纳米级颅骨替代及诱导材料与兔颅骨成骨细胞联合培养的实验研究 被引量：1

1

作者 郝晓光 张庆林 +3 位作者 孙康宁 庞琦 汪建军 赵广宇 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第15期19-20,共2页

关键词 纳米级颅骨替代 诱导材料 颅骨成骨细胞 联合培养 实验研究 细胞培养

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间歇性高糖环境对小鼠颅骨成骨细胞的影响 被引量：2

2

作者 颜晓芳 袁欣 +1 位作者 严孙杰 杨立勇 《海峡科学》 2014年第2期8-10,共3页

目的:观察间歇性高糖环境对小鼠颅骨成骨细胞形态、增殖及功能蛋白表达的影响。方法:将体外培养原代小鼠颅骨成骨细胞分为3组:正常糖浓度组(5.5mmol/L GLU)、持续性高糖组(25mmol/L GLU)、间歇性高糖组(5.5mmol/L GLU^25mmol/L GLU),干... 目的:观察间歇性高糖环境对小鼠颅骨成骨细胞形态、增殖及功能蛋白表达的影响。方法:将体外培养原代小鼠颅骨成骨细胞分为3组:正常糖浓度组(5.5mmol/L GLU)、持续性高糖组(25mmol/L GLU)、间歇性高糖组(5.5mmol/L GLU^25mmol/L GLU),干预3天后,MTT法检测细胞增殖抑制率;干预3周后,比色法和放射免疫法(RIA)分别检测培养上清液中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)水平的变化。结果:(1)在相同干预时间点,与正常糖浓度组相比,高糖组细胞增殖受抑制,其中间歇性高糖组细胞受抑制更显著(P<0.05)。(2)在相同干预时间点,高糖组成骨细胞的ALP、OCN均较正常糖浓度组下降,其中间歇性高糖组下降更显著;(3)随干预时间增加,高糖组成骨细胞的ALP、OCN均较正常糖浓度组下降(P<0.05)。结论:高糖环境可抑制成骨细胞的增殖、诱发细胞凋亡,并导致功能蛋白ALP、OCN下降,且这一损害作用在间歇性高糖环境更为显著。 展开更多

关键词 小鼠颅骨成骨细胞 间歇性高糖 骨形态蛋白2

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胎兔颅骨成骨细胞克隆筛选及鉴定

3

作者 唐康来 卢卫忠 +4 位作者 吴梅英 杨柳 李建福 曹桂 刘胜学 《西藏医药》 1999年第S1期18-18,共1页

目的：筛选胎兔颅骨细胞原代培养中的细胞克隆，建立成骨细胞株。方法：从服兔颅骨组织中分离培养颅骨细胞，在此基础上，运用有限稀释法进行克隆传代筛选，建立成骨细胞株，并运用酶组化、免疫级化及染色体染色等方法予以鉴定。结果：... 目的：筛选胎兔颅骨细胞原代培养中的细胞克隆，建立成骨细胞株。方法：从服兔颅骨组织中分离培养颅骨细胞，在此基础上，运用有限稀释法进行克隆传代筛选，建立成骨细胞株，并运用酶组化、免疫级化及染色体染色等方法予以鉴定。结果：原代培养的颅骨细胞来源复杂，形态多样；克隆传代筛选的细胞株，细胞形态单一，碱性磷酸酶组化染色呈强阳性，骨形态发生蛋白免疫级化染色呈强阳性，钙红染色显示具有成骨能力；染色体数目形态保持相对稳定。结论：利用有限稀释和克隆传代培养筛选建立的成骨细胞株，生物学性状均一，遗传学性状稳定。 展开更多

关键词 颅骨成骨细胞 克隆筛选 第三军医大学 克隆传代 胎兔 骨形态发生蛋白 西南医院 免疫级化 生物学性状 染色体数目

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补骨脂素对乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟的影响 被引量：8

4

作者 叶志伟 王丹 +2 位作者 杨钟华 王新泽 张山锋 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期402-406,共5页

