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MTH2蛋白与8-氧鸟嘌呤脱氧核苷在阿尔茨海默病患者海马组织中的表达变化 被引量:1
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作者 宋晓宁 郑君德 +2 位作者 刘东戈 黑爱莲 蔡剑平 《中日友好医院学报》 2009年第5期287-290,F0002,共5页
目的:观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷三磷酸酶同源蛋白2(MTH2)及8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxodG)在阿尔茨海默病(AD)患者海马组织标本中的表达变化,探讨在AD患者海马中二者表达的相关性。方法:选用临床及病理均诊断为AD的尸检海马组织石蜡切片作... 目的:观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷三磷酸酶同源蛋白2(MTH2)及8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxodG)在阿尔茨海默病(AD)患者海马组织标本中的表达变化,探讨在AD患者海马中二者表达的相关性。方法:选用临床及病理均诊断为AD的尸检海马组织石蜡切片作为实验组,年龄匹配且临床及病理诊断均排除AD的尸检海马组织石蜡切片作为对照组,每组各3例,用免疫组化的方法分别检测人脑海马中8-oxo-dG的含量及MTH2蛋白的表达。结果:免疫组化定量结果显示,在人脑海马组织CA1及CA3区,AD患者8-oxo-dG的表达显著高于年龄匹配对照组,而AD患者MTH2的表达显著低于年龄匹配的对照组。结论:在人脑海马组织中,DNA氧化产物8-oxo-dG含量在AD患者比年龄匹配对照组有显著提高,抗氧化修复蛋白MTH2的表达量却显著降低,提示人脑海马组织中MTH2蛋白表达量的减少及8-oxo-dG含量的增加与AD的发病过程相关。 展开更多
关键词 8-氧鸟嘌呤脱氧核苷 MTH2蛋白2 阿尔茨海默病
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阳离子对8-氧-7,8-二氢-2'-去氧鸟嘌呤核苷构型的影响 被引量:1
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作者 郑妍 梁晓琴 李来才 《四川师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期552-556,共5页
采用DFT理论的M05方法选用6-311++G(d,p)基组对8-氧-7,8-二氢-2'-去氧鸟嘌呤核苷的构型和糖苷键的稳定性进行了研究,考虑了阳离子对8-oxodG的构型和N—糖苷键稳定性的影响.研究结果表明,阳离子降低了N—糖苷键的稳定性,有利于N—糖... 采用DFT理论的M05方法选用6-311++G(d,p)基组对8-氧-7,8-二氢-2'-去氧鸟嘌呤核苷的构型和糖苷键的稳定性进行了研究,考虑了阳离子对8-oxodG的构型和N—糖苷键稳定性的影响.研究结果表明,阳离子降低了N—糖苷键的稳定性,有利于N—糖苷键的断裂."异头碳影响"和由于在碱基引入正电荷而引起的缺电子影响促进N—糖苷键以异裂过程进行裂解,正电荷或金属离子的引入对促进N—糖苷键的断裂起着重要的作用,而且,异裂过程是糖苷键断裂的首选方式. 展开更多
关键词 8--7 8-二氢-2′-鸟嘌呤核苷 糖苷键的稳定性 异裂 均裂 自然键轨道
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8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶在顺铂诱导的急性肾损伤中的作用和机制
3
作者 张明娇 朱杰夫 吴雄飞 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期329-335,共7页
目的:探讨在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)中8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)的作用及机制。方法:48只8~10周龄C57BL/6雄性小鼠构建动物模型。24只分为4组,每组6只,分别经腹注射顺铂干预0 h、24 h、48 h和72 h。剩余小鼠也随机分为4组,即生... 目的:探讨在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)中8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)的作用及机制。方法:48只8~10周龄C57BL/6雄性小鼠构建动物模型。24只分为4组,每组6只,分别经腹注射顺铂干预0 h、24 h、48 h和72 h。剩余小鼠也随机分为4组,即生理盐水对照组、顺铂组、OGG1抑制剂组(Th5487组)和顺铂+Th5487组。分别在腹腔注射生理盐水或顺铂和Th5487。留取血液测定肌酐、尿素氮,取肾组织进行病理分析,检测肾组织8-氧代鸟嘌呤含量和超氧化物歧化酶活力,RT-qPCR测定mRNA水平,Western Blot验证OGG1和炎症蛋白表达情况。利用顺铂诱导小鼠肾小管上皮细胞建立体外模型,检测线粒体膜电位改变、活性氧生成情况和蛋白表达变化。结果:在顺铂诱导的AKI模型中,OGG1表达上调,环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)信号轴及炎症反应激活;Th5487可抑制顺铂诱导的组织损伤、cGAS-STING信号轴的激活及炎性反应;在体外,Th5487可减少顺铂诱导的细胞中ROS含量升高及线粒体膜去极化。结论:在顺铂诱导的AKI过程中,OGG1可通过cGAS-STING信号促进肾脏损伤及炎症反应。 展开更多
