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弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抵抗弓形虫感染作用的观察 被引量:30
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作者 殷国荣 孟晓丽 +1 位作者 马广源 马晓明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期290-294,共5页
目的观察弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的肠黏膜和系统免疫应答及其抗弓形虫感染作用。方法BALB/c小鼠52只随机分为两组(每组26只),免疫组小鼠用弓形虫复合黏膜疫苗(每毫升含可溶性速殖子抗原1mg,霍乱毒素50μg)20μl/只滴鼻免疫2... 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的肠黏膜和系统免疫应答及其抗弓形虫感染作用。方法BALB/c小鼠52只随机分为两组(每组26只),免疫组小鼠用弓形虫复合黏膜疫苗(每毫升含可溶性速殖子抗原1mg,霍乱毒素50μg)20μl/只滴鼻免疫2次,间隔2周;对照组用等剂量PBS滴鼻。末次免疫后14d,各组处死6只,摘眼球取血(0.5~1ml);取直肠内粪便(4~5粒),ELISA测定血清IgG和粪IgA抗体;分别计数脾组织、派伊尔集合淋巴结(PP)和肠上皮淋巴细胞(IEL),免疫细胞化学法检测各组织中CD4+、CD8+T细胞亚群水平。用RH株弓形虫速殖子(4×104个/只)灌胃攻击感染各组其余小鼠,30d后颈椎脱位处死,计数肝、脑组织速殖子虫荷。结果免疫后14d,免疫组小鼠血清IgG和粪IgA抗体水平(分别为0.224和0.371),显著高于对照组(分别为0.041和0.037)(P<0.05),脾、PP和IEL中T淋巴细胞与对照组相比明显增生(P<0.01),其中脾、PP中CD4+、CD8+T淋巴细胞增殖显著(P<0.05),IEL中以CD8+T细胞为主,增殖显著(P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。攻击后30d,免疫组小鼠存活率(85.0%)显著高于对照组(45.0%)(P<0.05)。免疫组肝、脑组织速殖子数比对照组分别减少86.3%、86.7%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠,能有效诱导黏膜和系统免疫应答,小鼠存活率显著提高,肝、脑组织虫荷显著降低。 展开更多
关键词 弓形虫 黏膜疫苗 鼻内免疫 可溶性抗原 霍乱毒素
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弓形虫可溶性抗原联合γ干扰素鼻内免疫小鼠的抗弓形虫感染作用 被引量:16
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作者 刘成芳 殷国荣 +3 位作者 刘红丽 杨亚波 刘娟娟 管志玉 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第4期293-297,共5页
目的探讨弓形虫可溶性抗原(STAg)和γ干扰素(IFN-γ)联合鼻内免疫对小鼠的保护作用及IFN-γ作为佐剂鼻内免疫抗弓形虫感染的最佳剂量.方法将5~6周龄BALB/c小鼠70只随机分为5组,每组14只,分别用20μg STAg、20μg STAg+250 U IFN-γ、20... 目的探讨弓形虫可溶性抗原(STAg)和γ干扰素(IFN-γ)联合鼻内免疫对小鼠的保护作用及IFN-γ作为佐剂鼻内免疫抗弓形虫感染的最佳剂量.方法将5~6周龄BALB/c小鼠70只随机分为5组,每组14只,分别用20μg STAg、20μg STAg+250 U IFN-γ、20 μg STAg+500 UIFN-γ、20μg STAg+1 000 U IFN-γ和20μg STAg+2 000 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔14 d,末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,逐日观察小鼠健康存活情况.攻击后第29天处死全部小鼠,分离计数脑、肝组织速殖子;计数肠系膜淋巴结(MLN)和脾T淋巴细胞.结果随着佐剂IFN-γ剂量的增加,小鼠存活率有升高趋势,1 000 U IFN-γ剂量组小鼠存活率最高达93%;肝、脑速殖子数呈下降的趋势,其中STAg+1 000 U IFN-γ、STAg+2 000 UIFN-γ组显著低于STAg组;MLN和脾T淋巴细胞发生了增殖性应答,其中STAg+1 000 UIFN-γ、STAg+2 000 U IFN-γ组MLN细胞显著高于STAg组.结论STAg+1 000 U IFN-γ、STAg+2 000 U IFN-γ鼻内免疫明显优于其它小剂量佐剂及单独抗原免疫,能有效诱导黏膜免疫应答. 展开更多
关键词 弓形虫可溶性抗原 γ 干扰素 弓形虫 鼻内免疫 黏膜免疫
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TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的弓形虫IgA抗体特异性免疫应答 被引量:25
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作者 殷国荣 元海军 +3 位作者 杨亚波 周永安 沈嬿琼 孟晓丽 《热带医学杂志》 CAS 2004年第6期670-673,共4页
