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3-甲基腺嘌呤对鸡LMH细胞脂代谢的影响机制研究
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作者 李敏 韦垠 +2 位作者 郁建锋 徐璐 顾志良 《常熟理工学院学报》 2024年第2期46-50,共5页
本研究围绕自噬与鸡肝脏脂代谢机制展开.首先使用3组不同浓度(2.5 mmol/L、5 mmol/L和10 mmol/L)3-甲基腺嘌呤(3-methyl adenine,3-MA)分别处理鸡肝癌细胞(Leghorn Male Hepatocellular cells,LMH)24 h和48 h,然后提取细胞的总RNA,利用R... 本研究围绕自噬与鸡肝脏脂代谢机制展开.首先使用3组不同浓度(2.5 mmol/L、5 mmol/L和10 mmol/L)3-甲基腺嘌呤(3-methyl adenine,3-MA)分别处理鸡肝癌细胞(Leghorn Male Hepatocellular cells,LMH)24 h和48 h,然后提取细胞的总RNA,利用RT-qPCR检测自噬相关基因在mRNA水平的表达情况,筛选出3-MA的最佳抑制浓度和时间,并检测最佳条件3-MA处理鸡LMH细胞后脂代谢相关基因的表达情况.结果表明,使用2.5 mmol/L的3-MA处理鸡LMH细胞24 h后,基因Atg3、Map1lc3a、Becn1的表达量在mRNA水平出现下调,与预期相符,即为最佳条件.使用该条件的3-MA处理鸡LMH细胞后,脂代谢相关基因PPARα、ApoB与Fabp2的表达显著下调,而FASN的表达水平显著上调,Fabp7与FOXO1的表达水平则无显著变化.因此,一定浓度的自噬抑制剂3-MA在体外可促进脂质代谢. 展开更多
关键词 3-甲基腺嘌呤 自噬 脂代谢
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NOX2通过干预ROS介导的PI3K/AKT信号通路对多发性骨髓瘤细胞能量代谢重编程的作用
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作者 卓理想 梁冰 +1 位作者 张梦琼 陈夏 《西部医学》 2024年第10期1427-1435,共9页
目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)通过干预活性氧(ROS)介导的磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞能量代谢重编程的作用。方法收集2019年4月-2022年4月蚌埠医学院第一附属医院收治的50例M... 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)通过干预活性氧(ROS)介导的磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞能量代谢重编程的作用。方法收集2019年4月-2022年4月蚌埠医学院第一附属医院收治的50例MM患者骨髓血为MM组,同时收集29例健康正常人骨髓血为对照组,qRT-PCR检测骨髓血NOX2、PI3K相对表达、MM细胞系U266、LP-1的NOX2相对表达水平,分析NOX2与PI3K表达水平、NOX2表达水平与临床病理特征的相关性。WB检测U266、LP-1细胞PI3K/AKT信号通路相关分子表达水平,2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞ROS水平,2-N(7-硝基苯-2-乙二酸,3-4羟氨基)-2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)检测细胞葡萄糖摄取能力,生化实验检测细胞乳酸分泌水平,Seahorse检测细胞代谢情况,通过CCK-8、EdU法、划痕、Transwell实验与体内异种移植实验检测细胞增殖、迁移、侵袭及成瘤能力,免疫组化检测移植瘤NOX2、PI3K/AKT信号通路及糖酵解相关分子表达情况。结果NOX2表达水平在MM患者骨髓血、MM细胞系中均升高。相关性分析结果显示,MM患者骨髓血NOX2与PI3K表达水平呈正相关,ISS分期、β2-微球蛋白、Durie-Salmon分期与NOX2表达水平相关(均P<0.05)。与NC组、sh-NC组相比,NOX2组p-PI3K、p-AKT表达水平升高,sh-NOX2组p-PI3K、p-AKT表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比,NOX2组ROS水平、2-NBDG荧光强度、细胞乳酸分泌水平、细胞外酸化率、糖酵解能力、增殖、迁移、侵袭能力升高,移植瘤体积、质量增大,肿瘤乳酸脱氢酶A(LDHA)、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)、p-PI3K、p-AKT表达水平升高(均P<0.05)。结论NOX2在MM患者骨髓血与细胞系中高表达,可能通过促进ROS生成激活PI3K/AKT信号通路,促进MM细胞能量代谢重编程与恶性生物学行为,进而推动MM发展。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2 活性氧 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 多发性骨髓瘤
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Genome-wide adenine N6-methylation map reveals epigenomic regulation of lipid accumulation in Nannochloropsis
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作者 Yanhai Gong Qintao Wang +9 位作者 Li Wei Wensi Liang Lianhong Wang Nana Lv Xuefeng Du Jiashun Zhang Chen Shen Yi Xin Luyang Sun Jian Xu 《Plant Communications》 SCIE CSCD 2024年第3期106-122,共17页
