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CXCR4-3’-UTR双荧光素酶报告基因载体的构建及与microRNA-494的靶向作用
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作者 林海霞 舒丹桦 《现代实用医学》 2023年第11期1405-1408,共4页
目的 构建野生型与突变型CXCR4基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证microRNA-494 (miR-494)对CXCR4的靶向调控作用。方法 使用生物信息学相关软件预测miR-494与CXCR4之间的靶向关系;利用PCR法扩增CXCR4的目的基因... 目的 构建野生型与突变型CXCR4基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证microRNA-494 (miR-494)对CXCR4的靶向调控作用。方法 使用生物信息学相关软件预测miR-494与CXCR4之间的靶向关系;利用PCR法扩增CXCR4的目的基因片段构建野生型与突变型CXCR4基因3’-UTR的双荧光素酶报告基因载体;将miR-494模拟物和阴性对照物分别与野生型pMIR-CXCR4-wt-3’-UTR或突变型pMIR-CXCR4-mut-3’-UTR双荧光素酶报告基因载体共同转染NRK-49F细胞,然后进一步检测相对荧光值。结果 成功构建野生型与突变型CXCR4基因3’-UTR的双荧光素酶报告基因载体,荧光结果显示加入miR-494模拟物可使野生型pMIR-CXCR4-wt-3’-UTR的荧光素酶活性降低约52%,但突变型pMIR-CXCR4-mut-3’-UTR的荧光素酶活性与对照组相比无显著变化。结论 初步证实miR-494与CXCR4之间存在靶向调控关系。 展开更多
关键词 CXCR4 3’-非编码区 双荧光素酶报告载体 miR-494
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3’-羟基紫檀芪抑制胰腺导管腺癌细胞生长的作用及其机制研究 被引量:1
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作者 徐黎明 莫佳杰 +6 位作者 胡慧巧 方道全 戴以勒 茅叶繁 黄文铅 蒋磊 张启瑜 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2023年第7期412-419,共8页
目的 探究3’-羟基紫檀芪(3’-HPT)对胰腺导管腺癌(PDAC)细胞在体内外的抗肿瘤作用,为3’-HPT在临床上用于PDAC的治疗提供实验基础。方法 用不同浓度的3’-HPT分别处理PDAC细胞系PANC-1和PaTu8988t细胞24 h和48 h;CCK-8实验检测两种细... 目的 探究3’-羟基紫檀芪(3’-HPT)对胰腺导管腺癌(PDAC)细胞在体内外的抗肿瘤作用,为3’-HPT在临床上用于PDAC的治疗提供实验基础。方法 用不同浓度的3’-HPT分别处理PDAC细胞系PANC-1和PaTu8988t细胞24 h和48 h;CCK-8实验检测两种细胞的活力变化,计算药物的IC50;集落形成实验检测3’-HPT处理24 h后的PDAC细胞集落形成能力,细胞迁移实验检测3’-HPT处理后肿瘤细胞的迁移能力,流式细胞术检测3’-HPT处理后活细胞凋亡率。Western blotting实验检测3’-HPT处理后肿瘤细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail、Cleaved Caspase 3及Bcl-2表达水平;免疫荧光实验检测3’-HPT处理后细胞中Ki-67、Snail、Bcl-2表达情况。构建裸鼠皮下成瘤模型探究3’-HPT在体内的效应;免疫组化实验检测3’-HPT(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))处理后裸鼠PDAC移植瘤细胞中Ki-67、Snail、Bcl-2表达情况。结果 3’-HPT可以抑制PDAC细胞PANC-1和PaTu8988t生长,并具有浓度依赖性。3’-HPT对PANC-1细胞的IC50为4.97μmol/L,对PaTu8988t细胞的IC50为4.75μmol/L。经2.5μmol/L和5.0μmol/L 3’-HPT处理后,PDAC细胞的集落数目显著减少,细胞迁移能力显著降低,活细胞凋亡率显著升高。Western blotting实验结果显示3’-HPT处理能够抑制PDAC细胞中N-cadherin、Snail与Bcl-2蛋白表达并促进E-cadherin、Cleaved Caspase 3蛋白表达。免疫荧光实验显示细胞中Ki-67、Snail、Bcl-2表达水平均有所降低。3’-HPT能显著抑制裸鼠体内PDAC移植瘤的生长,但对裸鼠体质量无显著影响。免疫组化实验显示3’-HPT处理能够显著降低裸鼠移植瘤中的Ki-67、Snail和Bcl-2表达水平。差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 3’-HPT能够抑制体内外PDAC细胞的生长,并抑制细胞迁移,促进凋亡。 展开更多