目的研究速殖子超声裂解物(TSo)和IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,血清、小肠液和粪便IgA抗体分泌的动态变化。方法将6~7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只,分别用10μl缓冲液PBS、20μgTSo、500UIFN-γ和20μgTSo+5... 目的研究速殖子超声裂解物(TSo)和IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,血清、小肠液和粪便IgA抗体分泌的动态变化。方法将6~7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只,分别用10μl缓冲液PBS、20μgTSo、500UIFN-γ和20μgTSo+500UIFN-γ鼻内免疫小鼠。用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,分别于攻击后第7、10、13、16、19天处死小鼠,收集血清、小肠液及粪便,ELISA法测定IgA含量。结果各组血清IgA抗体水平在攻击后第10天达到峰值,TSo+IFN-γ组血清IgA抗体含量高于其他各组。小肠液和粪便IgA抗体含量在攻击后第13天达到峰值,在实验期各时点TSo+IFN-γ组小肠液和粪便IgA抗体含量高于其他组。小肠液与粪便IgA抗体水平呈正相关。结论TSo或IFN-γ或TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠可诱导黏膜免疫,产生高水平的弓形虫特异性IgA抗体。TSo联合IFN-γ鼻内免疫优于单独免疫,免疫小鼠肠道产生大量SIgA,发挥抗虫作用。鼻黏膜免疫是一种安全有效的免疫接种途径。 展开更多
关键词 弓形虫 速殖子超声裂解物(TSo) IFN-Γ 鼻内免疫 黏膜免疫 IgA
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可溶性弓形虫速殖子抗原联合蜂胶和IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的细胞免疫应答 被引量:15
4
作者 殷国荣 刘成芳 +4 位作者 刘娟娟 管志玉 石蓉 张宇斌 银晶晶 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第1期32-35,共4页
目的 比较蜂胶、IFN-γ佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助STAg增强机体细胞免疫应答的水平,探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法 将5~6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4组:20μg STAg组,20μg STAg+40μg蜂胶组,20μgSTAg+100... 目的 比较蜂胶、IFN-γ佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助STAg增强机体细胞免疫应答的水平,探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法 将5~6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4组:20μg STAg组,20μg STAg+40μg蜂胶组,20μgSTAg+1000U IFN-γ组和20μg STAg+40μg蜂胶+1000U IFN-γ组。将抗原和佐剂溶于20μl PBS中,双侧鼻孔(10μl/鼻孔)滴鼻免疫。免疫2次,间隔14d,末次免疫后第10d用RH株弓形虫速殖子4×10^4个/只灌胃攻击。逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43d处死全部存活小鼠,免疫细胞化学(ICC)法检测小鼠PP结、IEL和脾T淋巴细胞亚群水平。结果 与STAg组相比,各佐剂组小鼠T淋巴细胞亚群比例有升高的趋势,其中IFN-γ、蜂胶+IFN-γ佐剂组小鼠PP结CD4^+、CD8^+T淋巴细胞,IEL、脾CD8^+T淋巴细胞数显著高于STAg组,CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值倒置。结论 在抗弓形虫感染中,IFN-γ的佐剂作用优于蜂胶,有效激发机体细胞免疫应答,可用作鼻内免疫抗弓形虫感染的粘膜佐剂。IFN-γ+蜂胶佐剂鼻内免疫效果优于单独蜂胶、IFN-γ佐剂,应用联合佐剂是抗弓形虫感染免疫的一个新思路。 展开更多
关键词 可溶性速殖子抗原 IFN-Γ 蜂胶 鼻内免疫 细胞免疫 粘膜免疫 可溶性弓形虫速殖子抗原
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弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的脾与肠相关淋巴组织细胞免疫效应及动态变化 被引量:8
5
作者 刘娟娟 殷国荣 +2 位作者 张建红 孟晓丽 陈洁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第8期580-583,共4页