Epigenetic marks on histones and DNA,such as DNA methylation at N6-adenine(6mA),play crucial roles in gene expression and genome maintenance,but their deposition and function in microalgae remain largely uncharacteriz... Epigenetic marks on histones and DNA,such as DNA methylation at N6-adenine(6mA),play crucial roles in gene expression and genome maintenance,but their deposition and function in microalgae remain largely uncharacterized.Here,we report a genome-wide 6mA map for the model industrial oleaginous microalga Nannochloropsis oceanica produced by single-molecule real-time sequencing.Found in 0.1%of adenines,6mA sites are mostly enriched at the AGGYV motif,more abundant in transposons and 30 untranslated re-gions,and associated with active transcription.Moreover,6mA gradually increases in abundance along the direction of gene transcription and shows special positional enrichment near splicing donor and transcrip-tion termination sites.Highly expressed genes tend to show greater 6mA abundance in the gene body than do poorly expressed genes,indicating a positive interaction between 6mA and general transcription fac-tors.Furthermore,knockout of the putative 6mA methylase NO08G00280 by genome editing leads to changes in methylation patterns that are correlated with changes in the expression of molybdenum cofactor,sulfate transporter,glycosyl transferase,and lipase genes that underlie reductions in biomass and oil productivity.By contrast,knockout of the candidate demethylase NO06G02500 results in increased 6mA levels and reduced growth.Unraveling the epigenomic players and their roles in biomass productivity and lipid metabolism lays a foundation for epigenetic engineering of industrial microalgae. 展开更多
关键词 adenine N6-methylation industrial oleaginous microalgae Nannochloropsis oceanica transcriptional regulation EPIGENOMICS
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Urinary Concentrations of Hydroxyproline and 3-Methyl Histidine in Postpartum Cow 被引量:1
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作者 TIANWen-ru HEJian-bin 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2001年第1期23-29,共7页
The urinary concentrations of hydroxyproline (HYPRO)and 3 -methyl histidine (3 - MEHIS) were de- termined in 16 Chinese-Holstein cows. The objectives of the experiment were to find out thhe relationship between collag... The urinary concentrations of hydroxyproline (HYPRO)and 3 -methyl histidine (3 - MEHIS) were de- termined in 16 Chinese-Holstein cows. The objectives of the experiment were to find out thhe relationship between collagen and myosin ddegradation and uterine involution in the postpartum cow. The results in the experiment showed that the mean concentrations of HYPRO and 3-MEHIS were 138.32±22.99 and 37.09 ±3.90 nmol·mL-1,respectively,for the cows during the days between 60-90 postpartum,and for the cows immediately after calving the concentrations of HYPRO and 3 -MEHIS reduced from 284.30 and 65.48 nmol ·mL-1 on the day one after calving to the normal level of 109.18 and 33.51 nmol·mL^-1 on the day 50 post- partum,respectively. There was a good correlation between the urinary concentrations of both HYPRO and 3 -MEHIS and the diameters of the involuting uterus (r = 0. 79). 展开更多
