膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用 被引量：2

1

作者 魏娟 张晓岚 +4 位作者 敦志娜 赵春洪 申建刚 霍晓霞 安君艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2155-2158,共4页

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;... 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染时相应的表达,鉴定转染效果;分别应用Western blotting和RT-PCR方法测定MT1-MMP在HSC中的相应表达。结果:FRNK质粒成功转染HSC,于转染48h时,FRNK蛋白表达最强,P<0·05;FRNK转染后在基因水平上:MT1-MMP mRNA表达明显增加;翻译蛋白水平上:FRNK质粒转染HSC48h后,MT1-MMP蛋白表达量显著升高。结论:脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,FRNK可能通过上调MT1-MMP值来抑制HSC胶原合成。 展开更多

关键词 肝星状细胞 黏着斑激酶 黏着斑激酶相关非激酶 膜型基质金属蛋白酶-1 胶原 肝硬化

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黏着斑激酶相关非激酶在瘢痕疙瘩组织中的表达及意义

2

作者 王朝阳 吴文艺 +5 位作者 朱世泽 杨维群 蔡玉梅 潘明孟 周仙颖 林新恭 《中国美容医学》 CAS 2016年第4期38-41,共4页

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(facol adhesion kinase-ralated nonkinase,FRNK)在瘢痕疙瘩组织中的表达及意义。方法:利用Western-blot及反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测10例瘢痕疙瘩及10例相应周围正常... 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(facol adhesion kinase-ralated nonkinase,FRNK)在瘢痕疙瘩组织中的表达及意义。方法:利用Western-blot及反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测10例瘢痕疙瘩及10例相应周围正常皮肤组织中FRNK蛋白及m RNA表达水平并进行统计学分析。结果:瘢痕疙瘩组织中的FRNK蛋白表达明显低于正常皮肤(0.12±0.06比0.32±0.04),差异有统计学意义(P<0.01);瘢痕疙瘩组织中FRNK m RNA表达明显低于正常皮肤(0.27±0.03比1.10±0.05),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:FRNK蛋白及m RNA在瘢痕疙瘩组织中低表达,导致其对成纤维细胞凋亡作用减弱,对瘢痕疙瘩的形成可能起重要作用,通过调节FRNK的表达,有望为瘢痕的治疗提供新的靶点。 展开更多

关键词 黏着斑激酶相关非激酶(frnk) 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 凋亡

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黏着斑激酶相关非激酶质粒转染对肝星状细胞凋亡的影响

3

作者 申建刚 张晓岚 +1 位作者 霍晓霞 魏娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2239-2244,共6页

目的:应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染肝星状细胞(HSCs),探讨FRNK选择性抑制黏着斑激酶(FAK)磷酸化对FN刺激的HSCs凋亡的影响。方法:在体外培养HSCs,以FN刺激HSCs增殖,采用脂质体介导的方法进行FRNK表达质粒转染。应用... 目的:应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染肝星状细胞(HSCs),探讨FRNK选择性抑制黏着斑激酶(FAK)磷酸化对FN刺激的HSCs凋亡的影响。方法:在体外培养HSCs,以FN刺激HSCs增殖,采用脂质体介导的方法进行FRNK表达质粒转染。应用膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术、DNA凝胶电泳技术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,Western blotting及RT-PCR方法检测FRNK、FAK、p-FAK(Tyr397)、caspase-3蛋白及其mRNA表达。结果:FRNK表达质粒成功转染HSCs,在翻译后水平抑制FAK磷酸化;FRNK表达质粒转染HSCs48h后,细胞凋亡率增加,与空质粒组之间有显著差异[(25.37±1.92)%vs(9.28±1.05)%],P<0.01,伴随caspase-3在翻译和转录水平的增高[(264.17±12.60vs185.82±9.69),P<0.01;(4.19±0.48vs1.07±0.27),P<0.01]。结论:在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒,可使外源性的FRNK在HSCs内大量表达,在翻译后水平抑制FAK磷酸化;可以诱导FN刺激的HSCs发生凋亡。 展开更多

关键词 肝星状细胞 细胞凋亡 黏着斑激酶相关非激酶 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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粘着斑相关非激酶对骨桥蛋白促血管平滑肌细胞迁移的抑制作用及分子机制 被引量：11