目的观察弓形虫与Vero细胞共培养提取的排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的脾及肠相关淋巴组织(GALT)细胞免疫效应及动态变化。方法84只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以ESA(20μg/只)为抗原,对照组用未接种弓形虫... 目的观察弓形虫与Vero细胞共培养提取的排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的脾及肠相关淋巴组织(GALT)细胞免疫效应及动态变化。方法84只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以ESA(20μg/只)为抗原,对照组用未接种弓形虫的细胞培养上清液(20μl/只),鼻内免疫2次,间隔2周。末次滴鼻后第1、2、3、4、5、6、7周处死小鼠,分离脾、派伊尔结(PP)及小肠上皮内淋巴细胞(IEL)并计数。结果实验组小鼠脾淋巴细胞第3周达高峰,第1、2、3周明显高于对照组;PP淋巴细胞明显增生,第3周达高峰,第1、2、3、4、5周显著高于对照组;IEL第2周增生达高峰,第1~3周显著高于对照组。结论弓形虫ESA鼻内免疫BALB/c小鼠可有效诱导不同黏膜部位及系统特异性的细胞免疫应答,且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原 鼻内免疫 细胞免疫应答
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TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫脾淋巴细胞免疫应答 被引量:8
6
作者 元海军 殷国荣 +3 位作者 孟晓丽 刘红丽 张华屏 侯玉英 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第4期282-286,共5页
目的研究速殖子超声裂解物(TSo)和IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,脾T细胞亚群的动态变化.方法将6~7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用10μl PBS、20μgTSo、500 UIFN-γ和20 μg TSo十500 UIFN-γ鼻内免疫小... 目的研究速殖子超声裂解物(TSo)和IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,脾T细胞亚群的动态变化.方法将6~7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用10μl PBS、20μgTSo、500 UIFN-γ和20 μg TSo十500 UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔2周.末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击.分别于攻击后第7、10、13、16、19天处死小鼠,制备脾淋巴细胞悬液并涂片,免疫细胞化学法检测脾CD4+、CD8+T细胞亚群.结果攻击后第16、19天TSo+IFN-γ组脾CD4+T细胞比率较第10天升高(P<0.05);脾CD8+T细胞第10、13、16、19天呈现较高水平;CD4+/CD8+比值第10、13天出现倒置.结论TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠可激发系统免疫反应,提高其细胞免疫应答水平,增强脾CD8+T细胞的细胞毒作用,抵抗弓形虫感染.鼻黏膜免疫是一种安全有效的免疫接种途径. 展开更多
关键词 弓形虫 速殖子超声裂解物(TSo) IFN-Γ 鼻内免疫 脾T细胞亚群
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弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导体液免疫应答的动态观察 被引量:6
7
作者 殷国荣 周永安 +2 位作者 刘娟娟 孟晓丽 刘红丽 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2007年第3期135-140,共6页
观察从Vero细胞与弓形虫速殖子共培养液分离的排泄-分泌抗原(Excreted-secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠诱导的体液免疫应答及动态变化,为弓形虫复合黏膜疫苗候选抗原提供实验依据。BALB/c小鼠84只随机分为实验组和对照组,实... 观察从Vero细胞与弓形虫速殖子共培养液分离的排泄-分泌抗原(Excreted-secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠诱导的体液免疫应答及动态变化,为弓形虫复合黏膜疫苗候选抗原提供实验依据。BALB/c小鼠84只随机分为实验组和对照组,实验组以ESA为抗原(20μg/只),对照组用未接种弓形虫的细胞培养上清液20μL(μg/只),滴鼻免疫2次(间隔2周)。分别于2次免疫后第1、2、3、4、5、6、7周颈椎脱位处死小鼠。ELISA法测定血清IgG、IgA,粪便sIgA及肠液sIgA。结果表明,免疫组小鼠血清IgG、IgA和粪便sIgA及肠液sIgA均增高。血清IgG、IgA水平分别第5周、第4周达高峰,免疫后第1~7周(P〈0.05)显著高于对照组。粪便sIgA第4周即达高峰,之后逐渐降低,至第7周仍(P〈0.05)显著高于对照组。肠液sIgA第4周达高峰,第2、3、4周(P〈0.05)高于对照组。可见,弓形虫ESA鼻内免疫BALB/c小鼠可有效诱导体液免疫应答,特异性抗体生成明显且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原 鼻内免疫 黏膜免疫 IgA
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小鼠腹水中弓形虫排泄分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的免疫应答 被引量:6
8
作者 刘娟娟 殷国荣 +3 位作者 管志玉 石蓉 张宇斌 孟晓丽 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第2期110-114,共5页