关键词 8-鸟嘌呤DNA糖基化酶 顺铂 急性肾损伤 Th5487 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子
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8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1、环氧合酶2基因多态性与阿尔茨海默病的关系
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作者 肖明跃 王建平 《中国现代医生》 2013年第14期23-25,共3页
阿尔茨海默病是一种慢性进行性神经退行性疾病,为老年痴呆最普遍的一种。目前研究认为遗传因素、环境因素和免疫因素等均参与了AD的病理生理过程。家族性AD多呈常染色体显性遗传,与淀粉样前体蛋白(APP)、早老素1(PS1)、早老素2(PS2)基... 阿尔茨海默病是一种慢性进行性神经退行性疾病,为老年痴呆最普遍的一种。目前研究认为遗传因素、环境因素和免疫因素等均参与了AD的病理生理过程。家族性AD多呈常染色体显性遗传,与淀粉样前体蛋白(APP)、早老素1(PS1)、早老素2(PS2)基因突变有关。晚发性AD(LOAD)以及散发性AD(SAD)最主要的遗传危险因子是ApoEε4等位基因,但它只与50%的AD有相关,存在其他遗传危险因子。本文就8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1基因、环氧合酶2基因多态性与AD的关系的研究现状及进展做一简要综述。 展开更多
关键词 8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1 合酶2 阿尔茨海默病 核苷酸多态性
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毛细管电泳法高效筛选8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶的核酸适配体 被引量:1
5
作者 韩诗邈 赵丽萍 +1 位作者 杨歌 屈锋 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期721-729,共9页
8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是人体中重要的功能蛋白,在修复DNA氧化性损伤过程中起关键作用。氧化应激等引起的氧化损伤易导致炎症反应的发生,对OGG1的抑制可以一定程度上起到缓解作用;对癌细胞OGG1的抑制有望作为癌症治疗的新方法... 8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是人体中重要的功能蛋白,在修复DNA氧化性损伤过程中起关键作用。氧化应激等引起的氧化损伤易导致炎症反应的发生,对OGG1的抑制可以一定程度上起到缓解作用;对癌细胞OGG1的抑制有望作为癌症治疗的新方法。目前的研究多集中于小分子对OGG1功能的影响和调控,而OGG1的适配体筛选尚未见报道。作为功能配体,适配体具有合成简单、高亲和力及高特异性等优点。该文筛选了OGG1的核酸适配体,结合毛细管电泳高效快速的优点建立了两种基于毛细管电泳-指数富集进化(CE-SELEX)技术的筛选方法:同步竞争法和多轮筛选法。同步竞争法利用单链结合蛋白(SSB)与核酸库中单链核酸的强结合能力,与目标蛋白OGG1组成竞争体系,并通过增加SSB浓度来增加竞争筛选压力,以去除与OGG1弱结合的核酸序列,一步筛选即可获得与OGG1强结合的核酸序列。多轮筛选法在相同孵育条件和电泳条件下,经3轮筛选获得OGG1的核酸适配体。比较两种筛选方法的筛选结果,筛选结果中频次最高的3条候选核酸适配体序列一致,其解离常数(KD)值在1.71~2.64μmol/L之间。分子对接分析结果表明候选适配体1(Apt 1)可能与OGG1中具有修复氧化性损伤功能的活性口袋结合。通过对两种筛选方法的对比,证明同步竞争法更加快速高效,对其他蛋白核酸适配体筛选方法的选择具有一定的指导意义。得到的适配体有望用于OGG1功能调控,以抑制其修复功能。 展开更多
关键词 毛细管电泳 核酸适配体 8-鸟嘌呤DNA糖基化酶 竞争筛选 多轮筛选
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基于PET效应检测8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶的荧光传感器
6
作者 刘萍 金东 +1 位作者 李哲建 乔成芳 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1072-1077,共6页
