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骨髓基质干细胞与聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇体外复合培养的实验研究 被引量：10
1
作者 潘海涛 郑启新 郭晓东 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期65-69,共5页
目的探讨骨髓基质干细胞(marrowstromalstemcells,MSCs)与聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇[poly(lacticacid/glycolicacid/asparagicacid-co-polyethyleneglycol),PLGA-ASP-PEG]的生物相容性,为构建组织工程骨进行骨缺损修复提供理... 目的探讨骨髓基质干细胞(marrowstromalstemcells,MSCs)与聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇[poly(lacticacid/glycolicacid/asparagicacid-co-polyethyleneglycol),PLGA-ASP-PEG]的生物相容性,为构建组织工程骨进行骨缺损修复提供理论基础,以及为组织工程支架材料的优化提供实验依据。方法本体开环共聚法合成PLGA-ASP-PEG三嵌段共聚物。取4周龄新西兰大白兔骨髓,体外分离培养MSCs。将第3代MSCs以1.0×106/ml接种到PLGA-ASP-PEG材料上,测定细胞黏附力和黏附率;扫描电镜观察细胞的形态学特征;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期、增殖指数、DNA指数及凋亡;通过考马斯亮蓝测定法和3H-脯氨酸掺入实验观察细胞的蛋白合成和胶原合成情况。以PLGA支架材料作为对照。结果MSCs在PLGA-ASP-PEG支架材料上贴附、生长良好,其黏附、增殖和蛋白、胶原合成能力均显著高于PLGA组(P<0.05),细胞凋亡率显著低于PLGA组(P<0.05)。DNA指数显示两组细胞均为正常的二倍体细胞。结论PLGA-ASP-PEG的生物学性能与PLGA相比得到显著改善和提高,可作为MSCs的理想载体构建组织工程骨进行骨缺损修复研究。 展开更多
关键词 组织工程骨 聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇 骨髓基质于细胞 复合培养 兔
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腺病毒介导TGF-β_1及BMP-7基因共表达感染骨髓基质干细胞修复兔关节软骨缺损 被引量：14
2
作者 龙华 袁华 +5 位作者 马保安 周勇 鱼兵 裘秀春 范德刚 范清宇 《中国骨与关节损伤杂志》 2008年第6期471-474,共4页
目的探讨腺病毒介导转化生长因子β1(TGF-β1)及骨形成蛋白7(BMP-7)基因共表达感染对骨髓基质干细胞(MSCs)增殖和定向分化的影响,观察其构建组织工程化软骨对关节软骨缺损的修复质量和疗效。方法以腺病毒AdEasy为基因转移载体,制备携带T... 目的探讨腺病毒介导转化生长因子β1(TGF-β1)及骨形成蛋白7(BMP-7)基因共表达感染对骨髓基质干细胞(MSCs)增殖和定向分化的影响,观察其构建组织工程化软骨对关节软骨缺损的修复质量和疗效。方法以腺病毒AdEasy为基因转移载体,制备携带TGF-β1和BMP-7基因的高滴度腺病毒感染兔MSCs,利用外源性基因编码的生长因子诱导其表达软骨细胞表型,通过免疫细胞化学、原位杂交、RT-PCR及己糖醛酸水平检测等方法鉴定。再将其与骨基质明胶(BMG)支架相复合体外构建组织工程化软骨,移植修复同种异体兔关节软骨缺损并进行形态学和组织学观察及修复结果分析。结果腺病毒感染MSCs后免疫细胞化学染色和RT-PCR可检测出外源基因及其编码蛋白的表达,通过原位杂交可检测出Ⅱ型胶原蛋白基因表达,细胞培养液中己糖醛酸水平明显升高。将其复合于骨基质明胶上,经组织染色和电镜观察可见前体软骨细胞贴附于BMG表面和孔隙内大量增殖,在体移植修复实验组新生组织为类透明软骨,修复效果明显优于各对照组。结论MSCs经携带TGF-β1和BMP-7基因的腺病毒感染后,体外能向软骨细胞作定向分化,可用于制备组织工程化软骨,使提高关节软骨缺损的修复质量成为可能。 展开更多
关键词 软骨形成 骨髓基质于细胞 腺病毒 组织工程
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壮骨颗粒含药血清对兔骨髓基质干细胞体外增殖及分化影响
3
作者 陈德喜 万修阳 +5 位作者 李沂红 郎继孝 姜国湖 胡文贤 詹金华 刘秋霞 《山东中医杂志》 2009年第12期865-866,共2页