关键词 COW 3-methyl histidine HYDROXYPROLINE uterine involution
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甲基转移酶3在肝细胞癌中的研究进展 被引量:1
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作者 王朔 柯炜炜 卢再鸣 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期86-89,93,共5页
肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,居癌症发病率第四位,是全球第二大癌症死亡原因。N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化是信使RNA(mRNA)最普遍的修饰,而甲基转移酶3(METTL3)是m6A RNA甲基化的核心酶。作为致癌基因,METTL3在HCC中多处于过表... 肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,居癌症发病率第四位,是全球第二大癌症死亡原因。N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化是信使RNA(mRNA)最普遍的修饰,而甲基转移酶3(METTL3)是m6A RNA甲基化的核心酶。作为致癌基因,METTL3在HCC中多处于过表达状态。METTL3的过表达可增强HCC的增殖、侵袭及转移能力,降低患者的预后水平。此外,METTL3介导不同基因表达也为HCC的治疗提供诸多靶点。本文对近十年来METTL3在HCC中的研究进展进行综述,系统分析METTL3在HCC发生、治疗及预后中的作用,以期为HCC的治疗提供新的思路及方案。 展开更多
关键词 甲基转移酶3 N6-甲基腺苷 肝细胞癌 基因表达调控 信号通路
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高效液相色谱法测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂的活性 被引量:12
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作者 于刚 曹晓钢 +4 位作者 叶小利 李学刚 陈竹 袁吕江 王立军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期87-90,共4页
通过检测反应体系中烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)浓度的变化,建立了测定HMG-CoA还原酶抑制剂活性的HPLC法。使用Hypersil C18色谱柱,流动相V(K2HPO4-KH2PO4):V(甲醇)=4:1,pH7.2,流速1mL/min,柱温25℃,检测波长337nm。在NADPH浓度为0.5... 通过检测反应体系中烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)浓度的变化,建立了测定HMG-CoA还原酶抑制剂活性的HPLC法。使用Hypersil C18色谱柱,流动相V(K2HPO4-KH2PO4):V(甲醇)=4:1,pH7.2,流速1mL/min,柱温25℃,检测波长337nm。在NADPH浓度为0.5~100μmol/L时,其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9995);检出限为0.01μmol/L;方法对NADPH的回收率为99.8%~100.7%;相对标准偏差(RSD)为1.04%~1.25%(n=5)。 展开更多
关键词 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 抑制剂 烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸 高效液相色谱
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基于caspase 3、caspase 9表达探讨桂枝茯苓丸治疗小鼠子宫腺肌病的药效评价 被引量:8
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作者 赵艳 赵晓晓 +5 位作者 刁翰林 张毅然 师伟 徐丽 梁娜 李思毅 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第12期191-194,I0024,共5页
目的观察经不同处理的桂枝茯苓丸治疗小鼠子宫腺肌病疗效及其子宫内膜细胞凋亡情况,评价桂枝茯苓丸有效成分提取方式及药效表达,为将来开展桂枝茯苓丸治疗子宫腺肌病的药效物质发现和辨识奠定基础。方法选用他莫西芬药物诱导法制备ICR... 目的观察经不同处理的桂枝茯苓丸治疗小鼠子宫腺肌病疗效及其子宫内膜细胞凋亡情况,评价桂枝茯苓丸有效成分提取方式及药效表达,为将来开展桂枝茯苓丸治疗子宫腺肌病的药效物质发现和辨识奠定基础。方法选用他莫西芬药物诱导法制备ICR小鼠子宫腺肌病动物模型,随机分为空白组、模型组、桂枝茯苓丸醇提物组、桂枝茯苓丸超微粉组、中成药组和米非司酮组,干预15 d后取材,通过各组子宫一般形态观察、HE病理评分、caspase 3、caspase 9免疫组化蛋白阳性表达情况判断疗效。结果各治疗组HE病理评分皆低于模型组,caspase 3、caspase 9蛋白阳性表达高于模型组,皆有统计学意义,但各治疗组间差异无明显统计学意义。结论桂枝茯苓丸醇提物和超微粉可与中成药及米非司酮一样发挥疗效,通过促进子宫内膜细胞凋亡,抑制异位内膜侵袭性而缓解子宫腺肌病的发展,醇提和超微粉碎技术可作为有效提取方式最大程度保留桂枝茯苓丸中有效成分。 展开更多
关键词 经方 子宫腺肌病 提取方法 caspase 3 caspase 9 药效评价
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3-硝基丙酸预处理对黑质多巴胺神经元能量代谢的影响 被引量:5
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作者 曹学兵 孙圣刚 +1 位作者 钟建新 李红戈 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2005年第1期21-25,共5页