8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是一种突变的DNA修复酶,可切除生物体内受损DNA的标志物8-氧鸟嘌呤(8-oxoG),而8-oxoG与多种癌症的病因学有关。基于光诱导电子转移(PET)效应,以1条5'末端标记羧基荧光素且含有8-oxoG的DNA链为信号探针,1... 8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是一种突变的DNA修复酶,可切除生物体内受损DNA的标志物8-氧鸟嘌呤(8-oxoG),而8-oxoG与多种癌症的病因学有关。基于光诱导电子转移(PET)效应,以1条5'末端标记羧基荧光素且含有8-oxoG的DNA链为信号探针,1条3'末端含多个G碱基的互补序列作为猝灭基团,根据加入OGG1前后体系荧光强度的变化,建立了一种简单快速、灵敏检测OGG1酶活性的荧光传感器。结果表明,该方法可对OGG1浓度进行灵敏的定量检测,且OGG1酶浓度在0~60 U/mL范围内与体系荧光强度的变化值呈良好线性关系,检出限为0.7 U/mL。利用该方法检测人类血清样品中的OGG1酶,加标回收率为99.1%~105%,相对标准偏差(RSD)为1.0%~4.3%。该传感器选择性好,简化了实验步骤,节约了实验成本。 展开更多
关键词 8-鸟嘌呤DNA糖基化酶 光诱导电子转移效应 荧光传感器
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8-oxodG在口腔黏膜白斑中的表达
7
作者 苏秋香 姚波 +3 位作者 王旭光 杨丽 张素君 丁晓慧 《沈阳医学院学报》 2016年第5期325-327,331,共4页
目的:研究8-氧-7,8-二氢-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine,8-oxod G)在口腔黏膜白斑中的表达,探讨氧化性DNA损伤在口腔黏膜白斑发生发展中的作用及机制。方法:应用免疫荧光技术检测10例正常口腔黏膜和2... 目的:研究8-氧-7,8-二氢-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine,8-oxod G)在口腔黏膜白斑中的表达,探讨氧化性DNA损伤在口腔黏膜白斑发生发展中的作用及机制。方法:应用免疫荧光技术检测10例正常口腔黏膜和20例口腔黏膜白斑中8-oxod G和抑癌基因P53蛋白的表达。结果:HE染色可见口腔黏膜白斑中炎性细胞浸润,过角化和上皮异型性增生等组织病理学变化。免疫荧光标记显示8-oxod G在口腔黏膜白斑中生成,并可见抑癌基因P53蛋白的表达。口腔黏膜白斑中8-oxod G和P53蛋白的阳性表达率高于正常口腔黏膜(P<0.01);8-oxod G、P53在正常口腔黏膜、口腔黏膜白斑伴或不伴异型性增生的阳性表达程度具有相关性,与病变程度呈正相关(r=0.773,P<0.01)。结论:氧化性DNA损伤在口腔黏膜白斑的发生过程中起着重要作用,8-oxod G可作为口腔黏膜白斑病变程度的风险性预测标志物。 展开更多
关键词 口腔黏膜白斑 8--7 8-二氢-2'-脱氧鸟嘌呤核苷 化性DNA损伤 P53
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高血压小鼠心肌肥厚过程中心肌组织Prx-2、8-OHdG蛋白表达变化及意义 被引量:4
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作者 王若楠 范玉磊 +4 位作者 梁婷婷 耿小番 刘璇 姚程 孙影 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第4期5-8,共4页
目的探讨高血压小鼠心肌肥厚过程中心肌组织硫氧环蛋白过氧化物酶2(Prx-2)、8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHd G)蛋白表达变化及其意义。方法将60只雄性C57BL/6N小鼠分为观察组40只和对照组20只,观察组采用两肾一夹(2K1C)法制备高血压心肌肥厚模... 目的探讨高血压小鼠心肌肥厚过程中心肌组织硫氧环蛋白过氧化物酶2(Prx-2)、8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHd G)蛋白表达变化及其意义。方法将60只雄性C57BL/6N小鼠分为观察组40只和对照组20只,观察组采用两肾一夹(2K1C)法制备高血压心肌肥厚模型,对照组只分离左肾动脉,不放置肾动脉夹。两组分别于术前和术后2、4、8、12周测量尾动脉收缩压;术后2、4、8、12周分别随机选择10只观察组小鼠及5只对照组小鼠处死,计算全心质量指数和左心室质量指数,分别采用免疫印迹法、免疫组化法检测左心室心肌组织Prx-2、8-OHd G蛋白表达;分析观察组术后各时间点Prx-2、8-OHd G蛋白表达的关系。结果两组术前尾动脉收缩压比较无明显统计学差异(P>0.05),观察组术后2、4、8、12周尾动脉收缩压、全心质量指数和左心室质量指数均呈升高趋势,且均高于对照组同时间点(P均<0.05);证实建模成功。观察组术后2、4、8、12周左心室心肌组织Prx-2蛋白相对表达量及8-OHd G蛋白表达均呈升高趋势,且均高于对照组同时间点(P均<0.05)。观察组术后2、4、8、12周左心室心肌组织8-OHd G和Prx-2蛋白表达均呈正相关(r分别为0.95、0.97、0.97和0.95,P均<0.01)。结论高血压小鼠心肌肥厚过程中左心室心肌组织Prx-2、8-OHd G蛋白表达均升高,二者分别通过抗氧化和促氧化作用参与心肌肥厚的发生与发展。 展开更多
关键词 高血压 环蛋白过化物酶2 8-羟基脱氧鸟嘌呤 心肌肥厚 活性 小鼠
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胃肠道肿瘤患者机体氧化应激状态的研究 被引量:29