骨质疏松症是一种全身性骨骼疾病,其特点是骨量低、骨微结构恶化、骨脆性增加、易骨折。为了改善骨质疏松,需要寻找合成代谢和口服药物的副作用最小的替代药物。补骨脂素是从中草药中提取的香豆素衍生物。然而,补骨脂素在成骨细胞功能... 骨质疏松症是一种全身性骨骼疾病,其特点是骨量低、骨微结构恶化、骨脆性增加、易骨折。为了改善骨质疏松,需要寻找合成代谢和口服药物的副作用最小的替代药物。补骨脂素是从中草药中提取的香豆素衍生物。然而,补骨脂素在成骨细胞功能中的作用及其分子机制尚不清楚。本研究发现,补骨脂素通过上调成骨细胞特异性标志基因(包括icollagen,骨钙素和骨唾液蛋白)的表达,增强碱性磷酸酶的活性,以剂量依赖的方式促进小鼠原代成骨细胞的成骨分化。本研究同时证明补骨脂素能上调BMP2和BMP4基因的表达,提高磷酸化smad1/5/8蛋白水平,激活BMP报告基因(12xbe-oc-luc)的活性以及增强BMP信号直接靶基因osx的表达。BMP2和BMP4基因的缺失消除了补骨脂素对成骨细胞标志基因col1、alp、oc和bsp表达的促进作用。结果表明,补骨脂素通过激活BMP信号促进成骨细胞分化,提示补骨脂素可能是治疗骨质疏松等骨丢失相关疾病的一种潜在的合成代谢剂。 展开更多

关键词 补骨脂素 乳鼠颅骨成骨细胞 骨质疏松 细胞分化

原文传递

淡豆豉和黑豆乙醇提取物的促成骨细胞增殖活性及HPLC-MS分析 被引量：8

5

作者 冯薇 孙佳明 +4 位作者 李琛 牛丽颖 刘姣 张凯 王鑫国 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1651-1655,共5页

目的比较分析淡豆豉和黑豆乙醇提取物促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性及二者的化学成分。方法采用MTT法对淡豆豉和黑豆的乙醇提取物进行促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性的研究,并通过高效液相色谱-质谱联用技术对二者化学成分进行比较分析。结... 目的比较分析淡豆豉和黑豆乙醇提取物促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性及二者的化学成分。方法采用MTT法对淡豆豉和黑豆的乙醇提取物进行促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性的研究,并通过高效液相色谱-质谱联用技术对二者化学成分进行比较分析。结果淡豆豉和黑豆的乙醇提取物对大鼠成骨细胞的促增殖率分别可达到36.5%和28.2%,其主要有效成分为异黄酮类化合物,经液质联用分析共鉴定出15个黄酮类成分。结论黑豆发酵成淡豆豉后的成分变化主要体现在由苷类成分脱糖转化为苷元,含有量显著增加的大豆苷元和染料木素两种苷元主要由丙二酰大豆苷(大豆苷元-G-M)和丙二酰染料木苷(染料木素-G-M)脱丙二酰基和葡萄糖转化而来。 展开更多

关键词 淡豆豉 黑豆 黄酮类成分 大鼠颅骨成骨细胞 液质联用

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成骨细胞特异性识别多肽对人成骨细胞增殖和矿化影响的实验研究 被引量：9

6

作者 钱海燕 陈慧敏 +2 位作者 杜明亮 吴明月 李全利 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第3期337-340,共4页

目的观察成骨细胞特异性识别多肽对人颅骨成骨细胞(HCO)增殖和矿化作用的影响。方法体外常规培养人颅骨成骨细胞,分为5个实验组(10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L)以及空白对照组,MTT法检测细胞的增殖,紫外分光光度法... 目的观察成骨细胞特异性识别多肽对人颅骨成骨细胞(HCO)增殖和矿化作用的影响。方法体外常规培养人颅骨成骨细胞,分为5个实验组(10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L)以及空白对照组,MTT法检测细胞的增殖,紫外分光光度法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)的表达,茜素红染色及半定量分析检测细胞矿化程度,RT-QPCR法检测细胞骨钙素(OCN)mRNA的表达。结果此浓度范围内的特异性多肽对成骨细胞增殖有促进作用(P<0.05),最大效应浓度是10^(-5)mol/L;能增加ALP活性(P<0.05),最大效应浓度是10^(-4)mol/L。通过茜素红染色观察和半定量分析,14、21 d实验组钙盐沉积量高于对照组,半定量分析结果显示浓度10^(-5)mol/L时,吸光度(OD)值最高,但差异无统计学意义;RT-QPCR法显示14、21 d实验组OCN mRNA表达量均高于对照组(P<0.05)。结论 10^(-8)~10^(-4)mol/L浓度范围的成骨细胞特异性识别多肽能够促进人颅骨成骨细胞的增殖和矿化,且在10^(-5)mol/L浓度促进成骨细胞增殖及矿化相关蛋白表达最为显著。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性识别多肽 人颅骨成骨细胞 增殖 矿化

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阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响 被引量：1

