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题名非洲爪蟾卵非细胞翻译体系的建立及应用
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作者
田辉凯
姚小皓
马兵
张红梅
李学军
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机构
北京大学基础医学院药理学系
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第7期768-771,共4页
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文摘
目的 当前人类基因组研究的重心正在由“结构”向“功能”转移。而基因功能的研究离不开基因的表达 ,这就迫切需要一种操作简便 ,适用范围广的表达工具来表达有功能的蛋白质。方法 非洲爪蟾注射HCG催卵 ,2 %半胱氨酸去胶膜 ,高速离心制备卵提取物 ,即为非洲爪蟾卵非细胞翻译体系。通过亚克隆技术将TFAR1 9基因克隆到体外转录质粒中 ,通过酶切线性化模板 ,体外转录 ,加帽合成cRNA ,将其加入到制备的蛙卵提取物中进行体外翻译。结果 用Westernblot鉴定 ,获得了高效翻译 ,并且加入亚精胺和ATP再生系统可以提高翻译的效率。
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关键词
非细胞翻译体系
细胞凋亡
TFAR19
非洲爪蟾卵母细胞
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Keywords
cell free translation system
apoptosis
TFAR19
Xenopus leavis egg
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分类号
R-332
[医药卫生]
R282.71
[医药卫生—中药学]
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