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作者 张焱 马双余 孙晓力 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期793-796,共4页
目的通过检测胃肠道肿瘤患者血浆中活性氧类物质、抗氧化酶防御系统以及脂质过氧化物丙二醛(MDA)和DNA氧化损伤生物学标志物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的水平,分析胃肠道肿瘤患者机体氧化应激状态。方法采用紫外分光光度仪检测胃肠道肿... 目的通过检测胃肠道肿瘤患者血浆中活性氧类物质、抗氧化酶防御系统以及脂质过氧化物丙二醛(MDA)和DNA氧化损伤生物学标志物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的水平,分析胃肠道肿瘤患者机体氧化应激状态。方法采用紫外分光光度仪检测胃肠道肿瘤患者(胃癌41例,肠癌62例)以及40例正常人血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、MDA、超氧阴离子(O2-)、过氧化氢酶(CAT)水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定8-OHdG水平。结果与对照组比较,胃癌、肠癌组血清中O2-活力、MDA含量明显升高(P<0.05);T-AOC、SOD、GSH-PX、CAT明显降低(P<0.05);胃癌、肠癌组血清中8-OHdG明显升高(P<0.05);胃、肠癌组间无显著性差异。结论胃肠道肿瘤患者体内活性氧成分增高;抗氧化酶降低;氧化损伤产物增加,过高的氧化应激水平参与胃肠道肿瘤的发生。 展开更多
关键词 化应激 胃肠道肿瘤 R0s 化酶 自由基 丙二醛 8-羟基脱氧鸟嘌呤
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DNA氧化损伤产物及其检测方法 被引量:13
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作者 蔡凌霜 曾昭睿 吴采樱 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期88-93,共6页
介绍了DNA氧化损伤对生物体的影响 ,主要的DNA氧化损伤产物8_羟基鸟嘌呤和5_羟基胞嘧啶的形成及其检测方法 ,并对目前DNA氧化损伤产物研究存在的问题进行了讨论。
关键词 自由基 DNA 损伤 8-羟基鸟嘌呤 5-羟基胞嘧啶 检测 癌症 临床诊断
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甲醛对人Ⅱ型肺泡上皮细胞DNA氧化和甲基化水平的影响 被引量:4
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作者 柯跃斌 黄娟 +2 位作者 朱舟 吴双 陶功华 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2014年第1期24-29,共6页
目的:分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)水平、DNA 5-甲基胞嘧啶(5-mC)含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系,探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法:用5... 目的:分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)水平、DNA 5-甲基胞嘧啶(5-mC)含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系,探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法:用5~20μmol/L甲醛作用于A549细胞,用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平,用免疫荧光和高效毛细管电泳法检测细胞全基因组DNA 5-mC含量改变。结果:甲醛染毒提高了细胞8-oxo-dG水平,但是降低了细胞的DNA 5-mC含量。甲醛致细胞DNA氧化与DNA甲基化呈现不同特点,A549细胞暴露于20μmol/L甲醛后,DNA氧化水平在1周甚至更早时间就已显著增高,而相同条件下DNA甲基化水平的改变需要6周以上的时间,DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化。A549细胞经5~20μmol/L甲醛染毒8周后,DNA氧化水平与甲醛剂量呈正相关关系,而同样条件下DNA甲基化水平与甲醛剂量呈负相关关系。结论:甲醛染毒可提高DNA氧化水平,降低细胞DNA甲基化水平。在甲醛的毒作用效应中,细胞DNA氧化损伤可能是早于其DNA甲基化的一个重要分子事件。 展开更多
关键词 甲醛 DNA DNA甲基化 8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷 5-甲基胞嘧啶
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缺血预处理抑制大鼠胰腺移植缺血再灌注胰腺细胞凋亡:活性氧与线粒体DNA修复酶的作用 被引量:5
