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肿瘤3D细胞模型在体外药敏实验中的应用 被引量:1
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作者 刘艳红 李静 +3 位作者 余孝其 王娜 刘媛 张骥 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2019年第3期149-152,共4页
为解决肿瘤个体化治疗中体内外模型差异的问题,明晰体外模型对药敏检测的影响。实验在体外建立肿瘤3D细胞模型,通过ATP生物荧光法(ATP-TCA)检测3D肿瘤细胞中ATP的含量,间接反映3D肿瘤细胞对化疗药物5-FU和紫杉醇的敏感性。同时,通过Live... 为解决肿瘤个体化治疗中体内外模型差异的问题,明晰体外模型对药敏检测的影响。实验在体外建立肿瘤3D细胞模型,通过ATP生物荧光法(ATP-TCA)检测3D肿瘤细胞中ATP的含量,间接反映3D肿瘤细胞对化疗药物5-FU和紫杉醇的敏感性。同时,通过Live/Dead细胞成像实验进一步研究化疗药物对3D肿瘤细胞的杀伤作用。研究发现化疗药物5-FU和紫杉醇均可抑制HepG2和A549肿瘤3D细胞的生长,且紫杉醇对HepG2 3D细胞的抑制作用明显强于5-FU。药物敏感性评价结果显示,HepG2 3D细胞对化疗药物紫杉醇中度敏感,对5-FU不敏感。A549 3D细胞对紫杉醇和5-FU均中度敏感。Live/Dead细胞成像结果进一步证实了PTX对HepG2 3D细胞具有明显的毒性。本实验为体外药敏检测提供了新思路。 展开更多
关键词 个体化治疗 3d细胞模型 ATP生物荧光法 药敏检测 抑制作用
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化学生物学综合创新实验——基于3D细胞模型的基因转染 被引量:2
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作者 刘艳红 张骥 +2 位作者 余孝其 李静 王娜 《实验科学与技术》 2018年第6期20-23,共4页
该文通过体外构建三维(3D)细胞培养模型,探讨基于3D细胞模型的基因转染条件。实验选用甲基纤维素半固体培养体系,建立了体外3D细胞模型。并采用聚乙烯亚胺(PEI,25 k Da)介导荧光标记质粒和增强绿色荧光蛋白报告基因的转染,激光扫描共聚... 该文通过体外构建三维(3D)细胞培养模型,探讨基于3D细胞模型的基因转染条件。实验选用甲基纤维素半固体培养体系,建立了体外3D细胞模型。并采用聚乙烯亚胺(PEI,25 k Da)介导荧光标记质粒和增强绿色荧光蛋白报告基因的转染,激光扫描共聚焦三维重构技术进一步分析基因在3D细胞模型中的传输及表达情况。结果表明,当PEI和质粒DNA的复合比为10时,PEI介导的基因在3D细胞模型中具有良好的传输能力和一定的表达能力。本研究结果可为3D细胞模型在基因转染方面的应用提供实验依据。 展开更多
关键词 化学生物学 创新实验 3d细胞模型 基因转染
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肿瘤细胞3D无支架培养技术研究进展及其在药效评价中应用
3
作者 陈艳阁 汪海峰 《上海医药》 2024年第1期75-79,共5页
作为三维(3D)细胞培养技术之一的3D无支架培养技术,其广泛应用于肿瘤3D细胞模型的构建之中。了解当前肿瘤细胞3D无支架培养技术的应用情况,以及肿瘤3D细胞模型的构建成果对于抗癌药物的研发与评价很重要。本文介绍了构建肿瘤3D细胞模型... 作为三维(3D)细胞培养技术之一的3D无支架培养技术,其广泛应用于肿瘤3D细胞模型的构建之中。了解当前肿瘤细胞3D无支架培养技术的应用情况,以及肿瘤3D细胞模型的构建成果对于抗癌药物的研发与评价很重要。本文介绍了构建肿瘤3D细胞模型的超低吸附着板培养法、悬滴培养法、磁悬浮培养法和旋转式细胞培养系统以及它们的局限性,并简述了肿瘤3D细胞模型用于药效评价的新进展,以期为肿瘤3D细胞模型的构建及抗癌药的药效评价提供参考。 展开更多
