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非洲猪瘟病毒MGF110-5L-6L蛋白诱导宿主细胞翻译阻滞和应激颗粒形成的作用机制 被引量：1
1
作者 樊帅 钟函 +5 位作者 杨中元 何文瑞 万博 魏战勇 韩世充 张改平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1401-1416,共16页
【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引发的一种猪烈性传染病,是全球公认的养猪业“头号杀手”,至今尚无安全有效的疫苗和药物。病毒作为专性细胞内寄生物,必须通过“劫持... 【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引发的一种猪烈性传染病,是全球公认的养猪业“头号杀手”,至今尚无安全有效的疫苗和药物。病毒作为专性细胞内寄生物,必须通过“劫持”宿主翻译系统为病毒蛋白合成服务。其中翻译起始因子eIF2α作为翻译调控的核心节点,控制细胞应激反应和翻译重编程走向,对病毒毒力、嗜性、致病性及免疫逃逸等具有重要影响,eIF2α磷酸化调控无疑是病毒与宿主细胞竞争翻译资源的重要阵地之一。然而,关于ASFV编码蛋白与eIF2α磷酸化作用关系的认知极度匮乏。【目的】探究非洲猪瘟病毒MGF110-5L-6L蛋白对宿主细胞翻译阻滞和促进应激颗粒形成的作用机制,为深入揭示非洲猪瘟病毒的致病机制研究提供科学依据。【方法】在前期利用荧光素酶报告基因载体和绿色荧光报告载体,筛选发现外源表达MGF110-5L-6L极显著上调eIF2α磷酸化水平的基础上。选择猪肺泡巨噬细胞3D4/21和猪肾细胞PK-15作为研究用细胞系,利用质粒转染和特异性化学药物处理等方法,结合免疫印迹和激光共聚焦显微镜等检测技术,验证了MGF110-5L-6L蛋白与eIF2α磷酸化及其下游翻译效应之间的功能关系。随后,通过生物信息学网站预测、亚细胞定位和功能分析等,研究了MGF110-5L-6L蛋白与诱导细胞应激之间的相关性。【结果】证实外源表达ASFV多基因家族蛋白MGF110-5L-6L能够显著增强细胞内eIF2α磷酸化水平及激活转录因子ATF4表达量,诱导综合应激反应的发生;还可诱导细胞发生内质网应激和未折叠蛋白反应,并通过活化PERK和PKR激酶来诱发eIF2α的磷酸化,进而导致细胞蛋白翻译阻滞和应激颗粒形成。进一步证实,MGF110-5L-6L蛋白含有两个高度保守的半胱氨酸基序,且主要定位于内质网,少量分布于高尔基体、线粒体和溶酶体,还可诱导高尔基体和过氧化物酶体的亚细胞定位及形态出现显著改变,提示其可能通过影响内质网腔中氧化还原稳态、蛋白分泌途径或相关膜性细胞器发生等创造应激条件。【结论】报道了ASFV早期蛋白MGF110-5L-6L的结构、亚细胞定位及其潜在功能特征,揭示了MGF110-5L-6L蛋白与eIF2α磷酸化和宿主细胞蛋白翻译系统之间的功能关系,为深入认识ASFV的病原生物学与致病机制提供了新的科学参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF110-5L-6L蛋白 eIF2α磷酸化 翻译阻滞 应激颗粒
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5(6)-羧基罗丹明110异构体的合成、分离及表征 被引量：4
2
作者 高勇 田敏 +3 位作者 张斌 张敏 李剑利 史真 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期269-271,共3页
利用间氨基苯酚与苯三酸酐合成了5(6)-羧基罗丹明110异构体的混合物,然后经过酯化、柱色谱分离、脱酯合成了5-羧基罗丹明110和6-羧基罗丹明110,收率良好,并对其结构进行了表征.