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作者 侯伊玲 薄海 +1 位作者 刘子泉 夏时海 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期3279-3285,共7页
背景:缺血预处理可诱发机体内源性保护机制,可全面有效地防治器官移植缺血再灌注损伤。在胰腺移植过程中冷、热缺血均可导致移植胰腺缺血再灌注损伤,线粒体结构及功能与胰腺病变密切相关,近些年研究发现,线粒体DNA存在修复体系,其与线粒... 背景:缺血预处理可诱发机体内源性保护机制,可全面有效地防治器官移植缺血再灌注损伤。在胰腺移植过程中冷、热缺血均可导致移植胰腺缺血再灌注损伤,线粒体结构及功能与胰腺病变密切相关,近些年研究发现,线粒体DNA存在修复体系,其与线粒体DNA损伤之间的平衡决定了疾病的发生和转归。目的:观察缺血预处理对大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤时的细胞凋亡的影响,分析线粒体DNA修复酶8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和氧化应激在其中的变化规律及可能途径。方法:纳入健康雄性SD大鼠50只,其中20只为供体,10只为假手术组,另20只糖尿病造模后分为缺血再灌注组和缺血预处理组,每组10只。假手术组只行开、关腹手术,缺血再灌注组和缺血预处理组行异位全胰十二指肠移植。缺血再灌注组对应供体大鼠于获取供胰前以4℃UW液灌洗20min;缺血预处理组对应供体大鼠于获取供胰前阻断腹主动脉5min,再灌注5min,共2次。供胰均控制热缺血时间为15min,冷缺血时间为180min。再灌注后12h检测血浆淀粉酶活性、血糖浓度及Caspase-3,9活化水平,流式细胞法检测腺泡细胞凋亡率,罗丹明123法检测线粒体膜电位,二氯荧光素法检测线粒体过氧化氢产生速率,高效液相色谱法检测线粒体DNA中8-氧鸟嘌呤质量浓度,荧光定量聚合酶链反应法检测8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶mRNA的表达,Western-blotting法检测细胞色素C释放、磷酸化Akt及线粒体8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶蛋白表达水平。结果与结论:缺血预处理可降低线粒体氧化应激,提高Akt磷酸化水平,从而上调8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶表达,减少线粒体DNA氧化损伤,抑制腺泡细胞凋亡,减轻移植胰缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 缺血预处理 缺血再灌注 胰腺移植 凋亡 活性 8-鸟嘌呤DNA糖基化酶
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氧化损伤在HIV相关神经认知损害中的作用 被引量:5
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作者 丁渭 张玉林 +3 位作者 乔录新 宋凤丽 徐树莹 陈德喜 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第5期602-609,共8页
目的研究由活性氧诱导的DNA氧化损伤在感染了艾滋病毒的患者中枢神经系统组织中的积累。方法利用感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV-1)的患者的尸检脑组织的额叶皮质来分析HIV-1亚型,采用免疫荧光染色、定量聚合... 目的研究由活性氧诱导的DNA氧化损伤在感染了艾滋病毒的患者中枢神经系统组织中的积累。方法利用感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV-1)的患者的尸检脑组织的额叶皮质来分析HIV-1亚型,采用免疫荧光染色、定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和PCR克隆测序分析脑细胞中核和线粒体DNA损伤。结果中枢神经系统感染HIV会导致大脑细胞中核和线粒体DNA基因组的损伤。对HIV相关的神经认知功能障碍患者的尸检皮质组织进行检测可以发现有高水平的核和线粒体DNA 8-氧鸟嘌呤(8-hydroxyguanine,8-oxoG)损伤。在HIV相关的神经认知障碍的一个亚型脑组织中有逐渐增加的线粒体DNA突变和缺失,这与病情已经得到控制的情况大为不同。结论在HIV相关的神经认知障碍患者的中枢神经系统中高水平的氧化损伤对HIV引发神经细胞和胶质细胞的神经免疫和凋亡发挥了重要作用。 展开更多
关键词 HIV相关的神经认知功能障碍 艾滋病 活性 人类免疫缺陷病毒 线粒体 线粒体DNA 8-鸟嘌呤
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γ-射线上调线粒体DNA损伤修复相关因子的表达
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作者 朱杨 李鹤佳 +1 位作者 李德超 刘继光 《国际口腔医学杂志》 CAS 2011年第5期535-538,共4页