关键词 3’-羟基紫檀芪 胰腺导管腺癌 凋亡 迁移
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3,3’-二氨基-4,4’-二羟基联苯及其聚酰亚胺的合成与性能研究 被引量:4
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作者 费斐 徐永芬 +1 位作者 傅菊荪 虞鑫海 《绝缘材料》 CAS 北大核心 2009年第6期12-15,22,共5页
4,4’-二羟基联苯(DHBP)和浓硝酸在有机溶剂中反应,合成得到了3,3’-二硝基-4,4’-二羟基联苯(DNDHBP)。随后,在Pd/C-水合肼的还原体系中,被进一步还原,得到了3,3’-二氨基-4,4’-二羟基联苯(DADHBP)。将得到的3,3’-二氨基-4,4’-二羟... 4,4’-二羟基联苯(DHBP)和浓硝酸在有机溶剂中反应,合成得到了3,3’-二硝基-4,4’-二羟基联苯(DNDHBP)。随后,在Pd/C-水合肼的还原体系中,被进一步还原,得到了3,3’-二氨基-4,4’-二羟基联苯(DADHBP)。将得到的3,3’-二氨基-4,4’-二羟基联苯(DADHBP)与3,3’,4,4’-四羧基二苯醚二酐(ODPA)在强极性非质子有机溶剂中进行聚合反应,得到了粘稠状的聚酰胺酸(DADHBP/ODPA-PAA)溶液,涂膜,热亚胺化,获得了相应的聚酰亚胺(DADHBP/ODPA-PI)薄膜。利用差示扫描量热计(DSC)、傅立叶转换红外光谱仪(FT-IR)、紫外-可见分光光度计等仪器,对它们的性能进行了研究。结果表明,制成的聚酰亚胺薄膜具有良好的疏水性、光学性能和力学性能。 展开更多
关键词 3 3’-二硝基-4 4’-二羟基联苯 3 3’-二氨基-4 4’-二羟基联苯 3 3’ 4 4’-四羧基二苯醚二酐 聚酰亚胺 合成 性能
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自动液液萃取-固相萃取净化-气相色谱质谱联用法测定水中3,3’-二氯联苯胺
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作者 顾桔 龚文超 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2023年第12期0005-0008,共4页
采集的水样调节至pH>11的条件下,样品萃取用自动液液仪,用二氯甲烷溶剂萃取水样中的3,3’-二氯联苯胺,萃取液用无水硫酸钠过滤脱水、弗洛里硅酸镁柱净化、氮吹浓缩定容后,经过气相色谱-质谱联用法(GC/MS)分离检测,根据保留时间和目... 采集的水样调节至pH>11的条件下,样品萃取用自动液液仪,用二氯甲烷溶剂萃取水样中的3,3’-二氯联苯胺,萃取液用无水硫酸钠过滤脱水、弗洛里硅酸镁柱净化、氮吹浓缩定容后,经过气相色谱-质谱联用法(GC/MS)分离检测,根据保留时间和目标化合物的特征离子定性,内标法定量,建立一种快速、准确测定地表水、地下水和废水中的3,3’-二氯联苯胺的检测方法。结果表明:3,3’-二氯联苯胺的线性范围为1.0~20.0mg/L,相关系数为0.995,方法平均回收率为66.0%~96.8%,相对标准偏差 (n=7)为 1.5% ~10.9%,方法检出限为0.2μg/L,检测下限0.8μg/L。 展开更多
关键词 液液萃取 气相色谱质谱联用法 3 3’-二氯联苯胺
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2’,3’-双脱氢-2’,3’-双脱氧腺苷的合成
5
作者 易娟 薛伟才 尚红霞 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期277-278,281,共3页
以腺苷为原料,利用Corey-Winter烯化反应分4步合成了2’,3’-双脱氧-2’,3’-双脱氧腺苷,总收率51%。用1HNMR和13CNMR表征了中间体及目标产物。
关键词 腺苷 Corey—Winter烯化 2’ 3’-双脱氢-2 3’-双脱氧腺苷 合成
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虫草菌素(3’-脱氧腺苷)研究进展(综述) 被引量:64
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作者 刘东泽 陈伟 +2 位作者 高新华 代光辉 吴畏 《上海农业学报》 CSCD 2004年第2期89-93,共5页
主要综述了国内外对虫草菌素 (Cordycepin)的研究概况 ,介绍了虫草菌素的来源、合成和理化性质及其在生物学活性、检测方法、提取纯化、药理及临床应用方面的研究进展 ;同时也展望了虫草菌素的市场前景 ,提出了虫草菌素的研究目标 ,指... 主要综述了国内外对虫草菌素 (Cordycepin)的研究概况 ,介绍了虫草菌素的来源、合成和理化性质及其在生物学活性、检测方法、提取纯化、药理及临床应用方面的研究进展 ;同时也展望了虫草菌素的市场前景 ,提出了虫草菌素的研究目标 ,指出无冠构巢曲霉 (Aspergillusnidulans)可能将成为提取虫草菌素的另一个重要生物源。 展开更多
