高效毛细管电泳法测定酱油中5′-单磷酸核苷酸 被引量：7

1

作者 李佳 李芸 +3 位作者 宋宝花 丁晓静 赵珊 王志 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第22期264-267,共4页

建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-... 建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-环糊精为分离缓冲溶液,50mmol/L醋酸溶液为样品介质,检测波长为254nm。GMP及IMP的校正峰面积与质量浓度在5～100mg/L范围内具有良好线性关系,线性相关系数分别为0.9998和0.9997,检出限均为2mg/L,定量限均为5mg/L。用该法测定了9种酱油,并与文献报道的高效液相色谱法的结果进行比较,结果满意。 展开更多

关键词 高效毛细管电泳 核苷酸 鸟嘌呤-5′-单磷酸 次黄嘌呤-5′-单磷酸 酱油

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5’-单磷酸腺苷在水和乙醇/水体系中的溶解度模型 被引量：2

2

作者 马骏 张磊 +3 位作者 史隽 吴永宏 应汉杰 肖明芳 《生物加工过程》 CAS CSCD 2007年第2期61-66,共6页

以固-液平衡理论溶解度模型、适用于非理想体系的λh方程为理论基础,结合本实验结晶条件,采用静态法测定了5’-单磷酸核苷(5’-AMP)在纯水以及不同配比乙醇/水体系中的溶解度,建立了5’-AMP水和乙醇/水体系的结晶热力学模型。显示该体... 以固-液平衡理论溶解度模型、适用于非理想体系的λh方程为理论基础,结合本实验结晶条件,采用静态法测定了5’-单磷酸核苷(5’-AMP)在纯水以及不同配比乙醇/水体系中的溶解度,建立了5’-AMP水和乙醇/水体系的结晶热力学模型。显示该体系属于缔合引起的非理想溶液,并计算水及乙醇/水体系的溶解热和结晶热,为5’-单磷酸腺苷的工业结晶生产提供了热力学数据。 展开更多

关键词 5’-单磷酸腺苷 溶解度 结晶热力学

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香菇乳清酸核苷-5’-单磷酸脱羧酶编码基因le-pyrG的克隆 被引量：2

3

作者 鲍大鹏 冯爱萍 +4 位作者 张美彦 谭琦 陈明杰 牛丽英 潘迎捷 《食用菌学报》 北大核心 2009年第2期13-16,共4页

通过巢式简并PCR和基因组步行技术从香菇(Lentinula edodes)单核体中克隆到乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶(orotidine-5’-monophosphate decarboxylase,OMPDC)的编码基因le-pyrG,长度为946bp。经生物信息学分析,香菇le-pyrG基因含有2个... 通过巢式简并PCR和基因组步行技术从香菇(Lentinula edodes)单核体中克隆到乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶(orotidine-5’-monophosphate decarboxylase,OMPDC)的编码基因le-pyrG,长度为946bp。经生物信息学分析,香菇le-pyrG基因含有2个长度分别为67bp和51bp的内含子,该基因可以编码1个含有275个氨基酸残基的蛋白质序列,该序列经比对分析显示与裂褶菌(Schizophyllum commne)和灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)OMPDC序列的相同性分别为73%和70%,相似性分别为84%和83%。这是首次报道从栽培食用真菌中克隆出乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶编码基因的全序列。 展开更多

关键词 香菇 乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶 le-pyrG基因

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碳酸胍体系中6种5′-单磷酸核苷酸的毛细管电泳分离研究 被引量：1

4

作者 周文峰 袁倬斌 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1175-1178,共4页

报告了在碳酸胍体系中研究 6种 5′ 单磷酸核苷酸的分离工作 ,考察了分离条件对分离结果的影响。在最佳条件下 ,TMP、AMP、CMP、GMP、IMP、UMP等 6种核苷酸的线性范围分别为 :5～ 3 5 0、2～ 3 0 0、1 0～ 40、5～ 3 5 0、1 0～ 40 0和 ... 报告了在碳酸胍体系中研究 6种 5′ 单磷酸核苷酸的分离工作 ,考察了分离条件对分离结果的影响。在最佳条件下 ,TMP、AMP、CMP、GMP、IMP、UMP等 6种核苷酸的线性范围分别为 :5～ 3 5 0、2～ 3 0 0、1 0～ 40、5～ 3 5 0、1 0～ 40 0和 1 0～ 40 0mg/L ;其检出限分别为 :1、0 .5、2、1、2和 2mg/L。初步探讨了胍基与不同核苷酸之间的相互作用及这种作用对毛细管电泳分离的影响。并将实验结果与普通碳酸盐体系作了比较。 展开更多