关键词 5(6)-羧基罗丹明110 异构体 合成 分离
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5(6)-羧基罗丹明110的合成工艺 被引量：1
3
作者 高勇 杨晓航 +2 位作者 游楚楚 欧阳翰 袁耀锋 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期374-377,共4页
研究了反应时间、升温方式、氮气保护等合成条件对5(6)-羧基罗丹明110合成反应的影响,并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对5(6)-羧基罗丹明110的合成反应进行了检测。通过实验确定了较为适宜的合成条件:在氮气保护下80℃反应1h,... 研究了反应时间、升温方式、氮气保护等合成条件对5(6)-羧基罗丹明110合成反应的影响,并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对5(6)-羧基罗丹明110的合成反应进行了检测。通过实验确定了较为适宜的合成条件:在氮气保护下80℃反应1h,然后在30min内匀速升温至180℃再反应6h。在此条件下反应基本完全,磺化物较少,且可以通过重结晶除去。产率可达93%。 展开更多
关键词 5(6)-羧基罗丹明110 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 合成
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XK8-6/110KBT电机车调速方式的技术改造 被引量：1
4
作者 贾海民 王红伟 苗贺军 《中州煤炭》 2000年第6期26-26,共1页
鹤壁四矿采用XK5 8型晶闸管无极调速器 ,解决了XK8 6 / 1 1 0KBT电机车的起动、调速问题。
关键词 调速方式 改造 XK8-6/110KBT 电机车 XK5-8型 晶闸管无极调速器 工作原理 煤矿
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非洲猪瘟病毒MGF110-5-6L基因功能分析 被引量：1
5
作者 张柯慧 葛海亮 +3 位作者 于少雄 李连峰 李素 仇华吉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1357-1365,共9页
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染猪只引起的一种高度接触性传染病,最急性型致死率可高达100%。ASFV结构非常复杂,编码超过160多种蛋白质,其中多基因家族(multigene families,... 非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染猪只引起的一种高度接触性传染病,最急性型致死率可高达100%。ASFV结构非常复杂,编码超过160多种蛋白质,其中多基因家族(multigene families, MGFs)蛋白包括MGF100、MGF110、MGF300、MGF360和MGF505/530等,且MGF360和MGF505可抑制宿主干扰素(interferon, IFN)的产生以及影响ASFV的致病性。但关于MGF110家族相关基因的功能尚无报道,因此本研究选取了MGF110家族中MGF110-5-6L基因进行了相关功能的探究。应用同源重组技术构建了MGF110-5-6L基因缺失的突变体病毒(ASFV-ΔMGF110-5-6L),通过检测该突变体病毒在原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAMs)中的复制水平来探究其在ASFV复制周期中的功能,结果表明,其复制动力学曲线与亲本病毒ASFV HLJ/2018(ASFV-WT)一致,说明缺失MGF110-5-6L基因不影响ASFV在PAMs中的复制。为了探究MGF110-5-6L蛋白在ASFV复制周期中的生物学功能,将ASFV-WT和ASFV-ΔMGF110-5-6L分别感染PAMs,在感染后4,12,20 h收集样品,进行转录组测序。结果显示,与ASFV-WT感染组相比,ASFV-ΔMGF110-5-6L感染组中差异表达基因主要为和IL-17信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路以及细胞因子与细胞因子受体之间的相互作用相关。本研究构建了ASFV MGF110-5-6L基因缺失毒株,并通过转录组测序发现,MGF110-5-6L基因作为ASFV复制非必需基因具有拮抗细胞因子表达的功能,不仅为探究MGF110家族成员的生物学功能提供科学数据,还为深入揭示ASFV拮抗宿主细胞天然免疫反应的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF110-5-6L 转录组测序 差异转录基因
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SF_6开关微水含量超标原因分析及处理
6
作者 赵忠生 杨敏 +1 位作者 白秀娟 贾俊清 《内蒙古电力技术》 2001年第5期24-25,共2页
介绍了包头第一热电厂在SF_6开关安装过程中遇到的SF_6气体微水含量超标问题,并就原因分析及处理过程进行了阐述。
关键词 六氟化硫开关 微水含量 超标 CW6-110H/3150-31-5型
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双周情报（2004／5／22—2004／6／6）
7
《围棋天地》 2004年第12期33-33,共1页
关键词 2004年5月22日-2004年6月6日 第17届富士通杯八强赛 第110届NEC杯围棋赛 第59届日本本因坊战挑战赛 参赛棋手 对局
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