4

作者 刘智敏 韩梅 温进坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期131-137,共7页

为阐明整合素 β3 粘着斑激酶 (FAK)信号途径在骨桥蛋白 (OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用 ,用FAK磷酸化特异性抑制剂粘着斑相关非激酶 (FRNK)选择性阻断FAK磷酸化 ,观察对OPN 整合素 β3 相互作用所激活的FAK信号通路的影... 为阐明整合素 β3 粘着斑激酶 (FAK)信号途径在骨桥蛋白 (OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用 ,用FAK磷酸化特异性抑制剂粘着斑相关非激酶 (FRNK)选择性阻断FAK磷酸化 ,观察对OPN 整合素 β3 相互作用所激活的FAK信号通路的影响及其与OPN诱导VSMC迁移之间的关系 .外源性FRNK在VSMC中的过表达可显著抑制OPN诱导的VSMC迁移 ,使跨膜迁移细胞数下降 5 0 5 8% (P <0 0 5 ) .OPN刺激不但明显诱导FAK表达 ,而且还促进其磷酸化 .外源性FRNK对OPN诱导的FAK磷酸化具有显著抑制作用 ,使磷酸化型FAK水平比相应对照细胞下降5 9 1% ,但其对FAK表达不产生明显的影响 .FRNK还具有下调整合素 β3 表达的作用 ,免疫荧光细胞化学分析结果显示 ,在转染FRNK的VSMC中 ,粘着斑蛋白的磷酸化水平降低 ,粘着斑数量明显减少 .结果提示 ,整合素 β3 FAK是介导VSMC迁移的重要信号途径 ,外源性FRNK通过下调 β3 表达、抑制FAK磷酸化和减少粘着斑蛋白磷酸化及粘着斑形成等机制 ,减弱OPN刺激信号的跨膜转导及沿胞内途径传递 ,发挥抑制OPN促VSMC迁移的效应 . 展开更多

关键词 骨桥蛋白 粘着斑激酶 粘着斑相关非激酶 血管平滑肌细胞 迁移

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黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用 被引量：1

5

作者 钱震 林江 +5 位作者 钱军 姚冬明 王雅丽 韩兰秀 朱照辉 肖高飞 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期408-410,共3页

目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓... 目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓系白血病(AML)标本进行检测。结果建立的MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;检测不同稀释度的甲基化阳性模板,其最大灵敏度可达2%;在不同时间进行MSP检测的结果均一致;对10例AML患者的初步检测发现7例存在着GRAF基因启动子甲基化。结论成功建立了检测GRAF基因启动子甲基化的MSP方法,有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于临床AML标本的批量检测。 展开更多

关键词 黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子 甲基化特异性PCR 甲基化

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皮层肌动蛋白与磷酸化黏着斑激酶在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理因素的关系 被引量：1

6

作者 郑末 姜忠敏 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1132-1133,共2页

目的探讨皮层肌动蛋白(Cortactin)与磷酸化黏着斑激酶(FAKPY397)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理因素的关系。方法选取2014年5月至2015年5月该院收治的行择期手术的NSCLC患者120例,分别取患者肺癌组织和癌旁正常组织,并应... 目的探讨皮层肌动蛋白(Cortactin)与磷酸化黏着斑激酶(FAKPY397)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理因素的关系。方法选取2014年5月至2015年5月该院收治的行择期手术的NSCLC患者120例,分别取患者肺癌组织和癌旁正常组织,并应用免疫组织化学法检测肺癌组织和癌旁正常组织中Cortactin和FAKPY397表达,分析两者相关性。结果正常组织中Cortactin和FAKPY397表达阳性率显著低于肺癌组织(P<0.05);Ⅲ期和Ⅳ期患者肺癌组织Cortactin和FAKPY397表达阳性率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P<0.05);淋巴结转移者Cortactin和FAKPY397表达阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05);Speaman分析显示:Cortactin表达与FAKPY397表达呈正相关(r=0.532,P<0.05)。结论 NSCLC组织中Cortactin和FAKPY397表达会显著增高,两者具有正相关关系,可能对NSCLC的发展具有促进作用。 展开更多