关键词 碳酸胍 5′-单磷酸核苷酸 毛细管电泳 分离 相互作用

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三孢布拉氏霉乳清酸核苷-5’-单磷酸脱羧酶基因的PCR扩增与序列分析

5

作者 高建峰 宋冬林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期419-423,共5页

根据对卷枝毛霉Mucor circinelloides、布氏须霉PPhycomyces blakesleeanu、雪白根霉Rhizopus niveu、少根根霉Rhizo pus arrhizus和微小根毛霉Rhizomucor pusillus的乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因核酸序列的同源性分析,在第3个... 根据对卷枝毛霉Mucor circinelloides、布氏须霉PPhycomyces blakesleeanu、雪白根霉Rhizopus niveu、少根根霉Rhizo pus arrhizus和微小根毛霉Rhizomucor pusillus的乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因核酸序列的同源性分析,在第3个外显子内根据卷枝毛霉基因序列设计1对引物,以三孢布拉氏霉Blakeslea trispora基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到1个长度约为500 bp的产物。经过同源性分析证明该产物为三孢布拉氏霉乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因片段。在此基础上,采用抑制性PCR扩增技术,进行染色体步行,分别克隆染色体上相邻的DNA片段,测定了基因的全序列,并对该序列进行了分析。结果表明:在外显子区域核酸序列与卷枝毛霉、少根根霉和微小根毛霉的同源率分别为82％,81％和79％。 展开更多

关键词 三孢布拉氏霉 乳清酸核苷-5’-单磷酸脱羧酶 基因 PCR 核酸 同源性 染色体 DNA 类胡萝卜素

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DNA修饰碱基5-甲基胞嘧啶和8-羟基鸟嘌呤的毛细管气相色谱分析及质谱鉴定 被引量：7

6

作者 宋元宗 祝其锋 +1 位作者 庄海旗 莫丽儿 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期295-299,共5页

探索了GC/FID定量分析DNA修饰碱基 5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的实验条件 ,用GC/MS鉴定各有关成分。结果表明 ,DNA水解物中不同成分可被成功地衍生和分离 ;5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的相对摩尔反应因子分别为 3 0和 1 3;灵敏度分... 探索了GC/FID定量分析DNA修饰碱基 5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的实验条件 ,用GC/MS鉴定各有关成分。结果表明 ,DNA水解物中不同成分可被成功地衍生和分离 ;5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的相对摩尔反应因子分别为 3 0和 1 3;灵敏度分别为 5 50× 1 0 9mV·s/ g和 7 59× 1 0 1 0 mV·s/ g ;检测限可分别达 36 4pg/s和 1 5 8pg/s ;整个分析流程的相对标准偏差小于 2 0 %。 展开更多

关键词 5-甲基胞嘧啶 8-羟基鸟嘌呤 GC/FID 分析鉴定

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β-细辛醚对肾癌增殖及迁移侵袭的影响及其分子机制

7

作者 张盼 梅一波 +1 位作者 贺大林 曾津 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2024年第8期731-736,共6页