目的 观察 3 -硝基丙酸(3- nitropropionic acid,3 NP)预处理对黑质腺苷酸及腺苷含量的影响,探讨能量代谢及腺苷含量改变在3- NP预处理保护多巴胺(dopamine,DA)神经元中的作用。方法 64 只雄性 SD大鼠随机分为对照组、3 -NP组、PD组及... 目的 观察 3 -硝基丙酸(3- nitropropionic acid,3 NP)预处理对黑质腺苷酸及腺苷含量的影响,探讨能量代谢及腺苷含量改变在3- NP预处理保护多巴胺(dopamine,DA)神经元中的作用。方法 64 只雄性 SD大鼠随机分为对照组、3 -NP组、PD组及3- NP预处理组。3 -NP预处理组于6 羟基多巴胺(6 -OHDA)损毁前 24 h经腹腔注射3 NP (按体重20 mg/kg),采用高效液相色谱法(HPLC)测定术后2 h和1、3、5 d时间点损毁侧黑质腺苷酸及腺苷含量。结果 3- NP组2 h,帕金森病(PD)组3、5 d及3- NP预处理组各时间点较对照组ATP含量明显降低,腺苷酸ADP、-AMP等增高(P<0 .05或P<0. 01),3- NP预处理组3、5 d较PD组同时间点相比ATP水平增高(P<0. 05);3- NP预处理组各时间点腺苷持续在较高水平,与PD组同时间点相比显著增高(P<0 .01)。结论 3 -NP轻度抑制氧化磷酸化使能量代谢水平降低,有利于细胞能量储备和增强对后续抑制的耐受能力。腺苷水平增高在3 NP预处理保护神经元过程中可能具有重要作用。 展开更多
关键词 3-硝基丙酸 预处理 多巴胺神经元 高效液相色谱 腺苷酸类
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞ANT3基因表达及临床意义
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作者 杨再兴 梁艳 +4 位作者 曾贤铭 朱烨 李畅 王燕 仲人前 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第29期4-6,共3页
目的探讨腺嘌呤易位体3(ANT 3)基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法利用T aqm an-M GB探针技术,通过ΔCT值建立实时荧光逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)相对定量方法,检测30例健康人(对照组)和30例PBC患者(观察组)外周... 目的探讨腺嘌呤易位体3(ANT 3)基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法利用T aqm an-M GB探针技术,通过ΔCT值建立实时荧光逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)相对定量方法,检测30例健康人(对照组)和30例PBC患者(观察组)外周血单个核细胞(PBM C)ANT 3基因的表达,同时检测血清γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)与碱性磷酸酶(ALP)浓度。结果观察组PBM C中ANT 3 mRNA表达的ΔCT值明显高于对照组,P<0.01;其原始模板浓度为对照组的2.3倍,P<0.01。观察组血清γ-GT、ALP浓度均升高,且与ANT 3基因表达的ΔCT值呈负相关(P均<0.05)。结论PBC患者PBM C中ANT 3 mRNA表达水平明显升高,且与血清γ-GT、ALP浓度呈负相关。提示ANT 3 mRNA的表达量与PBC的严重程度相关;ANT 3基因检测在PBC发病机制、诊断及病情监控中有重要作用。 展开更多
关键词 腺嘌呤易位体3 基因 原发性胆汁性肝硬化
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3-[二(羧甲基)氨甲基]-1,2-二羟基蒽醌-3-甲基胺-N,N-二乙酸与腺嘌呤的分光光度法研究
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作者 迟燕华 庄稼 +3 位作者 白进伟 戴世琨 赵洪 李克安 《分析科学学报》 CAS CSCD 2005年第5期524-526,共3页
采用分光光度法对腺嘌呤(Ade)与3-[二(羧甲基)氨甲基]-1,2-二羟基蒽醌3-甲基胺-N,N-二乙酸(AFB)反应体系进行了研究。优化了实验条件,建立了Ade的分析方法。本法测定Ade的检出限为6.54×10-5mol/L,摩尔吸光系数(ε)为3.2×104L.... 采用分光光度法对腺嘌呤(Ade)与3-[二(羧甲基)氨甲基]-1,2-二羟基蒽醌3-甲基胺-N,N-二乙酸(AFB)反应体系进行了研究。优化了实验条件,建立了Ade的分析方法。本法测定Ade的检出限为6.54×10-5mol/L,摩尔吸光系数(ε)为3.2×104L.cm-1.mol-1;初步探讨了反应机理。 展开更多
关键词 腺嘌呤 AFB 分光光度法
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大鼠心肌细胞自噬H9C2/GFP-LC3稳定株的构建
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作者 王明丽 祝伟娜 +2 位作者 樊梦雅 刘璋楠 王耀辉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期427-430,共4页
摘要目的:在大鼠心肌细胞H9C2(2—1)中建立表达绿色荧光蛋白融合微管相关蛋白3(GFP-LC3)的稳定细胞株,为研究心肌细胞自噬提供合适的细胞模型。方法:将表达增强的绿色荧光蛋白融合微管相关蛋白3的质粒(pEGFP-LC3)瞬时转染人胚... 摘要目的:在大鼠心肌细胞H9C2(2—1)中建立表达绿色荧光蛋白融合微管相关蛋白3(GFP-LC3)的稳定细胞株,为研究心肌细胞自噬提供合适的细胞模型。方法:将表达增强的绿色荧光蛋白融合微管相关蛋白3的质粒(pEGFP-LC3)瞬时转染人胚肾一293T细胞(HEk293T),通过荧光观察和免疫印迹对质粒进行鉴定;将质粒用同样的方法转染H9C2(2-1)细胞,G418筛选出稳定表达GFP-LC3的细胞株,通过观察荧光和免疫印迹检测GFP-LC3在H9C2中的表达;稳定细胞株在缺氧1h复氧0、6、12、48h和60h的模型中,荧光显微镜观察GFP在细胞质中的表达,免疫印迹检测内源性LC3的变化;确定荧光及内源性LC3的高表达时相,用3-甲基腺嘌呤(3MA)进行自噬抑制后观察荧光及内源性LC3蛋白表达情况。结果:荧光观察和免疫印迹检测到GFP-LC3在H9C2中的表达,成功建立了表达GFP-LC3的H9C2稳定株;筛选出荧光及内源性LC3的高表达时相为缺氧1h复氧48h,在此模型中,GFP-LC3在细胞质中聚集成点状,内源性LC3表达显著升高,细胞经3MA处理后点状聚集减少,内源性LC3表达减弱。结论:成功建立了过表达GFP-LC3的H9C2稳定株,该细胞株为研究心肌细胞自噬奠定了基础。 展开更多
关键词 自噬 缺氧/复氧 心肌细胞 绿色荧光蛋白 微管相关蛋白3 3-甲基腺嘌呤