关键词 皮层肌动蛋白 磷酸化黏着斑激酶 非小细胞肺癌

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黏着斑激酶的表达与结直肠癌侵袭和转移的相关性

7

作者 杨红军 丁彦青 +1 位作者 周军 翁德胜 《实用癌症杂志》 2003年第6期589-591,共3页

目的　探讨黏着斑激酶 (FAK )表达与结直肠癌发生及其生物学行为的关系。方法　应用免疫组织化学S P方法 ,检测 67例结直肠癌和配对的正常黏膜以及 3 7例结直肠区域淋巴结转移癌组织中FAK的表达。结果　正常结直肠黏膜、结直肠癌及淋巴... 目的　探讨黏着斑激酶 (FAK )表达与结直肠癌发生及其生物学行为的关系。方法　应用免疫组织化学S P方法 ,检测 67例结直肠癌和配对的正常黏膜以及 3 7例结直肠区域淋巴结转移癌组织中FAK的表达。结果　正常结直肠黏膜、结直肠癌及淋巴结转移癌组织中FAK阳性率分别为 71.6% ( 4 8/67)、89.6% ( 60 /67)和 97.3 % ( 3 6/3 7) (P =0 .0 0 1) ;FAK强阳性率分别为6.0 % ( 4 /67)、77.6% ( 5 2 /67)和 83 .8% ( 3 1/3 7) (P =0 .0 0 0 )。结直肠癌中区域淋巴结有转移及区域淋巴结无转移者FAK阳性率分别为 10 0 .0 % ( 3 7/3 7)和 76.7% ( 2 3 /3 0 ) (P =0 .0 0 7) ;FAK强阳性率分别为 89.2 % ( 3 3 /3 7)和 63 .3 % ( 19/3 0 ) (P =0 .0 12 )。FAK表达水平与结直肠癌浸润深度呈正相关 (P =0 .0 0 9) ;而与结直肠癌的分化程度无关 (P =0 .43 8)。结论　FAK表达水平增高可加速结直肠恶性细胞的增殖、浸润和转移。故检测结直肠活检黏膜及癌组织中FAK表达水平 ,有助于进一步了解结直肠黏膜癌变倾向及结直肠癌生物学行为 。 展开更多

关键词 黏着斑激酶 表达 结直肠癌 侵袭 转移 相关性

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鸡局部黏着斑激酶基因5′UTR及启动子的克隆鉴定

8

作者 李淑锋 王利祥 +1 位作者 张大鹏 华子春 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期102-107,共6页

为了研究鸡局部黏着斑激酶(FAK)基因表达调控的分子机制,运用cDNA末端快速扩增技术确定了鸡胚成纤维细胞FAK基因的转录起始位点,并发现FAK基因mRNA的5′非翻译区(5′UTR)存在4种剪切形式。分析这4种剪切形式的5′端序列,发现它们都不影... 为了研究鸡局部黏着斑激酶(FAK)基因表达调控的分子机制,运用cDNA末端快速扩增技术确定了鸡胚成纤维细胞FAK基因的转录起始位点,并发现FAK基因mRNA的5′非翻译区(5′UTR)存在4种剪切形式。分析这4种剪切形式的5′端序列,发现它们都不影响蛋白的编码,但可能影响mRNA的翻译效率。另外,将启动子序列935 bp片段克隆构建到荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic中,转染鸡胚成纤维细胞,测定启动子的转录活性。通过启动子序列系列缩短的克隆,将核心启动子区定位在转录起始位点上游-662至+7的669 bp片段内,该启动子的典型特征是:没有TATA盒,而富含"GC"碱基。以上结果为FAK基因的表达调控研究提供了分子基础。 展开更多

关键词 局部黏着斑激酶基因(FAK) 5′非翻译区(5′UTR) 可变剪切 CDNA末端快速扩增技术

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黏着斑激酶在鼻咽癌细胞系6-10B中的表达及其对Bcl-2和Bax表达的影响 被引量：1

