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环洞庭湖地区活禽市场鸭源NDV的分离鉴定及遗传演化分析
被引量：
1
1
作者
郭威
胡仕凤
+5 位作者
王卫国
何世成
唐小明
林源
鲁杏华
王昌建
《动物医学进展》
北大核心
2015年第11期69-73,共5页
从洞庭湖地区周边县市几个活禽市场的健康家鸭中分离到14株具有血凝性的病毒,通过血凝、血凝抑制试验及RT-PCR鉴定,其中1株为新城疫病毒,命名为Duck/hunan/yy858/14。通过对该病毒的F基因全长扩增,并转化、克隆、测序及构建F基因的遗传...
从洞庭湖地区周边县市几个活禽市场的健康家鸭中分离到14株具有血凝性的病毒,通过血凝、血凝抑制试验及RT-PCR鉴定,其中1株为新城疫病毒,命名为Duck/hunan/yy858/14。通过对该病毒的F基因全长扩增,并转化、克隆、测序及构建F基因的遗传进化树,推导其核苷酸序列。序列测定及遗传进化分析显示,该毒株F基因全长为1 792bp,ORF为1 662bp,可编码553个氨基酸,其氨基酸裂解位点的组成为112 ERQERL117,具有典型新城疫病毒弱毒的分子特征,与我国内地首次分离到的Class I毒株NDV08-004、吉林野鸟毒株J36/13、香港活禽市场分离株Chicken/HongKong/1525.16/2005在同一分支,属Class I类基因3型。同源性分析显示该毒株与ClassⅡ中弱毒疫苗株V4和La Sota的核苷酸及氨基酸的同源性均较低,分别为73.4%和71.6%;与香港活禽市场分离株Chicken/HongKong/1525.16/2005和首例内地分离到的鸭源新城疫病毒毒株Duck/China/08-004/2008的核苷酸同源性分别为91.2%、91.0%;与吉林野鸟毒株J36/13的核苷酸同源性最高为98.3%,推测与野鸟毒株有共同来源。
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关键词
活禽市场
鸭源ndv
分离鉴定
遗传进化分析
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职称材料
鸭源、鸡源NDV对DF-1细胞的致病性特征
被引量：
1
2
作者
高诗敏
马海利
+4 位作者
邓瑞林
化丽珍
闫芳
田文霞
高文伟
《农业科技与信息》
2016年第6期128-129,共2页
新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起多种家禽发病的急性高度接触性疾病、为了研究鸡源和鸭源NDV体外致病特点，本研究选取鸡源GM和鸭源YC两株强毒接种于DF-1细胞，通过测定TCID50、细胞病变的程度及最大病变时细胞上清液的浓度，结...
新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起多种家禽发病的急性高度接触性疾病、为了研究鸡源和鸭源NDV体外致病特点，本研究选取鸡源GM和鸭源YC两株强毒接种于DF-1细胞，通过测定TCID50、细胞病变的程度及最大病变时细胞上清液的浓度，结果显示鸡源NDV—GM株最早于22h检测到HA阳性，先于鸭源NDV-YC株2个小时，2株病毒接种后70h左右HA均达到峰值，其中NDV-GM株HA峰值为5log2，低于NDV-YC株6log2，实验表明鸭源病毒对鸡源细胞有致病性，为研究鸭源病毒体外致病性差异研究奠定基础.
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关键词
鸡源
ndv
鸭源ndv
DF-1细胞
致病性
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职称材料
鸭源新城疫病毒NP蛋白的原核表达与间接ELISA方法的建立
3
作者
程彦丽
刁有祥
+3 位作者
张坤
杨建朋
国纪垒
肖坡
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期24-28,79,共6页
根据GenBank发表的鸭源新城疫病毒SDWF02株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物,扩增出鸭源新城疫病毒的NP基因,与原核表达载体pET-28a构建重组质粒pET28a-NP,经鉴定后转化Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot分析表明...