关键词 虫草菌素 合成 理化性质 生物学活性 检测方法 提取 纯化 药理作用 临床应用 无冠构巢曲霉 3’-脱氧腺苷
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过量表达紫茎泽兰类黄酮3’-羟化酶基因对转基因烟草POD、PAL活性的影响 被引量:6
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作者 张松焕 李春奇 +2 位作者 郭惠明 裴熙祥 程红梅 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第3期98-101,共4页
紫茎泽兰具有强烈的化感作用,可抑制周围其他植物生长。类黄酮3’-羟化酶(F3’H)属于细胞色素P450(CYP)单加氧酶,具有催化多种依赖NADPH或NADH的底物氧化反应的功能,在植物化感作用中行使一定的功能。利用转F3’H基因的烟草为实验材料,... 紫茎泽兰具有强烈的化感作用,可抑制周围其他植物生长。类黄酮3’-羟化酶(F3’H)属于细胞色素P450(CYP)单加氧酶,具有催化多种依赖NADPH或NADH的底物氧化反应的功能,在植物化感作用中行使一定的功能。利用转F3’H基因的烟草为实验材料,分别测定转F3’H基因植株、转pB I121空载体植株和野生型植株的过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,结果表明,转F3’H基因植株的POD活性分别是野生型植株和转空载体植株的3.8倍和2.0倍,而PAL活性则相应为4.0倍和2.0倍。由此推断F3’H基因在抵御伤害方面具有重要作用。 展开更多
关键词 类黄酮3’-羟化酶 过表达 POD PAL
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飞机草类黄酮3’-羟化酶基因(CoF3’H)的克隆及其在烟草中的表达 被引量:5
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作者 何海旺 潘华清 +1 位作者 张铙丹 何龙飞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期479-486,共8页
利用RT-PCR和RACE技术从飞机草中克隆得到1628 bp的类黄酮3’-羟化酶c DNA的全长序列,命名为Co F3’H,Gen Bank登录号为HQ268505.1。Co F3’H基因的编码区长度为1524 bp,编码507个氨基酸。氨基酸序列含P450蛋白结构域和半胱氨酸亚铁血... 利用RT-PCR和RACE技术从飞机草中克隆得到1628 bp的类黄酮3’-羟化酶c DNA的全长序列,命名为Co F3’H,Gen Bank登录号为HQ268505.1。Co F3’H基因的编码区长度为1524 bp,编码507个氨基酸。氨基酸序列含P450蛋白结构域和半胱氨酸亚铁血红素结合域保守区(F××G×R×C×G),利用DNAMAN软件比对显示,Co F3’H与其他植物的F3’H蛋白的同源性很高。通过农杆菌介导成功地将Co F3’H基因导入烟草,T2代的转Co F3’H基因烟草植株的黄酮含量显著高于野生型。说明Co F3’H在黄酮的生物合成中起重要作用,为后续研究飞机草的化感作用及综合利用提供基础。 展开更多
关键词 飞机草 类黄酮3’-羟化酶 克隆 表达
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槲皮素-3’-氨基酸酯盐酸盐的合成工艺研究 被引量:4
9
作者 于姝燕 杨跃 +5 位作者 郑永胜 郭举 吴成龙 罗娟 田之悦 成丽 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期631-635,共5页
The synthetic route of 3’-amino carboxylate hydrochloride of quercetin is improved.Using benzyl bromide to partly protect the hydroxyl groups,the protected quercetin then react with a series of Boc protected amino ac... The synthetic route of 3’-amino carboxylate hydrochloride of quercetin is improved.Using benzyl bromide to partly protect the hydroxyl groups,the protected quercetin then react with a series of Boc protected amino acids to afford the 3’-amino carboxylate,hydrogenised and treated with HCl(g),a series of 3’-amino carboxylate hydrochloride of quercetin are synthesized in good yields.The structures of these compounds are confirmed by means of their m.p.,mass spectra and 1H NMR. 展开更多