目的观察弓形虫感染小鼠腹水中分离的排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠对不同粘膜部位和系统的免疫效应。方法将5~6周龄BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只,实验组分别用从感染弓形虫后24、48、72 h小鼠腹... 目的观察弓形虫感染小鼠腹水中分离的排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠对不同粘膜部位和系统的免疫效应。方法将5~6周龄BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只,实验组分别用从感染弓形虫后24、48、72 h小鼠腹水中提取的ESA 20μg/只鼻内免疫小鼠2次,间隔2周;对照组用20μl/只PBS滴鼻。观察小鼠健康和死亡情况,记录体重。末次免疫后第3周处死小鼠,计数PP(Peyer’s patches)个数;分离PP淋巴细胞、脾淋巴细胞、小肠上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocyte,IEL)及肠系膜淋巴结细胞(mesenteric lymph node lympho-cyte,MLNL)并计数。眼眶采血和收集直肠内粪便,ELISA检测血清特异性IgG水平及粪便sIgA。结果72 h ESA组小鼠免疫后健康状况较差,体重逐渐降低,死亡4只;其他组小鼠体重仍呈增高趋势。各实验组小鼠IEL、MLNL、脾淋巴细胞以及PP淋巴细胞的增殖活性均高于对照组(P〈0.05),72 h和48 h ESA组高于24 h ESA组(P〈0.01)。免疫后第3周,各实验组小鼠血清IgG、粪便sIgA水平均高于对照组(P〈0.05),72 h和48 h ESA组高于24 h ESA组(P〈0.01)。结论感染后不同时间提取的腹水弓形虫ESA鼻内免疫小鼠均可诱导不同粘膜部位及系统特异性的免疫应答,48 h ESA的免疫效果最好。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原(ESA) 粘膜免疫 鼻内免疫 粘膜疫苗
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STAg联合CpG ODN和CT鼻内免疫小鼠诱导的特异性抗体应答和脾淋巴细胞的特异性增殖反应 被引量:4
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作者 马广源 石蓉 +2 位作者 殷国荣 刘红丽 孟晓丽 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第4期284-287,共4页
目的观察可溶性速殖子抗原(STAg)联合CpG寡核苷酸(CpG ODN)和/或霍乱毒素(CT)鼻内免疫BALB/c小鼠后血清IgG、肠冲洗液IgA抗体水平及脾淋巴细胞体外特异性增殖反应,探讨CpG ODN和CT的佐剂效应。方法6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为5组,分别... 目的观察可溶性速殖子抗原(STAg)联合CpG寡核苷酸(CpG ODN)和/或霍乱毒素(CT)鼻内免疫BALB/c小鼠后血清IgG、肠冲洗液IgA抗体水平及脾淋巴细胞体外特异性增殖反应,探讨CpG ODN和CT的佐剂效应。方法6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为5组,分别用20μl PBS(PBS组)、20μg STAg(抗原组)、20μg STAg+10μgCpG ODN(CpG佐剂组)、20μg STAg+1μg CT(CT佐剂组)、20μg STAg+1μg CT+10μg CpG ODN(联合佐剂组)滴鼻,间隔2周,免疫2次。末次免疫后第20 d颈椎脱臼处死小鼠,收集血清和肠冲洗液,ELISA法检测血清弓形虫特异性IgG和肠冲洗液IgA。分离脾淋巴细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测致敏脾淋巴细胞体外增殖活性。结果ELISA法测定PBS组、抗原组、CpG佐剂组、CT佐剂组及联合佐剂组小鼠血清IgGA值分别为0.025 6±0.012 1、0.054 2±0.024 4、0.109 4±0.007 5、0.110 1±0.009 1和0.124 6±0.013 7,肠冲洗液IgAA值分别为0.141 8±0.030 2、0.415 2±0.080 70、.526 9±0.075 40、.846 5±0.115 5和1.128 9±0.100 3,脾淋巴细胞刺激指数SI分别为1.159 0±0.275 5、1.364 0±0.349 8、1.582 0±0.375 3、1.928 0±0.278 9和2.371 0±0.646 9,差异均有统计学意义(P<0.01);联合佐剂组肠冲洗液IgA水平和脾淋巴细胞的SI值与CpG佐剂组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论STAg联合CpG ODN和/或CT鼻内免疫小鼠可有效诱导机体免疫反应,两种佐剂联合免疫的效果优于单一抗原或抗原联合单一佐剂。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 可溶性速殖子抗原 CPG寡核苷酸 霍乱毒素 鼻内免疫 粘膜佐剂
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黏膜佐剂mLT63及CpG-ODN鼻内免疫的佐剂作用 被引量:3
10
作者 王冠 段广才 +5 位作者 郗园林 张庶民 马霄 王咏红 杨永弘 沈叙庄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第8期566-569,574,共5页