关键词 3d肿瘤细胞模型 无支架细胞培养技术 药效评价
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基于3D肿瘤模型和网络药理学的威灵仙粗提物体外抗肺癌药效及潜在作用机制研究 被引量:2
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作者 刘诚毅 秦鑫鹏 +4 位作者 包永睿 王帅 李天娇 孟宪生 于睿 《中南药学》 CAS 2023年第4期903-910,共8页
目的基于3D肿瘤细胞模型和网络药理学方法,研究威灵仙体外抗肺癌的药效及潜在作用机制。方法使用人肺癌细胞系A549建立体外3D肺癌模型,以依托泊苷作为阳性对照组,对水、30%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、90%乙醇提取得到的威灵仙粗提物进行... 目的基于3D肿瘤细胞模型和网络药理学方法,研究威灵仙体外抗肺癌的药效及潜在作用机制。方法使用人肺癌细胞系A549建立体外3D肺癌模型,以依托泊苷作为阳性对照组,对水、30%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、90%乙醇提取得到的威灵仙粗提物进行体外药效学研究。通过多种数据库筛选出药物和肺癌的核心靶点,并采用ELISA试剂盒检测信号通路中的关键因子。结果挖掘出威灵仙活性成分33个,核心成分3种,为Hederagenin、2-Deoxy-D-Ribono-1、beta-sitosterol,排名靠前的靶点为CASP3、PTGS2、IL6、TNF,推测为核心靶点。GO功能富集共筛选得到171个条目,KEGG通路富集共筛选出56条通路。ATP检测结果显示各2D、3D细胞模型处理组IC_(50)值分别为:依托泊苷(41.98±1.15),(118.63±3.93)μmol·L^(-1);水提取物(0.89±0.04),(6.37±0.78)mg·mL^(-1);30%醇提物(0.64±0.02),(5.40±0.78)mg·mL^(-1);60%醇提物(0.45±0.01),(4.30±1.16)mg·mL^(-1);70%醇提物(0.37±0.02),(3.24±0.85)mg·mL^(-1);90%醇提物(0.60±0.03),(5.46±1.47)mg·mL^(-1)。HE染色结果显示,肿瘤细胞核皱缩及胞质减少程度强弱顺序为70%醇提物>依托泊苷处理组>60%醇提物>90%醇提物>30%醇提物>水提物。免疫细胞结果显示,相比于对照组,各给药组均有肿瘤细胞核皱缩且P53表达量显著减少(P<0.05)。ELISA结果显示,威灵仙70%醇提物和60%醇提物均对Bax-Bcl-2-Caspase-3信号通路产生显著影响(P<0.05)。结论各组威灵仙粗提物均对人A5493D模型有一定的活性抑制作用,其中70%醇提物效果最佳,60%醇提物次之,这种抑制作用可能与其上调Bax、Caspase-3含量,下调Bcl-2含量相关,即威灵仙粗提物可能具有抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 威灵仙 肺癌 3d细胞模型 网络药理学
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基于3D细胞水平的药物筛选模型 被引量:1
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作者 侯晓蓉 郭倩 +1 位作者 杨佳佳 单伟光 《发酵科技通讯》 CAS 2018年第1期52-57,共6页