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七氟醚预处理通过线粒体NAD~+-SIRT3通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤 被引量:4
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作者 秦秀男 秦溱 +4 位作者 冉珂 袁贵秀 常业恬 王亚平 肖艳英 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1108-1119,共12页
目的:缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)常发生于缺血性心脏疾病。七氟醚预处理有减轻心肌IRI的作用。保存线粒体结构和功能的完整是减轻心肌IRI的关键,线粒体内重要的信号调节分子沉默信息调节因子3(silent information... 目的:缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)常发生于缺血性心脏疾病。七氟醚预处理有减轻心肌IRI的作用。保存线粒体结构和功能的完整是减轻心肌IRI的关键,线粒体内重要的信号调节分子沉默信息调节因子3(silent information regulator 3,SIRT3)是一类依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD^(+))的去乙酰化酶。本研究旨在探讨NAD^(+)-SIRT3通路在七氟醚预处理减轻大鼠心肌IRI中的作用。方法:将60只健康成年雄性SD大鼠随机分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、七氟醚预处理组(Sev组,给予2.5%七氟醚吸入30 min)、七氟醚预处理+SIRT3抑制剂3-TYP干预组(Sev+3-TYP组,给予尾静脉注射5 mg/kg 3-TYP和2.5%七氟醚吸入30 min)、3-TYP干预组(3-TYP组,给予尾静脉注射5 mg/kg 3-TYP)。Sham组只开胸不结扎,其他4组采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立缺血再灌注模型。采用双重染色法测定心肌梗死面积。测定血清大鼠肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)水平。测定心肌组织中NAD^(+)、ATP、MDA含量,线粒体复合体Ⅰ、II、IV及SOD的活性,线粒体通透性的改变。采用蛋白质印迹法检测心肌组织中SIRT3、SOD2、过氧化氢酶(catalase,CAT)和电压依赖性阴离子通道1(voltage dependent anion channel 1,VDAC1)的蛋白质表达水平。在透射电子显微镜下观察心肌超微结构。记录缺血前即刻(T0)、缺血30 min(T1)、再灌注30 min(T2)、再灌注60 min(T3)和再灌注120 min(T4)时的HR和MAP。结果:缺血再灌注后,心肌组织中NAD^(+)含量减少,SIRT3蛋白质表达水平降低(均P<0.01),同时出现明显的心肌损伤,包括心肌梗死面积增加,血清cTnI水平升高(均P<0.01)。相应地,线粒体也出现明显的能量代谢、抗氧化功能和结构完整性的受损,表现为:线粒体复合体I、II、IV活性,ATP含量,SOD2和CAT蛋白质表达水平下降,而MDA含量、VDAC1蛋白质表达水平和线粒体通透性增加(均P<0.01)。与IR组比较,Sev组心肌组织中NAD^(+)含量增加,SIRT3蛋白质表达水平升高(均P<0.01);心肌梗死面积缩小,血清cTnI水平降低(均P<0.01);线粒体复合体I、II、IV活性,ATP含量,SOD2和CAT蛋白质表达水平升高,而MDA含量、VDAC1蛋白质表达水平和线粒体通透性降低(均P<0.01)。与Sev组比较,Sev+3-TYP组心肌组织中NAD^(+)含量减少,SIRT3蛋白质表达水平降低(均P<0.01);心肌梗死面积增加,血清c TnI水平升高(均P<0.01);线粒体复合体I、II、IV活性,ATP含量,SOD2和CAT蛋白质表达水平下降,而MDA含量、VDAC1蛋白质表达水平和线粒体通透性增加(均P<0.01)。结论:七氟醚预处理通过激活线粒体NAD^(+)-SIRT3通路,保存线粒体功能,从而减轻心肌IRI。 展开更多
关键词 吸入麻醉药 七氟醚 缺血再灌注损伤 心肌 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 沉默信息调节因子3 线粒体
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高效液相色谱—荧光法定量测定环境水样中3-MCPD的研究 被引量:1
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作者 郭明丽 胡志雄 +1 位作者 齐玉堂 张维农 《武汉轻工大学学报》 CAS 2014年第1期1-5,共5页
建立了一种高效液相色谱—荧光法对环境水样中的3-MCPD进行定量测定的方法,该方法采用高碘酸钠氧化与腺嘌呤荧光衍生化相结合对3-MCPD进行预处理,生成强荧光物质乙烯基腺嘌呤(εAde),并将其作为目标峰对3-MCPD进行色谱定量分析,该方法... 建立了一种高效液相色谱—荧光法对环境水样中的3-MCPD进行定量测定的方法,该方法采用高碘酸钠氧化与腺嘌呤荧光衍生化相结合对3-MCPD进行预处理,生成强荧光物质乙烯基腺嘌呤(εAde),并将其作为目标峰对3-MCPD进行色谱定量分析,该方法操作简便、测试成本低廉,而且选择性好、灵敏度高,对仪器设备要求也较低,最低检测限可达0.36 ng/mL。 展开更多
关键词 HPLC—FLD 环境水样 3-MCPD 腺嘌呤
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成纤维细胞生长因子13通过ROS/Caspase-3通路调控非小细胞肺癌A549细胞的凋亡 被引量:2
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作者 刘天宇 唐铖铖 +4 位作者 冯光 雷静静 孙晨皓 王令 路宏朝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期451-459,共9页