9

作者 王凤琴 章许晶 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期5844-5846,共3页

目的探讨黏着斑激酶(FAK)在鼻咽癌细胞6-10B中的表达及其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的影响。方法鼻咽癌细胞6-10B培养后利用RNA干扰(RNAi)技术下调FAK在6-10B中的表达水平,通过RT-PCR、Real-time PCR、Western印迹检测其干扰效率,通过Wes... 目的探讨黏着斑激酶(FAK)在鼻咽癌细胞6-10B中的表达及其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的影响。方法鼻咽癌细胞6-10B培养后利用RNA干扰(RNAi)技术下调FAK在6-10B中的表达水平,通过RT-PCR、Real-time PCR、Western印迹检测其干扰效率,通过Western印迹检测干扰后凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平,通过Hoechst染色观察细胞凋亡形态。结果干扰后FAK在鼻咽癌细胞6-10B中表达量较低、下调明显(P<0.05);鼻咽癌细胞系6-10B干扰FAK后,Bcl-2和Bax的表达量发生较明显改变(P<0.05);Hoechst染色结果显示干扰后细胞出现明显的凋亡形态。结论干扰FAK后促进鼻咽癌细胞凋亡,提示可以通过下调FAK表达水平促进肿瘤细胞凋亡,为鼻咽癌的基因治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 黏着斑激酶 鼻咽癌细胞 RNA干扰 凋亡相关蛋白

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趋化因子受体4、黏着斑激酶和基质金属蛋白酶-9在非小细胞肺癌组织的表达及其临床意义 被引量：2

10

作者 齐恒田 赵辰龙 +1 位作者 赵繁荣 许建功 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期728-730,共3页

目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)、黏着斑激酶(FAK)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平与非小细胞肺癌临床病理学特征的关系。方法选取2019年6月至2022年1月新乡医学院第三附属医院收集的79例非小细胞肺癌肺癌和癌旁组织作为研究对象,采... 目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)、黏着斑激酶(FAK)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平与非小细胞肺癌临床病理学特征的关系。方法选取2019年6月至2022年1月新乡医学院第三附属医院收集的79例非小细胞肺癌肺癌和癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肺癌组织和癌旁组织中CXCR4、FAK和MMP-9表达水平,并分析不同年龄段、性别、分化程度、临床分期和淋巴结转移等病理特征患者癌组织中CXCR4、FAK和MMP-9表达水平,分析CXCR4、FAK和MMP-9表达水平与非小细胞肺癌临床病理学特征的相关性。结果非小细胞肺癌组织CXCR4、FAK和MMP-9蛋白表达水平(1.94±0.41、2.23±0.42、2.06±0.44)明显高于癌旁组织表达水平(0.92±0.17、0.80±0.21、0.93±0.21),差异有统计学意义(t=20.590,26.750,20.450,P均<0.05)。Ⅲ~Ⅳ期患者非小细胞肺癌组织CXCR4、FAK和MMP-9蛋白表达水平(2.09±0.20、2.39±0.22、2.23±0.25)明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者表达水平(1.82±0.50、2.10±0.51、1.92±0.53),差异有统计学意义(t=3.066,3.280,3.292,P均<0.05)。低分化患者非小细胞肺癌组织CXCR4、FAK和MMP-9蛋白表达水平(2.05±0.22、2.35±0.23、2.18±0.27)明显高于中高分化患者表达水平(1.75±0.25、2.09±0.27、1.86±0.30),差异有统计学意义(t=2.693,2.979,2.903,P均<0.05)。淋巴结转移患者非小细胞肺癌组织CXCR4、FAK和MMP-9蛋白表达水平(2.04±0.24、2.34±0.26、2.14±0.26)明显高于无淋巴结转移患者表达水平(1.82±0.27、2.10±0.29、1.97±0.36),差异有统计学意义(t=3.360,3.704,2.183,P均<0.05)。CXCR4、FAK和MMP-9表达水平与非小细胞肺癌患者淋巴结转移、分化程度和临床分期均呈明显正相关(P<0.05),与性别、年龄无相关(P>0.05)。结论非小细胞肺癌组织中CXCR4、FAK和MMP-9表达水平明显高于癌旁组织,且表达水平与分化程度、临床分期和淋巴结转移呈正相关。 展开更多

关键词 趋化因子受体4 黏着斑激酶 基质金属蛋白酶-9 非小细胞肺癌

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黏着斑激酶相关非激酶对CFSC细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制因子mRNA表达的影响 被引量：5

11

作者 魏娟 张晓岚 +3 位作者 姚冬梅 霍晓霞 申建刚 敦志娜 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期757-761,共5页