关键词 槲皮素 溴化苄 槲皮素-3’-氨基酸酯盐酸盐
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3,3’-二吲哚甲烷对宫颈癌SiHa细胞增殖抑制的实验研究 被引量:4
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作者 李源 朱俊勇 +2 位作者 陈祖华 曾川 韦准 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2012年第9期775-779,共5页
目的研究吲哚-3-甲醇(I3C)的重要衍生物3,3’-二吲哚甲烷(DIM)对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度DIM对SiHa细胞体外生长的抑制作用,流式细胞术检测DIM对SiHa细胞凋亡的影响,荧光显微镜观察细胞形态的变化;... 目的研究吲哚-3-甲醇(I3C)的重要衍生物3,3’-二吲哚甲烷(DIM)对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度DIM对SiHa细胞体外生长的抑制作用,流式细胞术检测DIM对SiHa细胞凋亡的影响,荧光显微镜观察细胞形态的变化;Western blotting检测不同浓度DIM对SiHa细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果 DIM对SiHa细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖性,DIM对SiHa细胞干预48h的半数抑制浓度(IC50)为44.44μmol/L。分别以25、50、100μmol/L的DIM处理48h后,SiHa细胞的凋亡率分别为(10.09±1.32)%、(21.11±3.36)%和(55.46±6.33)%,阴性对照组为(4.56±0.52)%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度DIM处理48h后,荧光显微镜下SiHa细胞呈现皱缩、变圆,并形成明显的凋亡小体。Western blotting显示随着DIM浓度的增加,SiHa细胞中MAPK家族的ERK、p38和p-p38蛋白的表达水平受抑制,JNK、p-JNK蛋白的表达水平上调,PI3K家族的Akt、p-Akt、PI3K p110α、PI3K p110β、PI3K classⅢ、GSK3-β、p-PDK1和p-c-Raf蛋白的表达也受到抑制。结论 DIM能抑制SiHa细胞的生长并诱导细胞凋亡,其作用机制是通过对MAPK家族和PI3K家族凋亡相关蛋白表达的调控实现的,并将有可能成为一种有效的抗宫颈癌药物。 展开更多
关键词 3 3’-二吲哚甲烷 宫颈癌 SIHA细胞 增殖 凋亡
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3’-大豆苷元磺酸钠在缺血再灌注损伤时对视网膜抗氧化能力及NOS活性的影响 被引量:4
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作者 李良东 黄志华 +3 位作者 黎晓 刘东 占敏艳 曾靖 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第7期545-548,共4页
目的研究3’-大豆苷元磺酸钠(DSS)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤时对视网膜抗氧化能力及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。方法24只SD大鼠按随机数字表法分成4组:对照组、视网膜缺血再灌注模型组、低剂量(1mg/kg)及高剂量(2mg/kg)DSS组。颈... 目的研究3’-大豆苷元磺酸钠(DSS)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤时对视网膜抗氧化能力及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。方法24只SD大鼠按随机数字表法分成4组:对照组、视网膜缺血再灌注模型组、低剂量(1mg/kg)及高剂量(2mg/kg)DSS组。颈总动脉夹闭法制作视网膜缺血再灌注模型,比色法测定血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)浓度及NOS、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组相比,模型组血清MDA浓度升高(P<0.05),NO浓度降低、eNOS活性降低(P<0.01)。与模型组比较,低剂量DSS组MDA浓度降低、SOD活性升高(P<0.05);高剂量DSS组GSH-Px活性升高(P<0.05),tNOS活性升高(P<0.05);DSS低剂量组(P<0.05)及高剂量组(P<0.01)NO浓度与模型组比较均升高,低剂量及高剂量DSS组eNOS活性均升高(P<0.05)。结论DSS可通过提高eNOS、SOD及GSH-Px的活性,从而提高视网膜缺血再灌注损伤时的抗氧化能力及NO的释放,降低组织细胞损伤,保护眼功能。 展开更多