7

作者 沈霖 武嘉林 +5 位作者 李蕾 夏远军 高兰 谢晶 周丕琪 杨艳萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期251-254,共4页

目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照... 目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清。将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液。培养细胞被分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养。采用MTT比色分析、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达。结果阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P<0．05)。成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清100ml／L时最强,与雌激素组比较无显著性差异(P>0 05),且明显高于对照组(P<0．05)。成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml／L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异(P<0 05),且明显低于对照组(P<0．05)。结论阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节 OPG／RANKL表达而治疗骨质疏松。 展开更多

关键词 阿胶强骨口服液 含药血清 护骨素配体 胎鼠 基因mRNA表达 RANKL Wistar大鼠 MTT比色分析 显著性差异 颅骨成骨细胞 新生SD大鼠 成骨细胞增殖 胸腺嘧啶核苷 骨质疏松 对照组 单细胞悬液 放免法测定 PCR测定 OPG 雌激素 分子机制

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骨松康含药血清对成骨细胞生物学活性的影响 被引量：1

8

作者 隋福革 张达 +5 位作者 符强 汪群 藤家松 刘玉槐 李建军 徐莘香 《中国骨肿瘤骨病》 CAS 2005年第4期234-236,共3页

目的观察骨松康对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响。方法分离培养乳鼠颅骨成骨细胞,加入中药骨松康吸收后血清,流式细胞仪和碱性磷酸酶活性检测、骨钙素免疫组化染色、矿化结节计数分析其对成骨细胞增殖和分化的影响。结果以含药血清... 目的观察骨松康对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响。方法分离培养乳鼠颅骨成骨细胞,加入中药骨松康吸收后血清,流式细胞仪和碱性磷酸酶活性检测、骨钙素免疫组化染色、矿化结节计数分析其对成骨细胞增殖和分化的影响。结果以含药血清培养的成骨细胞,S期细胞比例增多,说明细胞DNA的合成增加;碱性磷酸酶活性及骨钙素表达增强;形成矿化结节数及分泌胰岛素样生长因子I(IGF-1)的含量均明显高于对照血清组(P<0·01)。结论骨松康含药血清能直接促进体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、分泌和矿化,提高了成骨细胞骨形成功能。 展开更多

关键词 骨质疏松症 成骨细胞 含药血清 增殖 分化 成骨细胞增殖 细胞生物学活性 碱性磷酸酶活性 胰岛素样生长因子 颅骨成骨细胞

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成骨细胞特异性识别多肽对人成骨细胞黏附和迁移作用的实验研究 被引量：3

9

作者 宋婷婷 王泽华 +3 位作者 高启坤 庄艳琴 吴齐越 吴明月 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第8期1217-1220,共4页

目的探讨成骨细胞特异性识别多肽对人颅骨成骨细胞黏附和迁移作用的影响。方法常规培养人颅骨成骨细胞,分为10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L 5个实验组及对照组,应用黏附实验、划痕实验及Transwell迁移小室实验检测... 目的探讨成骨细胞特异性识别多肽对人颅骨成骨细胞黏附和迁移作用的影响。方法常规培养人颅骨成骨细胞,分为10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L 5个实验组及对照组,应用黏附实验、划痕实验及Transwell迁移小室实验检测不同浓度的成骨细胞特异性识别多肽对人成骨细胞黏附、迁移作用的影响。结果成骨细胞特异性识别多肽在10^(-8)~10^(-4)mol/L浓度范围内能够促进人颅骨成骨细胞迁移与黏附,其中10^(-5)mol/L浓度促进作用最为显著。结论成骨细胞特异性识别多肽能够促进成骨细胞黏附及迁移。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性识别多肽 人颅骨成骨细胞 迁移 黏附

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联合应用重组人骨保护素和阿伦膦酸钠抑制成熟破骨细胞的体外实验研究 被引量：14

10

作者 黄鹏 王岩 +5 位作者 迟志永 杨子义 倪健 杨武剑 王冉东 白金柱 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期812-816,共5页

目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔... 目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔板中。9d后,重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色(TRAP染色)鉴定后,分别使用10-5g/LrhOPGFc、10μmol/LALN、10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN、5×10-6g/LrhOPGFc+5μmol/LALN作用于混合细胞体系,并设空白对照。加药后3、7d观察破骨细胞数目和形态,计算单位面积内TARP阳性细胞个数,并行骨磨片吸收陷窝计数。结果重组人骨保护素(rhOPGFc)分子量与预期结果相符合,蛋白印迹检测(Westernblotting)显示,该条带可被抗免疫球蛋白IgG抗体别显色。小鼠成骨细胞与破骨细胞前体细胞RAW264.7混合培养后9d,体系中出现大量多核成熟破骨细胞,TARP染色证实为成熟破骨细胞。加药3、7d后,与对照组相比,其余各组破骨细胞TARP阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数均明显减少,以10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN组减少最为显著。结论重组人骨保护素(rhOPGFc)可以有效减少成熟破骨细胞数目并抑制其功能。联合应用rhOPGFc和阿伦膦酸钠可以交互抑制成熟破骨细胞功能。 展开更多