药物筛选是新药研发过程中最为重要的阶段之一,而选择合适的筛选模型可以有效缩短时间、降低成本和提高效率.进入21世纪以来,药物筛选技术正朝着快速、高效的细胞水平筛选方面发展.以活细胞作为靶点的筛选模型,具有与生理内环境接近、... 药物筛选是新药研发过程中最为重要的阶段之一,而选择合适的筛选模型可以有效缩短时间、降低成本和提高效率.进入21世纪以来,药物筛选技术正朝着快速、高效的细胞水平筛选方面发展.以活细胞作为靶点的筛选模型,具有与生理内环境接近、微型化和高通量化等优点.而3D细胞模型较2D细胞模型,具有更接近机体环境的优势,是目前正在高速发展的一项新技术.主要论述了几种疾病的3D细胞药物筛选模型及其近年来的应用,为后续研究者们选择筛选模型提供参考. 展开更多
关键词 新药研发 药物筛选 3d细胞模型
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3D细胞模型在化学物质毒性测试中的应用研究进展 被引量:1
6
作者 王紫微 张睿 陈雯 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期20-24,共5页
在化学物质毒性预测及风险评估中,体外细胞模型具有较高的实际应用价值。随着3D生物打印、类器官培养、器官芯片等技术的迅速发展,体外细胞模型取得了长足的进步。相比起2D细胞模型,3D细胞模型在结构、功能及生理环境上与在体组织、器... 在化学物质毒性预测及风险评估中,体外细胞模型具有较高的实际应用价值。随着3D生物打印、类器官培养、器官芯片等技术的迅速发展,体外细胞模型取得了长足的进步。相比起2D细胞模型,3D细胞模型在结构、功能及生理环境上与在体组织、器官更为接近。基于3D细胞模型进行化学物质的危害识别及剂量-反应关系分析,可以获得较为准确的毒性数据,为化学物质风险评估及风险管理提供理论依据。本文概述了三种典型的3D细胞模型(人源细胞系共培养模型、3D生物打印细胞模型和类器官模型)的构建及其在化学物质毒性测试中的应用前景。 展开更多
关键词 毒性试验 危害物质 3d细胞模型 外源性化学物
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基于3D肝细胞模型评价盐酸胺碘酮重复给药肝毒性
7
作者 林铌 刘鑫磊 +4 位作者 孙百阳 俞月 耿兴超 周晓冰 李波 《中国药事》 CAS 2022年第12期1414-1423,共10页
目的:建立3D肝细胞微球模型并用于评价盐酸胺碘酮及联用肝药酶诱导剂利福平或抑制剂酮康唑时的重复给药肝毒性。方法:采用诱导分化的HepaRG和HHSteC细胞混合共培养构建3D肝细胞微球模型,对HepaRG诱导分化后形成的胆管结构功能进行验证,... 目的:建立3D肝细胞微球模型并用于评价盐酸胺碘酮及联用肝药酶诱导剂利福平或抑制剂酮康唑时的重复给药肝毒性。方法:采用诱导分化的HepaRG和HHSteC细胞混合共培养构建3D肝细胞微球模型,对HepaRG诱导分化后形成的胆管结构功能进行验证,活细胞探针标记肝细胞微球中两种细胞并对其分布情况进行检测,免疫荧光染色对肝细胞微球表达的特异性和功能性蛋白进行检验,并对试验周期内模型的肝功能指标稳定性进行连续监测。模型验证后,对每40个肝细胞微球进行连续4或5天的盐酸胺碘酮重复染毒,并联用肝药酶诱导剂利福平或抑制剂胺碘酮进行重复染毒,检测不同给药组的细胞毒性及肝功能指标。结果:本研究构建的3D肝细胞模型可以模拟肝脏胆管结构的外排功能,HepaRG和HHSteC细胞在微球中以24∶1的比例始终保持较均匀的分布,肝脏特异性和功能性蛋白表达丰富,并能在至少5天内维持肝功能指标稳定。在重复给予胺碘酮时,模型从给药第三天起出现剂量和时间依赖性的细胞毒性作用,且联用利福平(LDH和TBIL升高)或酮康唑(LDH、ALT、ALP和GLU升高)能产生剂量相关的肝毒性协同作用。结论:本研究成功构建更适用于短期重复给药毒性评价的3D肝细胞微球模型,对于体外药物肝毒性筛选和代谢研究具有明显优势,能够进行药物肝毒性标志物的筛选研究。 展开更多
关键词 3d细胞模型 肝毒性 盐酸胺碘酮 重复给药 利福平 酮康唑 联合用药