根据GenBank发表的鸭源新城疫病毒SDWF02株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物,扩增出鸭源新城疫病毒的NP基因,与原核表达载体pET-28a构建重组质粒pET28a-NP,经鉴定后转化Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot分析表明,54 000的融合蛋白得以表达,该蛋白能与鸭源新城疫的阳性血清发生特异性的反应。以纯化的重组蛋白为包被抗原,建立检测鸭源新城疫抗体的间接ELISA方法,经方阵滴定确定最佳包被质量液为pH9.6的碳酸盐缓冲液,最佳包被质量浓度为10ng/孔,血清最佳稀释度为1∶1 000。经应用试验表明该方法具有良好的特异性、可重复性和敏感性,为临床检测鸭源新城疫抗体水平提供了一种简单、准确、快速的诊断方法。
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关键词
鸭源ndv
NP蛋白
原核表达
ELISA
原文传递
题名
环洞庭湖地区活禽市场鸭源NDV的分离鉴定及遗传演化分析
被引量：
1
1
作者
郭威
胡仕凤
王卫国
何世成
唐小明
林源
鲁杏华
王昌建
机构
湖南农业大学动物医学院
湖南省动物疫病预防控制中心
出处
《动物医学进展》
北大核心
2015年第11期69-73,共5页
文摘
从洞庭湖地区周边县市几个活禽市场的健康家鸭中分离到14株具有血凝性的病毒,通过血凝、血凝抑制试验及RT-PCR鉴定,其中1株为新城疫病毒,命名为Duck/hunan/yy858/14。通过对该病毒的F基因全长扩增,并转化、克隆、测序及构建F基因的遗传进化树,推导其核苷酸序列。序列测定及遗传进化分析显示,该毒株F基因全长为1 792bp,ORF为1 662bp,可编码553个氨基酸,其氨基酸裂解位点的组成为112 ERQERL117,具有典型新城疫病毒弱毒的分子特征,与我国内地首次分离到的Class I毒株NDV08-004、吉林野鸟毒株J36/13、香港活禽市场分离株Chicken/HongKong/1525.16/2005在同一分支,属Class I类基因3型。同源性分析显示该毒株与ClassⅡ中弱毒疫苗株V4和La Sota的核苷酸及氨基酸的同源性均较低,分别为73.4%和71.6%;与香港活禽市场分离株Chicken/HongKong/1525.16/2005和首例内地分离到的鸭源新城疫病毒毒株Duck/China/08-004/2008的核苷酸同源性分别为91.2%、91.0%;与吉林野鸟毒株J36/13的核苷酸同源性最高为98.3%,推测与野鸟毒株有共同来源。
关键词
活禽市场
鸭源ndv
分离鉴定
遗传进化分析
Keywords
duck
ndv
live poultry market
isolation and identification
genetic evolution analysis
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鸭源、鸡源NDV对DF-1细胞的致病性特征
被引量：
1
2
作者
高诗敏
马海利
邓瑞林
化丽珍
闫芳
田文霞
高文伟
机构
山西农业大学动物科技学院
广东温氏食品集团股份有限公司
出处
《农业科技与信息》
2016年第6期128-129,共2页
基金
本文由校内科研启动基金资助（编号：J141502001）.
文摘
新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起多种家禽发病的急性高度接触性疾病、为了研究鸡源和鸭源NDV体外致病特点，本研究选取鸡源GM和鸭源YC两株强毒接种于DF-1细胞，通过测定TCID50、细胞病变的程度及最大病变时细胞上清液的浓度，结果显示鸡源NDV—GM株最早于22h检测到HA阳性，先于鸭源NDV-YC株2个小时，2株病毒接种后70h左右HA均达到峰值，其中NDV-GM株HA峰值为5log2，低于NDV-YC株6log2，实验表明鸭源病毒对鸡源细胞有致病性，为研究鸭源病毒体外致病性差异研究奠定基础.
关键词
鸡源
ndv
鸭源ndv
DF-1细胞
致病性
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
鸭源新城疫病毒NP蛋白的原核表达与间接ELISA方法的建立
3
作者
程彦丽
刁有祥
张坤
杨建朋
国纪垒
肖坡
机构
山东农业大学动物科技学院
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期24-28,79,共6页
基金
现代农业产业技术体系专项资金资助项目(CARS-43-34)
国家公益性行业(农业)科研专项基金资助项目(201003012)
+1 种基金
山东省科技攻关资助项目(2007GG30009001)
山东省科技发展项目(鸭源副黏病毒致病性研究)
文摘
根据GenBank发表的鸭源新城疫病毒SDWF02株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物,扩增出鸭源新城疫病毒的NP基因,与原核表达载体pET-28a构建重组质粒pET28a-NP,经鉴定后转化Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot分析表明,54 000的融合蛋白得以表达,该蛋白能与鸭源新城疫的阳性血清发生特异性的反应。以纯化的重组蛋白为包被抗原,建立检测鸭源新城疫抗体的间接ELISA方法,经方阵滴定确定最佳包被质量液为pH9.6的碳酸盐缓冲液,最佳包被质量浓度为10ng/孔,血清最佳稀释度为1∶1 000。经应用试验表明该方法具有良好的特异性、可重复性和敏感性,为临床检测鸭源新城疫抗体水平提供了一种简单、准确、快速的诊断方法。
关键词
鸭源ndv
NP蛋白
原核表达
ELISA
Keywords
duck
ndv
NP protein
prokaryotic expression
ELISA
分类号
S852.657 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环洞庭湖地区活禽市场鸭源NDV的分离鉴定及遗传演化分析
郭威
胡仕凤
王卫国
何世成
唐小明
林源
鲁杏华
王昌建
《动物医学进展》
北大核心
2015
1
下载PDF
职称材料
2
鸭源、鸡源NDV对DF-1细胞的致病性特征
高诗敏
马海利
邓瑞林
化丽珍
闫芳
田文霞
高文伟
《农业科技与信息》
2016
1
下载PDF
职称材料
3
鸭源新城疫病毒NP蛋白的原核表达与间接ELISA方法的建立
程彦丽
刁有祥
张坤
杨建朋
国纪垒
肖坡
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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