目的探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞CFSC胶原代谢的影响及其分子机制。方法用体外细胞培养技术、脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染；采用Western blot方法测定FRNK蛋白表达，鉴定转染效果；用^3H Pr... 目的探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞CFSC胶原代谢的影响及其分子机制。方法用体外细胞培养技术、脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染；采用Western blot方法测定FRNK蛋白表达，鉴定转染效果；用^3H Pro掺入技术测定CFSCI型胶原的合成；用RTPCR方法测定FRNK转染前后基质金属蛋白酶2（MMP-2）及其抑制因子（TIMP2）基因在CFSC中表达的变化情况。结果FRNK质粒成功转染CFSC，Ⅰ型胶原合成下降；MMP2基因表达上升，TIMP2基因表达下降，MMP2／TIMP2比值明显上升。结论外源性FRNK在CFSC内大量表达后，CFSC胶原表达减少；FRNK可能通过调节MMP2／TIMP2比值来促进CFSC的胶原降解。 展开更多

关键词 肝星状细胞 胶原Ⅰ型 明胶酶A 金属蛋白酶组织抑制剂2 黏着斑激酶相关非激酶

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黏着斑激酶相关非激酶对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响 被引量：5

12

作者 王朝阳 吴文艺 +5 位作者 朱世泽 杨维群 蔡玉梅 潘明孟 周仙颖 林新恭 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1754-1757,共4页

目的观察黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及其对下游黏着斑激酶（FAK）-细胞外信号调节激酶（ERK）信号转导通路、Ⅰ型胶原α1链（COL1A1）和Ⅲ型胶原d1链（COL3A1）表达的影响。方法于体外培养瘢痕疙瘩和... 目的观察黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及其对下游黏着斑激酶（FAK）-细胞外信号调节激酶（ERK）信号转导通路、Ⅰ型胶原α1链（COL1A1）和Ⅲ型胶原d1链（COL3A1）表达的影响。方法于体外培养瘢痕疙瘩和正常皮肤的成纤维细胞，Western blot及反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测正常皮肤和瘢痕疙瘩中FRNK蛋白及mRNA表达水平；在脂质体介导下用含FRNK基因的质粒转染瘢痕疙瘩成纤维细胞，用Western blot检测FRNK、FAK、磷酸化FAK（p-FAK）、ERKl／ERK2、磷酸化ERKl（p-ERKl）、磷酸化ERK2（p-ERK2）的蛋白表达；用RT-PCR方法检测FAK、ERK、COL1A1、COL3A1的mRNA表达；用流式细胞技术检测各组细胞的凋亡。结果瘢痕疙瘩成纤维细胞中的FRNK蛋白表达明显低于正常皮肤（0．14±0．08比0．33±0．06），差异有统计学意义（P〈0．05）；瘢痕疙瘩成纤维细胞中FRNKmRNA表达明显低于正常皮肤（0．30±0．04比1．04±0．06），差异有统计学意义（P〈0．05）；瘢痕疙瘩成纤维细胞于转染FRNK 48h后，FRNK蛋白表达量达到最高，72h后下降。与空质粒组比较，转染FRNK组的FAK、ERK蛋白及mRNA水平均下降，p-FAK、p-ERK的表达水平也均下降（P〈0．05）；转染FRNK组与空质粒组比较，COL1A1、COL3A1mRNA的表达水平均下降（0．23±0．10比0．85±0．24，0．60±0．02比1．06±0．10，P〈0．01），而空质粒组与对照组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）；转染FRNK组细胞凋亡率明显高于对照组、空质粒组[（36．63±4．89）％比（14．70±0．70）％比（13．20±0．80）％，P〈0．05]，而对照组、空质粒组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论（1）瘢痕疙瘩组织中FRNK蛋白的低表达导致其对成纤维细胞凋亡作用减弱；（2）瘢痕疙瘩中FRNK可能通过抑制FAK磷酸化或下调FAK活性，从而抑制FAK—ERK信号通路转导来促进细胞凋亡；（3）瘢痕疙瘩中FRNK促进成纤维细胞凋亡，可能导致胶原的生成下降。通过调节FRNK的表达，可能促进瘢痕组织中成纤维细胞的凋亡，胶原生成下降，有望为瘢痕的治疗提供新的靶点。 展开更多

关键词 黏着斑激酶相关非激酶 瘢痕疙瘩 细胞外信号调节激酶 黏着斑激酶 胶原

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黏着斑激酶相关非激酶对肝星状细胞凋亡及细胞外信号调节激酶的影响 被引量：6

