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鲤春血症病毒中国分离株糖蛋白基因和氨基酸序列的初步解析
被引量：
14
1
作者
刘荭
付峰
+5 位作者
黄倢
何俊强
史秀杰
高隆英
杨锦舜
江育林
《中国病毒学》
CSCD
2005年第6期647-651,共5页
2002～2004年间从国内养殖鲤科鱼类和观赏鱼类中分离出8株鲤春血症病毒(SVCV)。根据SVCV参考株 全序列,设计引物,用逆转录聚合酶链式反应扩增出8株SVCV糖蛋白编码基因片段,并对扩增产物进行了克隆和 序列测定。用生物信息学方法对测得...
2002～2004年间从国内养殖鲤科鱼类和观赏鱼类中分离出8株鲤春血症病毒(SVCV)。根据SVCV参考株 全序列,设计引物,用逆转录聚合酶链式反应扩增出8株SVCV糖蛋白编码基因片段,并对扩增产物进行了克隆和 序列测定。用生物信息学方法对测得的序列进行分析,结果8个国内分离株的糖蛋白基因序列与参考株的基因序 列相似性均在92％以上,8个国内分离株之间基因序列相似性均在97．7％以上;8个国内分离株之间糖蛋白推导 出的氨基酸序列相似性均在94．5％以上,与参考株氨基酸序列相似性在92．9％-94．9％之间。系统发育树分析结 果表明,SVCV国内分离株与USA株、980451株、980528株和970469株的进化方向一致,与其它SVCV毒株在进 化方向上不同。8个毒株有19个共同的酶切位点,推导出的氨基酸序列中有10个亲水区、10个可能的抗原位点 和10个跨膜蛋白区域,其峰值基本一致。对SVCV国内分离株的糖蛋白6个功能位点(天冬酰胺糖基化位点、精 氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪氨酸磷酸化位点和肉豆蔻酰 基化位点)进行了初步分析。
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关键词
鲤春血症病毒
糖蛋白
序列
解析
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职称材料
鲤春血症病毒单克隆抗体建立及免疫学特性鉴定
被引量：
3
2
作者
景宏丽
张旻
+6 位作者
王娜
李维
贾小波
方莹
高隆英
林祥梅
吴绍强
《检验检疫学刊》
2014年第3期55-59,共5页
制备高特异性的抗鲤春血症病毒单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用差速离心法提纯的鲤春血症病毒作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,4次免疫后,利用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出高敏感的特异性抗鲤春血症病毒单克...
制备高特异性的抗鲤春血症病毒单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用差速离心法提纯的鲤春血症病毒作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,4次免疫后,利用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出高敏感的特异性抗鲤春血症病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,体内诱生腹水制备抗鲤春血症病毒单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。融合后筛出两株杂交瘤细胞株9C11和1C12,亚型均为IgG2b型,κ链;间接ELISA测定腹水效价为104,与其他病毒株和细胞株不发生反应;western-blot结果显示单克隆抗体对应的抗原位点在相对分子质量(Mr)230 000的条带处;免疫氧化酶染色结果显示单克隆抗体能够特异地识别感染细胞内的鲤春血症病毒。本实验制备的抗鲤春血症病毒单克隆抗体特异性好,为鲤春血症病毒免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
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关键词
鲤春血症病毒
单克隆抗体
间接ELISA
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职称材料
题名
鲤春血症病毒中国分离株糖蛋白基因和氨基酸序列的初步解析
被引量：
14
1
作者
刘荭
付峰
黄倢
何俊强
史秀杰
高隆英
杨锦舜
江育林
机构
深圳出入境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室
中国科学院黄海水产研究所水产病害控制研究室
出处
《中国病毒学》
CSCD
2005年第6期647-651,共5页
基金
该项目由农业部中国水产科学研究院内陆渔业生态环境和资源重点开放实验室资助。
文摘
2002～2004年间从国内养殖鲤科鱼类和观赏鱼类中分离出8株鲤春血症病毒(SVCV)。根据SVCV参考株 全序列,设计引物,用逆转录聚合酶链式反应扩增出8株SVCV糖蛋白编码基因片段,并对扩增产物进行了克隆和 序列测定。用生物信息学方法对测得的序列进行分析,结果8个国内分离株的糖蛋白基因序列与参考株的基因序 列相似性均在92％以上,8个国内分离株之间基因序列相似性均在97．7％以上;8个国内分离株之间糖蛋白推导 出的氨基酸序列相似性均在94．5％以上,与参考株氨基酸序列相似性在92．9％-94．9％之间。系统发育树分析结 果表明,SVCV国内分离株与USA株、980451株、980528株和970469株的进化方向一致,与其它SVCV毒株在进 化方向上不同。8个毒株有19个共同的酶切位点,推导出的氨基酸序列中有10个亲水区、10个可能的抗原位点 和10个跨膜蛋白区域,其峰值基本一致。对SVCV国内分离株的糖蛋白6个功能位点(天冬酰胺糖基化位点、精 氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪氨酸磷酸化位点和肉豆蔻酰 基化位点)进行了初步分析。
关键词
鲤春血症病毒
糖蛋白
序列
解析
Keywords
Spring viraemia of carp virus （SVCV）
Glycoprotein
Sequences Analyses
分类号
S943 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
鲤春血症病毒单克隆抗体建立及免疫学特性鉴定
被引量：
3
2
作者
景宏丽
张旻
王娜
李维
贾小波
方莹
高隆英
林祥梅
吴绍强
机构
中国检验检疫科学研究院
蛇口出入境检验检疫局
出处
《检验检疫学刊》
2014年第3期55-59,共5页
基金
"十二五"国家科技支撑计划项目(2013BAD12B02)
文摘
制备高特异性的抗鲤春血症病毒单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用差速离心法提纯的鲤春血症病毒作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,4次免疫后,利用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出高敏感的特异性抗鲤春血症病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,体内诱生腹水制备抗鲤春血症病毒单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。融合后筛出两株杂交瘤细胞株9C11和1C12,亚型均为IgG2b型,κ链;间接ELISA测定腹水效价为104,与其他病毒株和细胞株不发生反应;western-blot结果显示单克隆抗体对应的抗原位点在相对分子质量(Mr)230 000的条带处;免疫氧化酶染色结果显示单克隆抗体能够特异地识别感染细胞内的鲤春血症病毒。本实验制备的抗鲤春血症病毒单克隆抗体特异性好,为鲤春血症病毒免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
关键词
鲤春血症病毒
单克隆抗体
间接ELISA
Keywords
Spring Viraemia of Carp Virus
Monoclonal Antibody
Indirect ELISA
分类号
S943 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鲤春血症病毒中国分离株糖蛋白基因和氨基酸序列的初步解析
刘荭
付峰
黄倢
何俊强
史秀杰
高隆英
杨锦舜
江育林
《中国病毒学》
CSCD
2005
14
下载PDF
职称材料
2
鲤春血症病毒单克隆抗体建立及免疫学特性鉴定
景宏丽
张旻
王娜
李维
贾小波
方莹
高隆英
林祥梅
吴绍强
《检验检疫学刊》
2014
3
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职称材料
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