目的研究β-细辛醚(β-As)对肾癌细胞的抑制作用及其分子机制,帮助阐明β-As抗肾肿瘤的作用并为其临床转化提供参考。方法本实验选用人肾癌细胞786-O和769-P进行体外实验,使用小鼠肾癌细胞Renca进行体内实验。应用MTT法、细胞划痕试验... 目的研究β-细辛醚(β-As)对肾癌细胞的抑制作用及其分子机制,帮助阐明β-As抗肾肿瘤的作用并为其临床转化提供参考。方法本实验选用人肾癌细胞786-O和769-P进行体外实验,使用小鼠肾癌细胞Renca进行体内实验。应用MTT法、细胞划痕试验、细胞侵袭实验(Transwell)小室检测肾癌细胞体外增殖、迁移侵袭能力;应用蛋白印迹法检测自噬及上皮间质转化(EMT)等相关蛋白水平的变化;应用Balb/c小鼠皮下成瘤实验检测β-As在体内的抗肿瘤作用。结果β-As可通过剂量依赖的方式抑制肾癌细胞786-O和769-P体外增殖。β-As可上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin、Vimentin的表达,并抑制其体外迁移侵袭能力。β-As可通过剂量依赖的方式上调LC3-Ⅱ、p-AMPK表达,下调p-mTOR、p-S6K的表达,而对总的AMPK、mTOR表达水平无显著影响。体内实验发现β-As可抑制肾癌细胞增殖。结论β-细辛醚通过自噬依赖性AMPK/mTOR信号通路对肾癌细胞的生长增殖、迁移侵袭及EMT进行抑制,在肾透明细胞癌尤其是进展期肾癌方面具有一定的临床转化潜能。 展开更多

关键词 肾癌 Β-细辛醚 自噬 迁移 侵袭 上皮间质转化 p-5′-单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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前列腺癌组织肝激酶B1,Rab鸟嘌呤核苷酸交换因子-5 mRNA表达水平与临床病理特征和预后的相关性研究 被引量：2

8

作者 荣蓉 古颖 +1 位作者 高翔 张磊 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第6期1-5,26,共6页

目的研究前列腺癌患者癌组织中肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)及Rab鸟嘌呤核苷酸交换因子-5(Rab guanine nucleotide exchage factor-5,Rab EX-5)mRNA表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测92例前列腺癌组织和80例良... 目的研究前列腺癌患者癌组织中肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)及Rab鸟嘌呤核苷酸交换因子-5(Rab guanine nucleotide exchage factor-5,Rab EX-5)mRNA表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测92例前列腺癌组织和80例良性前列腺增生组织中LKB1及RabEX-5 mRNA的表达,比较LKB1,RabEX-5 mRNA表达组间差异及与临床病理特征的关系。Pearson线性相关分析LKB1与RabEX-5 mRNA表达的相关性。Kaplan-Meier生存分析LKB1,RabEX-5 mRNA表达与前列腺癌患者生存预后的关系。多因素COX回归分析影响前列腺癌患者生存预后的危险因素。结果与前列腺增生组织相比,前列腺癌组织中RabEX-5 mRNA表达明显升高(1.311±0.374 vs 0.457±0.083),差异有统计学意义(t=20.758,P=0.000),而LKB1 mRNA表达显著降低(0.373±0.052 vs 1.234±0.268),差异有统计学意义(t=30.181,P=0.000)。LKB1,RabEX-5 mRNA表达与Gleason评分、骨转移、TNM分期有关(t=2.419~9.965,均P<0.05),与年龄、前列腺特异抗原(PSA)水平无关(t=0.379~1.453,均P>0.05)。前列腺癌组织中LKB1与RabEX-5 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.402,P=0.000)。低LKB1表达组3年总体生存率低于高LKB1表达组(χ^(2)=55.605,P=0.000),高RabEX-5表达组3年总体生存率低于低RabEX-5表达组(χ^(2)=29.435,P=0.000)。多因素COX回归分析结果表明,Gleason评分≥7分(OR=2.671,P=0.018)、骨转移(OR=1.528,P=0.031)、TNM分期为Ⅲ期(OR=1.634,P=0.037),LKB1 mRNA低表达(OR=1.764,P=0.008)及RabEX-5 mRNA高表达(OR=2.587,P=0.000)是影响前列腺癌患者生存预后的危险因素(P<0.05)。结论前列腺癌组织中RabEX-5 mRNA表达升高,而LKB1 mRNA表达降低,二者共同参与前列腺癌的发生发展,有望成为评估前列腺癌患者预后的组织肿瘤标志物。 展开更多

关键词 前列腺癌 肝激酶B1 Rab鸟嘌呤核苷酸交换因子-5 临床病理特征

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敲减lncRNA BAIAP2-AS1对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制 被引量：1