目的:探讨成纤维细胞生长因子13(fibroblast growth factor 13,FGF13)对非小细胞肺癌A549细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成和凋亡的影响及其调控机制。方法:WB法检测FGF13在人正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌A549、H460细胞... 目的:探讨成纤维细胞生长因子13(fibroblast growth factor 13,FGF13)对非小细胞肺癌A549细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成和凋亡的影响及其调控机制。方法:WB法检测FGF13在人正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌A549、H460细胞中的本底表达量。采用FGF13过表达载体转染BEAS-2B和A549细胞;设计两组靶向FGF13的shRNA序列,构建慢病毒干扰载体,包装病毒后侵染A549细胞,采用qPCR和WB法检测干扰效果,DCFH-DA探针结合荧光酶标仪分析敲减FGF13对A549细胞内ROS水平的影响,MitoSOX与WB法检测对线粒体ROS水平及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4)蛋白表达量的影响,Annexin V-FITC-PI双染法检测对细胞凋亡和Caspase-3及Cleaved Caspase-3蛋白表达的影响。结果:与BEAS-2B细胞相比,FGF13蛋白在两种肺癌细胞中均高表达(均P<0.05)。成功构建FGF13过表达、低表达的A549细胞系。过表达FGF13后,BEAS-2B和A549细胞内ROS水平显著降低(P<0.05);敲减FGF13表达后,A549细胞内ROS水平显著升高(P<0.05);然而过表达及干扰FGF13对A549细胞内线粒体ROS水平无显著影响,但NOX4蛋白表达量显著下调(P<0.05)及显著上调(P<0.05)。FGF13干扰后A549细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Caspase-3及Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著上调(P<0.05)。结论:FGF13可能通过NOX家族途径调控ROS的生成,并通过ROS/Caspase-3通路调控A549细胞凋亡。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子13 A549细胞 活性氧 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 CASPASE-3 凋亡
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獐牙菜苦苷可减轻糖尿病大鼠的周围神经痛:基于抑制NOXS/ROS/NLRP3通路实验 被引量:4
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作者 王保 姚嘉茵 +4 位作者 尧新华 劳俊铭 刘栋 陈陈燕 鲁义 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期937-941,共5页
目的基于NOXS/ROS/NLRP3信号通路探讨獐牙菜苦苷对糖尿病周围神经痛(DPN)大鼠的治疗作用及分子机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)法构建大鼠模型,造模成功后第1、7、14天分别按大鼠体质量腹腔注射干预制剂。将32只SD大鼠随机分为4组:空白... 目的基于NOXS/ROS/NLRP3信号通路探讨獐牙菜苦苷对糖尿病周围神经痛(DPN)大鼠的治疗作用及分子机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)法构建大鼠模型,造模成功后第1、7、14天分别按大鼠体质量腹腔注射干预制剂。将32只SD大鼠随机分为4组:空白对照组、DPN模型组、獐牙菜苦苷治疗组、NOXS抑制剂治疗组。空白对照组:给予10 mL/kg生理盐水;DPN模型组:给予10 mL/kg生理盐水;獐牙菜苦苷治疗组:给予5 mg/kg獐牙菜苦苷;NOXS抑制剂治疗组:给予10 mL/kg二苯基氯化碘盐。在给药完毕30 min后,对各组大鼠进行触觉过敏试验,采用ELISA检测NOXS/ROS/NLRP3以及炎性因子表达水平,采用Western blot方法检测各组大鼠脊髓组织的NOXS/ROS/NLRP3表达水平。结果与空白对照组比较,DPN模型组大鼠在造模后出现痛觉过敏(P<0.001),促炎因子TNF-α以及IL-6表达升高(P<0.001),抑炎因子TGF-β表达下降(P<0.001),NOXS/ROS/NLRP3通路各因子表达升高(P<0.001)。獐牙菜苦苷干预后有效减轻触觉过敏(P<0.001),且抑制促炎因子TNF-α(P=0.03)以及IL-6(P=0.002)的表达,促进抑炎因子TGF-β的表达(P=0.04);并且下调NOXS(P<0.001)、ROS(P<0.001)以及NLRP3(P=0.002)通路各因子的表达水平。獐牙菜苦苷对炎性因子及NOXS/ROS/NLRP3通路各因子的表达影响与NOXS抑制剂治疗组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论獐牙菜苦苷有效缓解触觉过敏,治疗DPN,通过抑制NOXs/ROS/NLRP3信号通路表达,纠正DPN炎性因子失衡是其分子机制之一。 展开更多
关键词 獐牙菜苦苷 糖尿病周围神经痛 NLRP3 炎性平衡
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小鼠急性心肌梗死后IL-1β和IL-6的动态变化及3甲基腺嘌呤的影响 被引量:2
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作者 陈法江 何丽姗 +2 位作者 李康兰 杨娅 罗健东 《广州医科大学学报》 2015年第5期6-11,共6页
目的:探讨小鼠急性心肌梗死(AMI)后炎症因子IL-1β和IL-6的动态变化及3-甲基腺嘌呤对心肌炎症因子IL-1β和IL-6释放的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分成四组:假手术组、AMI 1 d组、AMI 7 d组、AMI 21 d组,用超声心动仪检测心功能变化... 目的:探讨小鼠急性心肌梗死(AMI)后炎症因子IL-1β和IL-6的动态变化及3-甲基腺嘌呤对心肌炎症因子IL-1β和IL-6释放的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分成四组:假手术组、AMI 1 d组、AMI 7 d组、AMI 21 d组,用超声心动仪检测心功能变化,用荧光定量PCR法、ELISA法和免疫组化法测量血清和心肌组织中炎症因子IL-1β和IL-6的变化,用免疫蛋白印迹方法检测心肌组织IL-1β转换酶caspase-1蛋白的变化情况。在AMI后给予3-甲基腺嘌呤7 d,用超声心动仪检测心功能变,用ELISA法和免疫组化法测量心肌组织中炎症因子IL-1β和IL-6的变化情况。结果:小鼠冠状动脉左前降支结扎术后7、21 d心功能显著下降。小鼠AMI后炎症因子IL-1β和IL-6的mRNA水平表达增加,在血清和心肌组织中蛋白含量增加(P<0.05)。小鼠AMI后心肌中caspase-1蛋白表达增加(P<0.05)。3-甲基腺嘌呤加重小鼠AMI 7 d后心脏功能下降(P<0.05),并促进炎症因子IL-1β和IL-6的释放(P<0.05)。结论:小鼠心肌损伤过程中炎症因子IL-1β和IL-6表达增加,其机制可能跟AMI后caspase-1的增加有关;3-甲基腺嘌呤加重AMI后心功能的下降,其机制可能与促进炎症因子释放有关。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 3-甲基腺嘌呤 炎症因子 白介素-1 白介素-6 半胱氨酸天冬氨酸酶-1