关键词 成熟破骨细胞 人骨保护素 阿伦膦酸钠 体外实验研究 重组 RAW264.7 LALN 细胞抑制作用 颅骨成骨细胞 前体细胞 细胞数目 阳性细胞 吸收陷窝 IgG抗体 免疫球蛋白 骨细胞功能 酵母表达 融合蛋白 新生小鼠 酶消化法 96孔板

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红芪多糖对骨髓间充质干细胞和成骨细胞的影响 被引量：6

11

作者 赵良功 方瑶瑶 +1 位作者 刘小花 封士兰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期432-436,共5页

目的研究3种新型红芪多糖(HPS-1、HPS-2、HPS-3)对大鼠骨髓间充质干细胞rBMSCs和颅骨成骨细胞ROBs成骨性分化的影响。方法采用MTT法检测rBMSCs细胞和ROBs细胞增殖;采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测rBMSCs细胞和ROBs... 目的研究3种新型红芪多糖(HPS-1、HPS-2、HPS-3)对大鼠骨髓间充质干细胞rBMSCs和颅骨成骨细胞ROBs成骨性分化的影响。方法采用MTT法检测rBMSCs细胞和ROBs细胞增殖;采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测rBMSCs细胞和ROBs细胞的ALP活性;采用茜素红染法检测rBMSCs和ROBs细胞矿化结节的形成情况。结果HPS-1(20、50µg/mL)作用48 h显著促进rBMSCs细胞增殖(P<0.05、0.01),HPS-1(20µg/mL)作用48 h显著促进ROBs细胞增殖(P<0.01);HPS-2和HPS-3对2种细胞的增殖无促进作用。HPS-1(50、100µg/mL)显著升高rBMSCs细胞的ALP活性(P<0.01),HPS-1(10、20、50µg/mL)显著升高ROBs细胞的ALP活性(P<0.05、0.01);HPS-3(50µg/mL)显著升高rBMSCs细胞的ALP活性(P<0.05),HPS-2对2种细胞ALP活性没有促进作用。HPS-1显著增加rBMSCs和ROBs细胞中钙化结节面积和数量(P<0.01),HPS-2和HPS-3对rBMSCs和ROBs细胞钙化结节的形成没有促进作用。结论HPS-1可增强rBMSCs和ROBs细胞ALP活性和成骨相关因子表达,并显著促进rBMSCs和ROBs细胞分化、矿化。 展开更多

关键词 红芪多糖 成骨分化 骨髓间充质干细胞 颅骨成骨细胞 碱性磷酸酶

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补肾健骨方含药血清对ROBs和rBMSCs增殖、分化和矿化的影响 被引量：5

12

作者 周湘琳 王冬含 +2 位作者 施根根 赵良功 封士兰 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期958-963,共6页

目的观察补肾健骨方含药血清对大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)细胞活性及分化、矿化的影响。方法制备补肾健骨方含药血清,将ROBs和r BMSCs... 目的观察补肾健骨方含药血清对大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)细胞活性及分化、矿化的影响。方法制备补肾健骨方含药血清,将ROBs和r BMSCs分为5%、10%、15%、20%、25%浓度含药血清组、无药血清组及传统诱导组,分别对各组ROBs和r BMSCs进行成骨诱导。MTT法检测ROBs和r BMSCs细胞的增殖情况;用试剂盒检测ROBs和r BMSCs的碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色法检测矿化结节形成。结果不同浓度含药血清组与空白无药血清组、传统诱导组相比,均不同程度地促进ROBs和r BMSCs的增殖,使ALP活性提高,增加钙化结节数量和面积。其中含药血清浓度为20%时促进ROBs增殖分化作用最佳,浓度为10%时促进r BMSCs增殖分化效果最为显著。结论不同浓度补肾健骨方含药血清均能够促进ROBs和r BMSCs的成骨增殖、分化和矿化,分别在浓度为20%和10%时最佳。 展开更多

关键词 中医中药 含药血清 大鼠颅骨成骨细胞 大鼠骨髓间充质干细胞 细胞增殖 成骨分化

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