目的研究γ-射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤相关修复因子——线粒体转录因子A(Tfam)、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(Ogg)-1和DNA聚合酶-γ(Polg)表达的影响。方法体外培养OSCC-2和-5细胞株,甲噻唑四唑氮比色检测其存活率... 目的研究γ-射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤相关修复因子——线粒体转录因子A(Tfam)、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(Ogg)-1和DNA聚合酶-γ(Polg)表达的影响。方法体外培养OSCC-2和-5细胞株,甲噻唑四唑氮比色检测其存活率,RNA干涉技术敲除相关基因,半定量反转录PCR检测其相关mRNA的表达水平,蛋白质印迹技术检测相关蛋白质的表达。结果 OSCC-2和5细胞株经30Gy的γ-射线处理后,存活率分别下降至(35.33±6.03)%和(75.67±4.16)%,tfammRNA的表达水平升高;但是OSCC-5细胞株tfammRNA水平存在时相性,即在射线处理6h后,tfammRNA的水平较高。经过γ-射线处理的OSCC-5细胞株的Ogg-1和Polg的表达也较强,Tfam、Ogg-1和Polg各自的小分子干扰RNA(siRNA)都下调了相应的蛋白质表达水平。siRNA转染细胞经射线处理后程序性亡率有所增加。结论γ-射线能抑制OSCC-2和-5细胞株的增殖,上调mtDNA修复相关因子Tfam、Polg和Ogg-1的表达。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 线粒体DNA 线粒体转录因子 8-鸟嘌呤DNA糖基化酶 DNA聚合酶-γ
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S期激酶相关蛋白2(SKP2)泛素化修饰OGG1对中波紫外线诱导的晶状体上皮细胞氧化损伤作用 被引量:1
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作者 李鹏飞 陈晓娟 +3 位作者 孙诚浩 张文怡 吴安然 管怀进 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第1期15-19,共5页
目的探索E3泛素连接酶S期激酶相关蛋白2(SKP2)介导的碱基切除修复蛋白8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG1)在年龄相关性白内障(ARC)发生过程中的泛素化降解机制。方法采用免疫沉淀实验检测OGG1的泛素化修饰及其与SKP2的结合能力。采用中波... 目的探索E3泛素连接酶S期激酶相关蛋白2(SKP2)介导的碱基切除修复蛋白8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG1)在年龄相关性白内障(ARC)发生过程中的泛素化降解机制。方法采用免疫沉淀实验检测OGG1的泛素化修饰及其与SKP2的结合能力。采用中波紫外线(UVB)照射人晶状体上皮细胞株SRA01/04构建细胞氧化损伤模型。蛋白免疫印迹实验检测细胞氧化损伤模型和过表达模型细胞中SKP2的蛋白表达。通过转染SKP2质粒,增加SKP2的表达并观察细胞中OGG1蛋白的表达变化。结果OGG1蛋白存在泛素化修饰。UbiBrowser软件预测能与OGG1结合的潜在E3泛素连接酶,并通过免疫沉淀实验证明SKP2与OGG1之间存在相互作用。在氧化损伤环境下,SRA01/04细胞中SKP2蛋白表达出现先下降后逐渐升高的趋势,其中UVB照射10 min时SKP2表达下降最为显著。对照组、转染空载质粒组和转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中SKP2蛋白的相对表达量分别为1.040±0.007、0.920±0.008和1.330±0.020,与转染空载质粒组相比,转染SKP2过表达质粒组细胞中SKP2蛋白的表达显著上调(P<0.05)。空白对照组、UVB组、UVB+转染空载质粒组和UVB+转染SKP2过表达质粒组细胞中OGG1蛋白的相对表达量分别为1.05±0.01、5.05±0.16、5.20±0.07和3.83±0.10;与UVB+转染空载质粒组相比,UVB+转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中OGG1蛋白相对表达水平明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论E3泛素连接酶SKP2能够促进OGG1发生泛素化降解,导致晶状体上皮细胞内部损伤性DNA的累积,从而导致ARC的发生发展。 展开更多
关键词 年龄相关性白内障 泛素化修饰 8-鸟嘌呤-DNA糖基化酶 S期激酶相关蛋白2 中波紫外线
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火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶基因克隆、表达纯化和酶学性质研究
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作者 周欢 杨敏 +5 位作者 陈亚星 刘亚辉 孙丽华 徐春艳 郁峰 何建华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期67-74,共8页