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腺嘌呤柱前衍生化-HPLC-FLD法测定3-氯-1,2-丙二醇的方法优化 被引量:1
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作者 胡金华 杜言 +4 位作者 李小敏 胡志雄 张维农 齐玉堂 张燕鹏 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期130-137,共8页
3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)经高碘酸钠溶液氧化裂解、腺嘌呤衍生化后的产物——1,N6-亚乙烯基腺嘌呤(ε-Ade)为强荧光物质,通过对其荧光光谱与重要影响因素进行研究与优化,结合测定体系背景干扰的抑制,对高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)测... 3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)经高碘酸钠溶液氧化裂解、腺嘌呤衍生化后的产物——1,N6-亚乙烯基腺嘌呤(ε-Ade)为强荧光物质,通过对其荧光光谱与重要影响因素进行研究与优化,结合测定体系背景干扰的抑制,对高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)测定3-MCPD水溶液的条件进行了优化。得到优化条件为:使用耐碱性反相C18色谱柱进行测定,流动相中甲醇体积分数为20%,水相为pH 9.0的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液。食用油中3-MCPD的测定需以0.01 g/mL的NaCl溶液作为萃取水相,氧化裂解3-MCPD的高碘酸钠可采用等量的亚硫酸钠还原、1.1倍量的醋酸铅沉淀予以去除,从而抑制空白峰的干扰,将该方法应用于多种食用植物油样品的测定,结果表明:该方法准确度高、重现性好(RSD在0.32%~4.63%之间);样品谱图显示基质干扰很小,方法选择性高。 展开更多
关键词 食用油 3-氯-1 2-丙二醇(3-MCPD) 高效液相色谱-荧光法 腺嘌呤
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NOX2、NLRP3在肝纤维化患者血清中的表达及其生物学意义 被引量:6
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作者 谭莉霞 魏书堂 +4 位作者 闫春晓 王航宇 杨丙信 徐梦阳 仝甲钊 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2022年第3期221-224,共4页
目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)在肝纤维化患者血清中的表达及生物学意义。方法:选取2017年9月至2020年9月我院收治的80例肝纤维化患者为研究对象,同期选取8... 目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)在肝纤维化患者血清中的表达及生物学意义。方法:选取2017年9月至2020年9月我院收治的80例肝纤维化患者为研究对象,同期选取80例我院收治的酒精性肝炎患者为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测受试者血清中NOX2、NLRP3的表达,并比较肝纤维化患者与对照组患者血清中NOX2、NLRP3的表达差异。体外培养肝星状细胞(HSC)系LX-2,用6 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激24 h,活化并分为Control组、NC组、NOX2 siRNA组;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中NOX2、NLRP3的mRNA表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞ROS水平;蛋白免疫印迹(WB)检测增殖蛋白CyclinD1、CDK4,凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9及NOX2、NLRP3、IL-18、IL-1β的表达。结果:与对照组患者比较,肝纤维化组患者血清NOX2、NLRP3的表达显著升高(P<0.05);与Control组比较,NOX2 siRNA组细胞NOX2、NLRP3的mRNA表达、细胞内ROS含量,增殖蛋白CyclinD1、CDK4及蛋白NOX2、NLRP3、IL-18、IL-1β的表达均显著降低,细胞增殖抑制率、凋亡率、凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达显著升高(P<0.05)。结论:NOX2、NLRP3可能参与肝纤维化的发生,其可能是治疗肝纤维化的靶点。 展开更多
关键词 肝纤维化 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2 核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3 生物学意义
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腺苷脱氨酶抑制剂红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤对白血病细胞凋亡及细胞周期的影响 被引量:1
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作者 王会平 郜赵伟 +4 位作者 刘冲 李锐成 刘丽 和婷 董轲 《新乡医学院学报》 CAS 2020年第10期901-905,共5页