9

作者 李贺扬 龙银波 +2 位作者 金治宾 刘容 倪晓光 《山东医药》 CAS 2024年第4期44-49,共6页

目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检... 目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检测各细胞中微小RNA-491-5p(miR-491-5p)、BAIAP2-AS1、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)mRNA表达,选择lncRNA BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA相对表达量变化较显著的胶质瘤细胞进行后续实验。取上述胶质瘤细胞,随机分为空白对照组、BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1 shRNA+NC inhibitor组,BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA、NC shRNA,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1shRNA+NC inhibitor组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA与miR-491-5p inhibitor、BAIAP2-AS1 shRNA与NC inhibitor,空白对照组不予转染。转染48 h,收集细胞,采用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率,采用RT-qPCR法检测BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA表达。采用StarBase在线数据库预测miR-491-5p与BAIAP2-AS1、MGMT的互补位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证其靶向调控关系。结果与NHA细胞比较,A172、LN229、U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低(P均<0.05)。以U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低,故以U251细胞进行后续实验。与空白组、NC shRNA组比较,BAIAP2-AS1 shRNA组细胞活性、细胞迁移率、BAIAP2-AS1、MGMT表达显著降低(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著升高(P均<0.05);与BAIAP2-AS1 shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+inhibitor NC组比较,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组细胞活性、细胞迁移率、MGMT表达显著增加(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著降低(P均<0.05)。经StarBase在线数据库预测和双荧光素酶报告基因实验验证,BAIAP2-AS1可靶向调控miR-491-5p表达、miR-491-5p可靶向调控MGMT表达。结论敲减BAIAP2-AS1可通过调节miR-491-5p/MGMT轴抑制胶质瘤细胞增殖、迁移并促进其凋亡。 展开更多

关键词 胶质瘤 长链非编码RNA BAIAP2反义RNA 1 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 微小RNA-491-5p O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶

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N^6-(6-氨基己基)-5′-磷酸腺苷的合成(英文) 被引量：1

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作者 周乐 史远刚 +1 位作者 李键 王建辰 《西北农业大学学报》 CSCD 1996年第2期17-20,共4页

由肌苷开始经五步合成出Ｎ６－（６－氮基己基）－５’－磷酸腺苷。对６－氯－９β－Ｄ－呋喃核糖嘌呤的合成进行了改进。１，６－己二胺同６－氯－９β－Ｄ呋喃核糖嘌呤－５’－磷酸发生取代反应，合成出Ｎ６－（６－氮基己基）－５′... 由肌苷开始经五步合成出Ｎ６－（６－氮基己基）－５’－磷酸腺苷。对６－氯－９β－Ｄ－呋喃核糖嘌呤的合成进行了改进。１，６－己二胺同６－氯－９β－Ｄ呋喃核糖嘌呤－５’－磷酸发生取代反应，合成出Ｎ６－（６－氮基己基）－５′－磷酸腺苷，基于核苷的总产率约７０％。 展开更多

关键词 肌苷 核苷 5′-单磷酸腺苷 酶免疫测定 亲和层析

原文传递

UPLC-HRMS法定量分析小鼠组织中的6-氧-甲基鸟嘌呤 被引量：2

11

作者 李琛 王荣浩 +3 位作者 毛健 霍现宽 王丁众 张建勋 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期53-59,共7页

为评价4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的器官致癌性,建立了一种定量分析C57BL/6小鼠组织中DNA甲基化加合物6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)的超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,并分别对NNK染毒后生理盐水对照组、... 为评价4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的器官致癌性,建立了一种定量分析C57BL/6小鼠组织中DNA甲基化加合物6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)的超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,并分别对NNK染毒后生理盐水对照组、吡唑处理组和5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量进行了测定。用试剂盒提取组织样品DNA,提取物在80℃下酸解后加入内标6-氧-甲基-d3-鸟嘌呤([CD_3]6-O-MeG),经过HLB固相萃取柱净化后进行UPLC-HRMS分析。结果表明:(1)6-O-MeG在0.05~10.00 ng/mL内线性良好(R^2=0.999 8),检出限0.011ng/mL,回收率92.1%~102.2%,日内和日间精密度分别为1.10%~4.34%和1.89%~6.58%。(2)给药4 h后,吡唑处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量分别为对照组的2.09和1.87倍,5-MOP处理组则分别为对照组的0.32和0.67倍,表明小鼠体内的CYP2A5在NNK的代谢活化过程中起到重要作用。该方法样品前处理简单、选择性好、灵敏度高,适用于小鼠组织中6-O-MeG的测定。 展开更多