关键词 3’-大豆苷元磺酸钠 视网膜缺血再灌注损伤 抗氧化 一氧化氮合酶
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稀土配合物的研究——Ⅷ.1,4-双(1’-苯基-3’-甲基-5’-氧代吡唑酮基-4’)代-1,4-丁二酮(BPMPBD)与稀土元素配合物的合成及表征 被引量:3
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作者 李小静 完颜辉 +2 位作者 董文基 杨汝栋 杨文国 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第2期169-174,共6页
在乙醇-水溶液中,当pH=5-6时,用希土硝酸盐与BPMPBD反应,合成了15种希土元素(除Sc、Pm外)的二元配合物.通过化学分析和元素分析确定了配合物的组成为REL_2·nH_2O(RE=La,n=5,RE=Y,n=4,RE=Pr、Nd、Sm、Eu、Gd,n=3),RE_2L_3·5H_2... 在乙醇-水溶液中,当pH=5-6时,用希土硝酸盐与BPMPBD反应,合成了15种希土元素(除Sc、Pm外)的二元配合物.通过化学分析和元素分析确定了配合物的组成为REL_2·nH_2O(RE=La,n=5,RE=Y,n=4,RE=Pr、Nd、Sm、Eu、Gd,n=3),RE_2L_3·5H_2O(RE=Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu)及CeL_2·4H_2O.研究了这些配合物的一些性质及红外光谱、紫外光谱、核磁共振、荧光光谱和差热分析,认为重希土配合物具有双核结构。 展开更多
关键词 1 4-双(1’-苯基-3’-甲基-5’-氧代吡唑酮基-4’)-1 4-丁二酮 稀土 配合物
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2-(4’-硝基苯基)-4,5-二(3’-硝基苯基)咪唑合成及机理研究 被引量:4
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作者 高妍 张志强 +1 位作者 周袭非 胡知之 《化工新型材料》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期42-44,共3页
以苯偶姻为原料,经过氧化、硝化和环合加成制备了2-(4’-硝基苯基)-4,5-二(3’-硝基苯基)咪唑。对最后环合加成反应的工艺条件进行了优化并研究了其反应机理,较佳反应条件为:间二硝基苯偶酰∶对硝基苯甲醛∶醋酸铵摩尔比为1∶1.2∶14,醋... 以苯偶姻为原料,经过氧化、硝化和环合加成制备了2-(4’-硝基苯基)-4,5-二(3’-硝基苯基)咪唑。对最后环合加成反应的工艺条件进行了优化并研究了其反应机理,较佳反应条件为:间二硝基苯偶酰∶对硝基苯甲醛∶醋酸铵摩尔比为1∶1.2∶14,醋酸25mL,反应时间4.5h。在此条件下,目标产物收率达85.3%。 展开更多
关键词 2-(4’-硝基苯基)-4 5-二(3’-硝基苯基)咪唑 环合加成 反应机理
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热疗对2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶表达和C6胶质瘤细胞侵袭作用的影响 被引量:1
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作者 王健 张田 +2 位作者 贾永森 赵喜庆 秦丽娟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期248-252,I0001,共6页
目的:探讨热疗与2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(CNP)表达的关系,阐明热疗降低胶质瘤侵袭性的作用及其可能机制。方法:将对数生长期C6胶质瘤细胞随机分为对照组(37℃孵育)和热疗组(42℃孵箱内孵育10、30、60、120、180和240min)。各组... 目的:探讨热疗与2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(CNP)表达的关系,阐明热疗降低胶质瘤侵袭性的作用及其可能机制。方法:将对数生长期C6胶质瘤细胞随机分为对照组(37℃孵育)和热疗组(42℃孵箱内孵育10、30、60、120、180和240min)。各组细胞均行细胞爬片,采用免疫组织化学法检测各组细胞中热休克蛋白70(HSP70)的表达水平;Western blotting法检测各组细胞中CNP蛋白的表达水平;于Transwell上室构建胶质瘤侵袭模型,经热疗后采用结晶紫染色法观察透过Transwell下室面的胶质瘤细胞数。结果:与对照组比较,热疗组C6细胞经热疗后HSP70表达水平增加,于热疗30、60、120和180min时HSP70表达水平高对于照组(P<0.05或P<0.01),且于热疗30min时达高峰(P<0.01)。热疗组C6细胞中CNP蛋白表达水平亦于热疗后开始增加,热疗60、120和180min时CNP蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01),并于热疗120min时达高峰(P<0.01)。热疗后透过Transwell的胶质瘤细胞数减少,细胞数于热疗120min时达到最低水平(P<0.01)。结论:热疗可能是通过增加HSP70的表达而使CNP蛋白的表达增多,增多的CNP又通过某种机制降低了胶质瘤的侵袭性。 展开更多
