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AA12(LG21)可溶性表达研究及抗体制备 被引量：6
1
作者 刘爽 胡宝成 +1 位作者 绳纪坡 田媛 《生物技术通讯》 CAS 2003年第2期105-108,共4页
用PCR技术从AA12基因上扩增出LG21(100～498bp)片段,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)上;转化大肠杆菌BL21(DE3),进行诱导表达研究,使其在大肠杆菌中能够可溶性表达,优化表达条件获得表达量比较高的LG21蛋白;用镍离子螯和柱(Ni-NTA)纯化L... 用PCR技术从AA12基因上扩增出LG21(100～498bp)片段,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)上;转化大肠杆菌BL21(DE3),进行诱导表达研究,使其在大肠杆菌中能够可溶性表达,优化表达条件获得表达量比较高的LG21蛋白;用镍离子螯和柱(Ni-NTA)纯化LG21蛋白,获得纯度较高的蛋白。用纯蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,ELISA结果显示效价可达到1∶163840;Western结果表明该抗体可以与LG21蛋白特异结合;为进行免疫共沉淀实验,验证Chk1蛋白与AA12蛋白在体内的相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 aa12蛋白 LG21蛋白 原核表达 多克隆抗体 Chkl蛋白 A1—5细胞 表型 差异表达基因 G2期延迟 抗辐射性 可溶性表达 细胞周期 PCR技术
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