和相对定量分析的一种研究方法。依标记物性质不同,可分为放射性和非放射性。前者标记的原位杂交技术虽有较高灵敏度,但它却有不稳定、相对不安全、自显影时间长、废物难以处理及昂贵等缺点,故发展了一种较灵敏、安全、快速、简便及价廉的非放射性标记的原位杂交技术。本文较详细地介绍了它的原理、方法、发展过程、不同的标记检测体系的比较以及应用。 展开更多

关键词 非放射性标记 原位杂交

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放射性与非放射性标记重组克隆pPF_（14）DNA探针诊断恶性疟疾的比较研究

9

作者 王季石 陆惠民 李卓江 《贵阳医学院学报》 CAS 1994年第S1期164-164,共1页

放射性与非放射性标记重组克隆ｐＰＦ_（１４）ＤＮＡ探针诊断恶性疟疾的比较研究王季石，陆惠民，李卓江（贵阳医学院附院内科苏州医学院分子生物研究室）本研究用恶性疟原虫重组质粒ｐＰＦ１４ＤＮＡ片段，分别经［α─３２Ｐ］─ｄ... 放射性与非放射性标记重组克隆ｐＰＦ_（１４）ＤＮＡ探针诊断恶性疟疾的比较研究王季石，陆惠民，李卓江（贵阳医学院附院内科苏州医学院分子生物研究室）本研究用恶性疟原虫重组质粒ｐＰＦ１４ＤＮＡ片段，分别经［α─３２Ｐ］─ｄＡＴＰ和［Ｄｉｇ］─１１─ｄＵＴＰ?.. 展开更多

关键词 DNA探针 非放射性标记 PPF 重组克隆 恶性疟原虫 恶性疟疾 苏州医学院 陆惠民 斑点杂交 疟疾流行区

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用非放射性标记法研究低密度脂蛋白受体

10

作者 楼定安 朱伟民 +2 位作者 单 茵 沈奇桂 张骅 《科技通报》 1994年第3期137-141,共5页

低密度脂蛋白受体（ＬＤＬ－Ｒ）的缺陷是动脉粥样硬化的重要危险因素之一，检测ＬＤＬ－Ｒ对高胆固醇血症的鉴别诊断和治疗具有重要意义，本文总结本实验室多年来应用各种非放射性标记法（如荧光素、过氧化物酶、生物素）或免疫检测法... 低密度脂蛋白受体（ＬＤＬ－Ｒ）的缺陷是动脉粥样硬化的重要危险因素之一，检测ＬＤＬ－Ｒ对高胆固醇血症的鉴别诊断和治疗具有重要意义，本文总结本实验室多年来应用各种非放射性标记法（如荧光素、过氧化物酶、生物素）或免疫检测法代替经典的放射性配体法研究ＬＤＬ－Ｒ的经验，并推荐在临床检验中以生物素化ＬＤＬ为配体测定外周血单个核细胞ＬＤＬ－Ｒ（即细胞－ＢＡ－ＥＬＳＡ），较为简便、灵敏、经济、实用． 展开更多

关键词 低密度脂蛋白 受体 非放射性标记 细胞-BA-ELSA

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非放射性标记的染色体原位杂交技术及其应用的进展 被引量：3

11

作者 黄浩杰 陈宜峰 《国外医学（遗传学分册）》 CAS 1993年第2期70-75,共6页

非放射性标记的染色体原位杂交技术,随着克隆技术、PCR技术、多元标记技术以及染色体显带技术的发展,近年来已在基因定位、染色体结构和数目畸变的检测和探讨染色体进化等方面得到了广泛的应用。现就这方面的研究进展加以综述。

关键词 染色体 原位杂交 非放射性标记

全文增补中

用非放射性标记 DNA 探针检测食品中沙门氏菌

12

作者 袁而森 张凤才 何镜承 《检验检疫学刊》 1993年第1期53-55,39,共4页

核酸分子杂交技术是近十几年迅速发展起来的。即利用核苷酸碱基顺序互补原理,用特异的DNA 探针,通过核酸杂交和鉴定和检测样品中的微生物。自八十年代以来,由于制备探针方法上的突破,显著提高了其检测的敏感性及特异性。Hill

关键词 DNA 非放射性标记 核苷酸碱基 核酸杂交 耐热肠毒素基因 细菌菌落 敏感性试验 互补原理 菌落杂交 肠毒素

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一种新型的非放射性标记方法检测马铃薯纺锤块茎类病毒—digoxigenin…

13

《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1997年第2期258-260,共3页

关键词 马铃薯病毒 纺锤块茎类病毒 非放射性标记法

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非放射性杂交标记系统 被引量：2

14

作者 吴锦雅 周宏伟 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期393-394,共2页

非放射性杂交标记分子的出现极大地促进了杂交技术的推广应用，对整个分子生物学都有深远的影响。本文介 绍非放标记系统种类（半抗原类、荧光色素类及酶类）各自的原理及优缺点，并比较对其在原位杂交中的应用。