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前列腺癌三维细胞培养模型的建立与应用进展 被引量:1
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作者 胡云 胡梦博 姜昊文 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2017年第6期372-374,共3页
前列腺癌体外平面细胞培养模型(2D模型),由于平面化的细胞生长排列方式和细胞外基质的缺失并不能很好地模拟肿瘤微环境。体内模型因昂贵的饲育费用、更长的建模周期、非同种的组织来源和批量化难度大,其应用也有限。前列腺癌三维细胞培... 前列腺癌体外平面细胞培养模型(2D模型),由于平面化的细胞生长排列方式和细胞外基质的缺失并不能很好地模拟肿瘤微环境。体内模型因昂贵的饲育费用、更长的建模周期、非同种的组织来源和批量化难度大,其应用也有限。前列腺癌三维细胞培养模型(3D模型)具有多样的组织来源及灵活的构建方法,相对2D模型在生物学特征上更近似体内模型,相对体内模型其建立更易批量化、规范化,作为介于两者间的一种新型前列腺癌研究模式,3D模型正得到日益广泛的应用。本文综述了近年来新型前列腺癌3D模型的建立方法,及其在肿瘤机制研究与抗癌药物研发领域的应用进展。 展开更多
关键词 前列腺癌 3d细胞模型 肿瘤进展 药物研发
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重金属人体生物有效性、吸收及毒性研究中的肠道细胞模型 被引量:3
9
作者 王坤 肖羽芯 +3 位作者 李梦莹 马娇阳 覃一书 向萍 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期57-71,共15页
重金属污染对人体健康产生极大威胁,因而备受关注。肠道吸收是人体重金属暴露的主要途径之一,因此,重金属的生物有效性、肠道吸收过程和毒性研究成为当前的研究热点。体外胃肠模拟法和动物模型被广泛用于重金属的相关研究,然而体外胃肠... 重金属污染对人体健康产生极大威胁,因而备受关注。肠道吸收是人体重金属暴露的主要途径之一,因此,重金属的生物有效性、肠道吸收过程和毒性研究成为当前的研究热点。体外胃肠模拟法和动物模型被广泛用于重金属的相关研究,然而体外胃肠模拟法缺少人体肠道细胞成分,动物模型与人体存在着物种差异且实验成本高。鉴于此,研究者开发了能够部分模拟人体肠道上皮功能的体外肠道细胞模型。此模型作为研究生物有效性的重要工具,能模拟肠道对重金属的吸收转运过程,并能够结合分子生物学等技术、采用多学科交叉的研究方法探索重金属的肠吸收和肠毒性的分子机制。本文系统介绍了人肠上皮的结构功能、肠道上皮细胞对重金属吸收转运机制、肠道细胞模型的发展及其在重金属相关研究中的应用与优缺点,总结了肠细胞模型功能验证指标和优化方法。同时,还对肠道微流控培养系统(芯片肠道)和肠类器官等三维肠细胞模型技术的最新进展进行了介绍和展望。 展开更多
关键词 重金属 3d肠道细胞模型 生物有效性 共培养模型 毒性
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分化可控的人类鼻粘膜类器官模型的建立 被引量:1
10
作者 汪珂 于言 +4 位作者 韩日 王显文 赵云腾 唐浩程 李刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期868-877,共10页