关键词 NNK 6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG) 吡唑 5-甲氧基补骨脂素(5-MOP) C57BL/6小鼠 超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)

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5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肺癌SPC-A1细胞增殖及SFRP1、MGMT甲基化蛋白表达的影响 被引量：1

12

作者 华丛书 叶静 +2 位作者 陈海 葛腾飞 陈晓宇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期367-371,共5页

目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转... 目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)基因启动子区DNA甲基化mRNA和蛋白在其中的表达和意义。方法CCK-8法检测不同浓度的5-Aza-CdR对人肺癌SPC-A1细胞增殖影响,划痕实验测定5-Aza-CdR对SPC-A1细胞迁移能力的影响,Hoechst 33258染色检测(0、3、10、30μmol·L^(-1))5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞24h后细胞凋亡情况,RT-PCR、Western blot法检测SPC-A1细胞中SFRP1和MGMT的mRNA、蛋白表达。结果5-Aza-CdR可以浓度梯度的抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,IC 50为21.2μmol·L^(-1);5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))作用48 h后,肺癌SPC-A1细胞划痕愈合分别为对照组的(92.4±2.6)%、(83.6±4.2)%、(76.7±4.5)%;5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞后,出现典型的细胞凋亡形态学改变;不同浓度5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))处理SPC-A1细胞24 h后,SFRP1、MGMT mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。结论5-Aza-CdR可抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,抑制肺癌细胞划痕修复和促进凋亡,可能与升高MGMT和SFRPl的甲基化表达有关。 展开更多

关键词 肺癌SPC-A1细胞 5-氮杂-2′-脱氧胞苷 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶 分泌型卷曲相关蛋白1 细胞增殖 细胞凋亡

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N^2,9-二乙酰基鸟嘌呤的合成

13

作者 战佩英 娄奇 《通化师范学院学报》 2002年第2期52-54,共3页

本文介绍了用N,N-二甲基吡啶(DMAP)为催化剂合成N^2,9-二乙酰基鸟嘌呤的新方法,并对催化剂及其他因素的影响进行了研究,该方法具有操作简便,反应时间短,产品收率高达76％的优点。

关键词 N^2 9-二乙酰基鸟嘌呤 催化剂 合成 DMAP N N-二甲基吡啶 C9N9N5O3 乙酰化试剂 冰醋酸 抗病毒性药物 医药合成中间体

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白花蛇舌草提取物通过AMPK/ATG5信号通路对急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用机制研究 被引量：1

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作者 哈宗兰 马丽娜 +1 位作者 马琼 甘桂芬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期348-354,共7页

目的:通过5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/自噬相关蛋白5(ATG5)信号通路,探讨白花蛇舌草提取物减轻急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤的机制。方法:建立AP肺损伤大鼠模型,随机分为模型组、提取物(白花蛇舌草提取物)组、3-MA(自噬抑制剂3-甲... 目的:通过5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/自噬相关蛋白5(ATG5)信号通路,探讨白花蛇舌草提取物减轻急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤的机制。方法:建立AP肺损伤大鼠模型,随机分为模型组、提取物(白花蛇舌草提取物)组、3-MA(自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤)组、AICAR(AMPK激活剂)组、提取物+AICAR组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组;ELISA检测血清淀粉酶(AMY)、IL-1β、IL-6、IL-18水平;检测大鼠腹水量及肺湿/干重比(W/D);HE观察胰腺及肺组织病理损伤;Western blot检测溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、自噬底物p62、IL-1β前体蛋白(pro-IL-1β)、胰蛋白酶原活化肽(TAP)、AMPK、p-AMPK、ATG5、自噬标志物LC3-Ⅱ/Ⅰ、泛素特异性蛋白酶10(UPS10)表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠腹水量、肺W/D、胰腺和肺组织病理损伤评分、血清AMY、IL-1β、IL-6、IL-18水平、胰腺组织p62、TAP、pro-IL-1β表达、肺组织pAMPK/AMPK、ATG5、LC3-Ⅱ/Ⅰ、UPS10、pro-IL-1β表达均升高(P<0.05),胰腺和肺组织LAMP2蛋白表达降低(P<0.05);模型大鼠经白花蛇舌草提取物或自噬抑制剂3-MA干预后,上述指标均得到显著改善(P<0.05),且白花蛇舌草提取物的改善效果优于3-MA(P<0.05);而AMPK激活剂AICAR可削弱白花蛇舌草提取物对AP大鼠肺损伤的改善作用(P<0.05)。结论:白花蛇舌草提取物可通过抑制AMPK/ATG5信号通路减轻炎症反应、降低自噬水平改善AP大鼠肺损伤。 展开更多