目的研究大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体mLT63和CpG-ODN鼻内免疫对抗原的佐剂效应。方法选用破伤风类毒素(TT)和小牛血清白蛋白(BSA)为抗原,mLT63和CpG-ODN为佐剂,经鼻内免疫BALB/c小鼠。ELISA间接法检测免疫小鼠血清和肺、直肠及阴道... 目的研究大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体mLT63和CpG-ODN鼻内免疫对抗原的佐剂效应。方法选用破伤风类毒素(TT)和小牛血清白蛋白(BSA)为抗原,mLT63和CpG-ODN为佐剂,经鼻内免疫BALB/c小鼠。ELISA间接法检测免疫小鼠血清和肺、直肠及阴道组织萃取液的特异性抗TT、BSA的IgA、IgG水平。结果mLT63和CpG-ODN均能协助TT和BSA抗原在血清、肺、阴道、直肠组织中诱导出高滴度的IgG抗体。在血清中IgA抗体滴度均比较低,而TT-IgA在肺和阴道组织中滴度较高,BSA-IgA在肺组织中滴度较高。各佐剂组之间IgG和IgA抗体水平相比,差异均无显著意义。不同剂量的mLT63诱导的BSA-IgA抗体水平差异无显著意义。结论mLT63和CpG-ODN经鼻内免疫对TT和BSA抗原均有良好的佐剂作用。 展开更多
关键词 大肠杆菌不耐热肠毒素 无毒突变体 CPG-ODN 鼻内免疫 黏膜佐剂
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不同佐剂的弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答 被引量:3
11
作者 刘成芳 殷国荣 +3 位作者 刘娟娟 管志玉 石蓉 张宇斌 《热带医学杂志》 CAS 2006年第5期484-486,492,共4页
目的比较IFN-γ、蜂胶佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助可溶性速殖子抗原(STAg)增强机体黏膜免疫应答的水平,探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法将5~6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4组(各15只):20μgSTAg,20μgSTAg+40μg蜂胶,20... 目的比较IFN-γ、蜂胶佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助可溶性速殖子抗原(STAg)增强机体黏膜免疫应答的水平,探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法将5~6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4组(各15只):20μgSTAg,20μgSTAg+40μg蜂胶,20μgSTAg+1000UIFN-γ或20μgSTAg+40μg蜂胶+1000UIFN-,γ均溶于总体积为20lμ的PBS中,滴鼻免疫(10lμ/鼻孔),免疫2次,间隔14d。末次免疫后第10天用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击。攻击后第43天处死全部存活小鼠,比较各组小鼠肠黏膜小肠上皮内淋巴细胞(IEL)、PP结T淋巴细胞数;检测小鼠粪便、鼻咽冲洗液、肺冲洗液、阴道冲洗液中弓形虫特异性sIgA含量。结果各佐剂组小鼠IEL、PP结T淋巴细胞数显著高于STAg组,黏膜sIgA含量显著高于STAg组;蜂胶+IFN-γ联合组小鼠黏膜免疫应答水平高于单独佐剂组,其中显著高于蜂胶组(P<0.05)。结论IFN-γ作为弓形虫黏膜疫苗佐剂的效应优于蜂胶,IFN-γ+蜂胶作为复合黏膜佐剂鼻内免疫效果优于两者单独应用。 展开更多
关键词 可溶性速殖子抗原 IFN-γ 蜂胶 鼻内免疫 黏膜疫苗
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不同剂量弓形虫ESA鼻内免疫小鼠诱导的粘膜及系统免疫应答 被引量:3
12
作者 申金雁 管志玉 +3 位作者 刘红丽 孟晓丽 王海龙 殷国荣 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第3期186-189,共4页
目的观察不同剂量弓形虫排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠诱导的粘膜及系统免疫应答,确定适宜免疫剂量。方法40只BALB/c小鼠,雌雄各半,随机分为5组,每组8只。分别用5、10、20和30μgESA滴鼻免疫小鼠2次,间隔1... 目的观察不同剂量弓形虫排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠诱导的粘膜及系统免疫应答,确定适宜免疫剂量。方法40只BALB/c小鼠,雌雄各半,随机分为5组,每组8只。分别用5、10、20和30μgESA滴鼻免疫小鼠2次,间隔14d,对照组用20μl/只PBS滴鼻。于末次免疫后第14d,颈椎脱臼处死小鼠,ELISA法检测鼻咽冲洗液和小肠冲洗液sIgA、血清IgG抗体水平,分离并计数肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepitheliallym-phocytes,iIEL)、肠系膜淋巴结淋巴细胞(mesenteric lymph node lymphocytes,MLNL)及脾淋巴细胞。结果实验期间,小鼠健康状况良好。随鼻内免疫ESA剂量的增加,特异性抗体水平不同程度的升高,MLNL、iIEL及脾淋巴细胞也显示不同程度的增生性应答。其中,30μg组小鼠血清IgG、脾淋巴细胞数量与10μg组、5μg组和PBS组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);30μg组小肠冲洗液sIgA、鼻咽冲洗液sIgA、iIEL和MLNL数量,20μg组小肠冲洗液sIgA和MLNL数量与5μg组及PBS组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);20μg组血清IgG与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论20μg和30μgESA鼻内免疫能有效诱导粘膜及系统免疫应答。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄分泌抗原 鼻内免疫 粘膜疫苗