13

作者 申建刚 张晓岚 霍晓霞 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期849-853,共5页

目的应用黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白（FN）预刺激的肝星状细胞（HSC），探讨FRNK对HSC凋亡及细胞外信号调节激酶（ERK）的影响。方法在体外，以FN诱导HSC增殖，采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时... 目的应用黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白（FN）预刺激的肝星状细胞（HSC），探讨FRNK对HSC凋亡及细胞外信号调节激酶（ERK）的影响。方法在体外，以FN诱导HSC增殖，采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时转染HSC，应用膜联蛋白／碘化丙啶双标记流式细胞术、DNA凝胶电泳技术和透射电镜技术检测细胞的凋亡，Western blot及RT-PCR方法检测FRNK、黏着斑激酶（FAK）、p-FAK（Tyr^397）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（caspase-3）、ERK1、PERK蛋白及其mRNA表达。结果FRNK表达质粒成功转染HSC，在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较，FRNK表达质粒转染HSC 48h后，HSC凋亡率由9．28％±1．05％增至25．37％±1．92％（P〈0．01），caspase-3蛋白由185．82±9．69增至264．17±12．60（P〈0．01），caspase-3mRNA由1．07±0．27增至4．19±0．48（P〈0．01）。FRNK抑制FAK磷酸化和在翻译和转录水平抑制ERK1、p-ERK的表达，而FN则促进FAK和ERK1、pERK在翻译和转录水平的表达。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒，可使外源性的FRNK在HSC内大量表达，在翻译后水平抑制FAK磷酸化；并可能通过FAK-ERK信号转导通路诱导FN刺激的HSC发生凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 肝星状细胞 有丝分裂素激活蛋白激酶类 黏着斑激酶 黏着斑激酶相关非激酶

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黏着斑激酶相关非激酶抑制纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞增殖 被引量：1

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作者 霍晓霞 张晓岚 +1 位作者 申建刚 魏娟 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期547-548,共2页

黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）是黏着斑激酶（FAK）的内源性抑制剂。我们应用细胞培养技术，以纤维连接蛋白（FN）刺激HSC增殖，在脂质体介导下瞬时转染FRNK质粒，探讨选择性阻断FAK磷酸化对HSC增殖及其细胞周期的影响，以期为逆转肝纤... 黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）是黏着斑激酶（FAK）的内源性抑制剂。我们应用细胞培养技术，以纤维连接蛋白（FN）刺激HSC增殖，在脂质体介导下瞬时转染FRNK质粒，探讨选择性阻断FAK磷酸化对HSC增殖及其细胞周期的影响，以期为逆转肝纤维化提供新的理论依据及治疗靶向。 展开更多

关键词 肝星状细胞 细胞周期 黏着斑激酶相关非激酶

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乳腺癌中黏着斑激酶、抑癌基因PTEN编码蛋白的表达与生物学行为相关性分析 被引量：8

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作者 黄玉钿 张声 +3 位作者 郑曦 吴钦穗 黄双月 杨发端 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1201-1202,i0001,共3页

目的研究乳腺癌组织中黏着斑激酶(FAK)和PTEN蛋白的表达与肿瘤分化、浸润转移的关系,揭示细胞信号转导系统与乳腺癌发生发展的关系,同时为乳腺癌的基因治疗提供依据。方法应用免疫组织化学SP法检测92例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织... 目的研究乳腺癌组织中黏着斑激酶(FAK)和PTEN蛋白的表达与肿瘤分化、浸润转移的关系,揭示细胞信号转导系统与乳腺癌发生发展的关系,同时为乳腺癌的基因治疗提供依据。方法应用免疫组织化学SP法检测92例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中FAK、PTEN的表达情况及其与临床病理参数的关系。结果(1)在92例乳腺癌中FAK和PTEN的阳性表达率分别为69.6%和51.1%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);(2)FAK表达与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P<0.01),PTEN表达与乳腺癌组织学分级、腋窝淋巴结转移、临床分期呈负相关(P<0.05);(3)乳腺癌组织FAK表达与PTEN表达呈负相关(P<0.01)。结论乳腺癌FAK的高表达和PTEN的缺失表达与肿瘤发生发展、浸润转移密切相关;检测这些指标,有助于判断乳腺癌的恶性程度及生物学行为。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 PTEN 免疫组织化学 抑癌基因PTEN 乳腺癌组织 黏着斑激酶 生物学行为 相关性分析 编码蛋白 腋窝淋巴结转移

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金雀异黄酮抑制OPN-FAK信号通路对非小细胞肺癌迁移和侵袭的影响