关键词 白花蛇舌草提取物 胰腺炎 肺损伤 5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶 自噬相关蛋白5 炎症-自噬

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O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶在结肠癌干细胞中的表达及其与结肠癌5-氟尿嘧啶获得性耐药的关系 被引量：6

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作者 翟荣林 张小明 +3 位作者 王继亮 张万里 龙跃平 王国斌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期248-250,共3页

目的 探讨DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）在结肠癌干细胞中的表达及其与结肠癌5-氟尿嘧啶（5-Fu）获得性耐药的关系.方法 构建人结肠癌细胞5-Fu耐药模型,检测MGMT在耐药组与对照组中的表达差异,观察MGMT在CD133＋和CD1... 目的 探讨DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）在结肠癌干细胞中的表达及其与结肠癌5-氟尿嘧啶（5-Fu）获得性耐药的关系.方法 构建人结肠癌细胞5-Fu耐药模型,检测MGMT在耐药组与对照组中的表达差异,观察MGMT在CD133＋和CD133-细胞中的表达水平,比较耐药组和对照组CD133＋结肠癌干细胞分布比例.结果 MGMT在耐药组和对照组中的蛋白表达量分别为104.21±13.16和48.37±12.45,耐药组中的表达水平明显高于对照组（P＜0.01）;CD133＋细胞在耐药组和对照组中的比例分别为（1.77±0.75）％和（3.43±0.25）％,耐药组分布比例明显低于对照组;MGMT在耐药组和对照组CD133-细胞中的表达量均显著高于CD133＋细胞,耐药组与对照组之间的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 MGMT高表达与结肠癌5-Fu获得性耐药密切相关,耐药组中异常的CD133＋结肠癌干细胞分布比例提示其也参与了获得性耐药,但并不通过MGMT分子所介导. 展开更多

关键词 O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶 结肠癌 5-氟尿嘧啶 化疗耐药性

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HSF1/AMPK信号通路在铁死亡参与糖尿病心肌病发病的机制研究

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作者 周康 宋俊华 +3 位作者 周密 杨艳丽 陈海滨 张沥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1074-1080,共7页

目的:探讨热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)/5′-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)信号通路调控铁死亡对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)发病的影响。方法:本研究为实... 目的:探讨热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)/5′-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)信号通路调控铁死亡对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)发病的影响。方法:本研究为实验研究,采用空白对照与多组实验对照。H9c2细胞随机分为4组:低葡萄糖组(control,Con)、高葡萄糖组(high glucose,HG)、HG+HSF1组、HG+HSF1+化合物C(compound C,CC)组。分别对细胞进行罗丹明胶质蛋白染色、细胞线粒体(reactive oxygen species,ROS)检测和细胞脂质ROS检测,并通过Western blot分析AMPK信号表达。雄性C57/BL6小鼠随机分为4组:NC组、NC+HSF1组、DM组和DM+HSF1组,每组12只。通过超声心动图评估了小鼠心血管功能参数。结果:与Con组相比,HG组HSF1、pAMPK/AMPK水平明显下调(P=0.005、0.002),和相对细胞表面积、线粒体Fe2+水平、线粒体ROS水平、细胞脂质ROS水平明显增加(P=0.001、0.003、0.006、0.002)。与HG组相比,HG+HSF1组明显逆转了这些变化(P=0.001、0.001、0.002、0.006、0.007、0.003),但加入CC时HSF1的逆转作用明显减弱(P<0.05)。与NC组相比,DM组EF%、FS%、E/A、E′/A′和心脏组织中HSF1、pAMPK/AMPK表达明显降低(均P<0.01),和心脏组织中Fe2+、ROS、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平和4-羟基壬烯酸(4-Hydroxynonenal,4-HNE)蛋白水平明显增加(P=0.004、0.003、0.001、0.004),DM+HSF1组明显逆转了这些变化。结论:HSF1在DCM病理过程中发挥心脏保护作用,其抗铁死亡作用可能与AMPK依赖性的脂质代谢和线粒体稳态调节有关。 展开更多