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刚地弓形虫STAg鼻内免疫小鼠诱导小肠IgA分泌细胞数量及sIgA水平动态变化 被引量:2
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作者 申金雁 殷国荣 +3 位作者 刘红丽 殷丽天 孟晓丽 王海龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期411-415,共5页
目的动态观察刚地弓形虫(简称弓形虫)可溶性速殖子抗原(STAg)鼻内免疫小鼠对小肠IgA分泌细胞(IgASCs)数量和分泌型IgA(sIgA)水平的影响。方法 5~6周龄BALB/c小鼠96只,随机均分为免疫组和对照组。免疫组小鼠用STAg(20μg/只,悬... 目的动态观察刚地弓形虫(简称弓形虫)可溶性速殖子抗原(STAg)鼻内免疫小鼠对小肠IgA分泌细胞(IgASCs)数量和分泌型IgA(sIgA)水平的影响。方法 5~6周龄BALB/c小鼠96只,随机均分为免疫组和对照组。免疫组小鼠用STAg(20μg/只,悬于20μl PBS)滴鼻免疫2次,间隔2周;对照组用等量PBS代替。末次免疫后1周,灌胃感染RH株弓形虫速殖子(1×10~4个/只,溶于0.5 ml PBS),记录小鼠健康状况及体重。于感染后6、7、8、9、10和1 1 d随机处死每组小鼠各8只,免疫组化检测小鼠的十二指肠、空肠和回肠黏膜IgASCs数量,ELISA测定小肠冲洗液sIgA水平。结果感染后所有小鼠均发病,但免疫组症状较轻,体重增加幅度明显高于对照组(P〈0.05),感染后第7天对照组小鼠死亡2只。两组小鼠小肠冲洗液sIgA水平均呈升高趋势,但免疫组高于对照组(P〈0.05)。十二指肠IgASCs数量,对照组的略有增加,而免疫组持续升高至9 d后维持较高水平为20.65±1.67,对照组为12.30±2.67,对照组和免疫组十二指肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=0.378(P〈0.05)和r=0.566(P〈0.05)。空肠IgASCs数量,对照组的呈下降趋势,免疫组的持续升高至9 d后略下降。对照组和免疫组空肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=-0.557(P〈0.05)和r=0.218(P〉0.05)。对照组回肠IgASCs数量持续下降,免疫组的始终保持较高水平,对照组和免疫组回肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=-0.685(P〈0.05)和r=-0.053(P〈0.05)。结论 STAg鼻内免疫能使经口感染弓形虫小鼠空肠和回肠IgASCs数量增加,小肠黏膜免疫屏障功能增强。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 可溶性速殖子抗原 鼻内免疫 抗体分泌细胞 SIGA
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刚地弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的免疫应答 被引量:3
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作者 刘娟娟 殷国荣 +1 位作者 周永安 孟晓丽 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2007年第2期66-69,共4页
目的 观察刚地弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫小鼠后对不同黏膜部位和系统的免疫效应。方法 用Vero细胞培养刚地弓形虫,提取ESA抗原;将5—6周龄BALB/c小鼠随机分为6组,每组10只,实验组分别用培养5、7、9、11和14d提取的ESA20... 目的 观察刚地弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫小鼠后对不同黏膜部位和系统的免疫效应。方法 用Vero细胞培养刚地弓形虫,提取ESA抗原;将5—6周龄BALB/c小鼠随机分为6组,每组10只,实验组分别用培养5、7、9、11和14d提取的ESA20μg/只鼻内免疫小鼠2次,间隔为2周;对照组用无攻虫的细胞培养上清液滴鼻。观察小鼠健康和死亡情况,记录体重。在末次免疫后第3周处死小鼠,分别分离派伊尔结(PP)、脾淋巴细胞、肠上皮内淋巴细胞(IEL)、肠系膜淋巴结淋巴细胞(MLNL),并加以计数。收集粪便和眶血样本,ELISA检测粪内sIgA水平及血清IgG特异抗体。结果 实验期间小鼠健康状况良好,对照组和实验组小鼠体重均不同程度增加;末次免疫后第3周,实验组粪便sIgA、血清IgG、PP细胞、脾淋巴细胞、MLNL、IEL的数量均高于对照组,14d组(P〈0.01)的抗体滴度和各淋巴细胞计数最高。结论 用刚地弓形虫速殖子与Vero细胞共培养5—14d提取的ESA鼻内免疫小鼠均可诱导黏膜及系统特异性的免疫应答,共培养第14天提取的ESA免疫效果优于其他时间组。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 ESA 鼻内免疫 黏膜免疫