【目的】在大肠杆菌中表达火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶,纯化得到重组火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶,在此基础上系统研究火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶的酶学特征。【方法】构建8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶重组表达质粒,将重组质粒转化Escherichia coli... 【目的】在大肠杆菌中表达火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶,纯化得到重组火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶,在此基础上系统研究火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶的酶学特征。【方法】构建8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶重组表达质粒,将重组质粒转化Escherichia coli Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表达重组蛋白,通过Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白;最后利用含8-氧鸟嘌呤损伤的寡核苷酸作为底物,测定8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶的酶学性质。【结果】在大肠杆菌中成功诱导表达了重组火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶,经Ni2+亲和纯化后蛋白纯度大于95%。在体外鉴定了重组火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶的酶学性质。结果表明重组火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶可以切除DNA中的8-氧鸟嘌呤(8-Oxo-G,GO)损伤碱基,并且具有AP裂解酶活性。重组火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶催化反应的最适pH值和温度分别是pH 8.5和55°C。除Zn2+对火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶的酶促反应有明显的抑制作用外,实验中测定的其它二价离子(Mn2+,Mg2+,Ca2+,Ni2+,Co2+,Cu2+)对其没有明显的影响。离子强度在50-100 mmol/L范围内对其酶促反应影响不大,超过100 mmol/L时有明显的抑制作用。与8-氧鸟嘌呤互补的碱基差异对火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶切除8-氧鸟嘌呤损伤的效率影响不大;但与单链DNA相比,双链DNA是优选底物,切割效率如下:GO/C≈GO/G≈GO/T≈GO/A>GO/-。【结论】在大肠杆菌中成功表达,并Ni2+亲和纯化了火球菌8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶,生化研究表明制备的重组蛋白具有8-氧鸟嘌呤DNA糖苷酶活性,可能负责切除火球菌基因组DNA中的8-氧鸟嘌呤损伤。 展开更多
关键词 火球菌 8-鸟嘌呤DNA糖苷酶 碱基切除修复
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DNA损伤修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)的研究进展 被引量:4
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作者 严丽锋 顾爱华 《诊断学理论与实践》 2015年第2期193-196,共4页
DNA分子对活性氧特别敏感,易受到活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)攻击,发生氧化性DNA损伤,促进癌症发生[1-2]。DNA分子主要氧化产物8-氧-鸟嘌呤(8-oxo-7,8-dihydroguanine,8-oxo-Gua)被视为DNA氧化损伤的生物标志物。
关键词 8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶 DNA损伤 8--鸟嘌呤
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CHIP介导的OGG1在老年性白内障发展过程中作用 被引量:1
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作者 唐静 阳帆 +1 位作者 周丽丽 袁小波 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期4234-4237,共4页