关键词 热休克因子1 5′-单磷酸腺苷活化蛋白激酶 糖尿病心肌病 小鼠 铁死亡

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金果胃康胶囊对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜ULK1/AMPK/mTOR信号通路的影响 被引量：3

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作者 沈家林 许雨晴 +2 位作者 曹若彤 郗春华 赵唯含 《陕西中医》 CAS 2024年第4期446-450,共5页

目的:探讨金果胃康胶囊对胃癌前病变(PLGC)大鼠UNC-51样激酶1(ULK1)/5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:75只SPF级Wistar大鼠,除空白组外,采用MNNG复合造模法建立PLGC大鼠模型,造模... 目的:探讨金果胃康胶囊对胃癌前病变(PLGC)大鼠UNC-51样激酶1(ULK1)/5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:75只SPF级Wistar大鼠,除空白组外,采用MNNG复合造模法建立PLGC大鼠模型,造模成功后运用随机数字表法分为模型组、叶酸组及金果胃康高、中、低剂量组,每组12只。灌胃给药8周后取材。HE染色观察胃黏膜病理学变化,免疫组化法检测ULK1蛋白表达水平,qPCR检测胃组织AMPK、mTOR mRNA表达水平,Western blot检测胃组织AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。结果:金果胃康胶囊可显著改善PLGC大鼠胃黏膜萎缩、肠化生、上皮结构、形态紊乱及细胞异型性等病理表现。与模型组比较,金果胃康胶囊能显著上调AMPK、p-AMPK、ULK1的表达水平,下调mTOR、p-mTOR的表达水平(P<0.05),以高剂量组疗效最为显著。结论:金果胃康胶囊可能通过调控ULK1/AMPK/mTOR信号通路促进细胞自噬,修复胃黏膜病变,从而起到防治PLGC的作用。 展开更多

关键词 胃癌前病变 自噬 金果胃康胶囊 UNC-51样激酶1 5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 大鼠

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岩藻黄素对小鼠非酒精性脂肪性肝病的修复作用 被引量：1

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作者 任祥雨 郑佳文 +4 位作者 田笑笑 曹洪杰 李航婷 唐云平 杨最素 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期42-52,共11页

目的:探究岩藻黄素对高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的修复作用及其机制。方法:将52只C57BL/6小鼠随机分成4组,正常组14只,其余为实验组,实验组给予8周的高脂饮食喂养之后,再... 目的:探究岩藻黄素对高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的修复作用及其机制。方法:将52只C57BL/6小鼠随机分成4组,正常组14只,其余为实验组,实验组给予8周的高脂饮食喂养之后,再分为模型组、岩藻黄素低剂量和高剂量组,给予灌胃6周,每日1次。每周记录小鼠的体质量,第14周结束时小鼠禁食12 h后全部处死。后续分别测定各组小鼠血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)活力,总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoproteincholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoproteincholesterol,HDL-C)、游离脂肪酸、脂联素和瘦素含量;检测肝脏组织匀浆液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子α含量;透射电镜下观察肝脏的组织病理学变化并采用蛋白免疫印迹法检测肝脏中5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)和Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)信号通路蛋白表达情况。结果:与模型组相比,岩藻黄素组中的TC、TG、LDL-C、ALT、AST显著降低(P<0.05),HDL-C显著升高(P<0.05),且降低了瘦素水平,增加了脂联素分泌,GSH-Px、SOD、CAT升高(P<0.05),MDA降低(P<0.05),且炎症因子的水平降低。苏木精-伊红染色、油红O染色、糖原染色和透射电镜结果显示岩藻黄素组肝脏组织学结构好转,趋近于正常组。蛋白免疫印迹法结果显示岩藻黄素治疗可上调AMPK信号通路中磷酸化5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶和过氧化物酶体增殖物激活受体α、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶、肉碱脂酰转移酶1,下调固醇调节元件结合蛋白-1c、脂肪酸合酶表达;抑制Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/Nrf2信号通路中Keap-1的水平,提高Nrf2及其下游抗氧化蛋白血红素氧合酶1、NAD(P)H-醌氧化还原酶1和谷氨酸-半胱氨酸连接酶的表达水平;下调TLR4信号通路中TLR4蛋白的表达,抑制髓样分化因子88、磷酸化人核因子κB抑制蛋白α和磷酸化核因子κB蛋白(p65)的表达。结论:岩藻黄素可通过调节脂质代谢、减少氧化应激和调节炎症等途径修复高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病。 展开更多