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重组弓形虫磷酸甘油酸变位酶2联合IL-2、IFN-γ佐剂鼻内免疫小鼠诱导的小肠黏膜免疫应答 被引量:1
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作者 祝建疆 李雅清 +3 位作者 王海龙 孟晓丽 杨建一 殷国荣 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2012年第4期199-203,共5页
为探讨IL-2和IFN-γ的佐剂效应,本研究观察了重组弓形虫磷酸甘油酸变位酶2(rTgPGAM2)联合IL-2或IFN-γ滴鼻免疫小鼠诱导小肠黏膜IgA抗体分泌细胞(IgA—ASCs)和小肠冲洗液sIgA的免疫应答。将48只6周龄雌性BALB/c小鼠随机均分为6组... 为探讨IL-2和IFN-γ的佐剂效应,本研究观察了重组弓形虫磷酸甘油酸变位酶2(rTgPGAM2)联合IL-2或IFN-γ滴鼻免疫小鼠诱导小肠黏膜IgA抗体分泌细胞(IgA—ASCs)和小肠冲洗液sIgA的免疫应答。将48只6周龄雌性BALB/c小鼠随机均分为6组,免疫组分别用500IUIL-2、1000UIFN-γ、30μgrTgPGAM2、30μgrTgPGAM2+500IUIL-2或30μgrTgPGAM24-1000UIFN-1滴鼻免疫小鼠,抗原和佐剂溶于20μLPBS中,对照组用20μLPBS滴鼻。免疫3次,一免和二免间隔2周,二免后1周三免。三免后第14天,颈椎脱臼处死小鼠,免疫组化检测小鼠十二指肠、空肠和回肠黏膜中IgA-ASCs,计算阳性率,ELISA测定小肠冲洗液sIgA水平。结果表明,免疫组十二指肠、空肠和回肠黏膜中IgA—ASCs阳性率高于PBS组,其中rTgPGAM2、rTgPGAM2联合IL-2或IFN-γ佐剂组差异显著(P〈0.05或P〈0.01)。rTgPGAM2联合IL-2或IFN-γ佐剂组小肠冲洗液sIgA水平显著高于PBS组(P〈0.01)。rTgPGAM2、TgPGAM2+IL-2和TgPGAM2+IFN-γ滴鼻免疫小鼠均可有效诱导肠黏膜免疫应答,IL-2和IFN-γ可显著增强抗原的免疫效应,IL-2的佐剂效应优于IFN-γ。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 磷酸甘油酸变位酶2 抗体分泌细胞 鼻内免疫 黏膜佐剂
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TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠的抗弓形虫感染保护作用 被引量:2
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作者 元海军 殷国荣 +2 位作者 陈洁 孟晓丽 白丽萍 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第6期426-429,共4页
目的研究速殖子超声裂解物(TSo)联合IFN-γ鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用. 方法将6~7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用PBS 10 μl、20 μg TSo、500 U IFN-γ和20 μg TSo+500 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔2周.... 目的研究速殖子超声裂解物(TSo)联合IFN-γ鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用. 方法将6~7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用PBS 10 μl、20 μg TSo、500 U IFN-γ和20 μg TSo+500 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔2周.末次免疫后第10 d,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击.分别于攻击后第7、10、13、16、19 d处死小鼠,计数脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子,观察其动态变化. 结果 TSo+IFN-γ鼻内免疫组可使受攻击小鼠脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子数减少,攻击后第13和19 d TSo+IFN-γ组小鼠脑内速殖子数比PBS组分别减少63.92%和58.39%(P均<0.05). 结论 TSo+IFN-γ鼻内免疫小鼠可产生有效的保护性免疫,可减少脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子数.组织内速殖子计数可以作为抗弓形虫感染保护力的重要评价指标. 展开更多
关键词 弓形虫 速殖子超声裂解物(TSo) IFN-Γ 鼻内免疫 粘膜疫苗
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不同剂量CpG ODN联合STAg鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的免疫应答 被引量:5