目的建立分化程度可控、能够重现来源组织结构和功能的人类鼻粘膜类器官模型。方法采集手术切除的新鲜中鼻甲和鼻息肉组织,将消化过滤的鼻粘膜上皮细胞分为连续“扩增”培养组(EO组)及“扩增-分化”分段培养组(DO组)。分别在基于气液界... 目的建立分化程度可控、能够重现来源组织结构和功能的人类鼻粘膜类器官模型。方法采集手术切除的新鲜中鼻甲和鼻息肉组织,将消化过滤的鼻粘膜上皮细胞分为连续“扩增”培养组(EO组)及“扩增-分化”分段培养组(DO组)。分别在基于气液界面进行体外3D类器官培养,通过STR鉴定、电镜及免疫组化染色分别对两组鼻粘膜类器官的结构、细胞组成及纤毛功能进行鉴定。再通过PAS染色对DO组中分化后的鼻粘膜类器官分泌功能进行鉴定。结果整个培养期间,均能生长出直径逐渐增大的空泡状或实心球状3D类器官。培养第16天,DO组多为空泡状类器官,EO组多为实心球状类器官,DO组空泡数比例大于EO组[(21.67±8.57)%vs(54.67±13.26)%,P<0.05]。将鼻粘膜类器官与来源组织同时进行STR检测,匹配度为100%。培养第21天,DO组鼻粘膜类器官扫描及透射电镜显示纤毛超微结构,而EO组多显示出短绒毛结构。免疫组化染色结果显示,呼吸区粘膜主要包含P63(基底细胞)、β-tubulin(纤毛柱状细胞)、MUC5AC(杯状细胞)。相比EO组,DO组类器官纤毛细胞数[(7.95±1.81)%vs(27.04±5.91)%,P<0.05]及杯状细胞数[(14.46±0.93)%vs(39.85±5.43)%,P<0.05]占比更大,基底细胞占比差异无统计学意义(P>0.05)。DO组中分化后的鼻粘膜类器官糖原染色呈阳性表达。结论本研究首次采用“扩增-分化”分段式培养法,培养出能够在体外长期稳定生长、高度拟似来源组织形态结构和功能(纤毛功能及分泌功能),且分化程度可控的鼻粘膜类器官。 展开更多
关键词 类器官 鼻粘膜 气液界面 分化培养 3d细胞模型
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两种植物提取物的组合物对皮肤舒缓和修复功效的研究
11
作者 王先浩 张辉 +3 位作者 王晓梅 刘菲 韩婷婷 杨素珍 《山东化工》 CAS 2024年第5期43-45,50,共4页
研究了一种含有昆诺阿藜籽提取物、茵陈蒿提取物的组合物对皮肤刺激的舒缓及修护作用。通过HaCaT细胞因子表达试验、HaCaT细胞划痕试验、3D表皮模型丝聚蛋白表达试验、评估组合物的舒缓、促进皮肤屏障修护功效。结果表明该植物提取物的... 研究了一种含有昆诺阿藜籽提取物、茵陈蒿提取物的组合物对皮肤刺激的舒缓及修护作用。通过HaCaT细胞因子表达试验、HaCaT细胞划痕试验、3D表皮模型丝聚蛋白表达试验、评估组合物的舒缓、促进皮肤屏障修护功效。结果表明该植物提取物的组合物可抑制炎症因子IL-8、PGE-2、MCP-1的表达,促进受损细胞修复和丝聚蛋白表达,具有一定的舒缓、促进皮肤屏障修复的功效和进一步研究的价值。 展开更多
关键词 昆诺阿藜 茵陈蒿 细胞3d表皮模型 舒缓修复 皮肤屏障
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体外模型在药源性肾毒性评价中的研究进展 被引量:4
12
作者 邱宣 周晓冰 李波 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期1792-1796,共5页
由于肾毒性物质的靶器官选择性,药物诱导的肾毒性是目前新药开发和临床应用中存在的重要问题,高通量肾毒性体外评价模型可以提高大量化合物的筛选效率,节约时间和成本,已经逐渐成为肾毒性研究的主要研究方法。虽然肾毒性体外评价模型的... 由于肾毒性物质的靶器官选择性,药物诱导的肾毒性是目前新药开发和临床应用中存在的重要问题,高通量肾毒性体外评价模型可以提高大量化合物的筛选效率,节约时间和成本,已经逐渐成为肾毒性研究的主要研究方法。虽然肾毒性体外评价模型的研究热度不断升温,但由于肾毒性的特异性,仍未能建立标准的体外评价模型。目前,肾毒性体外评价的研究主要基于传统的2D细胞模型,3D细胞模型尚在初级阶段。本文对近年来高通量肾毒性体外评价模型的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 肾毒性 体外模型 生物标志物 高通量筛选 3d细胞模型
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