目的探讨热休克蛋白70羧基末端反应蛋白(CHIP)介导的8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1在老年性白内障发展过程中的作用。方法培养SRA01/04永生化人晶状体上皮细胞,分为空白对照组、空载体质粒转染组、CHIP过表达质粒转染组、细胞氧化损... 目的探讨热休克蛋白70羧基末端反应蛋白(CHIP)介导的8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1在老年性白内障发展过程中的作用。方法培养SRA01/04永生化人晶状体上皮细胞,分为空白对照组、空载体质粒转染组、CHIP过表达质粒转染组、细胞氧化损伤模型组。免疫沉淀实验检测OGG1蛋白的泛素化修饰及与E3泛素连接酶CHIP的结合能力。使用手持中波紫外线检测灯照射建立细胞氧化损伤模型,通过转染CHIP质粒提升其表达,Western印迹检测细胞中OGG1蛋白表达变化。结果免疫沉淀实验结果显示,晶状体上皮细胞中存在OGG1蛋白的泛素化修饰;UbiBrowser软件预测CHIP可能是引发OGG1泛素化修饰的E3泛素连接酶。Western印迹检测结果显示,CHIP能够与OGG1相互结合,提示OGG1可能参与了OGG1蛋白的泛素化修饰过程。在中波紫外线照射10 min时,晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量明显低于其他中波紫外线照射时间;在中波紫外线照射20~40 min时,随着照射时间的增加,晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05)。根据后续实验建立的细胞氧化损伤模型均选用中波紫外线照射10 min后,再孵育24 h。CHIP过表达质粒转染组晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量明显高于空载体质粒转染组和空白对照组(P<0.05);细胞氧化损伤模型组晶状体上皮细胞中OGG1蛋白相对表达量明显高于空白对照组(P<0.01);CHIP过表达质粒转染组上述指标明显低于细胞氧化损伤模型组、空载体质粒转染组(P<0.05)。结论E3泛素连接酶CHIP可诱发OGG1泛素化降解,造成晶状体上皮细胞中损伤性DNA聚集,导致老年性白内障的发生与发展。 展开更多
关键词 老年性白内障 人晶状体上皮细胞 E3泛素连接酶 热休克蛋白70羰基末端反应蛋白(CHIP) 8-鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1
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白细胞端粒长度及DNA氧化损伤和修复水平与急性心肌梗死的关联分析
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作者 蔡珂 段慧莲 +1 位作者 李振舒 高玉霞 《中国慢性病预防与控制》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期138-142,共5页
目的 了解白细胞端粒长度(LTL)、8-氧鸟嘌呤(8-oxoG)及8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)mRNA表达水平与急性心肌梗死(AMI)之间的关联,筛选AMI的有效预测指标,为AMI的防治提供参考依据。方法 将2021年6月至2022年2月在天津医科大学总医院... 目的 了解白细胞端粒长度(LTL)、8-氧鸟嘌呤(8-oxoG)及8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)mRNA表达水平与急性心肌梗死(AMI)之间的关联,筛选AMI的有效预测指标,为AMI的防治提供参考依据。方法 将2021年6月至2022年2月在天津医科大学总医院心内科冠心病监护病房住院并诊断为AMI的84例患者作为AMI组,以同期冠脉造影检查显示血管直径狭窄小于25%的患者98例作为对照组。收集两组患者的临床资料,采集空腹静脉血测定LTL、8-oxoG水平、OGG1 mRNA表达。采用SPSS 25.0软件进行t检验、非参数检验、χ^(2)检验、Spearman相关分析和多因素logistic回归模型分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价LTL、OGG1 mRNA、8-oxoG对AMI诊断的预测价值。结果 AMI组患者外周血LTL、OGG1 mRNA表达水平均显著低于对照组,8-oxoG水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在AMI组中,OGG1 mRNA表达水平和GRACE评分呈负相关(r=-0.288,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,长LTL(OR=0.001)和OGG1 mRNA高表达(OR=0.002)与AMI患病低风险相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,LTL、OGG1 m RNA单独检测及二者联合预测AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.691、0.603和0.722。结论 长LTL和OGG1 mRNA高表达与AMI患病低风险相关,LTL和OGG1 mRNA可能成为AMI新的预测诊断标志物,为AMI的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 端粒 化损伤 8-鸟嘌呤DNA糖基化酶mRNA
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