关键词 热疗 热休克蛋白70 2’ 3’-环核苷酸3'-磷酸二酯酶 胶质瘤 侵袭性
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多酶催化合成3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸反应体系的构建及优化 被引量:1
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作者 李晓燕 蔡谨 +2 位作者 杭宝建 黄磊 徐志南 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期119-125,共7页
3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸(PAPS)是目前发现的唯一的"活性"硫酸基团供体,在生物肝素酶法硫磺化反应中起到重要作用,但化学合成的成本高。如何大量低成本制备PAPS是实现酶法合成肝素工业化的关键因素。本文克隆表达了酶法合成... 3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸(PAPS)是目前发现的唯一的"活性"硫酸基团供体,在生物肝素酶法硫磺化反应中起到重要作用,但化学合成的成本高。如何大量低成本制备PAPS是实现酶法合成肝素工业化的关键因素。本文克隆表达了酶法合成PAPS的两个酶:三磷酸腺苷(ATP)硫化酶和5’-腺苷磷酰硫酸(APS)激酶。构建了一条体外合成PAPS的途径。首先利用ATP硫化酶将ATP转化生成APS,同时产生副产物无机焦磷酸(PPi),APS再在APS激酶作用下转化生成PAPS。研究了Mg2+浓度、缓冲体系和p H、温度以及无机焦磷酸水解酶(PPase)的添加对该酶反应的影响。通过添加无机焦磷酸水解酶(PPase),极大提高了PAPS的转化率。在最优条件下考察不同ATP浓度下PAPS随时间的积累量变化,发现反应过程中存在底物抑制作用;ATP浓度为50 mmol?L?1时,反应25 h,PAPS的积累量为18.87 mmol?L?1。反应过程中分批补料ATP,能极大提高催化效率。反应11.5 h,PAPS积累量可达20.36 mmol?L?1(10.32 g·L?1),转化率为81.4%。 展开更多
关键词 3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸 ATP硫化酶 APS激酶 分批补料
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水通道蛋白8基因3’-非翻译区荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定 被引量:1
16
作者 闵敏 彭丽华 +1 位作者 郭明洲 杨云生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期876-878,共3页
目的:构建水通道蛋白8(AQP8)基因3’-UTR荧光素酶报告载体,与microRNA(miRNA)共转染HT29细胞,分析miRNA对其调控作用。方法:以HT29细胞基因组DNA为模板PCR扩增AQP8基因3’-UTR序列,并将其克隆到荧光素酶报告载体pGL3M上;根据生物信息学... 目的:构建水通道蛋白8(AQP8)基因3’-UTR荧光素酶报告载体,与microRNA(miRNA)共转染HT29细胞,分析miRNA对其调控作用。方法:以HT29细胞基因组DNA为模板PCR扩增AQP8基因3’-UTR序列,并将其克隆到荧光素酶报告载体pGL3M上;根据生物信息学软件Targetscan和miRanda预测可能与AQP8基因3’-UTR作用的miRNA,将pGL3-AQP8 3’-UTR和预测miRNA共转染,利用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果:成功构建AQP8基因3’-UTR序列荧光素酶报告载体;生物信息学软件预测miRNA靶点显示AQP8基因3’-UTR可能是miR-214、miR-15a、miR-330、miR-137、miR-32、miR-612、miR-200a/141、miR-16的作用靶点;与对照组相比,miR-15a、miR-330、miR-32、miR-612、miR-200a、miR-16可使荧光素酶活性降低10%~45%。结论:成功地构建AQP8基因3’UTR荧光素酶报告载体,miR-15a、miR-330、miR-32、miR-612、miR-200a和miR-16可抑制其荧光素酶活性。 展开更多
关键词 水通道蛋白8 MICRORNA 3’-非翻译区 荧光素酶报告载体
原文传递
