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黑曲霉T21 glaA 5'上游调控区DNA与蛋白因子的相互作用分析 被引量：1
1
作者 仇润祥 朱兴国 +1 位作者 刘丽 唐国敏 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2002年第2期122-130,共9页
以糖化酶生产菌株黑曲霉T21（Aspergillus　niger T21）的糖化酶基因（glaa）5＇cis调控区片段为探针,采用电泳迁移率变动分析（EMSA）法,从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与glaA 5＇调控区特异结合的蛋白因子,并把其结合DNA定位在T21 glaA ... 以糖化酶生产菌株黑曲霉T21（Aspergillus　niger T21）的糖化酶基因（glaa）5＇cis调控区片段为探针,采用电泳迁移率变动分析（EMSA）法,从黑曲霉蛋白粗提液中检测到与glaA 5＇调控区特异结合的蛋白因子,并把其结合DNA定位在T21 glaA 5＇调控区的-374～-344,-484～-414以及-580～-540 bp 3个区段,且此3个结合DNA的片段在EMSA实验中呈现交叉竞争,表明这3个DNA区段可与同一个蛋白因子相结合.以-374～344 bp序列为探针的紫外交联实验表明,该蛋白因子的分子量（或亚基分子量）约为10ku.利用DNase I足印分析确定了此蛋白因子在前两个区段的精细结合部位,并对其结合序列的特性进行了分析. 展开更多
关键词 黑曲霉t21 glaA5′上游调控区DNA 蛋白结合因子 相互作用分析 糖化酶基因 电泳迁移率变动分析 DNaseⅠ足印分析
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丝状真菌表达分泌系统中受体菌的构建 被引量：12
2
作者 刘丽 刘谨 +2 位作者 仇润祥 朱兴国 唐国敏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期667-670,共4页
黑曲霉糖化酶高产菌株T2 1经紫外诱变后 ,通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株 0 76 %的菌株A .nigerT2 1 2 0 1,其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致。利用原生质体 PEG法将含有报告基因vhb的表达... 黑曲霉糖化酶高产菌株T2 1经紫外诱变后 ,通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株 0 76 %的菌株A .nigerT2 1 2 0 1,其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致。利用原生质体 PEG法将含有报告基因vhb的表达分泌质粒pGT10 vhb通过与选择标记质粒的共转化导入此蛋白酶部分缺陷株及其原株T2 1,检测在蛋白酶缺陷株AspergillusnigerT2 1 2 0 1和原株T2 1中VHb的分泌表达 ,结果表明在A .nigerT2 1 2 0 1中VHb表达水平显著高于原株 ,但Northernblot却显示在两菌株中vnb基因的转录水平近似 。 展开更多
关键词 丝状真菌 表达分泌系统 受体菌 构建 黑曲霉t21 蛋白酶缺陷株 VHB
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