目的探讨腺苷脱氨酶抑制剂-红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤(EHNA)对白血病细胞凋亡及细胞周期的影响。方法选取白血病细胞HL60、Jurkat、U937、K562及人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),培养至对数生长期,将细胞随机分为对照组、0.10 mmol... 目的探讨腺苷脱氨酶抑制剂-红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤(EHNA)对白血病细胞凋亡及细胞周期的影响。方法选取白血病细胞HL60、Jurkat、U937、K562及人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),培养至对数生长期,将细胞随机分为对照组、0.10 mmol·L^-1 EHAN处理组和0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组。对照组细胞细胞采用正常培养基培养,0.10 mmol·L^-1 EHAN处理组和0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组细胞分别应用含0.10、0.25 mmol·L^-1 EHNA的培养基培养,培养48 h后,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率及对照组和0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组细胞周期。结果细胞培养48 h后,0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组和0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组HL60、U937、K562、Jurkat细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.05);0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组HL60、K562细胞凋亡率显著高于0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组(P<0.05);0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组与0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组U937、Jurkat细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组、0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组和对照组HUVEC凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组K562细胞和Jurkat细胞的S期细胞比例显著高于对照组(P<0.05),K562细胞和HUVEC细胞的G 2/M期细胞比例显著低于对照组(P<0.05);0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组与对照组HUVEC细胞的S期细胞比例及HL60、Jurkat、U937细胞的G 2/M期细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论EHNA处理可以在不影响血管内皮细胞的前提下杀伤多种类型的白血病细胞,为白血病治疗药物开发提供了参考。 展开更多
关键词 腺苷脱氨酶抑制剂 红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤 白血病 细胞凋亡 细胞周期
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Effect of NdCl_3 on the Growth and i_PA Level of Detached Etiolated Cotyledons of Brasica Chinensis
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作者 陈靠山 张举仁 周燮 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 1997年第1期73-75,共3页
The increases of fresh weight, chlorophyll and protein content of detached etiolated cotyledons of Brissica chinensis under illumination were promoted by 140 μmol/L NdCl 3 treatment. The content of isopentenyl adeni... The increases of fresh weight, chlorophyll and protein content of detached etiolated cotyledons of Brissica chinensis under illumination were promoted by 140 μmol/L NdCl 3 treatment. The content of isopentenyl adenine( i PA) of the control determination with ELISA remained unchanged at 12 h. At 24 h, it increased to 70 pmol/g·FW. At 36 h, it was 87 pmol/g·FW, and at 48 h, it declined to 20 pmol/g·FW. Contrary, the content of i PA of cotyledons treated with NdCl 3 for 12 h increased to 15 pmol/g·FW. For 24 h, it was 148 pmol/g·FW, and maintained a high level between 24 h and 48 h. These results indicate that NdCl 3 promotes i PA synthesis in detached etiolated cotyledons of Brassica chinensis. 展开更多
关键词 Rare earths NdCl 3 Brassica chinensis L Isopentenyl adenine[
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