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作者 石蓉 殷国荣 +3 位作者 管志玉 刘娟娟 张宇斌 孟晓丽 《世界感染杂志》 2006年第2期118-121,132,共5页
目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)与不同剂量的CpG ODN联合滴鼻免疫小鼠的免疫效果,探索CpG ODN佐剂最佳剂量。方法 5-6周龄BALB/c小鼠50只随机分为5组,每组10只,实验组以20μg STAg联合不同剂量CpG ODN佐剂滴鼻免疫小鼠,... 目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)与不同剂量的CpG ODN联合滴鼻免疫小鼠的免疫效果,探索CpG ODN佐剂最佳剂量。方法 5-6周龄BALB/c小鼠50只随机分为5组,每组10只,实验组以20μg STAg联合不同剂量CpG ODN佐剂滴鼻免疫小鼠,佐剂剂量分别为0、1、5、10μg,对照组以PBS滴鼻,间隔2wk免疫2次。末次免疫后30d断颈处死全部小鼠,分离脾、Peyer's patch(PP结)、肠系膜淋巴结(MLN)和IEL淋巴细胞,观察淋巴细胞增殖情况。用ELISA的方法检测血清IgG和粪便IgA含量。结果 与PBS组和0剂量佐剂组相比,10μg CpG ODN联合STAg免疫后,小鼠肠粘膜淋巴组织和脾淋巴细胞增殖明显(P〈0.05)。10μg组血清IgG远高于对照组(P〈0.05),粪便IgA高于对照组(P〉0.05)。结论 CpG ODN可作为STAg的粘膜佐剂,10μg CpG ODN与STAg联合具有最佳的免疫效果。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 STAG CpG ODN 鼻内免疫 粘膜佐剂
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弓形虫ESA鼻内免疫小鼠诱导的黏膜及系统免疫应答
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作者 管志玉 孟晓丽 +2 位作者 殷国荣 刘红丽 王海龙 《山西医科大学学报》 CAS 2007年第10期868-871,共4页
目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(excreted-secreted antigen,ESA)鼻内免疫小鼠诱导黏膜和系统免疫应答的效果。方法将64只BALB/c小鼠随机分为8个组,每组8只。实验组小鼠分别用腹腔感染弓形虫小鼠第0,6,12,24,36,48和60小时无菌收集的腹腔... 目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(excreted-secreted antigen,ESA)鼻内免疫小鼠诱导黏膜和系统免疫应答的效果。方法将64只BALB/c小鼠随机分为8个组,每组8只。实验组小鼠分别用腹腔感染弓形虫小鼠第0,6,12,24,36,48和60小时无菌收集的腹腔液中获取的ESA 20μg/只滴鼻免疫小鼠2次,间隔14 d,以PBS 20μl/只滴鼻为对照。逐日观察小鼠状况,于末次免疫后第14天颈椎脱位处死小鼠,检测血清特异性IgG、小肠冲洗液sIgA水平,分离肠上皮内淋巴细胞(intesti-nal intraepithelial lymphocytes,iIEL)及肠系膜淋巴结淋巴细胞(mesenteric lymph node lymphocytes,MLNL)并计数。结果60 h组小鼠初次免疫后第8-11天,有倦怠、饮水及采食量减少等表现,体重增长较其他组缓慢(P<0.05),其他组小鼠健康状况良好。不同时相ESA鼻内免疫小鼠后特异性抗体水平升高,MLNLi、IEL发生增殖性应答。48 h组和60 h组各项指标均明显高于0 h组(P<0.01)及PBS组(P<0.05)。结论48 h和60 h弓形虫ESA均能诱导黏膜及系统免疫应答,但60h ESA可能对机体有毒副作用,不适宜直接滴鼻免疫,48 h ESA可作为弓形虫黏膜疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 弓形虫 免疫 黏膜 排泄-分泌抗原 鼻内免疫
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干扰素对M2e-HBc疫苗鼻内免疫的佐剂作用
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作者 吕宏亮 刘松友 +4 位作者 董小曼 沈心亮 毕胜利 冯玉萍 马忠仁 《医学研究杂志》 2008年第11期97-99,共3页
目的研究干扰素对鼻腔黏膜免疫M2e-HBc疫苗的佐剂作用。方法小鼠经鼻腔黏膜免疫,用流感病毒攻击。测定抗体水平和对小鼠的保护。结果小鼠可产生局部和系统保护性抗体IgA、IgG,对流感病毒的亚致死性攻击产生完全保护。结论干扰素对M2e-HB... 目的研究干扰素对鼻腔黏膜免疫M2e-HBc疫苗的佐剂作用。方法小鼠经鼻腔黏膜免疫,用流感病毒攻击。测定抗体水平和对小鼠的保护。结果小鼠可产生局部和系统保护性抗体IgA、IgG,对流感病毒的亚致死性攻击产生完全保护。结论干扰素对M2e-HBc疫苗鼻内免疫具有较强的免疫佐剂作用。 展开更多
关键词 M2e-HBc疫苗 鼻内免疫 干扰素 佐剂作用
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SIV的VLPs鼻内免疫
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作者 YaoQ. 陈锦荣 江丽君 《生物制品快讯》 2003年第7期9-9,共1页
关键词 SIV VLPS 鼻内免疫 免疫缺陷病毒 免疫应答
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