目的:研究壮骨颗粒含药血清对骨髓基质干细胞体外成骨活性的影响。方法:采用体外细胞培养技术,用壮骨颗粒对细胞进行体外诱导培养建立实验组,并设置空白血清对照组,进行MTT、免疫组织化学染色及ALP测定,观察壮骨颗粒对骨髓基质细胞的诱... 目的:研究壮骨颗粒含药血清对骨髓基质干细胞体外成骨活性的影响。方法:采用体外细胞培养技术,用壮骨颗粒对细胞进行体外诱导培养建立实验组,并设置空白血清对照组,进行MTT、免疫组织化学染色及ALP测定,观察壮骨颗粒对骨髓基质细胞的诱导作用。结果:在促细胞增殖方面,实验组作用最显著(P<0.01),在第3天开始增殖,第6天达到平台期,而对照组对数增殖期明显延长(P<0.01);在促细胞分化方面,常规形态学观察,壮骨颗粒组诱导的细胞在形态上类似于成骨细胞,免疫组化染色提示诱导细胞具有骨细胞表型。结论:壮骨颗粒可促进细胞增殖,并诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 壮骨颗粒 骨髓基质于细胞 增殖 分化 成骨细胞
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RGD多肽表面修饰对HA-TCP生物陶瓷细胞相容性的影响 被引量：2
4
作者 蓝旭 梁军 +1 位作者 葛宝丰 刘雪梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2007年第4期383-385,共3页
目的:了解精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)多肽表面修饰对羟基磷灰石-磷酸三钙(hydroxyapatite-tricalcium phosphate,HA-TCP)细胞相容性的影响。方法:以骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)复合RGD多肽表面修饰的... 目的:了解精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)多肽表面修饰对羟基磷灰石-磷酸三钙(hydroxyapatite-tricalcium phosphate,HA-TCP)细胞相容性的影响。方法:以骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)复合RGD多肽表面修饰的HA-TCP或单纯材料培养制备组织工程骨,用倒置相差显微镜和扫描电镜观察MSCs的粘附和生长情况、检测细胞活力和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、流式细胞仪分析细胞周期。结果:MSCs在材料表面和孔隙内均可粘附和生长,粘附于RGD多肽修饰HA-TCP的细胞活力和ALP活性明显高于未经RGD多肽修饰组(P<0.01,P<0.05)。各组细胞周期未见明显变化,未见异倍体细胞。结论:RGD多肽表面修饰对HA-TCP材料的细胞相容性有明显的优化作用。 展开更多
关键词 组织工程 表面修饰 骨髓基质于细胞 细胞相容性
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灌注式生物反应器中流体剪切力对大段组织工程化骨构建的作用 被引量：5
5
作者 李德强 李德强 +10 位作者 李德强 杨爱玲 汤亭亭 汤亭亭 卢建熙 卢建熙 郭雪岩 戴尅戎 戴尅戎 戴尅戎 戴尅戎 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第1期8-14,20,共8页
目的结合流体力学模型研究灌注式生物反应器中大段组织工程化骨的构建与多孔支架内流体剪切力的关系。方法利用灌注式生物反应器对复合骨髓基质干细胞的多孔磷酸三钙支架进行灌注培养。培养基的黏度分别为1.12mPa.s,2.23mPa.s及3.35mPa.... 目的结合流体力学模型研究灌注式生物反应器中大段组织工程化骨的构建与多孔支架内流体剪切力的关系。方法利用灌注式生物反应器对复合骨髓基质干细胞的多孔磷酸三钙支架进行灌注培养。培养基的黏度分别为1.12mPa.s,2.23mPa.s及3.35mPa.s。通过细胞增殖、成骨分化及组织形态学评价组织工程化骨的构建,建立流体力学模型,求解支架内的流体剪切力。结果培养基黏度2.23mPa.s组,细胞增殖高于其他组。培养基黏度2.23mPa.s及3.35mPa.s组第28d的碱性磷酸酶活性及第7d后的骨钙素分泌高于1.12mPa.s组。培养基黏度越高,骨桥蛋白的分泌高峰出现越早。28d后,黏度3.35mPa.s组的钙化基质最多。流体力学模型分析,培养基黏度1.12mPa.s,2.23mPa.s及3.35mPa.s组中,支架内的平均流体剪切力分别为5mPa,11mPa和15mPa。结论在利用复合人骨髓基质干细胞的多孔磷酸三钙构建大段组织工程化骨的过程中,15mPa的流体剪切力最有利于组织工程化骨的构建。 展开更多
关键词 生物反应器 骨组织工程 流体剪切力 计算流体动力学 骨髓基质于细胞
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