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作者 张田 任丹 李杰 《河北医学》 CAS 2023年第7期1074-1080,共7页

目的:探讨金雀异黄酮(GS)抑制骨桥蛋白(OPN)/黏着斑激酶(FAK)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)迁移和侵袭的影响。方法:qRT-PCR检测四种NSCLC细胞系(H596、H520、A549、H1703)及正常人肺上皮细胞(BEAS-2B)中OPN、FAK mRNA表达水平;以A549... 目的:探讨金雀异黄酮(GS)抑制骨桥蛋白(OPN)/黏着斑激酶(FAK)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)迁移和侵袭的影响。方法:qRT-PCR检测四种NSCLC细胞系(H596、H520、A549、H1703)及正常人肺上皮细胞(BEAS-2B)中OPN、FAK mRNA表达水平;以A549细胞为研究目标,分别设置对照组、GS低浓度(GS-L)组(10μmoL/L)、GS中浓度(GS-M)组(20μmoL/L)、GS高浓度(GS-H)组(40μmoL/L)、重组骨桥蛋白(rOPN)组(15ng/mL)、GS-H+rOPN组(40μmoL/L GS+15ng/mL rOPN)。分别利用MTT法、流式细胞仪检测上述各组细胞增殖率、凋亡率;划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移、侵袭变化;Western blot及qRT-PCR检测OPN/FAK信号通路相关基因和蛋白的表达。结果:与BEAS-2B细胞相比,A549细胞中OPN、FAK mRNA表达水平变化最为显著(P<0.05)。与对照组相比,GS-L组、GS-M组、GS-H组A549细胞增殖率、迁移率、侵袭及迁移数、OPN/FAK信号通路相关基因和蛋白表达显著降低,凋亡率显著增加(P<0.05);rOPN组A549细胞增殖率、迁移率、侵袭及迁移数、OPN/FAK信号通路相关基因和蛋白表达显著增加,凋亡率显著降低(P<0.05)。与GS-H组相比,GS-H+rOPN组A549细胞增殖率、迁移率、侵袭及迁移数、OPN/FAK信号通路相关基因和蛋白表达显著增加,凋亡率显著降低(P<0.05)。与rOPN组相比,GS-H+rOPN组A549细胞增殖率、迁移率、侵袭及迁移数、OPN/FAK信号通路相关基因和蛋白表达显著降低,凋亡率显著增加(P<0.05)。结论:GS可以抑制NSCLC-A549细胞的迁移、侵袭及增殖,促进其凋亡,可能与抑制OPN/FAK信号通路有关。 展开更多

关键词 金雀异黄酮 迁移 侵袭 骨桥蛋白/黏着斑激酶信号通路 非小细胞肺癌

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吉马酮调节FAK/YAP信号通路对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药性的影响

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作者 李明 范敏娜 《安徽医学》 2023年第12期1419-1425,共7页

目的 探讨吉马酮(GMC)调节局部黏着斑激酶(FAK)/Yes相关蛋白(YAP)通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法 将A549/DDP细胞分为CK组、低剂量GMC组(GMC-L组,5μmol/L)、中剂量GMC组(GMC-M组,10μmol/L)、高剂量GMC组(G... 目的 探讨吉马酮(GMC)调节局部黏着斑激酶(FAK)/Yes相关蛋白(YAP)通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法 将A549/DDP细胞分为CK组、低剂量GMC组(GMC-L组,5μmol/L)、中剂量GMC组(GMC-M组,10μmol/L)、高剂量GMC组(GMC-H组,20μmol/L)、GMC-H+pcDNA组(20μmol/L+转染pcDNA)、GMC-H+pcDNA-FAK组(20μmol/L+转染pcDNA-FAK)。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况;检测多药耐药基因1(MDR1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷酸化的FAK(p-FAK)、YAP蛋白表达情况。结果 与CK组比较,GMC-L组、GMCM组、GMC-H组A549/DDP细胞OD450值、克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数、MDR1、PCNA、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、p-FAK蛋白及核YAP蛋白表达降低,细胞凋亡率升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与GMC-H组、GMC-H+pcDNA组比较,GMC-H+pcDNA-FAK组A549/DDP细胞OD_(450)值、克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数、MDR1、PCNA、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、p-FAK蛋白及核YAP蛋白表达升高,细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论 GMC可能通过抑制FAK/YAP信号通路减弱NSCLC细胞DDP耐药性。 展开更多