关键词 非放射性杂交标记系统 生物素 地高辛 荧光素

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非放射性反义RNA探针的原位杂交技术探讨

15

作者 王一菱 郑乃刚 +3 位作者 丁一 吴景兰 张晋平 丰艳 《河南医科大学学报》 1996年第1期6-9,共4页

以自制的反义ＲＮＡ探针研究了非放射性标记原位杂交技术。结果表明：①以小柱装置（ｍｉｎｉｃｏｌｕｍｎ）提取质粒ＤＮＡ，方法快速、简便、且纯度好；②以线性化的质粒ＤＮＡ为模板进行体外转录，加Ｂｉｏ－１４－ＣＴＰ标记，需用... 以自制的反义ＲＮＡ探针研究了非放射性标记原位杂交技术。结果表明：①以小柱装置（ｍｉｎｉｃｏｌｕｍｎ）提取质粒ＤＮＡ，方法快速、简便、且纯度好；②以线性化的质粒ＤＮＡ为模板进行体外转录，加Ｂｉｏ－１４－ＣＴＰ标记，需用ｐＨ８．０的转录缓冲液；③实验中需防止ＲＮａｓｅ污染，但也可应用ＲＮａｓｅ作为实验对照和减低背景；④杂交液中以不加硫酸葡聚糖为宜，杂交温度以４２℃为佳。 展开更多

关键词 反义RNA探针 非放射性标记 原位杂交

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非放射性探针及其在生物医学中的应用

16

作者 彭克高 李志华 《云南畜牧兽医》 1989年第4期66-69,共4页

基因探针是一段与已知基因有关的核酸序列(DNA或RNA)经过标记后,仍保持与完全或部分相对应的核酸杂交能力,这样就可用已知的探针来探测未知基因,通过显示系统显示杂交反应,从而用于基因诊断的一种生物技术。探针的标记方法,多年来是用... 基因探针是一段与已知基因有关的核酸序列(DNA或RNA)经过标记后,仍保持与完全或部分相对应的核酸杂交能力,这样就可用已知的探针来探测未知基因,通过显示系统显示杂交反应,从而用于基因诊断的一种生物技术。探针的标记方法,多年来是用同位素标记的所谓放射性探针,标记方法复杂,同时需要贵重的仪器设备,有些则半衰期短,特别存在放射性污染的危害。 展开更多

关键词 探针技术 杂交反应 核酸杂交 标记方法 基因探针 基因诊断 已知基因 显示系统 非放射性标记 生物素标记探针

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mRNA差异显示技术的研究进展 被引量：7

17

作者 陈永华 严钦泉 +1 位作者 余建蒲 肖国樱 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期9-12,43,共5页

针对mRNA差异显示技术中的假阳性高和放射性污染等缺陷,文章从改进引物设计、应用非放射性标记、优化PCR参数、假阳性鉴定等方面进行了综述。1采用4种兼并或单碱基引物作锚定引物;用特异和长序列(≥20bp)专一性引物作为随机引物,可增加... 针对mRNA差异显示技术中的假阳性高和放射性污染等缺陷,文章从改进引物设计、应用非放射性标记、优化PCR参数、假阳性鉴定等方面进行了综述。1采用4种兼并或单碱基引物作锚定引物;用特异和长序列(≥20bp)专一性引物作为随机引物,可增加特异性;在锚定引物之前加上了一段T7启动子序列,在随机引物前加上一段M13重复序列,可使DDRT—PCR的体系的扩增特异性更一致。2针对放射性同位素检测法的缺点,文章提出并比较了几种常用的非放射性同位素标记方法。3保证起始(模板)mRNA质量和浓度,降低dNTP浓度,选择最适的反转录和PCR退火温度,可优化PCR参数。4用两种不同的反转录酶进行反转录平行实验,很容易区分出RNA制备过程中造成的假阳性,目前假阳性鉴定大多还是以Northern印迹为基础,再作些适当的改进。 展开更多

关键词 MRNA差异显示技术 研究进展 NORTHERN 非放射性同位素 非放射性标记 dNTP浓度 锚定引物 随机引物 放射性污染 启动子序列 假阳性 重复序列 标记方法 退火温度 平行实验 反转录酶 制备过程 R参数 特异性 PCR 单碱基 专一性

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ELISA试验的质量控制 被引量：19

18

作者 王克波 杨俊 杨志俊 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第1期111-112,共2页

关键词 ELISA试验 质量控制 非放射性标记免疫技术 流行病学筛查

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小鼠性决定基因SRY探针的制备 被引量：7

19

作者 刘水冰 田琼 《华南国防医学杂志》 CAS 2005年第3期12-13,共2页

目的研究制备地高辛标记的小鼠性决定基因SRY探针,用于检测小鼠体内SRY基因表达的研究。方法按已知的雄性小鼠Y染色体上性决定蛋白基因(SRY)的序列,请上海博亚公司合成四条oligoDNA,采用PCR技术连接并扩增,地高辛标记的方法制备基因探... 目的研究制备地高辛标记的小鼠性决定基因SRY探针,用于检测小鼠体内SRY基因表达的研究。方法按已知的雄性小鼠Y染色体上性决定蛋白基因(SRY)的序列,请上海博亚公司合成四条oligoDNA,采用PCR技术连接并扩增,地高辛标记的方法制备基因探针。结果用细胞原位杂交方法证实这种探针具有较高的敏感性和特异性。结论小鼠性决定基因SRY探针的制备成功为进一步研究异体雄性小鼠骨髓移植到雌性小鼠体内后的分布和表达提供了实验基础。 展开更多

关键词 SRY基因 CDNA探针 原位杂交 非放射性标记

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核酸探针技术 被引量：1

20

作者 陈勇 李元宗 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1995年第4期474-479,共6页

本文对核酸探针技术进行了较全面的综述,介绍了核酸探针的制备及非放射性标记方法.并对核酸的Southern转印杂交,Northern转印杂交,In Situ转印杂交及斑点杂交法的原理及应用进行了简明的评述.

关键词 核酸探针 基因诊断 评述 非放射性标记法

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