关键词 岩藻黄素 小鼠 非酒精性脂肪性肝病 5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶/核因子κB通路 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1-核转录因子红系2相关因子2通路

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甲酸钠法合成鸟嘌呤的研究

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作者 张从芬 王凤各 +1 位作者 游志英 缪慧萍 《中国当代医药》 2013年第28期9-10,13,共3页

目的研究合成精制鸟嘌呤的方法。方法以2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐和甲酸钠为原料,在3 atm压力和甲酸催化下,通过回流反应得到粗品鸟嘌呤,用盐酸酸化后,再用氨水处理得到精制鸟嘌呤。结果当物质的量配比(2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫... 目的研究合成精制鸟嘌呤的方法。方法以2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐和甲酸钠为原料,在3 atm压力和甲酸催化下,通过回流反应得到粗品鸟嘌呤,用盐酸酸化后,再用氨水处理得到精制鸟嘌呤。结果当物质的量配比(2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐∶甲酸)为1∶1.5,反应时间为8 h,以铁粉作还原剂时,得率较高。结论甲酸钠法工艺简单,操作容易控制,产品收率较高且反应时间短,易于实现工业化生产,是合成鸟嘌呤的良好方法。 展开更多

关键词 鸟嘌呤 2 4 5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐 甲酸钠

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超声波联合一磷酸腺苷(AMP)处理对鹅胸肉的嫩化效果 被引量：2

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作者 张坤 杨恒 +4 位作者 卞欢 邹烨 王道营 徐为民 赵保雷 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第4期1-7,共7页

为了解超声波与一磷酸腺苷(5'-Adenosine monophosphate,AMP)对鹅胸肉品质的作用,本试验对未处理的对照组和经单独超声波处理、单独AMP腌制及超声波联合AMP处理这三种不同嫩化处理的鹅胸肉进行对比分析,结果表明,单独超声波处理、AM... 为了解超声波与一磷酸腺苷(5'-Adenosine monophosphate,AMP)对鹅胸肉品质的作用,本试验对未处理的对照组和经单独超声波处理、单独AMP腌制及超声波联合AMP处理这三种不同嫩化处理的鹅胸肉进行对比分析,结果表明,单独超声波处理、AMP腌制和超声波联合AMP处理均可显著(p <0.05)增加鹅胸肉的小片化指数(MFI),显著(p <0.05)减小肉品蒸煮损失和剪切力,使肉品热敏性、组织学结构和表面微观结构发生明显变化,同时游离态肌动蛋白含量显著增大(p <0.05),肌动球蛋白表面微观结构发生明显改变,且超声波联合AMP处理方法在以上处理组中嫩化效果最佳,肌动蛋白含量最多,相关性分析结果显示,剪切力MFI之间的相关系数为-0.984,剪切力和肌动蛋白相对含量之间的相关系数为-0.997,呈显著(p <0.05)负相关,而肌动蛋白含量和MFI之间的相关系数为0.994,呈显著(p <0.05)正相关。因此,超声波联合AMP处理可用于鹅胸肉的嫩化,既绿色环保、节约能源又可为超声嫩化技术在肉品加工领域的广泛应用奠定理论基础。 展开更多

关键词 超声波 5’-单磷酸腺苷 嫩化 组织结构

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