血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制 被引量:1
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作者 官国英 李丽波 +2 位作者 刘忠瑞 许文革 韩世泉 《同位素》 CAS 2011年第2期98-101,共4页
以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸(T3)生物素-亲合素酶联免疫分析(T3-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2μg/L,批内、批间变... 以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸(T3)生物素-亲合素酶联免疫分析(T3-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1%-8.3%和6.5%-10.5%,回收率为98.1%-107.2%;高浓度T3血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。 展开更多
关键词 3 5 3’-三碘甲腺原氨酸(T3) 生物素-亲合素系统(BAS) 酶联免疫分析(ELISA)
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3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生模型的实验研究 被引量:13
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作者 曾靖 曾昭毅 +2 位作者 肖海 黄志华 邱峰 《赣南医学院学报》 2005年第6期741-742,共2页
目的:研究3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生的抑制作用。方法:皮下注射丙酸睾酮,制造小鼠前列腺增生模型,观察小鼠前列腺湿重、前列腺指数、光镜下前列腺形态学的变化,研究3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生的抑制作用。结果:3’-... 目的:研究3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生的抑制作用。方法:皮下注射丙酸睾酮,制造小鼠前列腺增生模型,观察小鼠前列腺湿重、前列腺指数、光镜下前列腺形态学的变化,研究3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生的抑制作用。结果:3’-大豆苷元磺酸钠能明显抑制由丙酸睾丸酮诱发的小鼠前列腺增生。结论:3’-大豆苷元磺酸钠对丙酸睾丸酮所致小鼠前列腺增生具有显著的拮抗作用。 展开更多
关键词 3’-大豆苷元磺酸钠 前列腺增生 小鼠 实验
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高效液相色谱法测定黄蜀葵花总黄酮胶囊中的金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷 被引量:2
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作者 杜安全 周正华 《化学分析计量》 CAS 2019年第3期104-106,共3页
建立高效液相色谱法测定黄蜀葵花总黄酮中金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷的含量。以乙腈-0.5%磷酸水溶液(22∶78)为流动相,流量为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为360nm。金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷的质量浓度分别在12.232~73.392μ... 建立高效液相色谱法测定黄蜀葵花总黄酮中金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷的含量。以乙腈-0.5%磷酸水溶液(22∶78)为流动相,流量为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为360nm。金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷的质量浓度分别在12.232~73.392μg/mL,11.044~66.264μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数均为0.9999,检出限分别为200,180ng/g。样品加标回收率分别为99.73%,100.78%,测定结果的相对标准偏差分别为0.86%,1.48%(n=6)。该方法操作简单、快速,结果准确,重现性好,可为黄蜀葵花总黄酮胶囊的质量控制提供依据。 展开更多
关键词 黄蜀葵花总黄酮胶囊 金丝桃苷 槲皮素-3’-葡萄糖苷 高效液相色谱法
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