关键词 吉马酮 局部黏着斑激酶/Yes相关蛋白通路 非小细胞肺癌 顺铂 耐药性

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FRNK抑制体外肝星状细胞增殖 被引量：3

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作者 申建刚 张晓岚 +2 位作者 霍晓霞 焦清海 王红芳 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第11期1151-1155,共5页

目的用FRNK表达质粒瞬时转染FN诱导的HSCs,探讨FRNK对HSCs增殖的影响。方法在脂质体介导下用FRNK表达质粒瞬时转染HSCs,用改良的MTT技术测定细胞增殖,用Western blot及RT-PCR技术检测各指标蛋白及mRNA表达。结果与nFRNK组相比,FRNK在FN... 目的用FRNK表达质粒瞬时转染FN诱导的HSCs,探讨FRNK对HSCs增殖的影响。方法在脂质体介导下用FRNK表达质粒瞬时转染HSCs,用改良的MTT技术测定细胞增殖,用Western blot及RT-PCR技术检测各指标蛋白及mRNA表达。结果与nFRNK组相比,FRNK在FN诱导的HSCs中大量表达后,于12、24和48h的增殖抑制率分别为20.07%、26.16%和29.77%(P<0.01);FRNK抑制FAK磷酸化和ERK1、p-ERK的表达,而FN则促进FAK、ERK1和p-ERK表达。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒,可时间依赖性的抑制HSCs增殖;FAK-ERK信号传导通路可能参与了该过程。 展开更多

关键词 肝星状细胞 增殖 黏着斑激酶相关非激酶 黏着斑激酶 细胞外信号调节激酶

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FRNK质粒转染抑制肝星状细胞胶原合成 被引量：3

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作者 魏娟 张晓岚 +2 位作者 申建刚 霍晓霞 敦志娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期144-147,共4页

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSCs)胶原合成的影响。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting方法测定FRNK蛋白在HSCs的表达,鉴定转染效果;[3H]-... 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSCs)胶原合成的影响。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting方法测定FRNK蛋白在HSCs的表达,鉴定转染效果;[3H]-Pro掺入法检测HSCs总胶原和Ⅰ型胶原的合成能力。结果:FRNK质粒成功转染HSCs,于转染48 h时FRNK蛋白表达最强(P<0.05);在FRNK转染HSCs 48 h后总胶原合成能力(498.17±73.20)较空质粒组(748.33±61.30)显著下降(P<0.01);在FRNK转染HSCs 48 h后Ⅰ型胶原合成能力(163.17±23.80)较空质粒组(371.58±15.44)亦显著下降(P<0.01)。结论:FRNK可以使HSCs总胶原和Ⅰ型胶原合成能力降低,提示其对肝星状细胞胶原合成功能具有负调控作用。 展开更多

关键词 肝星状细胞 黏着斑激酶相关非激酶 胶原 胶原Ⅰ型

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川芎含药血清对大鼠肝星状细胞大麻素受体1相关信号通路的影响 被引量：9

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作者 何娟 曹文富 +1 位作者 王海兰 韩仕庆 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1397-1401,共5页

目的观察川芎含药血清对血小板源生长因子(PDGF-BB)活化的大鼠肝星状细胞(HSCs)大麻素受体1(CB1)、黏着斑激酶(FAK)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法制备川芎含药血清,MTT法检测川... 目的观察川芎含药血清对血小板源生长因子(PDGF-BB)活化的大鼠肝星状细胞(HSCs)大麻素受体1(CB1)、黏着斑激酶(FAK)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法制备川芎含药血清,MTT法检测川芎含药血清对肝星状细胞增殖情况,Western blot法分析肝星状细胞CB1、FAK、p-Akt蛋白的表达。结果与正常对照组相比,PDGF-BB作用24 h能刺激HSCs增殖,上调CB1、FAK、p-Akt蛋白的表达;川芎含药血清、秋水仙碱及大麻素受体1抑制剂AM251均能明显抑制上述效应;且加入AM251后,川芎含药血清对上述效应的抑制效果增强,且作用呈剂量依赖性。结论川芎含药血清可能通过大麻素相关信号通路抑制HSCs增殖,从而发挥防治肝纤维化的作用。 展开更多

关键词 川芎含药血清 肝纤维化 肝星状细胞 大麻素受体1相关信号通路 黏着斑激酶 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶

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